肿瘤细胞株

摘要： 目的 消除查尔酮 α,β-双键的不利影响,发现多靶标受体酪氨酸激酶(RTKs)抑制剂.方法 查尔酮骨架上引入磺酰胺,设计并合成14个查尔酮衍生物(SFA1～SFA14).分别采用酪氨酸激酶检测试剂盒(ADP-GloTM)和四唑盐比色试验法(M TT)评价化合物对表皮生长因子受体(EGFR)、激酶插入区受体(KDR)和成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)以及乳腺癌细胞(MCF-7)、非小细胞肺癌细胞(A549)和白血病细胞(K562)的抑制活性.结果 大部分化合物具有高效RTKs抑制活性和抗肿瘤活性,部分化合物活性接近阳性对照的水平.结论 查尔酮磺酰胺衍生物具有潜在抗肿瘤活性.

摘要： 目的 基于受体酪氨酸激酶抑制剂的喹唑啉酮药效团,发现抗肿瘤活性的查尔酮衍生物.方法 查尔酮骨架上引入喹唑啉酮片段,设计、合成了2类查尔酮衍生物.采用ADP-GloTM方法评价对EGFR、KDR和FGFR13种肿瘤相关RTKs的抑制活性,采用MTT方法评价化合物的抗肿瘤活性.结果 大部分化合物具有较好的RTKs抑制活性和抗肿瘤活性,部分化合物的活性接近吉非替尼.结论 新型查尔酮衍生物具有潜在抗肿瘤活性,为抗肿瘤药物的发现奠定了基础.

摘要： 胃肠道间质瘤(GISTs)是最常见的消化道恶性肿瘤之一,且对放化疗皆不敏感.酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)作为特效药应用于临床治疗后取得了显著疗效,但随之而来的耐药性限制了其临床应用.随着相关机制研究不断深入,新颖的治疗药物也层出不穷.可见,关于胃肠道间质发病机制的基础研究对于发现治疗新方法至关重要.目前至少有3种模型被广泛应用于肿瘤发病机制的基础研究实验,即同源耐药/敏感细胞株模型,肿瘤移植小鼠模型,还有人体肿瘤标本.本文将回顾有关胃肠道间质瘤耐药机制研究方法的文献,对相关研究方法和发现的主要耐药机制进行系统综述.%gastrointestinal stromal tumors (GISTs) are one of the most common malignant tumors of digestive tract,and are resistant to cytotoxic radiotherapy and chemotherapy.Tyrosine kinase inhibitors (TKIs) have been used as a miracle drug for clinical treatment.However,the drug resistance has limited its clinical application.With the continuous deepening understanding of the relevant mechanisms,novel therapeutic agents are emerging.Therefore,fundamental studies on the pathogenesis of gastrointestinal stromal tumor are essential for the discovery of novel therapeutic approaches.At present,there are at least three models which are widely applied in the basic research of the pathogenesis of tumor,which are the homologous resistant/sensitive cell line model,the tumor transplanted mouse model,and the human tumor specimen.In this paper,we review the literature on the research methods of gastrointestinal stromal tumor resistance mechanism,and summarize the related research methods and the main mechanisms of drug resistance.

摘要： 目的：探讨布洛芬对人胃癌细胞株HGC-27、人结肠癌细胞株HT29和人食管癌细胞株EC109增殖和迁移的影响。方法：以不同浓度（0. 5 mmol/L、1 mmol/L和2 mmol/L）的布洛芬溶液干预HGC-27、HT29、EC109,采用MTT法检测细胞生长情况,细胞划痕试验检验不同浓度布洛芬溶液对细胞迁移能力的影响。结果：不同浓度布洛芬处作用于EC109、HGC-27、HT29细胞株处理0 h、24 h、48 h、72 h、96 h、120 h后,与0 mmol/L浓度布洛芬相比,三种肿瘤细胞抑制率均明显上升,且不同培养时间均在2 mmol/L时抑制率最大,差异有统计学意义（P 〈0. 05）。EC109的最佳培养时间为120 h,HGC-27最佳培养时间为72 h,HT29的最佳培养时间为96 h。结论：布洛芬可明显抑制EC109、HGC-27、HT29细胞的增殖与迁移能力。

