细菌L型

摘要： 目的 对抗结核药物诱导结核分支杆菌形成L型及其特性进行观察.方法 将结构分支杆菌接种于含有乙胺丁醇、异烟肼、利福平的非高渗透压培养基内,通过显微镜逐日对结核分支杆菌L型的形成情况进行观察.在形成L型后过滤培养物,最终生成结核分支杆菌L型纯培养物同时观察结构分支杆菌特异性基因、抗菌药物敏感性、培养以及形态等方面的情况.结果 在常规药物试验浓度下,结核分支杆菌在乙胺丁醇、异烟肼以及利福平作用的过程中均能够形成L型.这些抗结核药物与结构分支杆菌之间的作用不再明显,但对于诺氟沙星、氧氟沙星、红霉素、链霉素等药物依然存在比较大的敏感性.非高渗透压培养基内的结核分支杆菌呈现不规则或圆球形态,成链状排列或单个、成双存在.不运动、不黏附瓶壁沉于培养基底部,革兰染色阳性或阴性,抗酸染色阴性,结构分支杆菌保留了原有的特异性PCR引物基因序列.结论 乙胺丁醇、异烟肼与利福平虽然对于结核分支杆菌有着比较良好的杀菌作用,但部分情况下也能够被诱导并形成L型,使以上几种药物失去对于结核疾病的治疗作用.在传代培养环境下,非高渗培养基中的结构分支杆菌L型能够使PCR引物基因序列得到保留,能够通过特异性PCR的方式对分支杆菌进行鉴定.依照各种药物与结核分支杆菌L型之间的敏感性特点,需要在应用抗结核药物的过程中与能够作用于结核分支杆菌L型的抗菌药物联合使用.

摘要： 细胞壁缺损或完全丢失的细菌称为细菌L型(bacteria L form)L型可自发产生,亦可在抗菌治疗过程中产生,是细菌抵抗不利环境的一种方式。主要由一些能在细菌细胞壁合成过程中干扰某一环节的抗生素,如青霉素、头孢菌素等β—内酰胺类抗生素,其中Β—内酰胺环与细胞肽聚糖上肽链末端D—Ala—D—Ala结构相似,二者竞争性地与细胞膜上的青霉素结合蛋白(PBP)相结合。使PBP失去酶活性(转肽酶、羧肽酶与二肽酶),从而阻断肽聚糖上多肽链之间的相互交联,使细菌不能正常合成细胞壁而形成细菌L型。

摘要： Objective:To observe the effects of Staphylococcus aureus L-form on the growth of human cervical cancer cells( HeLa) in vitro. Methods:The HeLa cells were infected with Staphylococcus aureus L-form by routine method. The adhesion and invasion of Staphylococcus aureus L-form were detected using light and electron microscopy,and the proliferation of HeLa cells was detected using improved MTT assay. Results:The results of light and electron microscopy L-form showed that the Staphylococcus aureus L-form could adhere and invade into HeLa cells. The result of improved MTT method showed that Staphylococcus aureus L-form could promote the proliferation of HeLa cells. Conclusions:Staphylococcus aureus L-form can infect and promote the growth of HeLa cells,which reveals that Staphylococcus aureus L-form may be one of inducting factor of cervical cancer.%目的:研究金黄色葡萄球菌(金葡菌)L型对体外培养的单层人宫颈癌细胞(HeLa)生长的影响作用.方法:用常规方法诱导金葡菌为L型后感染HeLa细胞,采用光学显微镜、透射电子显微镜检测金葡菌L型黏附及侵入细胞情况,并采用改良的MTT比色法检测细胞增殖能力.结果:光镜、电镜检查显示金葡菌L型能够黏附并且进入HeLa细胞;改良的MTT法检测表明金葡菌L型能够促进HeLa细胞增殖(P<0.01).结论:金葡菌L型能够感染并促进HeLa细胞增殖生长,揭示金葡菌L型可能与宫颈癌的发生有关.

