细胞表型

摘要： 目的:寻找可靶向调控恶性肿瘤相关染色质解旋因子CHD1L的miRNAs分子,确证该调控模式对肝癌细胞恶性表型的影响。方法:通过生物信息学分析预测并筛选可靶向结合CHD1L的miRNAs,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及蛋白印迹分析(Western Blot)方法验证所筛选的miRNAs对肝癌细胞CHD1L表达的影响,明确可转录后调控CHD1L表达的关键miRNA分子;qRT-PCR检测肝癌组织中miRNAs和CHD1L的表达,并对其表达进行相关性分析;MTS、细胞划痕、Transwell迁移实验验证目标miRNA分子对肝癌细胞恶性表型的影响。结果:生物信息学分析结果显示miR-6883-3p可显著下调肝癌细胞CHD1L表达。双荧光素酶报告实验检测结果证明miR-6883-3p可直接靶向结合CHD1L 3'UTR端。临床肝癌组织样本qRT-PCR检测及统计学分析结果显示CHD1L高表达于肝癌组织,而miR-6883-3p则高表达于癌旁组织,二者表达呈负相关。miR-6883-3p模拟物(mimic)可明显抑制肝癌细胞增殖、促进细胞凋亡、抑制细胞迁移;而miR-6883-3p抑制剂(inhibitor)可显著促进肝癌细胞增殖、促进细胞迁移。与对照组(Mock)相比,miR-6883-3p mimic组肝癌细胞内ALB表达则随着CHD1L表达的下调而增加,HNF-4α及AFP随着CHD1L表达的下调而减少,反之亦然。结论:miR-6883-3p通过靶向调控CHD1L表达,抑制肝癌细胞的恶性表型。

摘要： 人角膜基质细胞(HCSCs)是一类呈静息状态的神经嵴间充质细胞,是负责分泌基质的高度特化的透明组织,在维持角膜透明度和人眼正常视觉功能等方面发挥重要作用。正常情况下,角膜基质细胞呈静息状态并表现为扁平、树突状,在角膜受到创伤刺激后被激活,激活状态的人角膜基质细胞(HCK)向修复表型转变,发生凋亡或向角膜成纤维细胞表型和肌成纤维细胞表型转化。HCSCs的表型转化与人角膜损伤修复过程所引起的瘢痕组织形成以及角膜透明度降低等方面具有密切关系。本文通过对HCSCs的3种表型、表型标志物、表型间转化以及体外转化的机制进行综述,发现通过干预HCK向纤维化表型转化过程及TGF-β/Smad等相关信号通路可以抑制角膜纤维化。因此,深入研究HCSCs表型转化的分子机制及干预角膜瘢痕形成的调控机制,有助于临床防治患者角膜纤维化和角膜术后混浊。

摘要： 目的:观察miR-216a-3p、miR-128-3p对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞表型表达的影响,并探究其潜在的作用机制。方法:运用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测癌组织、癌旁组织、人正常口腔角质形成细胞(hNOK)、OSCC癌细胞(SCC-9、SCC-25、HN4)中miR-216a-3p、miR-128-3p、G蛋白信号调节器17(RGS17)的表达;脂质体法将mimic-NC组(转染mimic)、mimic-miR-216a-3p组(转染miR-216a-3p mimic)、mimic-miR-128-3p组(转染miR-128-3p mimic)、si-NC组(转染si-NC)、si-RGS17组(转染si-RGS17)、mimic-miR-216a-3p+pcDNA组(共转染miR-216a-3p mimic和pcDNA)、mimic-miR-216a-3p+pcDNA-RGS17组(共转染miR-216a-3p mimic和pcDNA-RGS17)、mimic-miR-128-3p+pcDNA组(共转染miR-128-3p mimic和pcDNA)、mimic-miR-128-3p+pcDNA-RGS17组(共转染miR-128-3p mimic和pcDNA-RGS17)转染SCC-9细胞。5-溴-2-脱氧尿嘧啶(EdU)染色、克隆形成实验检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移侵袭能力;膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙啶(PI)染色检测细胞凋亡能力;双荧光素酶报告实验、RNA沉降实验验证靶向关系;蛋白免疫印迹(WB)实验检测RGS17蛋白。结果:与癌旁组织或hNOK细胞相比,OSCC组织(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期)、癌细胞(SCC-9、SCC-25、HN4)中miR-216a-3p、miR-128-3p表达显著降低,RGS17表达显著升高(P<0.05)。与mimic-NC组相比,mimic-miR-216a-3p、mimic-miR-128-3p组细胞EdU阳性率、克隆形成率、迁移侵袭细胞数均显著降低,细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。si-RGS17组细胞具有与mimic-miR-216a-3p、mimic-miR-128-3p细胞相似的变化。miR-216a-3p、miR-128-3p共同靶向负调控RGS17。过表达RGS17显著减弱miR-216a-3p、miR-128-3p对SCC-9细胞增殖、迁移侵袭抑制和凋亡促进作用。结论:miR-216a-3p、miR-128-3p抑制OSCC细胞增殖、迁移侵袭,促进凋亡,这与靶向RGS17有关。