摘要： 目的 :研究罗勒多糖与顺铂、盐酸吡柔比星和氟尿嘧啶三种化疗药物合用对不同组织来源的肿瘤细胞株的生长抑制作用,以期明确罗勒多糖对化疗药物抑瘤增效适用范围。方法:体外培养人肺腺癌A549细胞株、人喉癌Hep-2细胞株和人胃癌SGC-7901细胞株,采用MTT法测定罗勒多糖对顺铂、盐酸吡柔比星和氟尿嘧啶抑制上述肿瘤细胞生长的增效作用。结果:罗勒多糖联合顺铂、盐酸吡柔比星和氟尿嘧啶共同作用48 h可明显提高三种化疗药物对A549细胞、Hep-2细胞和SGC-7901细胞的生长抑制作用,且其作用具有一定的剂量依赖性。结论:罗勒多糖对多种化疗药物抑制不同组织来源的肿瘤细胞株的生长具有增效作用,提示罗勒多糖对化疗药物抑瘤增效具有广泛适用性。罗勒多糖是一种潜在的化疗增效药物,也可以作为化疗辅助的功能食品开发应用。

摘要： 答：1.实验要严格遵照无菌操作原则,所有手术器械和物品要在使用前严格消毒灭菌,且实验要在超净工作台内完成;2.皮下移植瘤、手术切除的肿瘤组织、培养的肿瘤细胞等移植物要快速进行处理及移植,尽可能在2h之内完成,为防止污染,可使用少许抗生素。

摘要： 目的:汉黄芩苷、汉黄芩素、黄芩苷及黄芩素是黄芩的主要成分.对前三种黄酮的抗癌活性文献有不同的报导.方法:本研究比较了4种黄酮在相同浓度下对4个肿瘤细胞株24 h及48 h存活率的影响.结果:实验结果显示,汉黄芩素对4种细胞株都有明显的抑制作用,48 h半抑制浓度分别为97.9 μM(肺腺癌A549)、15.3 μM(子宫颈癌HeLa)、147 μM(肝细胞癌HepG2)及104 μM(乳腺癌MCF-7).其相应的糖化物,汉黄芩苷对4种细胞均未显示抑制.黄芩素抑制HeLa细胞,而糖化的黄芩苷抑制HepG2,且对MCF-7显示刺激作用.结论:以上结果显示,汉黄芩素在4种主要黄芩黄酮中具有最强的抑制肿瘤细胞生长效能,而其他3种黄酮的抗肿瘤作用并不一致,黄芩苷甚至促进个别肿瘤细胞株的生长.因此,黄酮抗癌作用的研究及可能的临床应用更应在单体水平进行.%Wogonoside,wogonin,baicalin and baicalein are major chemical constituents of S.baicalensis.Baicalin,baicalein and wogonin have been reported previously to exert anti-cancer effects.The present study compared the anti-cancer effects of the four flavonoids individually towards four human cancer cell lines after 24-and 48-hour treatment based on cell viability assay.As a result,wogonin inhibited the growth of the four cell lines.The IC50 values after 48 hours of incubation were 97.9 μM for A549 lung adenocarcinoma cells,while 15.3 μM for HeLa cervical carcinoma cells,147 μM for HepG2 hepatocellular carcinoma cells and 104 μM for MCF-7 breast adenocarcinoma cells.In contrast,wogonoside,the glycoside of wogonin,showed no inhibitory effect against any one of the four cell lines.Baicalein inhibited the growth of HeLa cells,while baicalin inhibited the growth of HepG2 cells,both with higher IC50 values and less potent than wogonin.These findings established wogonin as the most active anti-cancer agent among the four major flavonoids of S.baicalensis.Since baicalin,the most abundant flavonoid in the herb,was found to enhance the growth of MCF-7 cells.Clinical applications of ingredients from S.baicalensis to the treatment of cancer should be carried out with purified compounds.

