维替泊芬

摘要： 目的制备细胞外囊泡(EVs)共载体系,以协同递送肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)/维替泊芬(VPF)组合用于诱导口腔鳞癌细胞凋亡及增殖抑制。方法通过超速离心、过滤法分离纯化TRAIL/VPF共载EVs(MSCT-EVs/VPF)。通过BCA法检测CD63、CD9和TRAIL表达,确认EVs来源。用高效液相法检测VPF载药量,绘制体外释放曲线。使用MTT法检测细胞毒性和半数抑制浓度(IC50)。通过流式细胞仪检测细胞凋亡,最后Western blot被用于检测MSCT-EVs/VPF对SCC25细胞中凋亡相关蛋白和YAP表达的影响。结果MSCT-EVs/VPF颗粒圆整,分散性良好,直径约为100 nm;纳米体系载药量为(15.43±0.44)%,在10 h内释放57.8%的VPF,45 h释放约82.5%;MSCT-EVs和VPF均可抑制SCC25肿瘤细胞生长,呈剂量依赖性,MSCT-EVs和VPF的质量比(wt%)在10∶1~5∶1的比例范围内显示出最佳抑制效果;在100∶5~100∶15(wt%)比例下,MSCT-EVs/VPF的半抑制浓度(IC50)低于游离MSCT-EVs+游离VPF组(P<0.05),显示出更高效的抑制作用。MSCT-EVs/VPF对鳞癌细胞的高效抑制作用部分源自对Caspase-3、Bax、Bcl-2、mTOR、p-mTOR和YAP的调控。结论通过EVs递送固定比例的TRAIL/VPF,对口腔鳞癌细胞展现出高效抑制作用,为多药耐药肿瘤的治疗提供了新思路。

摘要： 目的研究卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)是否通过Hippo信号通路促进大鼠卵泡颗粒细胞芳香化酶(CYP19A1)的表达和雌激素合成。方法体外分离培养大鼠原代培养卵泡颗粒细胞(GCs)24 h后,HE染色和免疫荧光法观察GCs生长情况和纯度。随后将GCs分为4组:对照组(无干预)、FSH组(0.3 IU·mL^(-1))、VP组(10μg·mL^(-1) Verteporfin,YAP的特异性抑制剂)、VP+FSH组(0.3 IU·mL^(-1) FSH+10μg·mL^(-1) Verteporfin),继续干预24 h。通过Western blot观察Hippo信号通路关键因子LATS1、P-LATS1、YAP、P-YAP和CYP19A1在GCs中的表达情况。采用ELISA测定GCs的雌二醇(estradiol,E2)浓度。结果Western blot结果显示,FSH可以促进GCs中LATS1、YAP和CYP19A1的表达,VP可抑制LATS1、YAP和CYP19A1的表达;在VP+FSH组中,LATS1、YAP和CYP19A1的表达较FSH组低,较VP组高(P均<0.05)。ELISA结果显示,FSH组E2浓度升高,VP组E2浓度降低,VP+FSH组的E2浓度较FSH组降低,较VP组升高(P均<0.05)。结论FSH通过抑制大鼠卵泡GCs的Hippo信号通路,促进CYP19A1的表达与雌激素的合成。