摘要： 背景:近年来的一些研究显示,HepaRG细胞三维培养模型可较好地模仿体内微环境,与二维培养相比显示出更好的肝分化和功能情况.目的:选择HepaRG人源肝祖细胞制备三维胶原微球,评价胶原微球内细胞适应性培养和功能表达情况.方法:以胶原蛋白作为基质材料,选择HepaRG和HepG2细胞分别建立三维胶原细胞微球模型,形成稳定的细胞球体,以HepaRG普通微球、HepG2普通微球、HepaRG二维培养、HepG2细胞二维培养为对照.培养1,6,12 d后,死活染色法观察细胞存活情况;培养1,6,12,16 d后,检测各组上清尿素合成与CYP3A4分泌量;培养12 d后,采用qPCR检测CYP3A4、CYP1A2、UGT1A1、CPS1 mRNA相对表达,Western Blot检测肝细胞标志物白蛋白和CYP3A4蛋白表达水平.结果 与结论:①连续培养12 d的活死染色显示,三维胶原微球内的活细胞数量较多,死细胞较少,具有较高的细胞活率,并且HepaRG三维胶原微球内的细胞呈现出多个细胞簇紧密连接的交联结构;②HepaRG三维胶原微球培养1,6,12 d后的尿素含量高于HepaRG二维培养(P<0.05),HepG2三维胶原微球培养1,6,12,16 d后的尿素含量高于HepG2二维培养(P<0.05),HepaRG三维胶原微球培养1,6,12 d后的CYP3A4分泌量高于HepaRG二维培养(P<0.05),HepG2三维胶原微球培养6,12 d后的CYP3A4分泌量高于HepG2二维培养(P<0.05);③HepaRG三维胶原微球内的CYP3A4、CYP1A2、UGT1A1和CPS1 mRNA相对表达高于HepaRG二维细胞(P<0.05),HepG2三维胶原微球内的CYP1A2相对表达高于HepG2二维培养(P<0.05);④HepaRG三维胶原微球内的白蛋白、CYP3A4蛋白表达水平高于HepG2三维胶原微球、普通微球、二维培养(P<0.05);⑤结果表明,HepaRG三维胶原微球具有高表达的肝功能水平,可为体外药物代谢评价、组织工程等应用提供研究参考.

摘要： 背景:近年来的一些研究显示,HepaRG细胞三维培养模型可较好地模仿体内微环境,与二维培养相比显示出更好的肝分化和功能情况。目的:选择HepaRG人源肝祖细胞制备三维胶原微球,评价胶原微球内细胞适应性培养和功能表达情况。方法:以胶原蛋白作为基质材料,选择HepaRG和HepG2细胞分别建立三维胶原细胞微球模型,形成稳定的细胞球体,以HepaRG普通微球、HepG2普通微球、HepaRG二维培养、HepG2细胞二维培养为对照。培养1,6,12 d后,死活染色法观察细胞存活情况;培养1,6,12,16d后,检测各组上清尿素合成与CYP3A4分泌量;培养12d后,采用qPCR检测CYP3A4、CYP1A2、UGT1A1、CPS1mRNA相对表达,Western Blot检测肝细胞标志物白蛋白和CYP3A4蛋白表达水平。结果与结论:①连续培养12 d的活死染色显示,三维胶原微球内的活细胞数量较多,死细胞较少,具有较高的细胞活率,并且Hepa RG三维胶原微球内的细胞呈现出多个细胞簇紧密连接的交联结构;②Hepa RG三维胶原微球培养1,6,12 d后的尿素含量高于Hepa RG二维培养(P<0.05),Hep G2三维胶原微球培养1,6,12,16 d后的尿素含量高于Hep G2二维培养(P<0.05),Hepa RG三维胶原微球培养1,6,12 d后的CYP3A4分泌量高于Hepa RG二维培养(P<0.05),Hep G2三维胶原微球培养6,12 d后的CYP3A4分泌量高于Hep G2二维培养(P<0.05);③Hepa RG三维胶原微球内的CYP3A4、CYP1A2、UGT1A1和CPS1 mRNA相对表达高于Hepa RG二维细胞(P<0.05),Hep G2三维胶原微球内的CYP1A2相对表达高于Hep G2二维培养(P<0.05);④Hepa RG三维胶原微球内的白蛋白、CYP3A4蛋白表达水平高于Hep G2三维胶原微球、普通微球、二维培养(P<0.05);⑤结果表明,Hepa RG三维胶原微球具有高表达的肝功能水平,可为体外药物代谢评价、组织工程等应用提供研究参考。