摘要： 目的 利用过表达和干扰技术,观察胰岛素样生长因子结合蛋白7 (IGFBP7)对胃癌细胞增殖和细胞周期,以及对细胞周期素D1和细胞周期素依赖性激酶4(CDK4)表达的影响,构建裸鼠移植瘤模型,观察IGFBP7对胃癌瘤体生长的影响.方法 采用小干扰核糖核酸(siRNA)干扰胃癌细胞株MKN-28中IGFBP7表达,并建立空白对照组和阴性对照组.采用pcDNA3.1-IGFBP7质粒转染SGC-7901细胞,使之过表达IGFBP7并建立相应的空白对照组和空载体组.培养48 h,采用MTT实验和克隆形成实验检测IGFBP7干扰和过表达后胃癌细胞体外增殖情况;流式细胞术检测IGFBP7对细胞周期的影响,蛋白质印迹法检测各组细胞中细胞周期素D1和CDK4.分别用过表达IGFBP7的SGC-7901稳定转染细胞及未转染SGC7901细胞建立裸鼠移植瘤模型,观察20 d内IGFBP7对胃癌移植瘤体生长的影响.采用单因素方差分析、LSD法和独立样本t检验比较组间差异.结果 MTT实验和克隆形成实验发现,与空白和阴性对照组比较,干扰IGFBP7的表达能促进MKN-28细胞的增殖(3.013±0.322、2.903±0.210比4.502±0.356,F=18.31,P=0.002 8),细胞克隆形成增多,G1期细胞减少[(57.29±1.30)％、(52.27±0.90)％比(36.81±0.83)％,F=321.57,P＜0.01];与空白对照组和空载体组比较,增加IGFBP7的表达能抑制SGC-7901细胞的增殖(3.142±0.320、3.214±0.226比1.813±0.165,F=22.35,P=0.001 7),细胞克隆形成减少,使细胞周期处于G1期细胞增多[(49.34±1.20)％、(47.42±0.71)％比(57.73±0.73)％,F=109.230,P＜0.01)].蛋白质印迹法发现干扰IGFBP7能够增加细胞周期素D1和CDK4的表达,过表达IGFBP7的作用相反(P均＜0.01).裸鼠移植瘤模型实验发现过表达IGFBP7组的裸鼠种植瘤的体积与质量均小于对照组[(773.50±113.45) mm3比(1 038.75±101.31)mm3,(786±50) mg比(1 145±85) mg,t=7.799、16.280,P均＜0.01].结论 IGFBP7能够影响胃癌细胞的增殖及细胞周期,并影响细胞周期素D1和CDK4的表达,可抑制裸鼠移植瘤的生长.%Objective To investigate the effects of insulin-like growth factor binding protein 7 (IGFBP7) on the proliferation,cell cycle of gastric cancer cell and the expression of cynlin D1,cyclin-dependent kinase(CDK)4,and to observe the effects of IGFBP7 on the growth of gastric tumor xenografts in nude mice.Methods The MKN28 cell line was interfered by small interfere ribonucleic acid (siRNA) (interfered group),and blank control group,negative control group were also set.The overexpression of IGFBP7 in SGC-7901 induced by pcDNA3.1-IGFBP7 plasmid infection (overexpression group),and blank control group,empty vector group were also set.Western blotting were used to observe the interference and over expression of IGFBP7 in the cell lines after 48 h.After IGFBP7 was knockdown or overexpressed,the cell proliferation of gastric cancer cells was detected by 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide (MTT) assay and colony formation assay.The cell cycle was determined by flow cytometry.Cynlin D1 and CDK4 were examined by Western blotting.Tumor xenografts in nude mice model was established with SGC-7901 cells from overexpressed group and untransfected SGC7901 cells.The effects of IGFBP7 on the growth of gastric cancer was observed within 20 days.Single factor analysis of variance was used,LSD test and independent sample t test were performed to compare the differences between groups.Results Compared with blank control group and negative control group,the proliferation of MKN 28 cells of interfered group increased (3.013±0.322,2.903± 0.210 vs 4.502±0.356,F=18.31,P=0.002 8) with more colony formation,and less cells at G1 stage ((57.29±1.30)％,(52.27±0.90)％ vs (36.81±0.83)％,F=321.57),and the differences were statistically significant (all P＜0.01).Compared with blank control group and empty vector group,the proliferation of SGC 7901 cells of overexpressed group decreased (3.142±0.320,3.214±0.226 vs 1.813 ±0.165,F=22.35,P=0.001 7) with less colony formation,and more cells at G1 stage ((49.34 ± 1.20)％,(47.42±0.71)％ vs (57.73±0.73)％,F=109.230,P＜0.01),and the differences were statistically significant (all P＜0.05).The results of Western blotting indicated that the expression of cyclin D1 and CDK4 increased after the expression of IGFBP7 was interfered (both P＜0.01).The results were opposite in the cells of IGFBP7 overexpressed group (both P＜0.01).Twenty days after tumor xenografts model established,the tumor size and mass of overexpressed group was significantly less than that of control group ((773.50±113.45) mm3 vs (1 038.75±101.31) mm3,(786±50) mg vs (1 145± 85) mg,t=7.799,16.280,both P＜0.01).Conclusion IGFBP7 could affect the prolifertion and cell cycle of gastric cancer cells,influence the expression of cyclin D1 and CDK4,and inhibit the growth of tumor xenografts in nude mice.