摘要： 目的 探讨维替泊芬(Vp)在实验性哮喘气道重塑中的作用及其机制。方法 (1)动物实验:将12只雌性BALB/c小鼠分为对照组、实验性哮喘组与Vp干预组,每组4只。实验性哮喘组小鼠使用屋尘螨提取液(HDM)滴鼻建立哮喘模型,Vp干预组在HDM激发前腹腔注射Vp进行干预,对照组给予等量生理盐水。收集小鼠肺组织及支气管肺泡灌洗液(BALF),采用HE染色、Masson染色、过碘酸希夫(PAS)染色观察肺组织病理变化,瑞氏-吉姆萨染色计数BALF中的炎性细胞;采用免疫组化检测肺组织中Yes相关蛋白(YAP)、磷酸化Yes相关蛋白(p-YAP)的表达情况,RT-PCR、Western bloing检测肺组织中YAP、p-YAP、骨桥蛋白(OPN)、平滑肌肌球蛋白重链(SMMHC)的表达情况。(2)细胞实验:将人气道平滑肌细胞(HASMC)分为对照组(加入等量生理盐水)、HDM组(加入50μg/ml HDM作用24 h)与HDM+Vp组(加入0.05 mg/L Vp刺激2 h后,加入50μg/ml HDM作用24 h),采用CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting检测YAP、OPN、SMMHC蛋白表达情况。结果 (1)动物实验:实验性哮喘组肺组织炎症较对照组加重,支气管基底膜、气道平滑肌及支气管管壁明显增厚[(1.13±0.38)μm vs.(0.79±0.36)μm,(6.49±2.36)μm vs.(4.56±1.52)μm,(33.85±5.95)μmvs.(22.08±3.30)μm,P<0.05],气道周围胶原纤维沉积面积、PAS染色阳性面积明显增加(5.85%±2.35%vs. 0.36%±0.12%,28.81%±5.89%vs. 13.57%±2.08%,P<0.01),肺组织中YAP、OPN mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),p-YAP/YAP比值、SMMHC mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。与实验性哮喘组比较,Vp干预组小鼠肺组织炎症减轻,支气管基底膜、气道平滑肌及支气管管壁明显变薄[(0.93±0.27)μm、(4.99±1.75)μm、(26.59±2.76)μm,P<0.05],气道周围胶原纤维沉积面积、PAS染色阳性面积明显减少(2.14%±0.89%、17.92%±1.89%,P<0.05),肺组织YAP、OPN mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),p-YAP/YAP比值、SMMHC mRNA和蛋白表达水平明显增高(P<0.05)。(2)细胞实验:与对照组比较,HDM组细胞增殖能力增强(0.2874±0.0055 vs. 0.2626±0.0051,P<0.01)、凋亡率降低(5.14%±0.82%vs.6.75%±0.21%,P<0.05),YAP、OPN蛋白表达升高(3.14±0.48 vs. 1.51±0.61,5.87±2.42vs.0.94±0.23,P<0.01),SMMHC蛋白表达降低(0.80±0.19vs.2.96±0.96,P<0.01)。与HDM组比较,HDM+Vp组细胞增殖能力减弱(0.2748±0.0043,P<0.05),凋亡率升高(6.29%±0.49%,P<0.05),YAP、OPN蛋白表达降低(2.02±0.53、2.93±1.09,P<0.05),SMMHC蛋白表达升高(2.11±0.85,P<0.05)。结论 Vp可降低YAP的表达,减少YAP核移位,逆转HASMC表型转化,这可能是其抑制实验性哮喘气道重塑的机制。

摘要： 目的 研究YAP抑制剂维替泊芬对慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞增殖凋亡的影响.方法 采用噻唑蓝(MTT)比色法计算YAP抑制剂维替泊芬对K562细胞增殖的影响;采用AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测维替泊芬作用后细胞凋亡变化;Western印迹检测维替泊芬作用后K562细胞Bax、Bcl-2基因的蛋白表达变化.结果 维替泊芬作用K562细胞后,细胞增殖受到抑制,且呈剂量和时间依赖性,24 h半数抑制浓度(IC50)为11.80μmol/L;维替泊芬作用K562细胞后,细胞凋亡率随药物浓度增加而增加,4、8、16μmol/L细胞凋亡率分别为(8.86±0.99)％、(16.54±0.45)％、(27.08±4.41)％,与对照组(3.49±0.61)％相比,8、16μmol/L差异有统计学意义(P<0.05);Western印迹检测维替泊芬作用K562细胞后,细胞凋亡相关基因Bax表达上调,Bcl-2表达下调.结论 YAP抑制剂维替泊芬通过抑制Hippo信号通路活性,抑制CML细胞K562细胞增殖,促进凋亡,因此,靶向Hippo信号通路有望为CML治疗提供新思路.

