细胞融合

摘要： 背景:临床上广泛采用自体神经移植来达到神经修复的目的,但应用效果欠佳,而聚乙二醇的应用从细胞融合剂到水凝胶生物黏合剂再到促轴突融合神经修复新型材料等,因此若能联合聚乙二醇探索出加快神经功能重建的方法,可以更好地应用于临床,并且对神经再生与功能重建也具有重要意义.目的:阐述聚乙二醇在神经功能重建领域的应用进展.方法:利用PubMed和中国知网数据库,检索有关聚乙二醇促细胞融合以及聚乙二醇作用于神经修复的文献,检索时间为2020年10月至2021年3月,英文检索词为"PEG,polyethylene glycol,cell-fusion,nerve function reconstruction,nerve repair",中文检索词为"聚乙二醇、细胞融合、功能重建、神经修复".根据纳入与排除标准对所有文章进行初筛后,保留相关性较高的61篇文章进行综述.结果 与结论:①在一定条件下,70％聚乙二醇加入少量腺苷5'-三磷酸可加快损伤神经轴突快速生长,有效促进膜的融合,实现神经细胞结构和功能重建.②聚乙二醇自身浓度是促进体细胞融合的主要影响因素,当聚乙二醇浓度为35％,相对分子质量为4000,或者聚乙二醇浓度为50％,其相对分子质量为1000时,对细胞融合效率影响最大;其他次要影响因素包括融合细胞个数、反应温度和时间等.③进一步分析聚乙二醇促神经修复的机制发现,聚乙二醇可促进轴突融合,表现出恢复轴突形态的连续性和电生理功能的作用,但是否能在瓦勒氏变性之前实现轴突的有效连接还需进一步研究证明.④聚乙二醇应用前景较为广泛,未来可考虑将其应用在新型生物黏合剂的研发、神经修复支架改良、复合物水凝胶研制相关研究中,但关于聚乙二醇在神经功能重建领域的应用还有诸多问题未解决,如聚乙二醇诱导神经细胞融合对人体的长期影响、最大延迟治疗时间等问题,还需后续研究不断完善.

摘要： 背景:临床上广泛采用自体神经移植来达到神经修复的目的,但应用效果欠佳,而聚乙二醇的应用从细胞融合剂到水凝胶生物黏合剂再到促轴突融合神经修复新型材料等,因此若能联合聚乙二醇探索出加快神经功能重建的方法,可以更好地应用于临床,并且对神经再生与功能重建也具有重要意义。目的:阐述聚乙二醇在神经功能重建领域的应用进展。方法:利用PubMed和中国知网数据库,检索有关聚乙二醇促细胞融合以及聚乙二醇作用于神经修复的文献,检索时间为2020年10月至2021年3月,英文检索词为"PEG,polyethylene glycol,cell-fusion,nerve function reconstruction,nerve repair",中文检索词为"聚乙二醇、细胞融合、功能重建、神经修复"。根据纳入与排除标准对所有文章进行初筛后,保留相关性较高的61篇文章进行综述。结果与结论:(1)在一定条件下,70%聚乙二醇加入少量腺苷5’-三磷酸可加快损伤神经轴突快速生长,有效促进膜的融合,实现神经细胞结构和功能重建。(2)聚乙二醇自身浓度是促进体细胞融合的主要影响因素,当聚乙二醇浓度为35%,相对分子质量为4000,或者聚乙二醇浓度为50%,其相对分子质量为1000时,对细胞融合效率影响最大;其他次要影响因素包括融合细胞个数、反应温度和时间等。(3)进一步分析聚乙二醇促神经修复的机制发现,聚乙二醇可促进轴突融合,表现出恢复轴突形态的连续性和电生理功能的作用,但是否能在瓦勒氏变性之前实现轴突的有效连接还需进一步研究证明。(4)聚乙二醇应用前景较为广泛,未来可考虑将其应用在新型生物黏合剂的研发、神经修复支架改良、复合物水凝胶研制相关研究中,但关于聚乙二醇在神经功能重建领域的应用还有诸多问题未解决,如聚乙二醇诱导神经细胞融合对人体的长期影响、最大延迟治疗时间等问题,还需后续研究不断完善。