摘要： Objective To synthesize and evaluate novel and potent prodrugs of 5-fluorouracil (5-Fu).Methods Six prodrugs of 5-Fu were prepared by incorporated various substituents on N 1 and N 3 position.The in vitro antiproliferative activity against five cancer cell lines was evaluated by MTT assay.Results All the six prodrugs of 5-Fu displayed potent antiproliferative activity against canc-er cell lines.Conclusion These novel prodrugs exhibited potent anticancer activity,and were worth of further investigation.%目的：寻找新型、高效的5-氟尿嘧啶(5-Fu)前药并测定其抗肿瘤活性。方法在5-氟尿嘧啶的 N 1和 N 3位引入具有抗肿瘤活性的取代基，合成其前体药物，利用 MTT 方法测定其对不同肿瘤细胞的增殖抑制活性。结果合成的6个5-氟尿嘧啶前体药物均显示了较好的肿瘤细胞增殖抑制活性。结论新型5-氟尿嘧啶前药对肿瘤细胞有较好的抑制活性，值得进一步研究。

摘要： 目的:研究蛇葡萄素钠对人肺腺癌SPC-A-1细胞、人正常胚肺MRC-5细胞的毒性作用.方法:应用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡;透射电子显微镜(TEM)观察细胞超微结构的变化.结果:MTT法实验表明,蛇葡萄素钠、卡铂显著抑制SPC-A-1细胞的增殖,呈现浓度依赖性,IC50分别为57.18 ±9.42 ug/ml、33.56±11.2 ug/ml,但对MRC-5细胞增殖的抑制作用不明显,IC50分别大于5000 ug/ml及500ug/ml;流式细胞检测分析表明,25～ 100ug/ml的蛇葡萄素钠可使SPC-A-1细胞增殖阻滞于S期,G0/G1期细胞明显减少,且呈浓度依赖性,50、100 ug/ml的蛇葡萄素钠可使SPC-A-1细胞发生明显凋亡,而蛇葡萄素钠对MRC-5细胞周期及凋亡的影响不明显.蛇葡萄素钠浓度为50、100ug/ml时,透射电镜下可见SPC-A-1细胞表现出典型的凋亡特征,而MRC-5细胞变化不明显.结论:蛇葡萄素钠对肿瘤细胞具有较强的毒作用,对正常细胞毒性较小.

摘要： 本研究检测五种血液系统肿瘤细胞株中的DPYD基因的单核苷酸多态性,横向比较DPYD基因多态性与血液系统肿瘤的关系。指出，DPYD基因的rs1801160、rs2297595位点在所有肿瘤细胞株中基因表达无差别;rs1801159位点在HL-60、Raji、K562、KA细胞株中基因表达相同，与U937细胞株的基因表达有差别。

摘要： 本研究检测五种血液系统肿瘤细胞株中XPC、ERCC5基因的单核苷酸多态性,横向比较XPC、ERCC5基因多态性与血液系统肿瘤的关系。指出，XPC基因的rs1870134位点，ERCCS基因的rs76871136、rs77569659位点，在所有肿瘤细胞株中的表达无差别;ERCCS基因的rs873601位点在HL-60、Raji、K562、KA细胞株中基因表达相同，与U937细胞株的基因表达有差别;XPC基因的rs2228000位点在五种血液系统肿瘤细胞株中表达不完全相同。

摘要： 腐植酸被认为在动物喂饲试验中对健康和产率具有整体积极作用,同时颇有争议的是,其也被作为肿瘤的病原学因素之一.尝试评价斯洛伐克地区特定来源腐植酸在使用推荐预防剂量时的体外作用.研究其体外的抗氧化性质、对肝线粒体中酶系和非酶系抗氧化防御系统的作用以及对人工培养肿瘤细胞株的作用.观察到不论腐植酸是溶解于二甲基亚砜(DMSO)或是直接加入呼吸介质中线粒体悬浮液,在腐植酸给药后超氧化物歧化酶(SOD)活性显著下降.所测定的其他抗氧化酶如谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和谷胱甘肽还原酶(GR),其活性及还原型谷胱甘肽(GSH)的含量与对照组相比并未表现出显著变化.腐植酸对超氧阴离子自由基(O2-·)的抑制率低于其对羟自由基(·OH)的抑制率.6种不同肿瘤细胞株的存活率显示出只有急性T淋巴性白血病细胞株对测试腐植酸敏感.尽管在水溶液中溶解度相对较低,但特定来源腐植酸参与了氧化还原调控.通过夺取自由基,腐植酸重置了抗氧化防御机制.来源于自然资源的腐植酸体外研究结果显示出其作为有前景的免疫增强剂的潜力.