摘要： 目的 研究人Plecstrin同源域家族A成员1(Pleckstrin homology like domain family A member 1,PHLDA1)与胶质瘤恶性表型关系.方法 收集马鞍山市中心医院神经外科和上海新华医院神经外科2015年1月至2020年4月65例原发脑胶质瘤的速冻标本.从接受尸检的非胶质瘤患者中收集了5份脑组织样本作为对照.利用免疫组化方法检测样品中的PHLDA1表达.采用免疫荧光、流式细胞术、集落形成法、体外细胞迁移侵袭法对成人胶质瘤U87细胞系和U251细胞系进行胶质瘤表型分析.结果 免疫组化结果显示,随着胶质瘤WHO分级的增加,PHLDA1染色强度增加(x2趋势=24.145,P<0.01).3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐比色法(MTT试验)结果显示,与空白对照组和阴性干扰组相比,当SiRNA干扰敲低PHLDA1后,U87和U251培养48 h后的增殖率显著降低(P<0.05).流式细胞仪检测显示,PHLDA1干扰后,U87和U251细胞凋亡率高于对照组(P<0.01),G0-G1期细胞比例低于对照组(P<0.05)而S期比例高于对照组(P<0.01).transwell试验显示,PHLDA1干扰组的U87和U251迁移率明显低于对照组(P<0.01).结论 PHLDA1在胶质瘤中过表达.功能分析显示PHLDA1在胶质瘤的迁移和侵袭中起重要作用.PHLDA1可能成为胶质瘤新的潜在治疗靶点.

摘要： 目的 分析老年结核病患者外周血中恒定自然杀伤T淋巴细胞(iNKT)的比例、表型及功能状态.方法 选取150例结核病患者,按照年龄将其分为老年结核病组(年龄≥60岁,n=68)、非老年结核病组(年龄0.05).(2)PMA/Iono刺激后,3组iNKT中INF-γ、IL-4分泌阳性细胞率均较刺激前增加(均P0.05).(3)α-GalCer刺激后,仅对照组iNKT占淋巴细胞比例较刺激前增加并高于老年结核病组与非老年结核病组(均P<0.05).结论 老年结核病患者外周血中iNKT比例下降明显,并呈过度活化状态,细胞因子分泌能力正常,但扩增效率降低.

摘要： 高内涵成像是一种能够通过对同一细胞进行多种荧光标记并进行多通道成像从而获得大量信息的研究手段,可以实现对细胞、细胞群以及小鼠肿瘤模型到肿瘤患者的病理样本的成像,应用范围广泛.本文对高内涵成像进行了简单介绍,同时基于实验经验对高内涵成像过程中可能影响图像质量的相关因素进行总结和建议,主要包括样品制备和高内涵成像.最后,本文对近年来高内涵成像在细胞表型研究方面的应用进行概括.把成像数据与从基因组、蛋白质组和代谢组数据集获得的信息结合起来,将为细胞学研究提供额外的深度和维度.

摘要： NADPH氧化酶与肿瘤的发生发展密切相关.前期发现,NADPH氧化酶4(NOX4)在人黑色素瘤A375-WT细胞内高表达、高活性,敲减NOX4的A375细胞(A375-NOX4△)增殖能力降低,但其分子机制尚未阐明.为探讨NOX4在黑色素瘤发生发展中的作用及其机制,本研究观察人黑色素瘤组织中NOX4表达,构建NOX4过表达的A375稳转细胞株(A375-NOX4-OE),分别通过体外、体内实验研究NOX4过表达调控人黑色素瘤细胞表型的分子机制.

