细胞色素C氧化酶

摘要： 目的:研究麻黄细辛附子汤对肾阳虚外感证模型小鼠Toll样受体(TLRs)应答及细胞色素C氧化酶(Cyt-CO)介导的凋亡调控的影响.方法:将48只雄性Balb/c小鼠随机分为正常组(n=12)和造模组(n=36).造模组小鼠采用腹腔注射苯甲酸雌二醇溶液(8 mg/kg)+滴鼻接种甲型H1N1流感病毒(20μL/只)的方法建立肾阳虚外感复合模型.然后将造模成功的小鼠随机分为模型组、阳性药组(磷酸奥司他韦胶囊,0.195 g/kg)和麻黄细辛附子汤组(1.802 g/kg,以生药总量计),每组12只.各给药组小鼠灌胃相应药液,正常组和模型组小鼠灌胃等体积生理盐水;灌胃体积均为20 mL/kg,每天1次,连续给药6天.给药期间,每天测量小鼠体质量、肛温,并计算其初始体质量百分率;末次给药后,计算其脏器(脾、胸腺、肺)指数,观察其肺组织病理学变化,检测其肺组织中甲型H1N1流感病毒的病毒载量(以M基因mRNA表达水平反映)以及心脏组织中TLR3、TLR7、髓样分化因子(MyD88)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)mRNA表达水平和Cyt-CO活性、细胞色素C(Cyt-C)含量.结果:与正常组比较,模型组小鼠的初始体质量百分率、肛温持续降低(P<0.05);脾指数、胸腺指数均显著降低(P<0.05),肺指数显著升高(P<0.05);肺组织病变严重;肺组织中病毒载量和心脏组织中TLR3、TLR7、MyD88、Caspase-3 mRNA表达水平及Cyt-C含量均显著升高(P<0.05或P<0.01),心脏组织中Cyt-CO活性显著降低(P<0.01).与模型组比较,麻黄细辛附子汤组小鼠的初始体质量百分率、肛温自给药第4天起呈上升趋势(P<0.05或P<0.01);脾指数、胸腺指数均显著升高(P<0.05),肺指数均显著降低(P<0.05);肺组织病理损伤明显改善;肺组织中病毒载量和心脏组织中TLR3、Caspase-3 mRNA表达水平和Cyt-C含量均显著降低(P<0.05或P<0.01),心脏组织中Cyt-CO活性显著升高(P<0.01).结论:麻黄细辛附子汤对肾阳虚外感病证模型小鼠具有改善作用,这可能与其可抑制TLRs应答和Cyt-CO介导的凋亡调控途径有关.

摘要： 本研究旨在探讨围填海对白骨壤(Avicennia marina)叶片叶绿素含量、呼吸与能量代谢的影响.实验以围填海不同区域白骨壤的叶片和指状呼吸根为材料,研究围填海对白骨壤叶片叶绿素含量、NAD+/NADH比值、NADP+/NADPH比值、ATP含量和指状呼吸根活力、细胞色素C氧化酶和乙醇脱氢酶活性的影响.实验结果表明,围填海使白骨壤叶片叶绿素含量平均下降53％,NAD+/NADH比值下降61％,NADP+/NADPH比值下降62％,ATP含量下降95％,指状呼吸根活力下降62％,细胞色素C氧化酶活性升高108％,乙醇脱氢酶活性升高20％.高岭土覆盖在白骨壤叶片表面,使其可利用的光能减少,导致其叶绿素含量降低;白骨壤叶片和指状呼吸根气孔被高岭土堵塞,呼吸及能量代谢受阻.因此,光照不足及低氧胁迫导致白骨壤死亡.