摘要： 从药用针层孔菌2种子实体和4种菌丝体提取多糖,采用Alamarblue assay试剂盒提供的方法,对多糖进行抑制Hela肿瘤细胞增殖作用研究。发现P11子实体有显著抑制Hela肿瘤细胞株增殖作用,并与剂量相关,其余组分有较弱的抑制Hela肿瘤细胞株增殖作用。

摘要： 目的:研究阿片生长因子蛋氨酸脑啡肽(Methionine Enkephalin,Met-ENK)对SH-SY5Y肿瘤细胞的抑制作用的效果及其途径与机制.方法:采用MTT法检测不同剂量的Met-ENK(10-3、10-4、10-5、10-6、10-7mol/L)对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y作用48小时后的肿瘤抑制率:采用细胞计数法绘制Met-ENK孵育0h,24h,36h,48h,72h后的SH-SY5Y的生长曲线；采用流式细胞术及PI染色法记录用药孵育48h后,SH-SY5Y细胞周期变化情况；用10-6mol/L的Met-ENK孵育SH-SY5Y 24小时,采用real time-PCR法,检测细胞内p21 Waf1/Cip1,p53基因转录量变化情况；采用western blot法检测不同时间段细胞中p21Waf1/Cip1,p16INK4a,磷酸Rb蛋白的表达量的变化情况；采用过氧化物歧化酶检测试剂盒检测给药后细胞内过氧化物酶的活性变化；采用Flu0 4-AM钙离子染色法检测不停浓度给药后,24小时内细胞内钙离子浓度变化.结果:MTT法结果显示Met-ENK对SH-SY5Y细胞的生长有明显的抑制作用;与空白对照组相比,生长明显缓慢；在Met-ENK作用后主要将细胞抑制于生长周期的G0/G1期；real time-PCR法结果证实p21Wafl/Cip1,p53基因在药物作用后转录量增加；western blot法显示药物作用后细胞内p21 waf1/Cip1,p16INK4a蛋白表达量增加,磷酸Rb蛋白表达量降低；同时发现,细胞内SOD酶活性增加,钙离子浓度随用药量的不同呈现下降的变化趋势.结论:Met-ENK对SH-SY5Y肿瘤细胞有明显的抑制作用,且主要是通过影响细胞周期相关蛋白及酶类表达和活性,细胞内SOD酶活性和钙离子浓度等多种途径发挥抑制SH-SY5Y细胞增殖的作用.

摘要： 目的:研究阿片生长因子蛋氨酸脑啡肽(Methionine Enkephalin,Met-ENK)对SH-SY5Y肿瘤细胞的抑制作用的效果及其途径与机制.方法:采用MTT法检测不同剂量的Met-ENK(10-3、10-4、10-5、10-6、10-7mol/L)对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y作用48小时后的肿瘤抑制率:采用细胞计数法绘制Met-ENK孵育0h,24h,36h,48h,72h后的SH-SY5Y的生长曲线；采用流式细胞术及PI染色法记录用药孵育48h后,SH-SY5Y细胞周期变化情况；用10-6mol/L的Met-ENK孵育SH-SY5Y 24小时,采用real time-PCR法,检测细胞内p21 Waf1/Cip1,p53基因转录量变化情况；采用western blot法检测不同时间段细胞中p21Waf1/Cip1,p16INK4a,磷酸Rb蛋白的表达量的变化情况；采用过氧化物歧化酶检测试剂盒检测给药后细胞内过氧化物酶的活性变化；采用Flu0 4-AM钙离子染色法检测不停浓度给药后,24小时内细胞内钙离子浓度变化.结果:MTT法结果显示Met-ENK对SH-SY5Y细胞的生长有明显的抑制作用;与空白对照组相比,生长明显缓慢；在Met-ENK作用后主要将细胞抑制于生长周期的G0/G1期；real time-PCR法结果证实p21Wafl/Cip1,p53基因在药物作用后转录量增加；western blot法显示药物作用后细胞内p21 waf1/Cip1,p16INK4a蛋白表达量增加,磷酸Rb蛋白表达量降低；同时发现,细胞内SOD酶活性增加,钙离子浓度随用药量的不同呈现下降的变化趋势.结论:Met-ENK对SH-SY5Y肿瘤细胞有明显的抑制作用,且主要是通过影响细胞周期相关蛋白及酶类表达和活性,细胞内SOD酶活性和钙离子浓度等多种途径发挥抑制SH-SY5Y细胞增殖的作用.

