细菌分离

摘要： 目的:2019年8月,湘南学院附属医院检验中心微生物室从一例外伤患者伤口脓汁中分离出一株施氏假单胞菌.方法:采集患者伤口分泌物,进行细菌的分离培养,并采用梅里埃VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统进行细菌鉴定及药敏监测,VITEK MS全自动快速微生物质谱检测系统、ABI3730XL测序仪进行细菌复核鉴定,鉴定结果均为施氏假单胞菌.结论:当机体防御功能减弱,机体免疫力下降时,应重视由该菌引起的临床感染.临床用药应在药敏试验结果指导下进行,临床医生不可单凭经验用药.

摘要： 目的:回顾性调查甘孜藏区某三甲医院分离细菌分布现状并分析其对常用抗菌药物的耐药率。方法:选取甘孜藏区某三甲医院2017年至2020年临床分离菌株,分析标本来源、细菌检出情况、药敏结果。结果:分离非重复菌株2946株,主要来自ICU、胃肠外科、肝胆外科、创伤外科、泌尿外科;分离的病原菌中革兰阳性菌、革兰阴性菌分别占31.40%、68.60%,主要为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物高度敏感,多数菌属耐药率均<10%,金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌对青霉素G耐药率最高,其次为红霉素,未检出对耐万古霉素、利奈唑胺金黄色葡萄球菌;检出超广谱β-内酰胺酶菌(ESBLs)1068株(36.25%)、耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)159株(5.40%)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)248株(8.42%)、耐万古霉素肠球菌(VRE)2株(0.07%);MRS及MRA均对青霉素G、苯唑西林完全耐药,对万古霉素、利奈唑胺、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶敏感。结论:甘孜藏区某三甲医院2017年至2020年分离的细菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌等为主,ESBLs、MRS、MRSA、VRE均有一定检出率,且均有一定耐药性,应合理应用抗菌药物。

摘要： 猪细菌性疾病是由各种细菌感染引起的疾病,在世界养猪场中普遍存在,给养猪业带来巨大的经济损失,严重威胁着养猪业的发展。本研究目的是通过分析2016~2018年收集的来自于中国15个不同省份的14610份样本来探索多种细菌病原体的流行情况。对样本采集的地理分布、组织来源分析发现湖南省的细菌分离率最高,肺脏组织样本中细菌病原体率高于其他组织。病原分离情况分析表明,单一病原体感染的比例约为66.53%,主要细菌病原体包括猪链球菌(Ss)、大肠杆菌(E.coli)、副猪嗜血杆菌(Hps)、葡萄球菌(S.hyicus)、多杀性巴氏杆菌(Pm)、支气管败血杆菌(Bb)、胸膜肺炎放线杆菌(App)、猪红斑丹毒丝菌(Er)和沙门氏菌(Salm),分离率分别为21.32%、13.45%、13.42%、6.23%、3.47%、2.85%、2.07%、2.02%和1.70%。多种病原体混合感染的比例为33.47%,且存在46种混合感染组合,其中两种病原混合感染比例最高,如Ss与E.coli,Ss与Hps、Hps与E.coli。其中Ss、Hps和E.coli与其他病原体的分离率分别为26.45%、9.76%,20.36%。表明这三种病原体相互感染的现象最为常见。对9大病原在不同年份及不同月份的流行率分析发现,在2016~2018年App、Bb、Hps、Pm、Ss、Er和Salm的流行趋势呈上升趋势,但E.coli和S.hycius的流行率在2016~2018年呈下降趋势。Ss和E.coli具有季节性流行特征,在夏季(5~8月)流行率较高,而Hps在冬季(12月~第二年2月)流行率较高。综上所述,该研究从年份和季节层面提供了9大病原体流行率和多种病原体混合感染的情况,有助于监测、预防和控制中国养猪场的细菌性疾病。