摘要： 【目的】从能量代谢的角度探索罗氏沼虾生长缓慢的原因,为分析和解决罗氏沼虾生长缓慢问题提供参考。【方法】利用合适浓度的siRNA抑制罗氏沼虾肝胰腺和肌肉中COX2基因的表达,分析肝胰腺和肌肉中线粒体呼吸链相关基因表达量和酶活性以及ATP含量的变化;通过持续抑制罗氏沼虾COX2基因的表达,分析其对罗氏沼虾生长的影响。【结果】siRNA对罗氏沼虾线粒体编码的COX2基因表达有抑制作用,在一定浓度范围内,随着siRNA浓度的增加抑制的作用越明显,超过一定的浓度范围的siRNA抑制作用不明显,浓度为2.0μg/g的siRNA与0.8、1.5、3.0μg/g的siRNA的抑制作用相比效果最好。罗氏沼虾注射siRNA后,肝胰腺和肌肉中的COX2基因表达量下调,ND1和ATP6基因表达量随之下调,COX、ATP合酶、CCR和ND的酶活性显著下降(P<0.05,下同),ATP含量降低。连续注射siRNA能持续抑制罗氏沼虾肝胰腺和肌肉中COX2基因的表达,随着siRNA注射次数的增加,抑制COX2基因表达的作用时间也增加,在注射4次2.0μg/g siRNA虾的肝胰腺和肌肉中,COX2、ND1和ATP6的基因表达量持续下调的时间最长,COX、ATP合酶、CCR和ND的酶活性能长期保持在显著低于对照组的水平,ATP含量也显著低于对照组。随着肝胰腺和肌肉中COX2基因表达被抑制时间的增加,罗氏沼虾的体长与体重增加量越小,养殖28 d后,注射1次siRNA和注射4次siRNA的虾的体重净增长分别为0.59和0.34 g。【结论】当参与ATP合成的酶的基因表达量和酶活性长时间受到抑制时,会抑制罗氏沼虾的生长。

摘要： 目的:了解细胞色素C氧化酶缺乏的可逆性线粒体肌病临床特征及基因突变特点。方法:回顾分析1例婴儿细胞色素C氧化酶缺乏的可逆性线粒体肌病的临床资料及基因检测结果。结果:本例患儿系婴儿起病,生长发育落后,入院时呼吸衰竭,需气管插管下呼吸机辅助呼吸,神经系统查体未见异常,动脉血气分析pH 7.212、血乳酸6.3 mmol/L、二氧化碳分压73.8 mm Hg、肌酸激酶1193 U/L、肌酸激酶同工酶155 U/L及乳酸脱氢酶560 U/L。头颅磁共振成像(MRI)示脑白质髓鞘化进程落后。入院后抗感染及辅助治疗效果不佳,持续高乳酸血症、肌酶水平异常升高。经辅酶Q_(10)、左卡尼丁治疗,临床症状明显改善。基因检测示线粒体基因组存在m.14674 T>C突变,来源于母亲。结论:婴幼儿持续呼吸衰竭、血乳酸水平高需警惕线粒体肌病,基因检测有助于及时诊断,细胞色素C氧化酶缺乏的可逆性线粒体肌病临床表现无特异性,早期诊治预后良好。

摘要： 目的 探讨中药培土生金法对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺功能及细胞色素C氧化酶(ROC)和神经生长因子(NGF)水平的影响.方法 采用熏吸香烟加气管内滴注脂多糖建立COPD大鼠模型,用番泻叶浸液10mL·kg-1·d-1灌胃,连续20 d,建立中医肺脾气虚症候.大鼠分为五组,每组8只.D组为模型对照组,不予药物治疗;A、B、C组分别采用中药煎剂0.45、0.9、1.8g·mL-1·d-1灌胃,E组采用地塞米松0.2mg·kg-1·d-1灌胃,连续给药60 d.另取8只大鼠作为空白对照(F)组,不作任何干预.检测六组大鼠肺功能及血浆ROC和NGF水平.结果 与F组比较,D组肺功能相关指标及血浆ROC、NGF水平均降低(P＜0.01).与D组比较,A、B、C、E组肺功能相关指标及血浆ROC、NGF水平均升高(P＜0.01).结论 中药培土生金法能改善COPD大鼠肺功能,上调血浆ROC和NGF水平,改善呼吸肌疲劳,减少呼吸衰竭发生.