摘要： 目的 探究维替泊芬是否具有诱导多种子宫内膜癌细胞发生内质网应激及自噬的作用.方法 维替泊芬处理子宫内膜癌细胞系KLE、EFE184、NOU-1和SKUT-2,并分别使用二甲基亚砜(DMSO)、蛋白酶体抑制剂MG132、硼替佐米和光敏剂原卟啉处理细胞作为对照组.维替泊芬作用浓度为0.1～10μmol/L,作用时间为0～48 h.光学显微镜和活细胞成像系统观察细胞形态,磺酰罗丹明B法测定细胞增殖能力.Western blot法检测内质网应激过程中相关蛋白质水平变化,免疫荧光法检测自噬小体.结果 MG132和硼替佐米抑制子宫内膜癌细胞增殖、诱导细胞肿胀与死亡,维替泊芬诱导细胞出现肿胀并死亡,而原卟啉无此作用.维替泊芬促进细胞中肌醇蛋白-1a减少、钙敏感伴侣蛋白增加、C/EBP同源蛋白(CHOP)增加、蛋白质二硫键异构酶降低.同时CHOP蛋白质水平受维替泊芬浓度和作用时间的影响,呈现双向性:当降低维替泊芬浓度同时增加作用时间时,CHOP蛋白质水平增加;当作用浓度在0～5μmol/L时,CHOP蛋白质水平随维替泊芬浓度增加而增加,但当作用浓度提高至10μmol/L时,CHOP蛋白质水平降低.维替泊芬促进细胞膜关键蛋白Rab11水平下降,细胞核出现形态皱缩,溶酶体增加.结论 维替泊芬可能通过诱导子宫内膜癌细胞发生内质网应激,引起细胞自噬,最终导致细胞死亡.

摘要： 目的 探讨TAZ蛋白在血管紧张素Ⅱ高血压引起的血管伤中的作用.方法 18只雄性C57BL/6小鼠随机分成三组:正常对照组、AngⅡ高血压组、AngⅡ+Verteporfin治疗组.尾动脉法测定小鼠的尾动脉收缩压;HE染色检测心脏血管结构损伤;Western blot测量炎症因子和TAZ相关蛋白表达.结果 AngⅡ小鼠血压增加,主动脉壁增厚,心肌面积增加,心重体重比值增加.Verteporfin治疗降低AngⅡ小鼠收缩压,并减轻心脏血管结构损伤.AngⅡ高血压鼠增加了主动脉TAZ蛋白的表达,提示在AngⅡ高血压鼠存在主动脉TAZ蛋白激活,Verteporfin治疗逆转TAZ表达.此外AngⅡ促进炎性细胞分子TNF-α和MCP-1的表达.Verteporfin治疗可阻止AngⅡ诱导的上述分子的变化.结论 在AngⅡ诱导的高血压鼠存在TAZ蛋白激活,TAZ蛋白可能通过介导血管炎症引起血管损伤和高血压.

摘要： 目的 观察半剂量维替泊芬光动力疗法(PDT)和577 nm阈值下微脉冲激光(SML)治疗慢性中心性浆液性脉络膜视网膜病变(chronic central serous chorioretinophathy,cCSC)的临床疗效.方法 回顾性分析2016年8月至2020年12月本院收治的cCSC患者61例(64眼)作为研究对象,根据治疗方法不同分为观察组(n=31,32眼)与对照组(n=30,32眼).观察组采用半剂量维替泊芬PDT治疗,对照组采用阈值下577 nm微脉冲激光治疗.比较两组治疗前后最佳矫正视力(BCVA)、黄斑中心凹视网膜厚度(central macular thickness,CMT)、中心凹处脉络膜厚度(subfoveal choroidal thickness,SFCT).结果 两组均治疗1次且治愈,无复发,无术后并发症.治疗前,两组BCVA(LogMAR)比较差异无统计学意义;治疗后1个月,两组BCVA(LogMAR)水平均高于治疗前,且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后1个月,两组CMT水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后1个月,两组SFCT水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后1、3个月,观察组治愈率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 半剂量维替泊芬PDT和微脉冲激光治疗cCSC均安全、有效,前者短期内起效快,能快速提高患眼视力,但随访时间延长,两者疗效相当.