摘要： 关节软骨无血管及神经分布,细胞密度及代谢活性低,因此极小的损伤也不能自我修复,通常需要外科手术进行干预.细胞治疗是应用间充质干细胞(MSCs)或软骨细胞移植到缺损部位,从而产生功能性修复.然而,这两种细胞的来源都有局限性:MSCs需要长时间的体外以获得足够数量的细胞,且在相同培养条件下较软骨细胞分泌更少的软骨基质;软骨细胞比MSCs在临床应用更广泛,但在体外扩增过程中去分化明显,失去正常软骨细胞表型,形成较差的纤维软骨.

摘要： 目的：分析5种致敏药物对小鼠耳后淋巴结7种免疫细胞表面分子表达和6个细胞亚型百分比的变化,探讨其用于评价致敏性的机制性研究依据.方法：选用24只健康小鼠,每组4只,在本实验室驯化1周后分别使用致敏药物耳后涂抹刺激后,提取耳后淋巴结细胞,使用流式细胞仪检测CD45+CD3+％,CD3+CD4+％, CD4+CD154+％,CD4+CD28+％,CD45+CD19+％和CD45+CD69+％细胞亚群的百分比情况.结果：丁子香酚和2-己基肉桂醛致敏后7种表面分子表达与空白对照组相应表型表达出现明显差异;戊二醛、DNCB、巯基苯并噻唑致敏后出现部分表达的差异性变化.结论：可以初步判断CD4和CD28的表达可能参与了致敏效应,可能成为初筛药物致敏效应的细胞表型.

摘要： NKT细胞属于新发现的一类淋巴细胞,此类淋巴细胞不同于NK细胞和T细胞.新近在NKT细胞发育、细胞表型、抗原识别及其在免疫调节中的作用等方面取得了很大进展.NKT细胞识别自身抗原,具有CD1限制性.NKT细胞通过调节T h1和T h2细胞发育参与免疫调节.NKT细胞的研究结果无论对免疫学基础理论还是多种免疫性疾病的临床治疗都有着重要的意义.

摘要： 目的:应用过表达转录因子Foxp3的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞模型，探讨转录因子Foxp3对RAW264.7细胞表型及免疫抑制相关基因的影响，从而为移植排斥提供新的细胞治疗措施奠定基础。rn 方法:采用脂质体转染重组质粒pIRES2-EGFP/mFoxp3及空载质粒pIRES2-EGFP至小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞系，经6418筛选后，免疫荧光显微镜及流式细胞术检测GFP表达、RT-PCR检测Foxp3表达以鉴定表达效果;采用RT-PCR检测转染重组质粒pIRES2-EGFP/mFoxp3,空载质粒pIRES2-EGFP以及未转染质粒组的RAW264.7细胞表面分子CTLA-4,G工TR及GITRL的表达水平;采用RT-qPCR的方法检狈g各组RAW264.7细胞iNOS及Argl的表达水平。rn 结果:成功建立稳定表达Foxp3的巨噬细胞RAW264.7细胞模型;与转染空载质粒pIRES2-EGFP和未转染质粒的RAW264.7细胞相比，转染重组质粒pIRES2-EGFP/mFoxp3的RAW264.7细胞的表面分子CTLA-4,GITR及GITRL的mRNA表达水平明显升高(p<0.O1)，免疫抑制相关基因iNOS及Argl的mRNA表达水平也明显升高(p<0.O1)。rn 结论:转录因子Foxp3能够使RAW264.7细胞表面分子及免疫抑制相关基因的表达水平明显升高，可能发挥抑制免疫应答的作用，从而在治疗移植排斥中发挥作用。

