耐冷菌

摘要： 耐冷菌在原料乳低温贮藏、加工和运输等过程中广泛存在,通过产生耐热蛋白酶和脂肪酶等胞外酶,水解牛奶中的乳清蛋白、牛血清白蛋白、酪蛋白和甘油三脂,导致乳制品品质显著下降。本文从原料乳中分离出29株假单胞菌和1株芽孢杆菌,90°C处理5 min使耐冷菌Z8、Z14、P4、P5和P8胞外脂肪酶活性分别提高1.88倍、2.20倍、2.00倍、2.25倍和3.67倍,使菌株P11、P15和Z7胞外蛋白酶活性分别提高1.89倍、1.81倍和2.11倍,表明耐冷菌能够分泌耐热胞外酶。培养温度对耐冷菌产胞外酶有显著影响,4°C和37°C培养能够抑制耐冷菌产酶能力。本研究为原料乳中耐冷菌及其胞外酶的控制提供理论依据。

摘要： 从甘肃庆阳污水处理厂采样,10°C驯化污泥,筛选分离得到5株对人工生活污水COD去除性能较好的耐冷菌,其中WE-1、WE-2和FH属于假单胞菌属(Pseudomonassp.),WS-1属于节细菌属(Arthrobactersp.),WS-2属于土生拉乌尔菌属(Raoultellasp.)。单菌及混合菌对人工生活污水的降解研究显示,单菌10°C培养10d, WE-1的COD去除率最高,为85.70%,处理后COD为92.95mg/L。WE-1、WE-2、WS-1、WS-2和FH混合接种,10°C培养7d, COD去除率达91.89%,处理后COD为52.72mg/L。混合菌对人工生活污水COD的去除率优于单菌。该混合菌对改善我国北方寒冷地区生活污水处理效率有一定的潜在价值。

摘要： 指出了低温是影响冬李寒冷地区生活污水处理效果的一个主要原因,在低温环境下,活性污泥中大多数中温菌的生长活性受到抑制,只有少数的耐冷菌可以存活下来并保持一定的活性.简要介绍了低温微生物的概念及分类,从细胞膜结构、低温酶、蛋白质合成以及冷休克蛋白等方面对耐冷菌的适冷机制进行分析,最后对耐冷菌在污水处理中的应用现状与发展方向进行了展望.

摘要： 针对北方地区农村厕改废水冬季处理效率低的问题,从低温驯化的活性污泥中分离筛选出8株在10°C下具有较高降解能力的耐冷菌株,研究其混菌作用效果并制成菌剂.结果 表明:单一菌处理时,假单胞菌H-30对模拟农村生活污水的化学需氧量(chemical oxygen demand,COD)去除率最高,为88.6％;8株耐冷菌H-7、H-10、H-29、H-30、H-33、H-36、H-40、H-54按最优体积比2∶1∶4∶4∶4∶1∶ 1∶1混合后对实际农村生活污水COD去除率可达94.1％,按此比例制成的菌剂在10°C下对实际农村生活污水的COD去除率为83.6％,出水COD为92.45 mg/L,达到我国农田灌溉水质标准.

摘要： 耐冷菌广泛存在于空气和土壤中,也是原料乳中常见的微生物。耐冷菌危害风险存在于乳业生产链每个环节。耐冷菌及其产生的耐热性脂肪酶是影响乳品质量安全的重要因素之一。耐冷菌本身危害通过加热基本可以消除,但是部分耐冷菌产生的耐热性脂肪酶在经过巴士杀菌甚至UHT处理后可能仍然有一定酶活力残留,他们能继续分解乳中脂肪产生游离脂肪酸,导致乳品品质下降,货架期缩短。本文阐述了耐冷菌及耐热性胞外酶的概念及特性,并总结比较了检测脂肪酶活力的方法。检测脂肪酶的活性对于预测、控制原料乳和乳制品的质量具有重要意义。