摘要： 2021年3月中旬,辽宁省庄河市某养殖场循环水系统养殖的大竹荚鱼出现离群缓游、体表出血等症状。病鱼经显微镜检测、组织内细菌分离及优势细菌鉴定,结果表明引起大竹荚鱼死亡的主要病原为格氏乳球菌(Lactococcus garvieae)。笔者通过药敏试验筛选抑菌药物的临床指导,使该病得到有效控制。

摘要： 海洋沉积物微生物资源丰富,放线菌是其中的优势类群之一,但是海洋放线菌纯培养难度较大。本文利用响应面法对采自印度洋的深海沉积物样品进行湿热处理条件优化,实验中选取了5个因素设计实验,生长的放线菌经纯化培养后,针对16S rRNA基因进行测序分析,以每种优化条件下培养出的放线菌种类数为响应值,优化结果最终为:湿热处理温度55°C,湿热处理时间1.2727 min,风干时间1.6970 d,抑制剂浓度0.9697倍,海盐添加量为2.1212%。最后,重新选择4种培养基,利用优化后的条件进行该样品纯培养分离,分离出大量放线菌及部分潜在分类单元。实验证明,多种分离方法的组合和优化可提高环境样品中纯培养微生物多样性及出菌率,有助于获得更多稀有微生物资源。本实验可为纯培养分离中不同培养基成分的组合设计提供方法参考。

摘要： 为了探索纳米孔测序技术在动物传染病病原快速诊断中的应用价值,采集1只发生腹泻实验兔的肝脏和脾脏进行核酸提取、建库和纳米孔测序分析,同时对该腹泻的实验兔分别进行细菌分离鉴定和腹泻相关病毒的血清学检测。结果显示:纳米孔测序方法运行3 h后,获得1.9 GB的数据量,检出756521条序列,平均序列长度为2549.9个碱基。根据对测序数据的生物信息学分析表明,引起实验兔腹泻的病原可能为大肠杆菌。对同批送检的6只实验兔采用常规细菌分离鉴定方法在实验兔的心脏血样品、肝脏、肺脏和回盲部内容物中只分离到了大肠杆菌。对腹泻相关病毒的血清学检测结果显示6只送检的兔均为兔轮状病毒阴性。本研究采用纳米孔测序技术对发生腹泻的实验兔进行诊断,其结果与常规实验室检测方法获得的结果相符合,表明纳米孔技术在动物传染病病原快速检测中具有潜在的应用价值。

摘要： 山西省某规模化育肥场50日龄仔猪连续以败血症死亡,疑似链球菌感染。为了解猪链球菌血清2型的感染情况,筛选出敏感药物,将疑似链球菌感染的病猪(n=10)抗凝全血进行细菌分离、革兰氏染色、毒力基因PCR鉴定及药敏试验,为该病的临床诊疗提供新思路和用药参考。结果显示,6例全血分离出疑似革兰氏阳性链球菌的菌株,5例疑似菌经PCR扩增后初步诊断为猪链球菌血清2型。5例猪链球菌血清2型分离株对恩诺沙星、大观霉素、头孢曲松钠中度敏感,对庆大霉素、丁胺卡那霉素、替米考星、链霉素、阿莫西林均耐药。

摘要： 锦鲤(Cyprinus carpio)在动物分类系统上属于鲤科(Cyprinidae),在我国属于知名度较高的观赏鱼种类,有“水中活宝石”“会游泳的艺术品”等美誉,具有较高的经济价值(许品章,2004)。近年来,随着人们对观赏鱼需求量逐渐增大,锦鲤养殖集约化程度越来越高,随之而来的锦鲤病害给锦鲤产业的发展造成了阻碍(宋东蓥等,2015)。为探明造成2021年山东省济宁市某锦鲤养殖场锦鲤暴发性死亡的致病菌,本研究对采集的锦鲤发病样本进行了细菌分离、质谱分析和分子鉴定、回归感染、药物敏感性等,为锦鲤养殖中病害防控提供了科学依据。