摘要： 目的：比较健康人和肿瘤患者外周血来源的CIK细胞的体外扩增速度、细胞表型和杀伤活性；观察健康人CIK细胞对裸鼠体内移植瘤的预防和治疗作用。rn 方法：常规无菌采集健康人和肿瘤患者外周血各10份，采用密度-梯度离心法分离出外周血中的单个核细胞，定向诱导成CIK细胞，然后直接活细胞计数法比较两者的扩增速度；流式细胞仪检测比较两者细胞表型；MTT法比较两者对K562和LOVO细胞株的杀伤活性。取30只裸鼠分为3个组。预防组：裸鼠先尾静脉注射CIK细胞，连续5天，第6天背部皮下接种A549细胞。治疗组：裸鼠于第一天接种A549细胞，次日，分为3组，第一组：局部(接种A549部位)注射CIK细胞；第二组：尾静脉注射CIK细胞；第三组：局部(接种A549部位)及尾静脉均注射CIK细胞，均连续治疗5天。对照组：裸鼠，第一天背部皮下接种A549细胞，第二天开始在尾静脉注射生理盐水，连续5天。四周后处死全部裸鼠，测量肿瘤大小，称重，计算肿瘤体积，抑瘤率，并做病理检查。rn 结果：健康人外周血来源的CIK细胞的扩增速度显著高于肿瘤患者外周血来源的CIK细胞(P<0.051；流式细胞仪检测显示健康人外剧血来源的CIK细胞CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞百分比显著高于患者外周血来源的CIK细胞(P<0.05)；健康人外周血来源的CIK细胞对K562，LOVO的杀伤活性强于患者外周血来源的CIK细胞(P<0.05)。对照组各裸鼠背部皮下移植瘤出现较早，并且以相近速率快速生长，体积较大；CIK细胞预防组及治疗组中局部注射组和尾静脉注射组的移植瘤出现较晚，生长较慢，体积较小，联合治疗组治疗效果更佳(P<0.05)。rn 结论：体外实验中，健康人外周血来源的CIK细胞体外扩增快.CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞比例高，对肿瘤细胞的杀伤活性强于肿瘤患者外周血来源CIK细胞。动物实验中，健康人CIK细胞对裸鼠移植瘤有预防和治疗作用。

摘要： 目的：比较两种不同方法诱导的CIK细胞的体外扩增速度、细胞表型和杀伤活性。rn 方法：健康人外周血10例，经密度梯度离心获得单个核细胞，运用两种不同的方法诱导CIK细胞，对照组以CD3MAb、干扰素-γ和IL-2为诱导剂制备CIK细胞，实验组另外加入RetroNectin诱导，直接活细胞计数法比较两者的扩增速度，流式细胞仪检测比较两者细胞表型，MTT法比较两者对K562和LOVO细胞株的杀伤活性。rn 结果：实验组CIK细胞的扩增速度显著高于对照组，(P0.05)。rn 结论：运用实验组方法诱导CIK细胞扩增速度快，CD3+CD56+百分比以及对肿瘤细胞的杀伤活性得以保持，是一种值得推广运用的培养方法。

摘要： 本研究通过建立口腔鳞癌局部骨侵袭动物模型及破骨细胞体外培养对口腔鳞癌骨侵袭进程中的不同种破骨细胞进行表型分析及功能研究.

摘要： 本研究通过建立口腔鳞癌局部骨侵袭动物模型及破骨细胞体外培养对口腔鳞癌骨侵袭进程中的不同种破骨细胞进行表型分析及功能研究.

摘要： 本研究通过建立口腔鳞癌局部骨侵袭动物模型及破骨细胞体外培养对口腔鳞癌骨侵袭进程中的不同种破骨细胞进行表型分析及功能研究.

摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体涉及恶性表型大细胞肺癌细胞株及其应用。本发明提供恶性表型大细胞肺癌细胞株，所述的细胞株包含：801D‑A10、801D‑F4、801D‑H10、801D‑E6、801D‑F10和801D‑F11中的任意一种。本发明建立的6种人大细胞肺癌细胞株，都可以成功传代至60代，能够稳定传代，且生长迅速。通过体内外实验证实801D‑A10、801D‑F4和801D‑H10细胞株的增殖和迁移侵袭能力强，通过体内外实验证实801D‑E6、801D‑F10和801D‑F11细胞株的增殖和迁移侵袭能力弱。

摘要： 本发明部分地基于鉴定用于调节单核细胞和巨噬细胞发炎表型的组合物和方法以及其免疫疗法用途。

摘要： 本发明提供了一种维持细胞表型的肝干细胞体外高活性三维扩增方法，其包括如下步骤：（1）准备培养基，培养基成分为：1L DMEM/F12、15‑20mg/L成纤维细胞生长因子胰岛素10‑15mg/L、0.1‑0.2mg/L谷氨酸、0.5‑0.8mg/L尼克酰胺、0.1‑0.2mg/L亚硒酸、0.05‑0.1mg/Lβ‑巯基乙醇、0.1‑0.6mg/Lα肌动蛋白、0.2‑0.3mg/L醋酸钠、0.001‑0.003mg/L丙酮酸钠和占总培养基重量2‑3%的胎牛血清；（2）将灭菌后的多孔凝胶浸没于培养基中，将肝干细胞接种至多孔凝胶中，然后进行培养。本发明能获得表型稳定、活性高的干细胞，可以保持良好的干细胞特性。