摘要： [Objective] The bacterial strains producing cold-adapted protease from the Bulunkou-lake group wetlands,East Pamirs were isolated and identified,which would provided a useful basis for further study of cold-adapted protease.[Method] The bacterial strains by the screening media containing skim milk were isolated.The phenotypic characteristics,the optimum growth temperature,salt resistance,growth characteristic and enzyme properties of the strains were studied,and their taxonomic identity and genetic variability by the 16S rRNA gene sequences were determined.[Result]6 high-yield protease-producing strains growing at 15 °C were obtained and belonged to psychrotrophs.The 6 strains had low salt-resistance but could be fermented under relative low temperature,which could reach the peak production of enzyme in the stable phase.Primary identification showed that 4 strains belonged to the genus Pseudomonas,the other two belonged to the genus Bacillus and Arthrobacter.[Conclusion] Although many closely related populations were isolated,they had different physiological characteristics,which would expand the existing resource database of cold-adapted strains producing protease and provide a basis for the further study of structure characteristics of cold-active protease and application in the field of biological engineering.%[目的]从新疆东帕米尔高原布伦口湖群湿地分离产蛋白酶耐低温细菌,对其进行初步分类鉴定,为后续低温酶制剂的研究应用奠定理论基础.[方法]利用脱脂乳选择培养基筛选产低温蛋白酶菌株,并对其表型特征、生长特性及产酶性状等进行研究,结合16S rRNA基因序列确定布伦口湖群湿地产低温蛋白酶功能菌株的遗传多样性及分类地位.[结果]共筛选出6株产蛋白酶菌株,其在15°C条件下均能生长繁殖,属耐冷菌,但耐盐性一般,能在低温条件下发酵产酶,生长稳定期达到产酶高峰.16SrRNA基因序列初步确定4株为假单胞菌(Pseudomonas sp.),另外2株分别为芽孢杆菌(Bacillus sp.)和节杆菌(Arthrobacter sp.).[结论]本研究筛选到的同属近缘种群较多,但生理特征各异,这进一步拓展了低温酶菌种资源库,为深入探究低温蛋白酶结构特性及在生物工程领域的应用潜力奠定坚实基础.

摘要： 耐冷菌及其分泌的耐热酶是原料乳中常见污染物,会导致乳制品腐败.通过16S rRNA基因测序分析了分离自上海地区原料乳的耐冷菌群,以及通过平板法研究不同耐冷菌的蛋白酶和脂肪酶活力.结果表明:所有的分离株属于9个菌纲,含33个菌属,其中数量占主要的菌属是假单胞菌(Pseudomonas)(55％)、不动杆菌(Acinetobacter)(10％)和黄杆菌(Flavobacterium)(5％),其余30个菌属占所有菌株数的30％.耐冷菌产酶能力平板法实验显示,大部分的耐冷菌都有产蛋白酶或脂肪酶的能力,不同菌属之间产酶特点存在差异.假单胞菌和黄杆菌主要表现为产蛋白酶活性,克雷伯氏菌(Klebsiella)主要表现为产脂肪酶活性,而大多数的不动杆菌没有产蛋白酶或脂肪酶活性.%Psychrotrophic bacteria and their heat-resistant enzymes are common contaminants in raw milk,leading to dairy product spoilage.The biodiversity of psychrotrophic bacteria isolated from raw milk in Shanghai was investigated by 16S rRNA sequencing and the individual isolates were evaluated for protease and lipase activities by plate culture.All isolates were classified into 33 genera in 9 classes,with Pseudomonas (55％),Acinetobacter (10％) and Flavobacterium (5％) being predominant,and the remaining 30 genera accounting for 30％ of the total number of isolates.Most isolates had the ability to produce protease or lipase,and different genera had different enzymatic profiles.Pseudomonas and Flavobacterium exhibited considerable protease activity,whereas Klebsiella showed strong lipase activity.On the other hand,most Acinetobacter isolates could produced neither protease nor lipase.

