肝再生增强因子

摘要： 肾间质纤维化是慢性肾脏病发生发展过程中的重要病理特征之一。在肾损伤的过程中,分布于肾脏细胞内的肝再生增强因子表达上调,通过免疫调控、提高氧化酸化能力和巯基氧化酶等作用参与肾损伤调控。肝再生增强因子可从抗肾小管细胞凋亡、抑制转化生长因子β信号通路、抑制细胞外基质合成、刺激细胞外基质降解、阻断信号通路及抑制炎症反应等多个方面干预肾间质纤维化的发生发展,保护肾脏功能。肝再生增强因子有望成为预防和减轻肾间质纤维化损伤的作用靶点。

摘要： 目的 观察脓毒症急性肾损伤治疗中连续性肾脏替代治疗(CRRT)的应用效果及对患者血白细胞介素-18(IL-18)、尿Na/H交换体亚型3(NHE3)、肝再生增强因子(ALR)水平的影响.方法 前瞻性选取2015年1月至2019年11月长江大学附属仙桃市第一人民医院收治的95例脓毒症急性肾损伤患者,按照随机平行分组法将其分为两组:对照组(n=47)和研究组(n=48).对照组采用常规抗脓毒症治疗,研究组在常规抗脓毒症的基础上采用CRRT治疗.比较两组患者治疗前后脓毒症指标(降钙素原、中性粒细胞比率、白细胞计数)、IL-18、NHE3、ALR与治疗后ICU 住院时间、心血管事件发生率、尿量恢复时间.结果 治疗后,研究组患者的降钙素原、中性粒细胞比率、白细胞计数、IL-18、NHE3、ALR、ICU住院时间、心血管事件发生率、尿量恢复时间依次为(8.14±1.95)ng/mL、(88.03±3.14)％、(16.52±2.04)×109/L、(43.08±6.14)ng/L、(124.82±15.45)pg/mL、(159.14±25.46)pg/mL、(9.27±3.41)d、10.42％、(7.86±2.61)d,对照组依次为(4.15±1.62)ng/mL、(78.42±3.35)％、(12.97±2.31)×109/L、(60.11±7.52)ng/L、(200.67±13.93)pg/mL、(220.76±27.08)pg/mL、(13.08±5.95)d、29.79％、(10.95±3.82)d.与对照组相比,研究组患者的治疗后降钙素原、中性粒细胞比率、白细胞计数、IL-18、NHE3、ALR水平与心血管事件发生率明显更低,且ICU住院时间、尿量恢复时间更短,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 脓毒症急性肾损伤治疗中CRRT的应用效果显著,可有效抑制脓毒症急性肾损伤进程,降低IL-18、NHE3、ALR水平,还可减少心血管事件,促使其快速康复.

摘要： 目的:探究肝再生增强因子(ALR)、血清β2微球蛋白(β2-MG)联合血肌酐(Scr)对重症急性胰腺炎(SAP)合并急性肾损伤(AKI)的早期预测价值.方法:采用前瞻性研究方法,选取2016年1月至2018年1月河北省廊坊市人民医院ICU收治的SAP患者82例,监测患者入院0h、6h、12h、24 h、48 h、72 h血ALR、尿β2-MG和Scr水平,并根据其是否并发AKI,分为AKI组和非AKI组,运用受试者工作特征(ROC)曲线,分析不同时段血ALR、尿β2-MG和Scr预测SAP合并AKI的价值.结果:SAP合并AKI患者31例(37.80％,AKI组),SAP非AKI患者51例(62.20％,非AKI组).AKI组入院6h血ALR明显升高,入院12h达到峰值,入院6h、12h、24 h、48 h、72 h,AKI组血ALR和尿β2-MG水平高于非AKI组(P＜0.05);入院6h、12h、24 h、48 h、72 h,AKI组Scr水平高于非AKI组(P＜0.05).入院12h血ALR水平预测AKI的灵敏度为0.876,特异度为0.884,ROC曲线下面积(AUC)为0.892;入院24 h尿β2-MG灵敏度为0.868,特异度为0.874,AUC为0.883;入院72 h Scr水平灵敏度为0.865,特异度为0.884,AUC为0.861;入院12h血ALR、24 h尿β2-MG和72 h Scr构建联合联合预测模型,灵敏度为0.916,特异度为0.934,AUC为0.965,高于单项预测指标.结论:ALR、β2-MG联合Scr对SAP合并AKI早期预测价值较高,可用于临床早期诊断.