摘要： 猪链球菌病是由致病性链球菌引起的一类传染性疾病的总称,各阶段猪对此菌均易感,可引发脑膜炎、关节炎、败血症、淋巴结脓肿等多种症状。近年来,随着养猪业规模化、集约化的发展,链球菌病的危害性日益引起人们的重视。本病另一个特点是易与其他类传染病混合或继发感染,并且发病急、传播快。2022年4月下旬,许昌市一规模养猪场保育猪群突然发病,减食明显,体温高达41°C,头颈部、腹下等处出现弥散性出血斑块(图1),病猪扎堆毛炸,精神萎靡,有的粪便干结如球,个别病猪出现跛行跗关节肿大,也有的病猪出现转圈、紧张尖叫、头后仰四肢乱划等神经症状,死亡率达20%~30%。送检河南省农业科学院畜牧兽医研究所病猪5头,经过诊断后及时为其提供了切实可行的防控措施,迅速控制住疫情,为养殖场减少了经济损失,现将诊治情况介绍如下。

摘要： 犬脓皮病是兽医临床上发病率较高的一种细菌性疾病,由于抗生素的滥用,耐药菌的感染也越来越常见。该病若治疗得当,病情会很快痊愈;若治疗失当,病情则容易反复,久治不愈,极少情况甚至可致病原菌侵人血液循环,引起全身性感染,危及生命。笔者曾收治了一只脓皮病犬,经过细菌分离和药敏试验,选择敏感药物治疗并得到痊愈,具体情况报告如下。

摘要： 牛的子宫内膜炎是危害牛业生产发展的主要产科疾病,大部分由牛产后细菌感染引起子宫内膜的粘液性或脓性局部炎症反应,如果不及时治疗,炎症继续扩散,引起卵巢炎、输卵管炎、腹膜炎等,会导致母牛发情或妊娠推迟,繁殖力降低,产犊间隔时间延长,产奶量减少,严重的影响牛的健康和繁殖性能.本研究通过对河南省内某牛场的子宫内膜炎患牛和健康牛的子宫内容物进行细菌分离鉴定、药敏试验、致病性试验和临床治疗分析,为本地区子宫内膜炎的治疗提供参考的依据.

摘要： 本试验从河北省昌黎某养猪场采集有明显"歪鼻"和呼吸道症状的30～60日龄仔猪肺脏和鼻腔分泌物,进行病原菌的分离鉴定,经过细菌分离培养、形态学观察、生化试验和动物感染试验证明分离菌为支气管败血波氏杆菌;通过药敏试验发现,该分离菌株对罗红霉素、庆大霉素、氟苯尼考、左氟沙星等高度敏感,对四环素、链霉素、青霉素、阿莫西林等耐药,并因此提出了防治该病的有效措施.

摘要： 肺炎克雷伯氏菌(K.pneumoniae)属肠杆菌科克雷伯氏菌属(Klebsiella),是一种人兽共患病病原,又是一种可引起多种动物患病的常见的条件性致病菌.该菌广泛分布于动物的呼吸道、消化道以及水、土壤和谷物中,可使人畜发生肺炎、子宫炎、泌尿道感染、化脓性腹膜炎及腹泻,甚至发生败血症.肺炎克雷伯氏菌引起人发病的报道比较多,而引起家畜发病的报道较少,现国内外已经从患病的鸡、兔、羊、猪、牛、水貂、梅花鹿、蟒蛇等多重动物体内分离到这种菌.该菌是牛呼吸道感染的重要病原体,常引起牛重症肺炎,还可引起牛泌尿道感染、胆道感染、败血症和化脓性脑膜炎等严重疾病.2014年6月宁夏某奶牛场犊牛出现大量死亡现象，发病牛年龄均为10日龄以内，尤其以4日龄左右犊牛为主。从临床症状、病理变化等方面，很难判定该病的病原。笔者对送检的病死犊牛样品分别进行了细菌形态学观察、细菌分离与细菌检测仪鉴定、药敏分析和人工感染等试验。确定该牛场犊牛腹泻病因为肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种。肺炎克雷伯氏菌是典型的条件致病菌，生产上需要注意卫生管理，常于动物抵抗力下降时引起暴发性流行。该养殖场奶牛肺炎克雷伯氏菌病的暴发正是由于天气炎热、多雨、饲养环境潮湿，致使环境中的肺炎克雷伯氏菌大量繁殖而造成的。当饲养管理不当，环境变化及机体抵抗力下降时，可侵入机体而引起发病。一般可通过改善饲养管理条件，加强通风换气，降低饲养密度等来增强牛群的整体抗病力。