摘要： 目的 探讨线粒体转录因子A(TFAM)和细胞色素c氧化酶(COX)途径在肿瘤坏死因子受体相关蛋白1(TRAP1)调节大鼠缺氧心肌细胞能量生成中的作用及机制. 方法 取135只1～3d龄SD大鼠乳鼠,分离培养心肌细胞.(1)取细胞,按随机数字表法(分组方法下同)分为常氧空白对照组、缺氧空白对照组、缺氧+TRAP1过表达对照组、缺氧+TRAP1过表达组,每组1瓶.常氧空白对照组细胞常规培养;缺氧空白对照组细胞常规培养后缺氧6h;缺氧+TRAP1过表达对照组、缺氧+TRAP1过表达组细胞常规培养后,分别加入TRAP1过表达空病毒载体、TRAP1过表达腺病毒载体病毒悬液转染48 h后缺氧6h.蛋白质印迹法检测各组细胞TFAM蛋白表达.(2)取细胞,分为常氧空白对照组、缺氧空白对照组、缺氧+ TRAP1过表达对照组、缺氧+TRAP1过表达组、缺氧+TRAP1过表达+TFAM干扰对照组、缺氧+TRAP1过表达+TFAM干扰组,每组1孔,前4组细胞处理同实验(1)对应组别.缺氧+TRAP1过表达+TFAM干扰对照组、缺氧+TRAP1过表达+TFAM干扰组细胞分别加入TFAM干扰空病毒载体、TFAM干扰腺病毒载体病毒悬液转染48 h,其他处理同缺氧+ TRAP1过表达组.采用ATP检测试剂盒及酶标仪检测细胞内ATP含量,采用COX活性检测试剂盒及酶标仪检测细胞内COX活性.(3)取细胞,分为常氧空白对照组、常氧+叠氮化钠组、缺氧空白对照组、缺氧+叠氮化钠组,每组1孔,常氧空白对照组和缺氧空白对照组细胞处理同实验(1)对应组别.常氧+叠氮化钠组细胞实验前30 min加入32 nmol叠氮化钠,缺氧+叠氮化钠组细胞缺氧前30 min加入32 nmol叠氮化钠后缺氧6h,同前检测ATP含量.以上实验均重复3次.对数据行单因素方差分析、LSD检验. 结果 (1)与常氧空白对照组比较,缺氧空白对照组细胞TFAM蛋白表达量明显下降(P＜0.01).与缺氧空白对照组和缺氧+TRAP1过表达对照组比较,缺氧+TRAP1过表达组细胞TFAM蛋白表达量明显升高(P＜0.01).(2)与常氧空白对照组(0.552±0.041、1.99±0.15)比较,缺氧空白对照组细胞COX活性(0.270±0.044)和ATP含量(1.09±0.11)均明显降低(P＜0.01).与缺氧空白对照组和缺氧+ TRAP1过表达对照组(0.269±0.042、1.17±0.12)比较,缺氧+ TRAP1过表达组和缺氧+TRAP1过表达+TFAM干扰对照组细胞COX活性(0.412 ±0.032、0.404 ±0.016)和ATP含量(1.75±0.06、1.69 ±0.07)均明显升高(P＜0.01).与缺氧+TRAP1过表达组和缺氧+ TRAP1过表达+TFAM干扰对照组比较,缺氧+TRAP1过表达+TFAM干扰组细胞COX活性(0.261 ±0.036)和ATP含量(1.23 ±0.07)均明显降低(P＜0.01).(3)与常氧空白对照组比较,常氧+叠氮化钠组和缺氧空白对照组细胞ATP含量明显降低(P＜0.01).与缺氧空白对照组比较,缺氧+叠氮化钠组细胞ATP含量明显降低(P＜0.01). 结论 TRAP1能够通过上调TFAM表达来提高COX活性,最终减轻缺氧导致的大鼠心肌细胞能量生成受损.