摘要： 目的 探讨大鼠肝移植后肝再生增强因子(augmenter of liver regeneration,ALR)与移植物急性排斥反应的关系.方法 建立急性排斥组及免疫耐受组大鼠肝移植动物模型各12只.术后第1、3、5和7天取大鼠外周血浆及肝脏组织标本.检测外周血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)及天冬氨酸转移酶(AST)和总胆红素(TBIL)水平;检测肝脏移植物组织内ALR、干扰素-γ(INF-γ)和白细胞介素-2(IL-2)的表达;分析ALR与INF-γ和IL-2表达变化关系.结果 术后第1天急性排斥组INF-γ明显高于免疫耐受组,第3、5、7天两组大鼠外周血ALT、AST及TBIL均高于术后第1天,且急性排斥组INF-γ、IL-2表达及ALR的表达明显高于免疫耐受组P0.05).结论 ALR与大鼠肝移植后急性免疫排斥反应呈明显的负相关,可能参与了这一过程的调控.

摘要： Objective To explore whether augmenter of liver regeneration (ALR) can serve as early diagnostic biomarker in the patients with acute kidney injury(AKI).Methods The inpatients with possibility to AKI in the central ICU of Second Affiliated Hospital of Chongqing Medical University from October 2014 to October 2015 were recruited and assigned to the AKI group and non-AKI group according to the KDIGO guidance.Blood and urine ALR and blood creatinine were detected at 0,6,12,24,48,72 h after entering the group.Results Among all cases,40 cases(62.5％) developed to AKI.Blood ALR and urine ALR at 6h after entering the group in the AKI group began to significantly increase compared with the non-AKI group(P＜0.05),the blood and urine ALR levels reached to the peak value at 12,24 h after entering the group;the blood creatinine level at 12 h after entering the group in the AKI group began to significantly increase compared with the non-AKI group(P＜0.05),blood creatinine level was still slowly and progressively elevated at 72 h after entering the group.Conclusion Serum and urine ALR levels are significantly increased in the early stage of AKI,which indicates that ALR may be a new type biomarker for diagnosing AKI.%目的 本研究拟探讨肝再生增强因子(ALR)是否可作为急性肾损伤(AKI)患者的早期诊断生物标志物.方法 将2014年10月至2015年10月在重庆医科大学附属第二医院中心ICU住院且有发展为AKI可能的患者收集入组,按照美国肾脏病基金会(KDIGO)指南将患者分为AKI组及非AKI组,检测入组后0、6、12、24、48、72 h患者的血、尿ALR及血肌酐水平.结果 所有患者中,40例患者发展成AKI.AKI组患者血ALR和尿ALR水平在入组后6h开始较非AKI组均有明显上升(P＜0.05),血、尿ALR水平分别在入组后12、24 h达到峰值;AKI组患者血肌酐水平在入组后12 h开始较非AKI组明显上升(P＜0.05),血肌酐于入组后72 h仍缓慢进行性升高.结论 血、尿ALR水平在AKI早期就明显上升,提示ALR有可能是一种诊断AKI的新型生物标志物.

摘要： 目的 通过构建转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)上皮-间质转化(EMT)模型及单侧输尿管梗阻术(UUO)模型,观察内源性ALR表达情况.方法 体外培养HK-2细胞,给予不同浓度TGF-β1处理,以蛋白质印迹法(Western blotting)检测E-钙黏附蛋白、波形蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应、Western blotting、细胞免疫荧光检测ALR表达水平.构建UUO模型大鼠,以Western blotting检测不同组别ALR表达水平.结果 与对照组相比,TGF-β1处理HK-2细胞E-钙黏附蛋白表达水平降低、波形蛋白表达水平增加(P<0.05),内源性23 kDa ALR mRNA及蛋白表达水平增加(P<0.05),ALR免疫荧光增强.UUO模型大鼠中,与假手术组相比,UUO术后7 d内23 kDa ALR表达水平增加(P<0.05),术后14 d 23 kDa ALR表达水平较术后7 d下降(P<0.05).结论 TGF-β1处理HK-2细胞及UUO模型大鼠23 kDa ALR表达水平增加;ALR可能参与了线粒体的氧化应激及凋亡过程.