摘要： 我们生活在数字时代,数字技术已经深度嵌入我们的生活,改变着我们的生存方式和生活方式,也在深刻影响着我们的教材开发和课堂教学。生物学教学将在数字时代绽放别样的光彩。第一,数字技术可以突破时空限制为生物学教学生动地再现生命世界。生命现象和生命活动规律用数字化方式来展示,可以突破教室的时空限制,精彩再现原本遥远、抽象的生命现象,甚至可以为学生的学习提供胜似身临其境的鲜活场景。

摘要： 破骨细胞作为骨代谢过程中唯一一个具有骨吸收功能的细胞,其功能异常会引起骨代谢类疾病。细胞融合是破骨细胞形成过程中的重要过程,对于破骨细胞生物学功能的发挥至关重要。本文通过列举一些在破骨细胞融合过程中的相关因子及其影响因素,阐明其在融合过程中可能的相关分子机制,旨在为治疗破骨细胞相关的骨代谢疾病提供新的治疗靶点。

摘要： 目的:制备抗Periostin单克隆抗体并鉴定其免疫学性能,为后期临床应用奠定基础。方法:表达并纯化Periostin的GST融合蛋白,经过免疫小鼠、细胞融合及亚克隆筛选,制备效价良好的高亲和力单克隆抗体,并用免疫组化实验鉴定其免疫学性能。结果:获得6株杂交瘤细胞株,均能稳定分泌高亲和力抗体,经酶联免疫吸附测定、Western blot和免疫组化实验证实均能特异性识别人的Periostin,显微镜下观察发现Periostin在结直肠癌、乳腺癌等肿瘤患者的组织切片中表达水平显著高于健康人。结论:成功制备了高亲和力、特异性强的抗人Periostin单克隆抗体,为小分子抗体以及抗体人源化制备奠定了基础,进而为治疗人体内组织器官纤维化提供理论依据。

摘要： 在高中生物学新教材关于证明细胞膜流动性的插图安排以及语言表述中,容易给师生带来一些认知误区。本文基于这些认知误区进行探讨与辨析,尝试还原科学史内容,为该部分的教学提出一些改进建议。

摘要： 细胞融合是细胞生物学的一项核心技术,也是细胞生物学实验课程的重要内容。聚乙二醇(PEG)诱导的细胞融合法是目前最经济、简单的细胞融合技术。因影响细胞融合效果的因素很多,难以把握,导致细胞融合效果不理想,不利于学生对实验结果的观察、判断和描述,因而无法更好地达成培养学生实验技能和探究能力的培养目标。本文综述了以鸡血细胞为实验材料时,不同条件下聚乙二醇诱导的鸡血细胞融合效果,期望找到适合的探索方向,以达到优化细胞融合的条件,从而提高PEG诱导细胞的融合率。

摘要： 为了制备犬瘟热病毒(CDV)核衣壳蛋白(NP)的单克隆抗体,从而为建立CDV的诊断方法提供有效试剂。将纯化后的CDV核蛋白作为免疫原注射至BALB/c小鼠腹腔中,取经4次长程免疫和1次加强免疫并达到融合标准的小鼠脾脏刮制成悬液,与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合制备杂交瘤细胞,利用间接ELISA筛选,并对单抗进行生物特性鉴定。结果表明:经过筛选后共获得2株可持续分泌抗CDV NP的单克隆细胞株,以3-3G、1-10B命名。2株细胞株抗体经效价测定均可达到1∶2 048 000;经亚型鉴定,2株杂交瘤细胞均为IgG2型;经过protein A柱纯化,抗体纯度达到了90%以上;BCA法测得抗体浓度至少达2.78 mg/mL;通过Western blot鉴定,制备所得CDV NP单克隆抗体与纯化的CDV NP抗原在预期的60 kd处有蛋白免疫印迹条带。该研究制备的单克隆抗体为后续犬瘟热的检测方法的研究奠定了基础。