摘要： 为了鉴定引起雏鸡关节炎及死亡的病原菌,无菌采集病死雏鸡的肝脏、关节渗出液等病料组织,通过细菌常规的分离鉴定和16SrRNA PCR等方法进行分离鉴定,分离菌株被鉴定为金黄色葡萄球菌.致病性试验结果表明,分离菌株对雏鸡具有很强的致病性.药敏试验结果显示,分离菌株对头孢曲松、头孢拉啶、环丙沙星等5种药物敏感,对氨苄西林、阿莫西林、丁胺卡娜等5种药物中敏,对青霉素、新霉素、庆大霉素等4种药物耐药.

摘要： 为了鉴定引起雏鸡关节炎及死亡的病原菌,无菌采集病死雏鸡的肝脏、关节渗出液等病料组织,通过细菌常规的分离鉴定和16SrRNA PCR等方法进行分离鉴定,分离菌株被鉴定为金黄色葡萄球菌.致病性试验结果表明,分离菌株对雏鸡具有很强的致病性.药敏试验结果显示,分离菌株对头孢曲松、头孢拉啶、环丙沙星等5种药物敏感,对氨苄西林、阿莫西林、丁胺卡娜等5种药物中敏,对青霉素、新霉素、庆大霉素等4种药物耐药.

摘要： 为了鉴定引起雏鸡关节炎及死亡的病原菌,无菌采集病死雏鸡的肝脏、关节渗出液等病料组织,通过细菌常规的分离鉴定和16SrRNA PCR等方法进行分离鉴定,分离菌株被鉴定为金黄色葡萄球菌.致病性试验结果表明,分离菌株对雏鸡具有很强的致病性.药敏试验结果显示,分离菌株对头孢曲松、头孢拉啶、环丙沙星等5种药物敏感,对氨苄西林、阿莫西林、丁胺卡娜等5种药物中敏,对青霉素、新霉素、庆大霉素等4种药物耐药.

摘要： 为了鉴定引起雏鸡关节炎及死亡的病原菌,无菌采集病死雏鸡的肝脏、关节渗出液等病料组织,通过细菌常规的分离鉴定和16SrRNA PCR等方法进行分离鉴定,分离菌株被鉴定为金黄色葡萄球菌.致病性试验结果表明,分离菌株对雏鸡具有很强的致病性.药敏试验结果显示,分离菌株对头孢曲松、头孢拉啶、环丙沙星等5种药物敏感,对氨苄西林、阿莫西林、丁胺卡娜等5种药物中敏,对青霉素、新霉素、庆大霉素等4种药物耐药.

摘要： 为了鉴定引起雏鸡关节炎及死亡的病原菌,无菌采集病死雏鸡的肝脏、关节渗出液等病料组织,通过细菌常规的分离鉴定和16SrRNA PCR等方法进行分离鉴定,分离菌株被鉴定为金黄色葡萄球菌.致病性试验结果表明,分离菌株对雏鸡具有很强的致病性.药敏试验结果显示,分离菌株对头孢曲松、头孢拉啶、环丙沙星等5种药物敏感,对氨苄西林、阿莫西林、丁胺卡娜等5种药物中敏,对青霉素、新霉素、庆大霉素等4种药物耐药.