摘要： Pseudomonas frequently occur in refrigerated raw milk as the predominant bacteria,which secret heat-resistant enzymes that can cause milk spoilage.A total of 102 strains of Pseudomonas isolated from raw milk were identified by rpoB gene sequencing at the species level,and azocasein was used to quantify the proteolytic activity and heat resistance of their extracellular peptidases under two sets of cultivation conditions (30 °C for 2 days or 6 °C for 8 days).Pseudomonas fluorescens was the most dominant Pseudomonas species in the samples,followed by Pseudomonasfragi and Pseudomonas sp1.A significant variation in the proteolytic activity of different Pseudomonas species was observed.Most isolates of Pseudomonasfluorescens (23/41) showed proteolytic activity after cultivation at two temperatures (30 or 6 °C),while most isolates of Pseudomonas sp1 did not.In addition,all isolates of Pseudomonasfragi (13/13) showed proteolytic activity only after cultivation at 6 °C.Temperature stability of their extracellular peptidases was determined.After cultivation at 6 °C,P.fluorescens M02 had the highest peptidase activity (11.78 ΔA/(h·mL)).The peptidase showed maximum activity at pH 6.5 and 40 °C.The addition of 103 CFU/mL P.fluorescens M02 resulted in destabilization of skim milk during 5 days of culture at 6 °C.Monitoring the predominant psychrotrophic bacteria at species level will be useful in designing effective monitoring methods and tools to improve the quality and safety of raw milk or dairy products.%在冷藏的原料乳中,假单胞菌经常出现并成为主导菌群,其分泌的耐热酶会使原料乳变质.对从原料乳中分离的102株假单胞菌经rpoB基因测序进行菌种分析,用偶氮酪蛋白测试所有假单胞菌在2种培养条件(30°C培养2d或6°C培养8d)下胞外肽酶的蛋白水解活性和耐热性.结果表明:荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)是假单胞菌中最主要的菌种,其次是莓实假单胞菌(Pseudomonas fragi)和假单胞菌sp1 (Pseudomonas sp1).不同假单胞菌菌种之间的产肽酶能力存在明显差异.大多数荧光假单胞菌(23/41)在不同温度(30°C和6°C)条件下培养后能产肽酶,而大多数的假单胞菌sp1不产肽酶,所有分离的莓实假单胞菌(13/13)只在6°C条件下产肽酶,大多数的假单胞菌所产肽酶都有热稳定性.在6°C培养条件下,荧光假单胞菌菌株M02有最高肽酶活力(11.78ΔA/ (h·mL)),其胞外肽酶最佳催化pH值为6.5,最佳催化温度为40°C.当M02的接种浓度为103 CFU/mL时,6°C培养5d就能使脱脂乳溶液产生沉淀.对耐冷假单胞菌的种类和产肽酶能力进行分析和考察有助于提高原料乳或乳制品的质量和安全性.

摘要： 采用唯一碳源法从土壤中分离了一株具有聚己内酯(PCL)降解能力的真菌DSWJ1201,对其进行了形态学和分子生物学鉴定,结果表明该真菌为短密青霉(Penicillium brevicompactum);结合单因素实验和正交试验对菌株产PCL解聚酶的条件进行了优化,结果显示出当培养温度为20°C、培养基初始pH值为7.0、装液量为250mL三角瓶装液100mL、PCL质量的浓度为0.6g/L、诱导物(吐温80)体积分数为2.5mL/L、发酵时间为5d时,菌株所产粗酶的酶活力最高.同时还发现菌株DSWJ1201具有耐冷菌的特性,且能够降解表面活性剂吐温80,因此在常温和低温条件下的废弃物处理中具有潜在的应用价值.

摘要： 通过实验室小试，对活性污泥法与生物接触氧化法联用的内循环复合生物反应器处理低温污水的效能及微生物学进行了研究。试验结果表明，微生物种类和数量在低温时明显少于中温条件；分离高效耐冷菌，低温环境下耐冷菌对COD的去除率比中温菌高出63.67％；以聚氨酯泡沫为载体固定高活性耐冷菌，系统在冬夏对COD平均去除率可达到86.66％。两个处理单元的DO分别保持在2.0～4.0mg/L和4.0～8.0mg/L，COD负荷为1000mg/L以下，可以使系统出水在冬季达到一级B排放标准。

摘要： 本文从曾被硝基苯污染的某河流底泥中分离出能以硝基苯为唯一碳源的7株耐冷细菌,其中一株在温度从2.5°C到35°C范围内时都可以有效降解并矿化20mg/L的硝基苯,最适宜的生长温度为25°C左右;菌株在pH为6-9范围内都能快速降解硝基苯,偏碱性的条件下比酸性条件更适合细菌生长.低温条件下该菌株对硝基苯的快速降解特性为硝基苯污染环境的修复提供了可能.

摘要： 本文从曾被硝基苯污染的某河流底泥中分离出能以硝基苯为唯一碳源的7株耐冷细菌,其中一株在温度从2.5°C到35°C范围内时都可以有效降解并矿化20mg/L的硝基苯,最适宜的生长温度为25°C左右;菌株在pH为6-9范围内都能快速降解硝基苯,偏碱性的条件下比酸性条件更适合细菌生长.低温条件下该菌株对硝基苯的快速降解特性为硝基苯污染环境的修复提供了可能.