摘要： 目的:研究阿片生长因子蛋氨酸脑啡肽(Methionine Enkephalin,Met-ENK)对SH-SY5Y肿瘤细胞的抑制作用的效果及其途径与机制.方法:采用MTT法检测不同剂量的Met-ENK(10-3、10-4、10-5、10-6、10-7mol/L)对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y作用48小时后的肿瘤抑制率:采用细胞计数法绘制Met-ENK孵育0h,24h,36h,48h,72h后的SH-SY5Y的生长曲线；采用流式细胞术及PI染色法记录用药孵育48h后,SH-SY5Y细胞周期变化情况；用10-6mol/L的Met-ENK孵育SH-SY5Y 24小时,采用real time-PCR法,检测细胞内p21 Waf1/Cip1,p53基因转录量变化情况；采用western blot法检测不同时间段细胞中p21Waf1/Cip1,p16INK4a,磷酸Rb蛋白的表达量的变化情况；采用过氧化物歧化酶检测试剂盒检测给药后细胞内过氧化物酶的活性变化；采用Flu0 4-AM钙离子染色法检测不停浓度给药后,24小时内细胞内钙离子浓度变化.结果:MTT法结果显示Met-ENK对SH-SY5Y细胞的生长有明显的抑制作用;与空白对照组相比,生长明显缓慢；在Met-ENK作用后主要将细胞抑制于生长周期的G0/G1期；real time-PCR法结果证实p21Wafl/Cip1,p53基因在药物作用后转录量增加；western blot法显示药物作用后细胞内p21 waf1/Cip1,p16INK4a蛋白表达量增加,磷酸Rb蛋白表达量降低；同时发现,细胞内SOD酶活性增加,钙离子浓度随用药量的不同呈现下降的变化趋势.结论:Met-ENK对SH-SY5Y肿瘤细胞有明显的抑制作用,且主要是通过影响细胞周期相关蛋白及酶类表达和活性,细胞内SOD酶活性和钙离子浓度等多种途径发挥抑制SH-SY5Y细胞增殖的作用.

摘要： 目的:研究阿片生长因子蛋氨酸脑啡肽(Methionine Enkephalin,Met-ENK)对SH-SY5Y肿瘤细胞的抑制作用的效果及其途径与机制.方法:采用MTT法检测不同剂量的Met-ENK(10-3、10-4、10-5、10-6、10-7mol/L)对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y作用48小时后的肿瘤抑制率:采用细胞计数法绘制Met-ENK孵育0h,24h,36h,48h,72h后的SH-SY5Y的生长曲线；采用流式细胞术及PI染色法记录用药孵育48h后,SH-SY5Y细胞周期变化情况；用10-6mol/L的Met-ENK孵育SH-SY5Y 24小时,采用real time-PCR法,检测细胞内p21 Waf1/Cip1,p53基因转录量变化情况；采用western blot法检测不同时间段细胞中p21Waf1/Cip1,p16INK4a,磷酸Rb蛋白的表达量的变化情况；采用过氧化物歧化酶检测试剂盒检测给药后细胞内过氧化物酶的活性变化；采用Flu0 4-AM钙离子染色法检测不停浓度给药后,24小时内细胞内钙离子浓度变化.结果:MTT法结果显示Met-ENK对SH-SY5Y细胞的生长有明显的抑制作用;与空白对照组相比,生长明显缓慢；在Met-ENK作用后主要将细胞抑制于生长周期的G0/G1期；real time-PCR法结果证实p21Wafl/Cip1,p53基因在药物作用后转录量增加；western blot法显示药物作用后细胞内p21 waf1/Cip1,p16INK4a蛋白表达量增加,磷酸Rb蛋白表达量降低；同时发现,细胞内SOD酶活性增加,钙离子浓度随用药量的不同呈现下降的变化趋势.结论:Met-ENK对SH-SY5Y肿瘤细胞有明显的抑制作用,且主要是通过影响细胞周期相关蛋白及酶类表达和活性,细胞内SOD酶活性和钙离子浓度等多种途径发挥抑制SH-SY5Y细胞增殖的作用.