摘要： Cox4是电子传递链上复合体Ⅳ的1个关键亚基,实现Cox4的高效表达以及制备其抗体,对于线粒体功能研究至关重要.根据裂殖酵母序列信息数据库(S.pombe_GeneDB)中cox4的基因序列(登录号:SPAC1296.02)设计引物,以粟酒裂殖酵母的cDNA序列为模板,通过PCR扩增技术得到目标蛋白的基因,然后通过克隆构建到含有T7强启动子的表达载体pET-28a(+)上,并将其转入大肠杆菌BL21(Escherichia coli BL21)中实现重组工程菌株的构建.结果表明,通过一系列条件优化实现了对重组工程菌株中Cox4的高效表达,并纯化得到大量相应蛋白,最后以纯化的蛋白为抗原成功制备了Cox4抗体.Cox4抗体的成功制备为粟酒裂殖酵母中线粒体功能研究奠定了基础.

摘要： 目的 探讨脑还丹对快速老化小鼠SAM-P/8海马神经元细胞色素C氧化酶(Cytochrome c oxidase,COX)活性及COXⅡmRNA和COXⅣmRNA表达和细胞凋亡的影响.方法 SAM-P/8快速老化小鼠随机分为模型组,银可络组,脑还丹高、低剂量组,模型组小鼠予蒸馏水灌胃,银可络组,脑还丹高、低剂量组小鼠分别给予银可络,高、低剂量脑还丹,于治疗105 d,取海马组织,培养海马神经元24h后,检测各组的海马神经元COX活性,COXⅡmRNA和COXⅣmRNA的表达及观察细胞凋亡情况.结果 模型组小鼠COX活性低于银可络组、脑还丹低、高剂量组(P＜0.01),脑还丹高剂量组、银可络组小鼠COX活性高于脑还丹低剂量组(P＜0.01),同时模型组小鼠COXⅡmRNA表达低于脑还丹高剂量组和银可络组(P＜0.01或P＜0.05),银可络组、脑还丹高剂量组小鼠COXⅡmRNA表达高于脑还丹低剂量组(P＜0.01或P＜0.05),COXⅣmRNA表达也取得相似的结果.另外,模型组小鼠海马神经元凋亡较脑还丹高、低剂量组、银可络组增多(P＜0.01),脑还丹低剂量组小鼠的海马神经元凋亡数多于银可络组及脑还丹高剂量组(P＜0.01).结论 脑还丹可能通过提高快速老化小鼠COX活性和促进COXⅡmRNA和COXⅣmRNA表达发挥抗凋亡的作用,疗效随着剂量升高而增加.

摘要： 目的 研究脂多糖(LPS)诱导的脓毒症模型大鼠心肌损伤不同时期线粒体功能的变化.方法 SPF级雄性SD大鼠32只,随机分为对照组和脓毒症组,后者按时间再分为脓毒症6h(LPS-6h)组、12h(LPS-12h)组和24h(LPS-24h)组,每组8只.脓毒症组腹腔注射LPS 10mg/kg建立脓毒症大鼠模型,对照组腹腔注射等体积生理盐水.在诱导脓毒症后6、12h和24h时间点于大鼠心尖采血并剪取心脏,采用全自动化学发光免疫分析仪检测血清超敏肌钙蛋白I(hs-cTnI)水平,Western blotting检测心肌组织半胱天冬酶-3(caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)含量并计算Bcl-2/Bax比值,分光光度法检测心肌ATP含量和细胞色素C氧化酶(COX)活性.结果 各脓毒症组血清hs-cTnI水平与对照组比较均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),以LPS-24h组为最高.LPS-12h组与LPS-24h组心肌细胞caspase-3和Bax表达与对照组比较明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),该效应随LPS作用时间延长而逐渐增强;具有凋亡抑制作用的Bcl-2表达在LPS作用12h和24h后明显低于对照组(P<0.01),以LPS-24h组为最低;LPS-24h组的Bcl-2/Bax比值明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).各脓毒症组ATP含量均明显低于对照组,且随LPS作用时间延长而逐渐降低,LPS-24h组最低;各脓毒症组COX活性与对照组比较均明显降低(P<0.01).结论 脓毒症模型大鼠发生心肌损伤时,随时间进展可能出现线粒体相关凋亡基因的激活和COX活性下降,影响ATP供能,加重心肌损伤.