摘要： 基因编码工具(例如CRISPR/Cas9)的出现使敲除哺乳动物细胞基因成为现实.然而,实现细胞的多基因敲除成功率低且所需时间长.细胞融合技术是构建杂合细胞的常用方法,通过融合两种不同表型的细胞,构建出一种具有杂合表型的新型细胞.但是,由于基因的互补作用,通过基因敲除而获得的性状在细胞融合后成为隐性性状,融合细胞不能表现该性状.本研究的目的是设计一种通过细胞融合技术和CRISPR/Cas9技术获得基因双敲除细胞的方法.由于现阶段没有关于HEK 293细胞株细胞融合的参考数据,所以首先在HEK 293野生型细胞株中分别敲除GPI生物合成必需的PIGA或PIGK,获得PIGA-KO细胞株和PIGK-KO细胞株,并以这两个细胞株作为模型进行条件优化.经过反应条件优化,HEK 293细胞的融合效率显著提高,且实现了FUT8敲除细胞株和ST6GALJ敲除细胞株的快速融合;其次是将细胞融合技术与CRISPR/Cas9技术结合从而实现多种糖基因的快速敲除.将分别含有FUT8和ST6GAL1目标导向RNAs且都能稳定表达Cas9蛋白的两个细胞株进行融合,即可获得FUT8和ST6GAL1基因都被敲除的双敲细胞株.实验结果表明,将细胞融合技术和CRISPR/Cas9技术结合可简便而快速地获得基因双敲除细胞株.

摘要： [目的]本研究考察嗜酸乳杆菌(L.a)和地衣芽孢杆菌(B.lich)的融合子产芽孢乳酸菌Lsp-1的抗逆性、产乳酸能力和产消化酶的能力.[方法]通过对Lsp-1和其亲本菌株L.a、B.lich的耐酸耐胆盐能力、产乳酸、产消化酶(蛋白酶、淀粉酶)、产丁二酮能力以及胆固醇清除能力的对比,比较Lsp-1与两亲本菌株的差异.[结果]在pH 2.0或含0.3％胆盐的MRS培养基中培养2.5 h后,Lsp-1的活菌数比亲本菌株L.a和B.lich高10～100倍.B.lich不产乳酸,Lsp-1的产乳酸量48 h后与L.a基本相同.各菌株产胞外中性蛋白酶能力B.lich(8.84 U·mg-1)>Lsp-1(5.54 U·mg-1)>L.a(4.59 U·mg-1);产胞外酸性蛋白酶能力B.lich(4.74 U·mg-1)>Lsp-1(3.30 U·mg-1)>L.a(2.54 U·mg-1);产淀粉酶能力(透明圈直径/菌落直径)B.lich(5.03)>Lsp-1(2.70)>L.a(2.32);产丁二酮能力L.a(10.25μg·mg-1)>Lsp-1(8.21μg·mg-1),B.lich没有检测到;胆固醇清除能力Lsp-1(19.7％)显著高于两亲本菌株.[结论]Lsp-1抗逆性提高增强了其肠道存活率和定植能力,融合子遗传了L.a的高产酸能力和B.lich的高产消化酶能力,为其抑制病原菌生长和提高肠道吸收率等提供了保障.

摘要： 平足蛋白(Podoplanin,PDPN)首次被发现在患有嘌呤霉素所诱导的肾病鼠模型的肾小球足突细胞表面上,是一种跨膜O-链接的糖蛋白,由162个氨基酸组成,大小为38kD.平足蛋白特异性表达于淋巴管内皮,不表达于血管内皮,特异性较好,可作为肿瘤诊断和判断预后的淋巴管化学标记物.而PDPN的生理功能目前还不是很清楚。但有研究表明，PDPN在肿瘤的发生、发展、侵袭和转移中发挥了重要作用，且与肿瘤预后密切相关。因此，制备高亲和力和高特异性的抗平足蛋白的单克隆抗体有助于区分淋巴管和血管，有助于对肿瘤的恶性程度、侵袭能力和预后进行判断，为临床病情评估及进一步治疗提供指导。rn 本研究通过合成PDPN的胞外功能区优化后的DNA片段，而后克隆到原核表达载体PET-28a(+)和PGEX-6P-1上，转到Transetta（DE3)菌株，经IPTG诱导表达、纯化得到可溶性的蛋白PDPN-GST和PDPN-HIS，并用ELISA和WB鉴定。PDPN-GST和PDPN-HIS分别作为免疫原和检测原。将多次免疫的抗血清效价达到融合要求的Balb/c小鼠的脾细胞与状态良好的SP2/0骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤细胞。通过多次亚克隆筛选得到阳性杂交瘤细胞株。而后进行腹水诱生抗体，纯化并鉴定抗体。该研究为建立基于免疫学检测PDPN方法和开发生产高质量的肿瘤标记物检测试剂盒奠定坚实的基础。