摘要： 本文从曾被硝基苯污染的某河流底泥中分离出能以硝基苯为唯一碳源的7株耐冷细菌,其中一株在温度从2.5°C到35°C范围内时都可以有效降解并矿化20mg/L的硝基苯,最适宜的生长温度为25°C左右;菌株在pH为6-9范围内都能快速降解硝基苯,偏碱性的条件下比酸性条件更适合细菌生长.低温条件下该菌株对硝基苯的快速降解特性为硝基苯污染环境的修复提供了可能.

摘要： 本文从曾被硝基苯污染的某河流底泥中分离出能以硝基苯为唯一碳源的7株耐冷细菌,其中一株在温度从2.5°C到35°C范围内时都可以有效降解并矿化20mg/L的硝基苯,最适宜的生长温度为25°C左右;菌株在pH为6-9范围内都能快速降解硝基苯,偏碱性的条件下比酸性条件更适合细菌生长.低温条件下该菌株对硝基苯的快速降解特性为硝基苯污染环境的修复提供了可能.

摘要： 本文从曾被硝基苯污染的某河流底泥中分离出能以硝基苯为唯一碳源的7株耐冷细菌,其中一株在温度从2.5°C到35°C范围内时都可以有效降解并矿化20mg/L的硝基苯,最适宜的生长温度为25°C左右;菌株在pH为6-9范围内都能快速降解硝基苯,偏碱性的条件下比酸性条件更适合细菌生长.低温条件下该菌株对硝基苯的快速降解特性为硝基苯污染环境的修复提供了可能.

摘要： 本文从曾被硝基苯污染的某河流底泥中分离出能以硝基苯为唯一碳源的7株耐冷细菌,其中一株在温度从2.5°C到35°C范围内时都可以有效降解并矿化20mg/L的硝基苯,最适宜的生长温度为25°C左右;菌株在pH为6-9范围内都能快速降解硝基苯,偏碱性的条件下比酸性条件更适合细菌生长.低温条件下该菌株对硝基苯的快速降解特性为硝基苯污染环境的修复提供了可能.

摘要： 本发明属于农业微生物领域，具体涉及一种提高豌豆耐冷耐湿性的微生物菌剂及其应用，其活性成分为植物乳杆菌YuN21和根瘤菌，所述植物乳杆菌YuN21的分类名为Lactobacillus plantarum，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，该微生物菌剂应用在提高豌豆耐冷耐湿性方面，既能够提高秋播豌豆的耐冷性，有利于冻害后的复苏，同时又能够降低春播豌豆遭受湿冷天气时的烂种、出苗不整齐、弱苗多和成苗率低等问题的发生率，应用的操作方法简单、实用，对环境友好，适合于农业领域大规模使用及推广。

摘要： 本发明公开了一株抑制病原菌的耐盐耐低温弯曲乳杆菌及其在食品冷链反复冻融保藏中的应用。本发明提供了乳酸菌(Lactobacillus curvatus)QZ2195，其保藏号为CCTCC NO：M 2021322，该菌株具有如下功能：1)低温条件下抑制病原菌；2)反复冻融条件下抑制病原菌；3)延长冷冻产品在冷藏、微冻或冷冻条件下的保藏期；4)延长冷冻产品反复冻融条件下的保藏期。本发明寻找出一种乳酸菌，该菌株耐低温且耐高盐，其可以用于抑制多种耐低温或耐高盐的病原菌，且可用于冷藏保藏、微冻保藏或冷冻保藏制品反复冻融下的应用。

摘要： 本发明公开了一种耐冷假单胞菌胞外蛋白酶失活方法，包括以下步骤：将含有耐冷假单胞菌胞外蛋白酶的溶液在50‑70°C热浴加热2‑4min，再经800W微波加热60‑120s。上述的胞外蛋白酶失活方法，与低温失活方法相比，大大缩短了处理时间，降低能耗，灭活效果也优于传统方法，并且，不会破坏胞外蛋白酶所处的溶液环境中的其他营养物质。