摘要： 为了确定引起雏鸡死亡的病原菌,从发病致死的雏鸡体内分离1株病菌,采用细菌常规的分离鉴定、16SrRNA基因测序、致病性试验、K-B药敏纸片法等分别对分离菌株进行鉴定、致病性及耐药性检测.结果显示,分离株鉴定为致病性肺炎克雷伯氏菌;其16SrRNA基因序列与GenBank登录的12株肺炎克雷伯氏菌参考株同源性在98％～99％之间,与肺炎克雷伯氏菌杆菌参考株KP262416.1聚于一支,与KJ803938.1聚于一大支,且与2株参考株存在密切的遗传进化关系;该菌株对头孢曲松、头孢克肟、头恩诺沙星等4种药物敏感,对环丙沙星、新霉素、丁胺卡那等6种药物中敏,对氨苄西林、阿莫西林、青霉素等6种药物耐药.

摘要： 为了确定引起雏鸡死亡的病原菌,从发病致死的雏鸡体内分离1株病菌,采用细菌常规的分离鉴定、16SrRNA基因测序、致病性试验、K-B药敏纸片法等分别对分离菌株进行鉴定、致病性及耐药性检测.结果显示,分离株鉴定为致病性肺炎克雷伯氏菌;其16SrRNA基因序列与GenBank登录的12株肺炎克雷伯氏菌参考株同源性在98％～99％之间,与肺炎克雷伯氏菌杆菌参考株KP262416.1聚于一支,与KJ803938.1聚于一大支,且与2株参考株存在密切的遗传进化关系;该菌株对头孢曲松、头孢克肟、头恩诺沙星等4种药物敏感,对环丙沙星、新霉素、丁胺卡那等6种药物中敏,对氨苄西林、阿莫西林、青霉素等6种药物耐药.

摘要： 本发明属于生物工程下游后处理技术领域。包括：(1)用阴离子表面活性剂在碱性条件下处理发酵所得的细菌菌体，离心提取其内含的聚羟基脂肪酸酯颗粒；(2)再用蛋白酶处理前一步所得的聚羟基脂肪酸酯产物，(3)收集并干燥所得聚羟基脂肪酸酯产品。本发明利用较为廉价的原料，反应条件温和，生产设备投资少，适合工业化大规模生产的要求，使聚羟基脂肪酸酯的生产成本大大降低。

摘要： 本发明公开了分离试剂、其制备方法、应用、分离细菌的方法和凝胶提取管，涉及生物检测技术领域。分离试剂包括第一组分和第二组分，以重量份计，所述第一组分包括10‑30份凝胶；所述第二组分包括2×10‑3‑2.0份溶血剂、(0.01‑0.5)×10‑3份离心梯度调节剂以及缓冲剂，且所述缓冲剂的用量使得所述第二组分的pH为7.2‑7.6。该分离试剂能够良好对增菌血培养后的培养液进行处理，使得细菌和血培养后的培养物中的培养基、血细胞以及活性炭等物质进行分离，快速分离得到纯净的高浓度的细菌，在增菌血培养后可直接进行细菌检测，提升了检测速度，同时，减少了培养基、血细胞以及活性炭等物质对细菌检测的影响。

摘要： 本公开提供了通过在低铜条件下培养甲烷氧化细菌来产生生物质的方法。还提供了产生的生物质和从生物质制备的蛋白分离物。

摘要： 本发明提供从阳性血中分离细菌的试剂，包括用于溶解来自血液培养物的血液样品中的血细胞的A剂，还包括用作清洗剂的B剂和用于破碎病原菌细胞壁、促进细胞中的蛋白释放的C剂；所述A剂为皂素溶液和SDS中至少一种或其它能裂解血细胞的表面活性剂。本发明还提供从阳性血中分离细菌的方法及细菌鉴定方法，先用A剂裂解血细胞，然后B剂洗去细胞碎片和杂质，最后C剂破碎病原菌细胞壁，让细菌的蛋白质释放出来并取含有细菌蛋白质的上清液坐位后续鉴定的样品；将用于鉴定的样品点样到靶板的空位上，室温干燥后覆盖基质于样品上，室温干燥，然后上机检测。可实现快速鉴定细菌，半小时内即可结果，且检测结果可靠性高，干扰小。