摘要： 为了分析猪源新城疫病毒F和HN基因对BHK-21细胞膜融合的作用，本实验采用RT-PCR方法从猪源新城疫病毒JL01株中扩增获得了F蛋白基因，并根据GenBank上登录的猪源新城疫病毒HN基因序列，合成了HN基因，分别将F和HN克隆到pKS载体上。又从大肠杆菌BL21(DE3)中扩增得到T7 RNA聚合酶基因，将报告基因EGFP与T7 RNA聚合酶基因一起定向克隆到痘苗病毒转移载体pSTK上。再将pKS-F、pKS-HN与pSTK-T7-EGFP共转染BHK-21细胞，转染后16h，用Giemsa染液进行染色，可见明显的细胞融合现象。该研究证明猪源新城疫病毒JL01株的F和HN蛋白共同作用于BHK-21细胞产生细胞膜融合。

摘要： 多环芳烃(polycyclic aromatic hycdrocarbons,PAHs)是一类广泛分布并稳定存在于自然环境中的有毒污染物。研究表明,PAHs的微生物降解已成为国内外污染环境修复的重要手段,是环境中去除多环芳烃最主要途径,也是最有效、最廉价的方式。

摘要： 目的：观察人绒癌细胞系BeWo在forskolin诱导融合前后细胞中蛋白MMP-2及Ecad的表达变化，以探讨绒癌细胞融合与其浸润和转移能力变化的关系。rn 方法：用BeWo细胞株进行培养传代，以100 mmol/L.浓度的forskolin作用于BeWo细胞，用逆转录聚合酶链(RT-PCR)方法检测Syncytin mRNA表达量的变化;免疫印迹技术(Western-blot)方法检测forskolin作用前后绒癌细胞株BeWo中表达MMP-2及E-cad蛋白表达量的变化。rn 结果：以人类绒毛膜癌细胞株BeWo作为靶细胞，根据RT-PCR和Western-blot方法中条带的形状和亮暗程度可知Syncytin基因和E-cad及MMP-2蛋白的表达呈时间依赖性，随着forskolin作用时间的增加，Syncytin基因及E-cad蛋白的表达逐渐增加，而MMP-2蛋白表达量逐渐减少，差异具有统计学意义(p<0.05)。rn 结论：Syncytin高表达与融合后绒癌细胞的浸润转移能力的改变可能有一定关系，Syncytin的检测有望成为滋养细胞肿瘤患者判定预后的有价值的指标，并为滋养细胞肿瘤的治疗开辟新的思路。

摘要： 为建立圆弧青霉毒素-青霉酸的免疫学检测方法，制备了抗青霉酸(PA)的单克隆抗体.通过碳二亚胺法将青霉酸(PA)分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联获得完全抗原PA-BSA和PA-OVA.以PA-BSA为免疫小鼠，采用杂交瘤技术，经细胞融合、克隆筛选、扩大培养获得一株针对青霉酸的杂交瘤细胞4C2-F8-D2。通过动物体内诱生腹水法获得了单克隆抗体，纯化后的抗体效价为1：2.05×105，抗体类型为IgG1型，与黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、T-2毒素和伏马毒素均无交叉反应率，单抗的亲和常数为1.54×108 L/mol，为进一步研制检测圆弧青霉毒素-青霉酸的ELISA试剂盒提供了基础.

摘要： 为获得高特异性的抗隐孢子虫单克隆抗(monoclonal antibody，McAb)，以大肠杆菌中高效表达的隐孢子虫鼠基因型子孢子表面抗原CP15/60为免疫抗原，免疫BALB/c小鼠。rn 取脾细胞与SP2/0细胞融合，融合阳性细胞用间接ELISA方法进行筛选，有限稀释法3-4次克隆纯化，获得8株能稳定分泌抗隐孢子虫鼠基因型CP15/60蛋白的McAb杂交瘤细胞株，其接种产生的小鼠腹水和细胞培养液上清的最高效价分别可达1：276800和1：2800。对腹水效价较高的B4F7、D8H52株McAb进行染色体分析、亚型鉴定、亲和力测定、交叉反应性测定、Western blot检测以及分子量大小测定。结果显示其染色体数目为90-110，亚型均为IgG1，重链、轻链大小分别约为56 ku和27 ku，与球虫、血吸虫以及弓形虫无交叉反应，并具有良好的亚型特异性。表明获得了高特异性的抗隐孢子虫McAb。

摘要： 动物体细胞核移植技术对于优良种畜的复制、动物遗传多样性保存及濒危动物挽救、转基因动物培养以及人类疾病的治疗都具有重要的意义;近几年猪体细胞核移植研究取得了一定的进展,但总体看来核移植效率还很低,还需要对一些关键技术的深入研究和不断完善核移植操作程序,通过对猪体细胞核移植的关键技术及影响因素进行探讨与分析,以其加快猪体细胞核移植技术的研究,提高猪体细胞核移植的效率,进一步促进猪体细胞核移植技术在生产中应用.