摘要： 目的：本实验旨在观察罗格列酮对SGC-7901胃癌细胞株侵袭转移及MMP-2表达的影响及其作用机制。rn 方法：采用RT-PCR、Real-time PCR和Western blot分别检测PPAR Y、MMP-2和p38MAPK的表达，明胶酶分析法检测MMP-2的活性，Transwellchamber试验及划痕试验检测胃癌细胞侵袭迁移能力。P13K抑制剂LY294002和p38MAPK抑制剂SC203580检测P13K或p38APK信号通路的作用。rn 结果：罗格列酮抑制胃癌细胞的迁移、侵袭能力并下调MMP-2的表达，p38MAPK阻滞剂可取消罗格列酮对MMP-2的下调作用。rn 结论：罗格列酮可能通过激活p38MAPK通路下调MMP-2抑制胃癌侵袭转移。

摘要： 目的：本实验旨在观察罗格列酮对SGC-7901胃癌细胞株侵袭转移及MMP-2表达的影响及其作用机制。rn 方法：采用RT-PCR、Real-time PCR和Western blot分别检测PPAR Y、MMP-2和p38MAPK的表达，明胶酶分析法检测MMP-2的活性，Transwellchamber试验及划痕试验检测胃癌细胞侵袭迁移能力。P13K抑制剂LY294002和p38MAPK抑制剂SC203580检测P13K或p38APK信号通路的作用。rn 结果：罗格列酮抑制胃癌细胞的迁移、侵袭能力并下调MMP-2的表达，p38MAPK阻滞剂可取消罗格列酮对MMP-2的下调作用。rn 结论：罗格列酮可能通过激活p38MAPK通路下调MMP-2抑制胃癌侵袭转移。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，公开了杂交瘤细胞株及基于杂交瘤细胞株的抗Nodal抗体和检测肿瘤细胞方面的应用。所述杂交瘤细胞株AH12，于2014年4月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，分类命名为杂交瘤细胞，保藏编号为CGMCC NO.9105。基于所述杂交瘤细胞株产生的抗Nodal的单克隆抗体，所述抗Nodal的单克隆抗体与抗Nodal的多克隆抗体组成一种新的可应用于检测肿瘤细胞的试剂盒。本发明提供单克隆抗体的类型为IgG，具有良好的特异性与较高的效价。经检测，其效价可达1:1024000，在western bolt检测中，本发明提供的抗体仅在目标位置检测到特异性条带，且在稀释2000倍后仍显示良好的特异性。所述试剂盒可以较好地用于血清中Nodal蛋白的含量检测，且具有较高的灵敏性和特异性。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，公开了杂交瘤细胞株及基于杂交瘤细胞株的抗Nodal抗体和检测肿瘤细胞方面的应用。所述杂交瘤细胞株AH12，于2014年4月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，分类命名为杂交瘤细胞，保藏编号为CGMCC No.9105。基于所述杂交瘤细胞株产生的抗Nodal的单克隆抗体，所述抗Nodal的单克隆抗体与抗Nodal的多克隆抗体组成一种新的可应用于检测肿瘤细胞的试剂盒。本发明提供单克隆抗体的类型为IgG，具有良好的特异性与较高的效价。经检测，其效价可达1∶1024000，在westernbolt检测中，本发明提供的抗体仅在目标位置检测到特异性条带，且在稀释2000倍后仍显示良好的特异性。所述试剂盒可以较好地用于血清中Nodal蛋白的含量检测，且具有较高的灵敏性和特异性。

摘要： 本发明公开了一种小鼠成纤维细胞肿瘤细胞株及其应用，该细胞株为国内外首次建立的白血病相关小鼠成纤维细胞肿瘤细胞株，其细胞名称是小鼠成纤维细胞肿瘤细胞株HXWMF‑1，保藏编号为CCTCC NO:C2019244，可用于建立小鼠成纤维细胞肿瘤动物模型等多方面的应用。

摘要： 本发明公开了一种高迁移性肿瘤细胞株筛选方法，旨在解决现有的筛选方法成本高、品种不全以及破坏生物化学性质的问题。所述筛选方法通过构建ZEB1启动子pZEB1驱动表达载体phZEB1‑PURO‑GFP并转染肿瘤细胞，通过筛选可获得具有肿瘤干细胞特性且ZEB1高表达的细胞株系。该发明的高迁移性肿瘤细胞株筛选方法可用于各种类型肿瘤干细胞的筛选。