摘要： 目的:研究感染人体的细菌L型的分离培养,寻找一种培养细菌L型的最佳办法,以便临床鉴定与研究细菌L型。方法:提取我院近期感染细菌L型病人不同器官的分泌液,分别在液体培养基与血琼脂固体培养基上进行培养,观察比较每个培养基上形成的菌落。结果 :在血琼脂固体培养基上最终形成了细菌L型与细菌G型的菌落,在液体培养基上形成了细菌型、L型、G型菌落,血琼脂培养基上有明显的细菌L型菌落分布特征。结论 :经过对细菌L型的分离培养研究,发现血琼脂固体培养基培养对于培养细菌L型有较好的效果,在临床上可以用于鉴定与研究细菌L型。

摘要： 为了解鼠伤寒沙门菌L型在猪胆囊内的携带情况,将鼠伤寒沙门菌接种于猪胆汁内进行体外培养,采用非高渗分离培养法分离胆汁培养物内的细菌L型,用二重PCR和核苷酸序列测定检测细菌L型分离物的invA和STM4495基因,建立猪胆囊内鼠伤寒沙门菌L型的检测方法,并对488份猪胆囊标本进行细菌L型的检测.结果表明:在1h至60 d的猪胆汁诱导培养物内能够检出细菌L型,其与鼠伤寒沙门菌invA和STM4495基因的核苷酸序列的符合率均为99％;猪胆囊标本中细菌L型的阳性率为51.43％,二重PCR鉴定沙门菌invA基因的阳性率为2.66％,其中鼠伤寒沙门菌STM4495基因的阳性率为1.02％.

摘要： Objective:To explore laboratory inductive effects of the commonly used clinical antibiotics on the common pathogenic L-form bacteria and to provide a scientific basis for clinical diagnosis and treatment. Methods:With the paper dispersion method and tube dilution method, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, E. coli and Shigella were induced by antibiotics in the laboratory. Results: Cefazolin, cefoperazone, ampicillin, piperacillin and levofloxacin could induce Pseudominas aeruginosa, E. coli and Shigella to some degree to form corresponding L-form bacteria. L-form Staphylococcus aureus under the same condition wasn't induced. Conclusion: Some antibiotics under certain conditions could make some bacteria lose cell walls and become L-form bacteria, and then change their biological characteristics, which the clinical diagnosis and treatment should attach importance to.%目的：探讨临床常用抗菌药物对常见致病菌L型的实验室诱导作用，为临床诊治提供科学依据。方法：利用纸片弥散法和试管稀释法，分别对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、痢疾志贺菌进行L型菌的抗菌药物实验室诱导。结果：头孢唑林、头孢哌酮、氨苄西林、哌拉西林、左氧氟沙星均可不同程度诱导铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、痢疾志贺菌形成相应的L型细菌，相同条件下金黄色葡萄球菌L型未诱导出。结论：部分抗菌药物在一定条件下能使某些细菌失去细胞壁转为L型菌，继而发生生物学性状的改变，临床诊断治疗时应给予重视。