摘要： 动物体细胞核移植技术对于优良种畜的复制、动物遗传多样性保存及濒危动物挽救、转基因动物培养以及人类疾病的治疗都具有重要的意义;近几年猪体细胞核移植研究取得了一定的进展,但总体看来核移植效率还很低,还需要对一些关键技术的深入研究和不断完善核移植操作程序,通过对猪体细胞核移植的关键技术及影响因素进行探讨与分析,以其加快猪体细胞核移植技术的研究,提高猪体细胞核移植的效率,进一步促进猪体细胞核移植技术在生产中应用.

摘要： 动物体细胞核移植技术对于优良种畜的复制、动物遗传多样性保存及濒危动物挽救、转基因动物培养以及人类疾病的治疗都具有重要的意义;近几年猪体细胞核移植研究取得了一定的进展,但总体看来核移植效率还很低,还需要对一些关键技术的深入研究和不断完善核移植操作程序,通过对猪体细胞核移植的关键技术及影响因素进行探讨与分析,以其加快猪体细胞核移植技术的研究,提高猪体细胞核移植的效率,进一步促进猪体细胞核移植技术在生产中应用.

摘要： 目的:制备抗艰难梭菌B毒素的单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性.方法:用纯化的艰难梭菌B毒素免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0融合,采用间接ELISA筛选杂交瘤细胞.用ELISA检测mAb腹水的效价;用Western blot检测mAb的特异性.结果:得到1株杂交瘤细胞株(3B4),该株细胞分泌的mAb为IgG2a.中和试验表明,该mAb均无中和活性.腹水mAb的效价均在10-4以上.在非变性条件下,PAGE后Western blot的结果显示,该株mAb可与相对分子质量(Mr)为22×104的B毒素产生反应;而在变性条件下,SDS-PAGE后Western blot均显示,可与Mr为4×103的B毒素片段产生反应.结论:该株杂交瘤细胞株能分泌抗艰难梭菌B毒素的特异性mAb,为艰难梭菌B毒素的研究提供了有利的工具.

摘要： 本发明公开了一种采用细胞融合技术生产异戊二烯的方法及其构建的融合子，主要利用原生质体融合技术，以大肠杆菌和真氧产碱杆菌为亲本，通过以油脂为唯一碳源和抗性标记质粒筛选，获得高效转化油脂的重组细胞，并利用该融合子发酵生产异戊二烯，该方法能够提高油脂代谢的速率、提高异戊二烯的产率，降低发酵成本。

摘要： 本发明公开了一种诱导树突状细胞与肿瘤细胞融合的方法，其在融合过程中依次添加一定量的聚乙二醇和胶原蛋白来高效诱导细胞融合，其中聚乙二醇能使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，由于两细胞接口处双分子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作用，从而使细胞发生融合。胶原蛋白可以使融合后细胞膜紧缩，修复细胞膜，从而形成稳定、高效的融合细胞，适用于生产肿瘤疫苗、单克隆抗体等特定的生物制品。

摘要： 本发明公开了一种利用二倍体细胞与花粉细胞融合育种法培育三倍体霍山石斛的方法。该方法包括：(1)优选出抗逆性好、生长快、茎秆粗、茎高长、分蘖多、纤维含量低、药效成分含量高的不同产地的霍山石斛品种作为三倍体培育源植株亲本；(2)对源植株种子在固体培养基中进行无菌播种，获得原球茎；(3)对源植株花粉在固体培养基中进行无菌培养，获得花粉细胞群；(4)制备花粉细胞和原球茎细胞的原生质体，进行细胞融合；(5)在固体培养基上对融合细胞进行培养分化成幼株，检测出三倍体植株；(6)对三倍体植株进行组培，获得大量三倍体幼苗。