摘要： 本发明公开了一种间质干细胞体内突变肿瘤细胞株肺转移细胞株B6及其构建方法和应用，此细胞株采用大鼠骨髓间质干细胞体内突变肿瘤细胞株K3注射裸鼠胫骨骨髓腔致肺转移，将肺转移瘤体细胞分离原代培养获得的体外细胞，经过单克隆筛选，体外扩增后再进行致转移瘤，重复进行2轮筛选获得体内突变肿瘤细胞株K3肺转移细胞株B6。并通过一系列生物学鉴定方法鉴定体内突变肿瘤细胞株K3肺转移细胞株B6建立成功，相对体内突变肿瘤细胞株K3，肺转移细胞株B6具有更强的侵袭、转移、增殖、克隆形成能力，更具有肿瘤干细胞特性。K3体内突变肿瘤细胞株肺转移细胞株B6的建立为研究肿瘤干细胞生物学特性及寻找治疗肿瘤新途径提供研究基础，具有重要科研价值。

摘要： 本发明公开了一种淋巴结来源淋巴瘤相关成纤维细胞肿瘤细胞株，来源于人淋巴瘤细胞裸鼠移植瘤模型中的淋巴结微环境，其细胞名称为小鼠淋巴瘤相关成纤维细胞肿瘤细胞HXLyAF‑KLN，保藏编号为CCTCC NO：C2021107，保藏日期为2021年12月09日，保藏单位为中国典型培养物保藏中心。该细胞株为国内外首次建立的淋巴结来源淋巴瘤相关小鼠成纤维细胞肿瘤细胞株，可在构建小鼠成纤维细胞肿瘤动物模型、恶性淋巴结微环境模型、3D肿瘤培养体系和类器官体系模型、淋巴结微环境与淋巴瘤进展和耐药的关系模型中应用。

摘要： 本发明公开了一种小鼠成纤维细胞肿瘤细胞株HXLyAF‑KBM及其应用，该细胞株来源于人淋巴瘤细胞裸鼠移植瘤模型中的骨髓微环境，其细胞名称为小鼠淋巴瘤相关成纤维细胞肿瘤细胞HXLyAF‑KBM，保藏编号为CCTCC NO：C2021106，保藏日期为2021年12月09日，保藏单位为中国典型培养物保藏中心。该细胞株为国内外首次建立的骨髓来源淋巴瘤相关小鼠成纤维细胞肿瘤细胞株，可在构建小鼠成纤维细胞肿瘤动物模型、恶性骨髓微环境模型、3D肿瘤培养体系和类器官体系模型、骨髓微环境与淋巴瘤进展和耐药关系模型中应用。

摘要： 本发明公开了一种小鼠成纤维细胞肿瘤细胞株及其应用，该细胞株为国内外首次建立的白血病相关小鼠成纤维细胞肿瘤细胞株，其细胞名称是小鼠成纤维细胞肿瘤细胞株HXWMF‑1，保藏编号为CCTCC NO:C2019244，可用于建立小鼠成纤维细胞肿瘤动物模型等多方面的应用。

摘要： 本发明公开了一种间质干细胞体内突变肿瘤细胞株K3及其应用，此细胞株采用大鼠骨髓间质干细胞尾静脉反复注射体内成瘤，将瘤体细胞分离培养获得的体外细胞，再经过单克隆筛选获得间质干细胞体内突变肿瘤细胞株,保藏编号为CGMCCNO.9158。还公开了K3在肿瘤干细胞的SP分离和裸鼠体内的K3分离肿瘤干细胞的相关研究中的应用。本发明建立了一套分离、培养和鉴定间质干细胞体内突变肿瘤细胞株的方法。间质干细胞体内突变肿瘤细胞株的建立为研究间质干细胞体内瘤化的机制及肿瘤干细胞的生物学研究具有重要作用，为尽量减少间质干细胞在体内瘤化，提高其应用的安全性具有重要科研价值。

摘要： 本发明公开了一种人乳腺良性叶状肿瘤细胞株BPT‑0526，所述细胞系BPT‑0526保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2021年5月26日，保藏地址为:中国，武汉，武汉大学，保藏编号为CCTCC NO:C2021143。本发明还公开了人乳腺良性叶状肿瘤细胞株作为研究肿瘤发生发展机理的细胞模型以及在筛选抗肿瘤药物中的应用。本发明的肿瘤细胞系可作为研究乳腺良性叶状肿瘤的模型，对于了解人乳腺良性叶状肿瘤病人的发病机制有很大的帮助。