摘要： 目的：探讨胃癌组织中幽门螺杆菌L型（Hp-L）感染与巨噬细胞移动抑制因子（MIF）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和血管内皮生长因子（VEGF）表达之间的相互关系及临床意义。方法应用免疫组织化学染色法及革兰染色检测80例胃癌组织及50例癌旁正常组织中Hp-L感染情况，同时检测上述组织中MIF、MMP9、VEGF蛋白的表达；运用RT-PCR及Western blotting法检测30例新鲜胃癌组织及相应切缘组织中MIFmRNA及MIF、MMP9、VEGF蛋白的表达。结果80例胃癌组织中经免疫组化和革兰染色同时阳性病例有57例，与对照组相比具有显著性差异（71.25%vs 14%，P<0.05）；胃癌组织中Hp-L阳性组中MIF、MMP9、VEGF蛋白表达阳性率高于Hp-L阴性组（P<0.05），且Hp-L感染与MIF、MMP9和VEGF表达均呈正相关关系（r=0.598， r=0.292，r=0.341，P<0.05）。30例胃癌新鲜组织中MIF-mRNA表达（1.583±0.177）高于对照组（1.407±0.078），两者差异具有显著性（t=3.729，P=0.001）；Western blotting法检测MIF、MMP9、VEGF蛋白在胃癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织；胃癌组织中MIF、MMP9均与肿瘤浸润深度及淋巴结转移有关，VEGF蛋白表达与肿瘤浸润深度有关（P<0.05）。结论 Hp-L型感染是促进胃癌的侵袭与转移的重要因素之一，其机制与上调胃癌组织中MIF、MMP9、VEGF表达有关。%Objective To investigate the correlation between infection with L-form of Helicobacter pylori (Hp-L) and the expressions of macrophage migration inhibition factor (MIF), matrix metalloproteinase 9 (MMP9), and vascular endothelial growth factor (VEGF) in gastric cancer. Methods Hp-L was examined in 80 gastric carcinoma and 50 adjacent normal tissues by Gram staining and immunohistochemical staining, and the expressions of MIF, MMP9 and VEGF were detected by immunohistochemical staining;the expression of MIF mRNA was detected by RT-PCR and the expression of MIF, MMP9 and VEGF proteins were detected by Western blotting in 30 fresh gastric cancer tissues and the corresponding adjacent tissues. Results Of the 80 gastric carcinoma tissues, 57 (71.25%) showed Hp-L positivity detected by both Gram staining and immunohistochemical staining, as compared with a rate of only 14% in the adjacent normal tissues (P<0.05). The gastric carcinoma tissues showed higher expression levels of MIF, MMP9 and VEGF proteins than the corresponding adjacent normal mucosa;the positivity MIF, MMP-9 and VEGF proteins were significantly higher in Hp-L-positive gastric carcinoma than in Hp-L-negative cases (P<0.05). Positive correlations were found between Hp-L positivity and the expressions of MIF, MMP-9 and VEGF (r=0.598, 0.292, 0.341, respectively, P<0.05). The 30 fresh gastric cancer tissues showed also significantly higher MIF mRNA expression and MIF, MMP-9 and VEGF protein expressions than the adjacent tissues (t=3.729, P<0.01). The expressions of MIF and MMP-9 were also related to the clinicopathological factors including lymph node metastasis and depth of invasion (P<0.05). Conclusion Infection with L-form of Hp-L can be an important factor that contributes to the invasion and metastasis of gastric carcinoma, the mechanism of which involves up-regulated expressions of MIF, MMP-9 and VEGF.

摘要： 目的：观察异烟肼、利福平、乙胺丁醇抗结核药物诱导形成结核分支杆菌L型以及结核分支杆菌L型对抗菌药物敏感性。方法将结核分支杆菌接种于含有不同质量浓度利福平（0．05、0．1、0．2μg/mL）、异烟肼（0．01、0．04、0．08μg/mL）、乙胺丁醇（1、2．5、5μg/mL）的BD960液体培养基内，10 d后在显微镜下观察结核分支杆菌L型的形成情况。培养结核分支杆菌L型，在显微镜高倍镜下观察，并检测其对抗菌药物的敏感性。结果0．1、0．2μg/mL利福平，0．04、0．08μg/mL异烟肼，2．5、5μg/mL乙胺丁醇可诱导形成结核分支杆菌L型。在含有4μg/mL链霉素、0．2μg/mL异烟肼、40μg/mL利福平、2μg/mL乙胺丁醇、1μg/mL对氨基水杨酸的非高渗培养基内培养7 d后均可见结核分枝杆菌L型生长，而含有30μg/mL卡那霉素、40μg/mL卷曲霉素、3μg/mL氧氟沙星的培养基内未见其生长。结论中高浓度的利福平、异烟肼、乙胺丁醇能够诱导结核分支杆菌L型形成。结核分枝杆菌L型对卡那霉素、卷曲霉素、氧氟沙星敏感。

摘要： 目的 探讨卡介苗稳定L型菌对动物的致病作用.方法 将卡介苗稳定L型纯培养物注射至PPD试验阴性豚鼠的腹部皮下,观察动物的发病情况、PPD反应、组织病理学改变以及分离培养和鉴定卡介苗及其L型.结果 2×108个/mL剂量的卡介苗稳定L型感染动物21d后可见局部皮肤轻度红肿及腹股沟淋巴结肿大,第4周各感染动物的PPD试验仍为阴性.组织病理学检查可见 非特异性增生性炎症反应,未见结核结节和干酪样坏死.于感染31 d后组织切片抗酸染色可发现抗酸阳性的圆球体,阳性率为20％.分离培养未检出卡介苗及其L型.结论 卡介苗稳定L型可在动物局部组织中存活并且具有引起局部组织非特异性炎性病理损害的作用,但不能引起动物形成PPD阳性反应.