摘要： 细胞色素c氧化酶(cytochrome c oxidase,COX)是线粒体呼吸链的终端酶,位于线粒体内膜上,是呼吸链中唯一能够将氧还原成水的复合物.人体组织或细胞中90％的氧是通过COX催化处理后被利用的,COX在机体内的氧化代谢和ATP合成中起着重要作用.研究发现,衰老及相关退行性疾病的发生均与COX活性减弱有关.本文从COX结构、亚基缺失、介导氧化损伤、与生物大分子结合等几个方面,综述COX对衰老等疾病的调控作用及相关机制,旨在为对预防或治疗老年性疾病提供参考.

摘要： 本文以细菌细胞色素c氧化酶(CcO)的SDⅡ为研究对象,通过蛋白质工程方法的定点突变技术构建各种突变体蛋白,研究了Trp121残基对SDⅡ结构、性质和功能的影响.并提出可能的影响电子传递的机制.

摘要： 本研究首先建立SD大鼠衰老模型，以运动和热量限制为干预手段，探讨衰老大鼠和青年大鼠心肌和骨骼肌线粒体细胞色素c氧化酶的各亚基之间的比例差异，并探讨在衰老中产生的变化与影响。研究阐明：衰老过程中，coxⅠ和coxⅣ蛋白表达水平明显下降，使得细胞色素c氧化酶的功能出现退化现象，从而影响到线粒体功能，也同样出现线粒体功能的下降；运动和限食能有效的延缓衰老，减少了线粒体功能退化的程度；运动和限食都起到了延缓衰老作用，但并不是叠加的关系；细胞色素c氧化酶各亚基之间变化趋势保持一致，四级结构无变化。

摘要： 本文将前驱体A、B在一定条件下,连接得到目标配体,将它与CoCOAcl2反应,得同双核配合物并对其表征.

摘要： 本文利用中位卟啉与咪唑衍生物合成了一种新细胞色素C氧叱酶模型化合物,期重在还原O2到H2O的过程中避免产生有毒的过氧化合物.

摘要： 细胞癌变与核外的遗传物质即线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)的突变和功能紊乱可能也有关系.细胞色素C氧化酶(cytochrome c oxidase,COX)是控制线粒体呼吸和能量代谢的关键酶.前期通过cDNA微阵列检测,发现胃癌中存在一个EST片段表达缺失或减弱,然后对这一胃癌相关的EST片段(MDSCBC11)所代表的基因进行克隆和表达分析.利用多组织Northern印迹膜杂交、RACE实验方法,确定其全长cDNA序列为822bp;经生物信息学分析,证实其编码的蛋白质与人线粒体的细胞色素C氧化酶-亚基Ⅲ(COX3)同源(相似性为99％),因而将克隆的基因命名为ELCOX3.本文结果提示COX-2蛋白表达下调对于胃癌具有早期预警意义，饰感染可能通过下调COX-2的表达、增加活性氧的生成而促进胃癌的发生。