摘要： 本发明公开了一株耐冷草假单胞菌及其在污水处理中的应用，涉及环境微生物及污水处理技术领域。耐冷草假单胞菌（

摘要： 本发明属于农业微生物领域，具体涉及一种提高豌豆耐冷耐湿性的微生物菌剂及其应用，其活性成分为植物乳杆菌YuN21和根瘤菌，所述植物乳杆菌YuN21的分类名为Lactobacillus plantarum，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，该微生物菌剂应用在提高豌豆耐冷耐湿性方面，既能够提高秋播豌豆的耐冷性，有利于冻害后的复苏，同时又能够降低春播豌豆遭受湿冷天气时的烂种、出苗不整齐、弱苗多和成苗率低等问题的发生率，应用的操作方法简单、实用，对环境友好，适合于农业领域大规模使用及推广。

摘要： 本发明属于分子检测技术领域。一种用于检测植物内生耐冷假单胞菌的绝对荧光定量PCR特异引物，包括引物16s1和引物16s9；所述引物16s1包括正向引物16s1‑F和反向引物16s1‑R，所述正向引物16s1‑F的序列如SEQID：1所示，所述反向引物16s1‑R的序列如SEQID：2所示；所述引物16s9包括正向引物16s9‑F和反向引物16s9‑R，所述正向引物16s9‑F的序列如SEQID：3所示，所述反向引物16s9‑R的序列如SEQID：4所示。本发明作为绝对实时荧光定量PCR测定核桃等植物内生拮抗菌在病原物不同侵染时期基因表达量的特异引物，用于区别植物内生耐冷假单胞菌与其他内生细菌。

摘要： 本发明公开了一种具有耐冷特性的新型木聚糖酶及其编码基因和应用。本发明提供了属于糖苷水解酶第8家族的新型木聚糖酶基因，其核苷酸序列为：SEQ ID NO.1，所编码的木聚糖酶蛋白质氨基酸序列为：SEQ ID NO.2。利用该基因构建的工程菌株获得的重组木聚糖酶以玉米芯木聚糖为底物，通过DNS还原糖活性测定的方法测定其比活力为5546.9U/mg。该木聚糖酶能够在低温条件表现出较高的底物亲和力和催化效率，低温下比活力为1521.1U/mg。利用基因生产的木聚糖酶可用于木聚糖转化和木聚寡糖的制备以及食品烘焙中提高面包的品质和延长面包的货架期。

摘要： 本发明公开了一株抑制病原菌的耐盐耐低温弯曲乳杆菌及其在食品冷链反复冻融保藏中的应用。本发明提供了乳酸菌(Lactobacillus curvatus)QZ2195，其保藏号为CCTCC NO：M 2021322，该菌株具有如下功能：1)低温条件下抑制病原菌；2)反复冻融条件下抑制病原菌；3)延长冷冻产品在冷藏、微冻或冷冻条件下的保藏期；4)延长冷冻产品反复冻融条件下的保藏期。本发明寻找出一种乳酸菌，该菌株耐低温且耐高盐，其可以用于抑制多种耐低温或耐高盐的病原菌，且可用于冷藏保藏、微冻保藏或冷冻保藏制品反复冻融下的应用。

摘要： 本发明涉及一种强化寒冷湿地脱氮性能的固定化耐冷菌剂的制备方法，包括以下步骤：1)采用SBR法进行耐冷氨氧化菌群的富集培养，2)制备菌悬液，3)耐冷氨氧化菌群的固定：将巴西狐单螺菌与普通小球藻复配得到小球藻复配溶液，然后将海藻酸钠溶液和小球藻复配溶液混合均匀作为包埋载体，加入污泥生物炭形成凝胶剂，然后在凝胶剂中加入菌悬液，混合均匀并静置3～4h后缓慢滴加到交联剂中，交联18～24h后用去离子水洗涤3遍；将本发明制备的固定化菌藻小球应用于冬季寒冷湿地，显著提升了寒冷条件下湿地系统的脱氮除磷能力，显著改善人工湿地冬季运行效果差、污染物处理效果差等问题。

摘要： 本发明公开了一种用于寒冷地区使用耐冷菌群的热管型MBR污水处理系统，包括相互连接重力热管加热保温装置、生物菌群耐冷驯化器和MBR膜生物反应器；本申请公开的适用于寒冷地区的新型热管型MBR生活污水处理系统，能够使活性污泥法在我国北方地区和西部高寒地区使用，改善污水处理效果并且约能源，环保经济。