摘要： 细菌L型是细胞在外界环境因素影响下所形成的细胞壁的缺陷型由于L型菌细胞壁的完全或不完全缺陷引起生物学特征的明显改变,使常规培养失败.本文利用扫描电镜观察了病儿血液中的L型菌,为指导了临床合理用药提供了依据.

摘要： 细菌L型是细胞在外界环境因素影响下所形成的细胞壁的缺陷型由于L型菌细胞壁的完全或不完全缺陷引起生物学特征的明显改变,使常规培养失败.本文利用扫描电镜观察了病儿血液中的L型菌,为指导了临床合理用药提供了依据.

摘要： 细菌L型是细胞在外界环境因素影响下所形成的细胞壁的缺陷型由于L型菌细胞壁的完全或不完全缺陷引起生物学特征的明显改变,使常规培养失败.本文利用扫描电镜观察了病儿血液中的L型菌,为指导了临床合理用药提供了依据.

摘要： 本发明公开一种针对透明质酸酶分泌型细菌的细菌响应性钛基抗菌植入材料制备方法。该方法首先通过阳极氧化法在钛材表面构建二氧化钛纳米管，并将其用做构建抗菌植入材料的载药基底。其次，利用层层自组装技术(旋涂法)构建壳聚糖/透明质酸‑天蚕肽B多层膜，从而在载药纳米管基材表面构建出一种细菌(透明质酸酶分泌型细菌)响应性的抗菌生物涂层，以提高钛基移植体的抗菌性能。

摘要： 本发明公开了一种细菌I型、II型、III型整合子基因的PCR检测方法。由于本发明采用的引物来自细菌整合子基因中高度保守的整合酶区域，采用该引物对能准确、快速、方便的判别细菌是否含有整合子，并能区分是I型、II型、III型整合子，建立了一种多重PCR检测I型、II型、III型整合子的方法。通过实验证明该方法具有敏感性高、特异性好的特点，是一种快速准确检测I型、II型、III型整合子的方法。为筛选整合子类型及细菌耐药基因盒的分析，大规模的进行细菌耐药性的分子流行病学调查研究提供一种简便、快捷的方法。

摘要： 本发明公开了一种细菌鉴定和分型分析基因组数据库及鉴定和分型分析方法。通过删除错误的标签和低质量的基因组组装来创建一个高质量的细菌鉴定和分型分析基因组数据库。并依托该数据库，提供了基于基因组信息进行细菌鉴定和分型分析方法，开发了一套快速的细菌基因组鉴定鉴定平台（FIDBac）。FIDBac鉴定的准确率达到97%以上，显著高于其它同类鉴定系统或软件。这一单一、连贯和自动化的细菌基因组鉴定工作流程，对于在食品工业、制药工业、临床诊断和微生物资源开发等领域具有重要意义。

摘要： 本发明提供了一种刷型结构耐久型复合抗菌协同防细菌黏附功能的材料的制备方法，所述聚合物为乙烯基硅氧烷和聚苯乙烯微球、单体RA’、单体RB’和单体RC’的无规共聚物，所述喷涂材料由所述聚合物在银氨溶液和硼氢化钠的混合溶液中经还原反应将银离子键合在所述RB基团上；所述刷型结构耐久型复合抗菌协同防细菌黏附功能的材料由基材和所述喷涂材料制备而成，所述喷涂材料的端基硅氧烷水解接枝在所述基材的羟基上。本发明的喷涂材料具有无机纳米银快速释放杀菌与有机阳离子耐久性杀菌的复合型抗菌协同超疏水防细菌黏附功能，材料表面具有良好的抗菌效果的同时还能有效防止大肠杆菌、葡萄球菌等细菌的附着。