摘要： 细胞癌变与核外的遗传物质即线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)的突变和功能紊乱可能也有关系.细胞色素C氧化酶(cytochrome c oxidase,COX)是控制线粒体呼吸和能量代谢的关键酶.前期通过cDNA微阵列检测,发现胃癌中存在一个EST片段表达缺失或减弱,然后对这一胃癌相关的EST片段(MDSCBC11)所代表的基因进行克隆和表达分析.利用多组织Northern印迹膜杂交、RACE实验方法,确定其全长cDNA序列为822bp;经生物信息学分析,证实其编码的蛋白质与人线粒体的细胞色素C氧化酶-亚基Ⅲ(COX3)同源(相似性为99％),因而将克隆的基因命名为ELCOX3.本文结果提示COX-2蛋白表达下调对于胃癌具有早期预警意义，饰感染可能通过下调COX-2的表达、增加活性氧的生成而促进胃癌的发生。

摘要： 细胞癌变与核外的遗传物质即线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)的突变和功能紊乱可能也有关系.细胞色素C氧化酶(cytochrome c oxidase,COX)是控制线粒体呼吸和能量代谢的关键酶.前期通过cDNA微阵列检测,发现胃癌中存在一个EST片段表达缺失或减弱,然后对这一胃癌相关的EST片段(MDSCBC11)所代表的基因进行克隆和表达分析.利用多组织Northern印迹膜杂交、RACE实验方法,确定其全长cDNA序列为822bp;经生物信息学分析,证实其编码的蛋白质与人线粒体的细胞色素C氧化酶-亚基Ⅲ(COX3)同源(相似性为99％),因而将克隆的基因命名为ELCOX3.本文结果提示COX-2蛋白表达下调对于胃癌具有早期预警意义，饰感染可能通过下调COX-2的表达、增加活性氧的生成而促进胃癌的发生。

摘要： 重症肌无力(MG)的发病，除了存在乙酰胆碱能运动神经元与骨骼肌之间突触功能性障碍之外，还可能存在着由神经肌肉接头传递障碍或者其它机制所导致的肌细胞线粒体损伤制。本研究通过观察健脾祛湿方对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠模型肌细胞线粒体三磷酸腺苷(ATP)含量及细胞色素C氧化酶(CCO)含量和活性的影响，探讨重症肌无力肌细胞线粒体损伤修复的可能机制，为中西医结合治疗重症肌无力提供新的实验和临床依据。

摘要： 重症肌无力(MG)的发病，除了存在乙酰胆碱能运动神经元与骨骼肌之间突触功能性障碍之外，还可能存在着由神经肌肉接头传递障碍或者其它机制所导致的肌细胞线粒体损伤制。本研究通过观察健脾祛湿方对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠模型肌细胞线粒体三磷酸腺苷(ATP)含量及细胞色素C氧化酶(CCO)含量和活性的影响，探讨重症肌无力肌细胞线粒体损伤修复的可能机制，为中西医结合治疗重症肌无力提供新的实验和临床依据。

摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，具体地说涉及食蟹猴细胞色素P450 3A5基因和食蟹猴NADPH-细胞色素P450氧化还原酶基因、分别含有该两个基因的的重组载体、用载体转化的宿主、以及转化体产生的重组病毒。包括生产具有酶活性的基因表达产物及它们在药物筛选中的应用。

摘要： 本发明涉及一种细胞色素氧化酶突变体及其应用，本发明首次将CYP153A M.aq.中229位置的丙氨酸突变为丝氨酸，利用该突变酶将癸酸转化为10‑羟基癸酸，提高了癸酸的转化率，为10‑羟基癸酸的工业化生产奠定了基础。

摘要： 一种检测细胞色素氧化酶CYP3A4的双光子荧光探针的应用，其属于生物医药技术领域。该特异性探针底物可用于测定生物体系中CYP3A4的酶活性。CYP3A4酶活性测定的流程如下：选择萘酰亚胺4‑位羟化反应为探针反应，通过定量检测单位时间内其羟化代谢产物的生成量来测定各类生物样品中CYP3A4酶的活性。本发明可用于不同种属、不同个体来源生物样本中CYP3A4酶活的定量评估，以及不同来源的动物组织细胞培养液及细胞制备物中CYP3A4活力定量测定，以期实现对重要药物代谢酶CYP3A4处置药物能力的评估。还可用于体外快速筛选CYP3A4的抑制剂，并评估其抑制能力和肿瘤中CYP3A4活性的检测，能够检测斑马鱼中CYP3A4活性，并用以检测CYP3A4在活体层面药药相互作用。