摘要： 目的 研究Yes相关蛋白(YAP)靶向抑制剂维替泊芬(VP)联合放疗对脑胶质瘤细胞增殖与迁移行为的影响及机制.方法 对脑胶质瘤细胞分别用放疗、VP、VP联合放疗3种不同的方法进行处理,应用集落形成实验、CCK-8实验检测细胞增殖情况;应用免疫印迹实验探究VP联合放疗增强放疗效果的机制;应用划痕实验检测细胞迁移情况.结果 放疗或VP处理均能抑制细胞增殖,放疗联合VP处理的细胞增殖速度受到的抑制效果更为显著;VP联合放疗之后,细胞周期蛋白激酶4(CDK4)和磷酸化Rb(p-Rb)的蛋白表达水平显著低于对照组,细胞周期阻滞,增殖减慢;放疗或VP处理均抑制细胞迁移,放疗联合VP处理后,细胞的迁移能力下降更为显著.结论 VP能够明显提高脑胶质瘤的放疗效果;VP联合放疗通过阻断Yes相关蛋白-转录增强结合域(YAP-TEAD)的结合,阻滞细胞周期,从而抑制细胞的增殖.

摘要： 目的 探讨维替泊芬(VP)对异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌纤维化是否有抑制作用及对心功能的影响.方法 6周龄C57BL/6小鼠(购自中山大学实验动物中心)随机分为4组.对照组予以尾静脉注射1％二甲基亚砜(DMSO);ISO组予以皮下注射ISO(每天20 mg/kg);VP组予以尾静脉注射VP(每天2 mg/kg);ISO+ VP组分别予以皮下注射ISO(每天20 mg/kg)和尾静脉注射VP(每天2 mg/kg).连续给药7d后行超声心动图检查评估心脏形态及功能.取材后行心脏质量、心脏体重比测定,天狼猩红染色检测心肌纤维化变化情况.酶联免疫吸附测定(ELISA)血浆氨基末端脑钠素原(NT-pro BNP)浓度.组间比较采用单因素方差分析.结果 成功建立了ISO诱导小鼠心脏纤维化模型.ISO组小鼠的左心室收缩末内径[(2.20±0.63) mm比(1.44士0.45)mm,F =9.730,P＜0.05]及容积[(18.33±12.17)μl比(6.32±5.04)μl,F=8.890,P＜0.05]较ISO+VP组增大,差异有统计学意义,左心射血分数(EF)较ISO+VP组降低[(56.65±11.41)％比(82.35士10.30)％,F=15.670,P＜0.05],差异有统计学意义;ISO组小鼠的心脏质量[(0.11±0.01) mg比(0.10±0.01) mg,F=13.560,P＜0.05]及心脏体重指数[(0.57±0.03)％比(0.51±0.02)％,F=23.950,P＜0.05]均大于ISO+VP组,差异有统计学意义;ISO组小鼠血浆NT-pro BNP浓度较VP组升高[(0.57士0.16)μg/L比(0.23±0.07)μg/L,F=9.340,P＜0.05],差异有统计学意义;天狼猩红染色结果显示ISO组小鼠左室心肌纤维化较ISO+ VP组严重[(17.48±5.85)％比(9.27±2.62)％,F=30.190,P＜0.05],差异有统计学意义.结论 VP可抑制ISO诱导的心脏纤维化并改善左心收缩功能.