摘要： 目的：研究重组人肝再生增强因子（hALR）转染肝细胞系的生物学活性，为生物人工肝细胞反应器提供合适的细胞材料。方法本研究采用转染重组质粒pcDNA3.1(-)hALR的HepG2细胞，经G418筛选，在体外培养、传代后，进行Western blot免疫印迹实验及免疫荧光实验，检测细胞中hALR的表达，并与未转染重组质粒的HepG2细胞进行比较；采用ELISA方法，检测两组细胞培养液中hALR的分泌情况；使用流式细胞仪检测细胞中增殖细胞相关核抗原Ki-67，了解重组质粒转染前后HepG2细胞的增殖状况。结果转染重组质粒pcDNA3.1(-)hALR的HepG2细胞功能稳定，形态良好，细胞表达及分泌hALR较未转染重组质粒的HepG2细胞多，且随着培养时间的延长，细胞培养液中的hALR含量迅速升高，优于未转染重组质粒的HepG2细胞；转染重组质粒的HepG2细胞中Ki-67阳性细胞计数显著高于未转染重组质粒的HepG2细胞，说明转染重组质粒使肝细胞增殖活跃。结论本研究结果表明，前期研究构建的转染了hALR基因的肝细胞系能较高表达hALR，且细胞增殖活跃。%Objective To investigate the effects of augmenter of liver regeneration on the proliferation of HepG2 cells, and its mechanism of action;to provide a suitable liver cell line for the bio-reactor of bio-artiifcial liver support system. Methods HepG2 cells transferred with expression vector pcDNA3.1(-)hALR were screened by G418. After in vitro culture and subculture, the expression of hALR were detected by Western blot and immunolfuorescence assay in two HepG2 cell lines transferred with or without expression vector. The secretion of hALR in the culture lfuid of the two HepG2 cell lines were detected by ELISA. Ki-67 in two HepG2 cell lines were detected by lfow cytometry to understand the proliferation of HepG2 cells transferred with or without expression vector. Results The function of HepG2 cell line transferred with expression vector pcDNA3.1(-)hALR was stable. HepG2 cells transferred with expression vector pcDNA3.1(-) hALR expressed and secreted more hALR than HepG2 cells, and with the extension of culture time, the content of hALR in the culture lfuid of HepG2 cells transferred with expression vector pcDNA3.1(-)hALR increased more rapidly than those of HepG2 cells. The Ki-67 positive cells in HepG2 cells transferred with expression vector pcDNA3.1(-)hALR were signiifcantly more than those of HepG2 cells, which indicated that the proliferation of HepG2 cells became more active by transfection of expression vector pcDNA3.1(-)hALR. Conclusion This study indicated that the HepG2 cells transferred with expression vector pcDNA3.1(-) hALR can express more hALR, and the proliferation of the cells was very active.