摘要： 本发明公开了异源融合基因修饰的癌细胞/树突状细胞融合肿瘤疫苗及其制备方法。本发明所提供的异源基因修饰的癌细胞/树突状细胞融合肿瘤疫苗及其制备方法中，融合细胞的方法包括将含有Endoglin和α1，3半乳糖转移酶相关基因并表达Endoglin和α1，3半乳糖转移酶的肿瘤细胞和树突状细胞进行融合得到融合细胞的步骤；α1，3半乳糖转移酶基因编码氨基酸序列为SEQ ID No.3的蛋白质；Endoglin为氨基酸序列为SEQ ID No.1的蛋白质；α1，3半乳糖转移酶相关基因由α1，3半乳糖转移酶基因和GTTI连接而成；GTTI的核苷酸序列为序列表中SEQ ID No.5的第1-548位核苷酸。

摘要： 本发明公开了一种采用细胞融合技术生产异戊二烯的方法及其构建的融合子，主要利用原生质体融合技术，以大肠杆菌和真氧产碱杆菌为亲本，通过以油脂为唯一碳源和抗性标记质粒筛选，获得高效转化油脂的重组细胞，并利用该融合子发酵生产异戊二烯，该方法能够提高油脂代谢的速率、提高异戊二烯的产率，降低发酵成本。

摘要： 本发明属于生物技术领域，特别指一种心肌细胞和肿瘤细胞融合的方法。融合方法是用心肌细胞与肿瘤细胞选择性融合，提高心肌细胞和肿瘤细胞的融合率。本发明的目的是通过心肌细胞和肿瘤细胞选择性融合，提高融合率。融合后肿瘤细胞带有或部分带有心肌细胞已高度分化不可再生的性质，可使肿瘤细胞生长缓慢，达到抑制肿瘤细胞生长及转移的目的。

摘要： 本发明涉及利用细胞融合技术的基因及细胞治疗剂以及其的用途，具体地，经确认，超表达血凝素神经氨酸酶(hemagglutinin neuraminidase，HN)及融合(F，fusion)蛋白的细胞通过血凝素神经氨酸酶及融合蛋白来增强与其他细胞的细胞融合力，通过与损伤或凋亡中的细胞或具有基因异常的细胞的细胞融合恢复成正常细胞，因此，可将包含对上述血凝素神经氨酸酶/融合蛋白进行编码(HN/F)的基因的载体或利用其转化的细胞有用地用作用于预防或治疗与细胞损伤相关的疾病，如神经退行性疾病或神经疾病或者肌肉退行性疾病或肌肉疾病的组合物的有效成分。

摘要： 本发明属于生物医学技术领域，尤其涉及一种HTLV‑1 Env介导的细胞‑细胞融合模型、制备方法及应用。本申请中获得HTLV‑1 Env基因片段，并替换载体pSRHS‑Tat‑EnvHIV‑1的HIV‑1 Env基因中对应的gp145片段，转染效应细胞COS‑1，并与基因组中整合有LTR及其下游串联着的萤火虫荧光素酶报告基因的TZM‑bl细胞共培养；通过检测萤火虫荧光素酶的活性间接检测HTLV‑1 Env介导的细胞‑细胞融合能力。利用抑制多肽P‑400的对该融合系统进行验证，表明该系统非常适用于针对HTLV‑1病毒进入抑制剂的筛选和验证，以及对进入抑制剂有效浓度和毒性等指标进行评估。

摘要： 一种小鼠胚胎干细胞单细胞融合方法,属于细胞工程技术领域。针对细胞融合效率低的问题，本发明提供了一种小鼠胚胎干细胞单细胞融合方法，是以小鼠胚胎干细胞(mESC)作为细胞融合对象，用含质量分数0.25％胰酶的消化液将mESC消化成单细胞，利用细胞凝集素构建一对一的单细胞对，在含有50％聚乙二醇中培养1min，随后将细胞继续培养7天，获得小鼠胚胎干细胞融合细胞。本发明适用于动物育种的研究或单克隆抗体的生产。

摘要： 一种猪鼠细胞单细胞融合方法，属于细胞工程技术领域。本发明针对目前异种细胞融合效率低的问题，提供了一种单细胞融合方法,以小鼠胚胎干细胞与猪多能性干细胞或猪成纤维细胞作为细胞融合对象，用含质量分数为0.25％的胰酶的消化液将猪、鼠细胞消化成单细胞，经培养后，利用细胞凝集素构建一对一的单细胞对，在含有质量分数为50％的聚乙二醇中培养1min，随后将细胞继续培养7天，获得猪鼠单细胞的融合细胞。本发明适用于动物育种研究或单克隆抗体的生产。