摘要： 本研究设计了一种主动稳定包载维替泊芬(verteporfin,BPD)的新生血管及肿瘤靶向阳离子脂质体(cationic liposome with drug active-loaded in lumen,CLL),并对其体内外理化性质进行探究.采用醋酸钙梯度法对光敏剂BPD进行主动包载,并通过后插法加入阳离子脂质(2,3-二油酰基-丙基)-三甲胺[(2,3-dioleoy-loxy-propyl)-trimethylammonium,DOTAP]成功制备CLL.体外表征结果显示,CLL粒径约100 nm,电位在28 mV左右,体外稳定性较被动载药制剂显著增强.此外,包载于脂质体内腔的BPD通过分子间荧光共振能量转移(homo-FRET)可在递送过程中关闭光敏效应,使光毒性降低.细胞摄取及毒性实验结果证明,正电荷靶向可显著提高血管内皮细胞及肿瘤细胞中药物摄取量,CLL光动力药效显著增强.体内实验结果显示,相比于被动载药制剂,CLL血浆清除速率降低且在肿瘤中特异性蓄积增强.离体组织定量结果显示,CLL在正常组织中分布少,有利于提高其体内安全性.动物实验均按照北京大学医学部实验动物伦理委员会及国际动物实验的指导原则进行.上述实验结果说明,本研究成功构建了新型阳离子靶向脂质体,克服了被动载药制剂在肿瘤治疗中的局限性,使其光动力疗效显著提高.

摘要： 目的：旨在探讨和评估光敏剂维替泊芬(vertporfin)介导的光动力疗法(PDT)对角膜新生血管(CoNV)治疗的效果及羟基自由基清除剂甘露醇对此疗法的交互作用.rn 方法：新西兰白兔随机分为四组:Ⅰ组为空白对照组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组采用角膜基质层缝线的方法诱导CoNV形成.Ⅱ、Ⅲ组行vertporfin-PDT治疗CoNV,verteporfin以1.5mg/kg静注,其中Ⅱ组PDT治疗前给予静脉注入20％的甘露醇4.0g/kg2组.Ⅳ组不治疗,为阳性对照.治疗后裂隙灯显微镜观察CoNV变化并记录面积,取各处理组及对照组的角膜、虹膜睫状体组织,行组织病理学检查,免疫组化(S-ABC法)检测血管内皮生长因子(VEGF)在角膜组织中的表达,统计学分析.rn 结果：治疗后的3天、1周和2周，Ⅱ,Ⅲ组CoNV面积均明显小于Ⅳ组(P＜0.01)，而Ⅱ,Ⅲ组之间CoNV面积无明显差异(P＞0.05)。组织病理学检查显示，Ⅱ,Ⅲ组CoNV管壁破坏，形成血栓。VEGF的表达Ⅱ,Ⅲ组明显高于I组(P＜0.01)，明显低于N组(P＜0.01)，而Ⅱ,Ⅲ组之间VEGF的表达无明显差异(P＞O.05)。rn 结论：vertporfin-PDT对兔模型眼CoNV有明显的抑制作用，不损伤邻近的正常血管及组织。甘露醇作为轻基自由基清除剂，并不能降低vertporfin-PDT对CoNV的治疗效果，甘露醇与vertporfin之间可能无明显的药物交互作用。

摘要： 本发明涉及包含锡泊芬的组合物。本申请公开了一种包含高纯度锡泊芬的大规模(批量)组合物以及合成这样的组合物的方法。

摘要： 本发明公开了一种多替泊芬的应用。本发明公开了一种多替泊芬在制备光动力疗法诊断或治疗膀胱癌的药物中的应用。TUR‑BT手术后联合多替泊芬光动力疗法治疗高危性非肌层浸润性膀胱癌，一方面可以在手术切除可见病灶后，同时给予动力治疗，杀伤可能存在的潜伏病灶或手术过程中散播的肿瘤细胞，减少术后复发的可能性；另一方面，光动力治疗可以完全替代，或至少明显降低BCG膀胱灌注的次数；最后，每次光动力治疗通常安排在TUR‑BT术后随访时随膀胱镜检查同时进行，不额外增加医师和患者的负担。

摘要： 治疗高胆红素血症或降低总血清胆红素水平的方法包括对婴儿开始光疗，同时基本上同时对婴儿施用治疗量的锡泊芬。各种实施方案涉及治疗高胆红素血症和降低胆红素水平。