摘要： 目的 研究肝再生增强因子(ALR)保护急性肝损伤的作用及其机制. 方法 HL-7702细胞分为正常对照组、CCl4急性肝损伤组、ALR+CCl4干预组、3-甲基腺嘌呤(3-MA) +CCl4干预组以及ALR+3-MA+CCl4干预组,CCl4处理前8h对ALR+CCl4和ALR+3-MA+CCl4干预组转染ALR质粒,对除正常对照组外其余四组给予CCl4处理,30 rain后对3-MA+CCl4和ALR+3-MA+CCl4干预组给予3-MA处理,CCl4处理24 h后收集细胞.收集HL-7702细胞和培养上清液,检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;Western blot检测细胞中ALR、细胞周期蛋白D、细胞周期蛋白E、增殖细胞核抗原(PCNA).自噬相关基因7(Atg7)和自噬基因LC3、p62、Beclin-1水平;实时定量PCR检测ALR mRNA水平.多组样本均数的两两比较采用One-way ANOVA分析. 结果 ALR+CCl4干预组与急性肝损伤组相比,ALR蛋白以及mRNA表达水平显著升高(P值均＜ 0.05);CCl4急性肝损伤组与正常对照组相比,ALR蛋白以及mRNA表达水平同样显著升高(P值均＜ 0.05).ALR+CCl4干预组与CCl4急性肝损伤组相比,细胞上清液中ALT (0.73±0.17与1.43±0.38,P值均＜0.05)、AST(19.85±1.83与56.73±6.25,P值均＜0.05)水平显著降低(单位均为IU/L);肝细胞中再生相关细胞周期蛋白D、细胞周期蛋白E、PCNA表达水平以及自噬相关LC3、Atg7.Beclin-1表达水平显著增高,P62表达水平显著降低,提示ALR可以保护急性肝损伤,促进肝细胞的再生,增强肝细胞的自噬水平.ALR+3-MA+CCl4干预组再生相关蛋白的表达水平相较于ALR+CCl4干预组明显降低,与3-MA+CC14干预组相比无明显差异,提示抑制自噬后,肝细胞再生水平明显下降,ALR促进肝再生的作用也明显减弱.结论 ALR可以促进肝脏实质细胞再生,这种再生是通过调节自噬完成的.%Objective To investigate the protective effect of augmenter of liver regeneration (ALR) against acute liver injury and related mechanisms.Methods HL-7702 cells were divided into normal control group,carbon tetrachloride (CCl4)-induced acute liver injury group,ALR+CCl4 intervention group,3-methyladerine (3-MA)+CCl4 intervention group,and ALR+3-MA+CCl4 intervention group.The ALR+CCl4 and ALR+3-MA+CCl4 intervention groups were transfected with ALR plasmids at 8 hours before CCl4 treatment.All groups except the normal control group were treated with CC14,and 30 minutes later,the 3-MA+CC14 and ALR+3-MA+CCl4 intervention groups were treated with 3-MA.The cells were collected at 24 hours after CCl4 treatment.The HL-7702 cells and supematant were collected to measure the levels of alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) (IU/L).Westem blot was used to measure the levels ofALR,cyclin D,cyclin E,proliferating cell nuclear antigen (PCNA),autophagy-related gene 7 (Atg7),and autophagy genes LC3,p62,and Beclin-1.Quantitative real-time PCR was used to measure the mRNA expression ofALR.A oneway analysis of variance was used for comparison of means between any two groups.Results The ALR+CCl4 intervention group had significant increases in the protein and mRNA expression of ALR compared with the acute liver injury group (both P ＜ 0.05).The CC14-induced acute liver injury group had significant increases in the protein and mRNA expression of ALR compared with the normal control group (both P ＜ 0.05).Compared with the CCl4-induced acute liver injury group,the ALR+CCl4 intervention group had significant reductions in ALT (0.73±0.17 IU/L vs 1.43±0.38 IU/L,P ＜ 0.05) and AST (19.85±1.83 IU/L vs 56.73±6.25 IU/L,P ＜ 0.05) in supematant,significantly increased expression of cyclin D,cyclin E,PCNA,LC3,Atg7,and Beclin-1 in hepatocytes,and significantly reduced expression of p62,which suggested that ALR protected the liver against acute liver injury,promoted the regeneration of hepatocytes,and enhanced the autophagy of hepatocytes.The ALR+3-MA+CCl4 intervention group had a significant reduction in the expression of regeneration-associated proteins compared with the ALR+CCl4 intervention group,while there was no significant difference between the ALR+3-MA+CCL4 intervention group and 3-MA+CCL4 intervention group,which suggested that after the inhibition of autophagy,there were significant reductions in the regeneration of hepatocytes and liver regeneration promoted by ALR.Conclusion ALR can promote the regeneration of hepatocytes in liver parenchyma,which is achieved by the regulation of autophagy.

摘要： 目的：探讨了肝再生增强因子是HBV相关慢加急性肝衰竭预后评估候选分子的可能性。方法:本研究采用四氯化碳诱导大鼠肝再生模型，观察四氯化碳注射后6、12、24、48、72小时肝再生增强因子(ALR)，肝细胞生长因子(HGF)，细胞增殖核抗原(PCNA)和病理变化。同时收集HBV相关慢性肝病患者标本检测血清ALR水平，并追踪慢加急性肝衰竭患者的临床结局。结果:四氯化碳注射后，大鼠血清ALR水平缓慢升高，在注射后12小时达到顶峰，随后逐渐降到基线水平(F=30.495, P<0.01)。肝组织ALR水平和血清ALR水平变化趋势相反。血清HGF、肝组织PCNA和病理变化与血清ALR水平有相同的趋势。慢加急性肝衰竭和肝细胞癌患者血清ALR水平高于正常对照(2.68±1.95 vs 0.74±0.31, P<0.01; 1.77±1.32 vs 0.74±0.31,P=0.035)。慢加急性肝衰竭患者中，存活组早期血清ALR水平明显高于死亡组(7.83±1.77 vs2.14±1.58, t=7.576, P<0.01)。结论:血清ALR水平可能预示着肝细胞增殖或肝脏再生。慢加急性肝衰竭患者早期血清ALR水平升高可能意味着预后良好。ALR可能作为HBV相关慢加急性肝衰竭预后判断的潜在候选分子。