摘要： 本发明公开了一种荧光型细菌检测膜和制备方法及其细菌检测的方法，属于生物化学技术领域。该细菌检测膜包括基材层及设置在基材层上的检测层，基材层为由纳米纤维膜组成，检测层为由功能性阳离子聚合物和阴离子聚合物组成，功能性阳离子聚合物和阴离子聚合物通过层层自组装的方式均匀交替组装设置在纳米纤维膜表面。本发明的细菌检测膜可在5分钟内快速的实现对浓度为10～10

摘要： 本发明公开了一种比色型细菌检测膜和制备方法及其细菌检测的方法，属于生物化学技术领域。该细菌检测膜包括基材层及设置在基材层上的检测层，基材层由纳米纤维膜组成，检测层为阳离子聚合物和功能性生物酶组成，阳离子聚合物和功能性生物酶通过层层自组装的方式均匀交替组装设置在纳米纤维膜表面，功能性生物酶的上层和下层均为阳离子聚合物，阳离子聚合物为聚乙烯亚胺，功能性生物酶为β‑半乳糖苷酶。本发明的细菌检测膜可在5分钟内快速对细菌浓度范围进行界定，检测方法简单，在环境、食品和临床医学领域都具备较好的应用。

摘要： 本发明公开一种针对透明质酸酶分泌型细菌的细菌响应性钛基抗菌植入材料制备方法。该方法首先通过阳极氧化法在钛材表面构建二氧化钛纳米管，并将其用做构建抗菌植入材料的载药基底。其次，利用层层自组装技术(旋涂法)构建壳聚糖/透明质酸-天蚕肽B多层膜，从而在载药纳米管基材表面构建出一种细菌(透明质酸酶分泌型细菌)响应性的抗菌生物涂层，以提高钛基移植体的抗菌性能。

摘要： 本发明公开了一种细菌I型、II型、III型整合子基因的PCR检测方法。由于本发明采用的引物来自细菌整合子基因中高度保守的整合酶区域，采用该引物对能准确、快速、方便的判别细菌是否含有整合子，并能区分是I型、II型、III型整合子，建立了一种多重PCR检测I型、II型、III型整合子的方法。通过实验证明该方法具有敏感性高、特异性好的特点，是一种快速准确检测I型、II型、III型整合子的方法。为筛选整合子类型及细菌耐药基因盒的分析，大规模的进行细菌耐药性的分子流行病学调查研究提供一种简便、快捷的方法。

摘要： 本发明公开了一种细菌鉴定和分型分析基因组数据库及鉴定和分型分析方法。通过删除错误的标签和低质量的基因组组装来创建一个高质量的细菌鉴定和分型分析基因组数据库。并依托该数据库，提供了基于基因组信息进行细菌鉴定和分型分析方法，开发了一套快速的细菌基因组鉴定鉴定平台（FIDBac）。FIDBac鉴定的准确率达到97%以上，显著高于其它同类鉴定系统或软件。这一单一、连贯和自动化的细菌基因组鉴定工作流程，对于在食品工业、制药工业、临床诊断和微生物资源开发等领域具有重要意义。

摘要： 本发明提供了一种刷型结构耐久型复合抗菌协同防细菌黏附功能的材料的制备方法，所述聚合物为乙烯基硅氧烷和聚苯乙烯微球、单体RA’、单体RB’和单体RC’的无规共聚物，所述喷涂材料由所述聚合物在银氨溶液和硼氢化钠的混合溶液中经还原反应将银离子键合在所述RB基团上；所述刷型结构耐久型复合抗菌协同防细菌黏附功能的材料由基材和所述喷涂材料制备而成，所述喷涂材料的端基硅氧烷水解接枝在所述基材的羟基上。本发明的喷涂材料具有无机纳米银快速释放杀菌与有机阳离子耐久性杀菌的复合型抗菌协同超疏水防细菌黏附功能，材料表面具有良好的抗菌效果的同时还能有效防止大肠杆菌、葡萄球菌等细菌的附着。