摘要： 饮用水活性炭处理出水中炭附细菌与游离细菌的分离方法，采用了“微滤膜过滤+低速离心”分离方法，用以分离饮用水活性炭处理出水中的炭附细菌与游离细菌，为炭附细菌控制的深入研究提供必要的手段。优点：①该方法实现了活性炭出水中炭附细菌与游离细菌的有效分离，利用物理分离过程，在不改变炭附细菌任何物理、化学性状的前提下，完成计量分析，保证了检测的稳定性和准确性；②该方法从微滤膜过滤到低速离心分离，均可在普通实验室进行，实验耗材容易获取，操作成本低廉，经济可行；③该分离方法可以应用于任何设有活性炭工艺的水厂，操作简便快捷，易于实现。

摘要： 本发明属于生物工程下游后处理技术领域。包括:(1)用阴离子表面活性剂在碱性条件下处理发酵所得的细菌菌体,离心提取其内含的聚羟基脂肪酸酯颗粒;(2)再用蛋白酶处理前一步所得的聚羟基脂肪酸酯产物,(3)收集并干燥所得聚羟基脂肪酸酯产品。本发明利用较为廉价的原料,反应条件温和,生产设备投资少,适合工业化大规模生产的要求,使聚羟基脂肪酸酯的生产成本大大降低。

摘要： 本发明涉及微藻共栖细菌分离领域，具体而言，涉及微藻共栖细菌分离培养基、分离方法以及影响微藻生长的关键细菌高通量筛选方法。一方面，本发明提供一种微藻共栖细菌分离培养基，基于常用海洋细菌分离培养基—Zobell 2216E海洋肉汤细菌培养基进行改良，提供一种可实现增加微藻藻际共栖细菌可培养细菌种类的培养基，为筛选影响微藻生长关键细菌提供丰富的菌种资源。另一方面，本发明提出一种高通量快速筛选显著促藻或抑藻生长细菌的方法，能在短时间内发现对微藻生长有关键影响的细菌。

摘要： 本发明涉及微藻共栖细菌分离领域，具体而言，涉及微藻共栖细菌分离培养基、分离方法以及影响微藻生长的关键细菌高通量筛选方法。一方面，本发明提供一种微藻共栖细菌分离培养基，基于常用海洋细菌分离培养基—Zobell 2216E海洋肉汤细菌培养基进行改良，提供一种可实现增加微藻藻际共栖细菌可培养细菌种类的培养基，为筛选影响微藻生长关键细菌提供丰富的菌种资源。另一方面，本发明提出一种高通量快速筛选显著促藻或抑藻生长细菌的方法，能在短时间内发现对微藻生长有关键影响的细菌。

摘要： 应用于智能细菌分离装置的细菌培养箱，包括盒体,盒体为上部开口的长方体形壳体，盒体的的开口端安装盒盖，盒盖的一侧与盒体铰接，盒盖能够将盒体的上部开口封闭，盒体的中部设置观察窗，本实用新型通过第一托板和第二托板相结合，第一托板和第二托板能够将培养槽和温控加热系统分隔开，当温控加热系统进行加热时，温控加热系统产生的热气流上升，第二托板能够通过上部开设的数个第二透气孔对热气流进行第一步导流，从而使热空气能够更加均匀的散开，进入到第一托板和第二托板之间的空间，进行一步混匀，然后，在第一托板和第二托板之间空间中的气流能够通过第一托板上的数个第一透气孔进行第二步导流，从而使热空气能够更加均匀地作用到培养槽上，从而使数个培养槽温度能够更加均匀，方便对细菌的培养。

摘要： 本实用新型公开了基于膜分离的光合细菌分离纯化装置，包括罐体，所述罐体上设置有进液管和排液管，所述罐体内设置有环形固定板，所述环形固定板上设置有滤筒，所述滤筒与罐体之间形成环形压滤腔体，所述环形压滤腔体与进液管连通，所述环形固定板的内侧设置有第一过滤板，所述滤筒和第一过滤板均采用生物过滤膜制成。本实用新型所述分离纯化装置不仅能够实现对光合细菌的快速分离提纯，且具有过滤效果好的优点。