摘要： 本文首先对对肝再生增强因子对PBMC增殖的影响及调节性T细胞的关系进行了阐述，探讨了肝再生增强因子诱导调节性T细胞发挥免疫抑制作用的机制，论述了肝再生增强因子对大鼠腹腔肝细胞移植免疫排斥的影响，研究表明，hALR能够显著抑制ConA刺激的PBMC增殖，但不是通过诱导PBMC凋亡实现的，而是具有抗凋亡作用；hALR可以促进TGF-β1和IL-10产生而抑制IL-2产生，能够抑制ERK1/2的活性和NF-κB(p65)的表达，提示hALR对细胞因子的调控可能既是hALR上调Treg的条件也是其发挥免疫抑制作用的机制，在分子机制上则表现为对信号通路分子的调控。hALR能够通过上调腹腔HCT的ALF大鼠腹腔大网膜内Treg的比例，抑制机体炎症反应和对腹腔移植物的免疫排斥反应，改善腹腔移植物存活，最终提高ALF大鼠存活率。

摘要： 肝再生增强因子(ALR)是一种来源于肝脏的,能特异性促进肝脏细胞再生的细胞因子.研究证实,重组人ALR蛋白具有促进肝细胞再生的生物学活性,是一种具有良好前景的生化药物.由于其特殊的生物学功能和广阔的应用前景,了解ALR作用机理,有助于对肝脏再生机制的阐述和ALR药物的深入开发.

摘要： 目的:建立一种可分泌表达的重组人肝脏再生增强因子的纯化工艺,对纯化产品进行鉴定和活性研究.方法:通过疏水层析,离子交换层析和分子筛层析的优化,建立了重组人肝脏再生增强因子的纯化工艺,通过SDS-PAGE、N端氨基酸测序、免疫、全波长扫描等方法对纯化产品进行了鉴定.结果:纯化后重组蛋白的纯度为95﹪以上,经还原型SDS-PAGE检测分子量为15000,而非还原型电泳检测分子量为30000,说明该蛋白稳定存在的形式为二聚体.N端氨基酸序列测定与人cDNA推导序列完全一致,并对人源ALR免疫家兔产生的多抗有免疫原性.该蛋白经纯化后为黄色,全波长扫描结果表明,黄色可能是所结合色素FAD所致.体内生物学活性的研究表明,rhALR对损伤后肝细胞的DNA合成有明显的促进作用.

摘要： 本发明属于生物工程产品的生产方法和应用领域，根据全长人肝再生增强因子(ALR，Augmenter of Liver Regeneration)的氨基酸序列，人工合成表达重组全长人肝再生增强因子的基因序列，将其插入到质粒pPIC9K中，转化入毕赤酵母GS115中，建立了重组全长人肝再生增强因子酵母表达及蛋白纯化的生产工艺，最终获得重组全长人肝再生增强因子纯品。该纯品能够在体外促进肝癌细胞系HepG2的DNA合成，在体内促进肝部分切除术后大鼠肝脏的再生，促进CCl4中毒后大鼠肝细胞DNA合成与修复，提高CCl4中毒后大鼠存活率，可能用于慢性肝炎、重型肝炎及其肝硬化的治疗。

摘要： 本发明属于生物工程产品的生产方法和应用领域，根据全长人肝再生增强因子(ALR，Augmenter of Liver Regeneration)的氨基酸序列，人工合成表达重组全长人肝再生增强因子的基因序列，将其插入到原核表达载体pBV220中，转化入大肠杆菌DH5α中，建立了重组全长人肝再生增强因子原核表达及蛋白纯化的生产工艺，最终获得重组全长人肝再生增强因子纯品。该纯品能够在体外促进肝癌细胞系HepG2的DNA合成，在体内促进肝部分切除术后大鼠肝脏的再生，促进CCl4中毒后大鼠肝细胞DNA合成与修复，提高CCl4中毒后大鼠存活率，可能用于慢性肝炎、重型肝炎及其肝硬化的治疗。

摘要： 本发明公开了一种人肝再生增强因子突变体、基因及应用。人肝再生增强因子突变体，氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明人肝再生增强因子突变体通过将N端7个氨基酸残基删除，然后再进行了4个单点突变(C15S、K71R、R72K、C124S)获得一种新的突变体，该突变体的基因在毕赤酵母中表达获得的突变体蛋白为单体形式存在，更有利于活性中心(C62‑C65)和结合在附近的FAD的暴露，实验结果表明其巯基氧化活性提高了20％以上，体外促肝细胞增殖能力和体内四氯化碳肝损伤的保护效果也有所提高，且潜在酶切位点突变掉后，所得产物更加均一，为后续的提取纯化的规模化可操作性提供保障，为开发临床应用提供了可靠基础。