摘要： 一些实施方案涉及治疗高胆红素血症的方法，所述方法包括给予婴儿治疗量的金属卟啉。当所测婴儿血清总胆红素水平位于或低于由开始光疗的AAP列线图所建议的水平附近、当所测婴儿血清总胆红素水平位于针对在婴儿中开始光疗所建议的水平附近或当所测婴儿血清总胆红素水平位于针对开始光疗所建议的水平附近时，可进行给药。可以给药而不考虑婴儿的血清总胆红素水平。在一些实施方案中，给予金属卟啉不引起QT延长。

摘要： 本发明涉及维替泊芬在制备抗癌性疼痛的药物中的应用。本发明提供了维替泊芬的药学新应用，本发明首次发现了维替泊芬具有抗癌性疼痛的功效，能够应用于制备抗癌性疼痛的药物。维替泊芬是通过抑制脊髓背角YAP和TAZ的表达、聚集和入核来实现上述功能的。维替泊芬是一种很具有潜力的抗癌性疼痛的靶向药物，且在治疗过程中具有针对性，疗效显著，副作用小，耐受性低，为研究癌性疼痛的治疗策略提供了理论依据，为制备新的治疗癌性疼痛的药物提供了一个嵌入点。

摘要： 本发明适用于生物医药技术领域，提供了一种透明质酸纳米颗粒/维替泊芬复合物的制备方法，包括以下步骤：步骤1：透明质酸纳米载体的制备；步骤2：透明质酸纳米颗粒/维替泊芬复合物的制备，通过物理包埋的方式实现透明质酸纳米颗粒药物装载。本发明提供的透明质酸纳米颗粒/维替泊芬复合物可改善当前用于治疗葡萄膜黑色素瘤的光敏剂药物生物利用度和靶向性差等问题，可使已应用于临床的光敏药物维替泊芬在葡萄膜黑色素瘤动物模型中发挥更好的抗肿瘤效应，同时实现更低的毒性和更优的靶向性，具备临床转化潜力，有望为葡萄膜黑色素瘤患者的治疗带来福音，也为开发出更多新型有效的抗肿瘤药物提供思路和参考。

摘要： 本发明属于医药技术领域，涉及维替泊芬新的药用用途，具体涉及维替泊芬在制备抗新型冠状病毒SARS‑CoV‑2药物中的用途。本发明经实验证实，维替泊芬通过对体外细胞培养Vero‑E6(非洲绿猴肾细胞)进行干预，能有效抑制新型冠状病毒的感染，所述的维替泊芬可进一步制备治疗新型冠状病毒引起的新型冠状病毒病，为治疗和控制新型冠状病毒病提供新的药物。

摘要： 本发明公开了一种用于疤痕修复的载维替泊芬的微针及其制备方法和应用，将维替泊芬混入水凝胶前体溶液后填入微针模板的空隙，溶液固化后移除模板得到载维替泊芬的微针。搭载的维替泊芬可从微针中缓慢释放；微针的针尖穿透性强，可增强维替泊芬在疤痕内的渗透性；可根据疤痕治疗的应用环境，调整针尖的形貌；可根据疤痕的严重度调整维替泊芬的搭载量。

摘要： 本发明公开了维替泊芬用于制备肥胖症药物的应用，维替泊芬通过降低脂肪组织含量进而缓解肥胖症；通过本发明研究发现，维替泊芬具有减肥功效，直接作用于肥胖的脂肪细胞，能迅速通过诱导肥胖脂肪细胞凋亡快速减少脂肪细胞数量，而对脂肪组织中其他细胞无副作用，从而安全有效地抑制并降低脂肪组织含量，为临床治疗病理性肥胖症提供实验基础。

摘要： 本发明属于肿瘤治疗技术领域，具体涉及维替泊芬在制备抗卵巢癌的药物中的用途及抗卵巢癌的药物。本发明要解决的技术问题是为卵巢癌的治疗提供一种新的有效途径。本发明解决上述技术问题的技术方案是提供了维替泊芬在制备抗卵巢癌的药物中的用途。试验证明维替泊芬具有明显的抗卵巢癌效果，并且由于维替泊芬目前是一种眼科临床用药，其安全性已经得到充分的验证，因此为卵巢癌临床治疗提供了一种新的有效手段。