摘要： 本公开提供涉及表现出原代人肝细胞表型的人肝细胞细胞系的体外培养物的方法和组合物。这类细胞系易于被嗜肝病毒诸如HCV或HBV感染，并且支持病毒复制和高水平的病毒颗粒产生。这类体外培养物可用于嗜肝病毒的产生和研究，以及筛选(例如，抗病毒药物、评估药物代谢)方法、和原代人肝细胞的研究。

摘要： 本申请公开了一种定位目标表型癌细胞中表型基因的方法，用于癌症的治疗。方法包括：对目标表型癌细胞和对应正常细胞分别进行总RNA提取，将提取的总RNA进行反转录，得到cDNA，然后以得到的cDNA为模板，实时定量PCR计算目标表型癌细胞中选定基因的mRNA相对转录水平，根据目标表型癌细胞中基因表达的相对转录水平定位目标表型癌细胞的表型基因，最后建立包含癌细胞表型、表型基因以及癌细胞表型和表型基因之间对应关系的数据表，当获知癌细胞表型时，能够根据所述癌细胞表型在所述数据表中快速查询表型基因，所述表型基因用于癌症的治疗。

摘要： 一种表征细胞表型的方法，包括接收来自多个患者或多个多细胞体外模型的多个组织样品的多参数细胞和亚细胞成像数据，对所述多参数细胞和亚细胞成像数据进行细胞分割以产生经分割的多参数细胞和亚细胞成像数据，以及对经分割的多参数细胞和亚细胞成像数据进行递归分解以识别多个计算表型。递归分解包括多个分解水平，每个分解水平包括软/概率聚类和空间正则化，并且经分割的多参数细胞和亚细胞成像数据中的每个细胞被概率地分配给多个计算表型中的一个或多个。

摘要： 本发明提供了一种诱导中性粒细胞分化为抗原提呈细胞表型的方法，涉及免疫学，分子生物学等技术领域。所述表型诱导和功能验证的方法包括：1)中性粒细胞的分离纯化；2)PMA浓度的选择；3)APC特征中性粒细胞诱导方式；4)APC特征中性粒细胞生理功能的验证；本发明得到的得到高纯度的中性粒细胞，并且成功诱导APC特征中性粒细胞的形成；不仅如此，APC特征中性粒细胞具备了抗原提呈细胞的功能，对于适应性免疫调节和病原体的清除以及宿主的防御方面具有重要的临床意义。

摘要： 本发明为一种体外模拟细胞因子释放对间接靶细胞表型影响的方法，涉及免疫细胞研究领域，特别是CAR‑T细胞与其对应靶细胞共孵育时其细胞因子对间接靶细胞表型影响的体外研究。CRS体外模型是在Corining Transwell 12孔板(0.4μm孔径，12mm底面积)中，上层隔室加入CART细胞(A细胞)和对应靶细胞(B细胞)，下层12孔板中加入间接靶细胞(C细胞，包括HUVEC，PBMCs，CD34+磁珠分选后的G‑PBMCs)。小于0.4μm孔径物质可自由通过(如细胞因子)，而细胞无法自由通过，从而模拟CAR‑T细胞与肿瘤细胞接触时释放细胞因子对HUVEC等间接靶细胞表型的影响。

摘要： 本发明公开一种基于细胞荧光图像的肿瘤细胞表型识别计数方法，首先采集细胞核荧光图像和多张细胞质荧光图像，然后将荧光图像转换为灰度图像；通过机器学习算法确定每张灰度图像的阈值校正因子；再根据阈值校正因子校正灰度图像转换二值图过程中的二值化阈值；通过细胞质二值图生成与肿瘤细胞表型相对应的细胞质掩膜，并结合细胞核二值图生成细胞二值图，最后识别细胞二值图中的肿瘤细胞，并统计肿瘤细胞的细胞数量。结合了基于规则和统计机器学习两种方法，可以在不同图像情况下实现全自动且灵活地识别并计数多种循环肿瘤细胞表型，识别精度高、计数准确、误差小，而且缩识别计数时间短。

摘要： 本发明涉及基于流式细胞术检测结核特异性T细胞免疫表型用于诊断结核分枝杆菌感染的方法，包括首先对细胞的培养和刺激，接着进行多色免疫表型标记，再用流式细胞术检测CD4+T淋巴细胞经结核特异性抗原ESAT‑6和CFP‑10刺激后，其细胞表型CD25+CD134+的表达增加。本发明的方法有着操作简单的优点，且还增加了诊断的灵敏度和缩短了检测时间，适合在结核病的检测中推广。