摘要： 本发明主要涉及一种高活性的人肝再生增强因子及其制药用途。具体而言，本发明涉及一种截短型的人肝再生增强因子，其可用于预防和/或治疗肝损伤，尤其涉及利用中、低剂量的所述人肝再生增强因子来预防和/或治疗肝损伤或制备相应药物。本发明还涉及所述人肝再生增强因子的制备方法及其编码核酸等。

摘要： 本发明主要涉及一种高活性的人肝再生增强因子。具体而言，本发明涉及一种不成熟形式(或称截短型)的人肝再生增强因子，其可用于预防和/或治疗肝损伤，尤其涉及利用中、低剂量的所述人肝再生增强因子来预防和/或治疗肝损伤。本发明还涉及所述人肝再生增强因子的制备方法及其编码核酸等。

摘要： 本发明属于生物工程产品的生产方法和应用领域，根据全长人肝再生增强因子(ALR，Augmenter of Liver Regeneration)的氨基酸序列，人工合成表达重组全长人肝再生增强因子的基因序列，将其插入到质粒pPIC9K中，转化入毕赤酵母GS115中，建立了重组全长人肝再生增强因子酵母表达及蛋白纯化的生产工艺，最终获得重组全长人肝再生增强因子纯品。该纯品能够在体外促进肝癌细胞系HepG2的DNA合成，在体内促进肝部分切除术后大鼠肝脏的再生，促进CCl4中毒后大鼠肝细胞DNA合成与修复，提高CCl4中毒后大鼠存活率，可能用于慢性肝炎、重型肝炎及其肝硬化的治疗。

摘要： 本发明属于生物工程产品的生产方法和应用领域，根据全长人肝再生增强因子(ALR，Augmenter of Liver Regenerat ion)的氨基酸序列，人工合成表达重组全长人肝再生增强因子的基因序列，将其插入到原核表达载体pBV220中，转化入大肠杆菌DH5α中，建立了重组全长人肝再生增强因子原核表达及蛋白纯化的生产工艺，最终获得重组全长人肝再生增强因子纯品。该纯品能够在体外促进肝癌细胞系HepG2的DNA合成，在体内促进肝部分切除术后大鼠肝脏的再生，促进CCl4中毒后大鼠肝细胞DNA合成与修复，提高CCl4中毒后大鼠存活率，可能用于慢性肝炎、重型肝炎及其肝硬化的治疗。

摘要： 本发明公开了一种人肝再生增强因子突变体、基因及应用。人肝再生增强因子突变体，氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明人肝再生增强因子突变体通过将N端7个氨基酸残基删除，然后再进行了4个单点突变(C15S、K71R、R72K、C124S)获得一种新的突变体，该突变体的基因在毕赤酵母中表达获得的突变体蛋白为单体形式存在，更有利于活性中心(C62‑C65)和结合在附近的FAD的暴露，实验结果表明其巯基氧化活性提高了20％以上，体外促肝细胞增殖能力和体内四氯化碳肝损伤的保护效果也有所提高，且潜在酶切位点突变掉后，所得产物更加均一，为后续的提取纯化的规模化可操作性提供保障，为开发临床应用提供了可靠基础。

摘要： 本发明涉及称为肝再生增强因子(Alrp)的蛋白在哺乳动物中调节和控制凋亡的新应用。

摘要： 本发明涉及一种人肝再生增强因子转染真核细胞的方法，属于生物工程的生产方法，包括：构建pCDNA3.1(-)HALR质粒，进行HepG2的培养及筛选；pcDNA3.1(-)HALR质粒转染HepG2筛选后所得的肝肿瘤细胞系；然后对转染的肝细胞系进行筛选，用有限稀释法挑选生长迅速的克隆，建立稳定的肝细胞系。本发明的人肝再生增强因子转染真核细胞的方法，具有作为生物人工肝构建的开发的巨大潜力，可利用基因工程技术大量生产，降低成本，应用于生物人工肝研究与临床。除此之外，转染的肝细胞还有可能促进肝细胞移植中移植细胞的生长繁殖或有助于组织器官工程技术的发展等。