摘要： 本发明公开了一种细胞色素P450BM3氧化酶突变体，所述细胞色素P450BM3氧化酶突变体氧化结构域的氨基酸序列为SEQ ID NO:2。本发明还公开了表达该细胞色素P450BM3氧化酶突变体氧化结构域的重组基因及表达载体。本发明同时还公开了利用该细胞色素P450BM3氧化酶突变体在催化芳香基化合物硝化反应中的应用。本发明提供的细胞色素P450BM3氧化酶突变体可以利用绿色能源H2O2作为氧化剂，从而构建了P450/NaNO2/H2O2催化体系，进而实现P450酶对芳香化合物的高活性的催化硝化。

摘要： 本发明涉及一种细胞色素氧化酶1A1酶检测试剂盒及其使用方法和应用。该试剂盒包括A液、B液、C液、D液、E液和质控标准品，所述A液为100mM磷酸盐缓冲液,B液为1unit/ml葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶；所述C液为0.1～10mM含有式(1)化合物的底物溶液；所述D液为10mM NADP

摘要： 本发明属于基因工程领域，具体涉及一种人细胞色素P450 3A5酶及NADPH-细胞色素P450氧化还原酶共表达体系，其包括宿主酵母，以及定向插入P450氧化还原酶基因和人源P450 3A5基因的双表达载体。本发明所构建的人细胞色素P450 3A5酶及NADPH-细胞色素P450氧化还原酶共表达体系可在酵母中异源表达，此外，还可解决酵母细胞P450氧化还原酶表达水平较低的缺陷，能够保证被转染的细胞同时表达两种蛋白，可大量制备代谢物。

摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，具体地说涉及食蟹猴细胞色素P450 3A5基因和食蟹猴NADPH－细胞色素P450氧化还原酶基因、分别含有该两个基因的的重组载体、用载体转化的宿主、以及转化体产生的重组病毒。包括生产具有酶活性的基因表达产物及它们在药物筛选中的应用。

摘要： 本发明涉及具有核编码的、隐性的、雄性不育表型的植物和与其相关的基因座(gst)，包括负责可育/不育表型且在不育表型中被突变的基因。本发明进一步提供了鉴定与上述特征表达相关的基因型的方法，以及相应的遗传工具，例如杂交探针和寡核苷酸。还描述了根据本发明获得的植物在杂交育种和在生产从可再生原料(例如生物乙醇、生物气和糖基产品)获得的产品中的用途。

摘要： 一种检测细胞色素氧化酶CYP3A的广谱型荧光探针的应用，其属于生物医药技术领域。该特异性探针底物可用于测定生物体系中CYP3A的酶活性。CYP3A酶活性测定的流程如下：选择BN类化合物4‑位羟化反应为探针反应，通过定量检测单位时间内其羟化代谢产物的生成量来测定各类生物样品中CYP3A酶的活性。BN系列探针可同时检测CYP3A4和CYP3A5的活性，是检测CYP3A活性的广谱型探针，由此可以实现CYP3A相关的基于机理抑制剂的高效发现和深入研究。该探针还可用于体外快速筛选CYP3A的可逆及不可逆抑制剂、激活剂及诱导剂，并用以检测CYP3A在活体层面药‑药相互作用。

摘要： 本发明提供一种快速检测斑马鱼线粒体细胞色素氧化酶活力的方法及应用。细胞色素氧化酶(COX)位于真核生物的细胞线粒体上，是氧化磷酸化的重要复合物，其活力高低可以反映线粒体活力状态。本方法基于细胞色素氧化酶催化3,3‑二氨基联苯胺使其氧化形成棕褐色不溶性产物，从而根据颜色的深浅反映COX活力的高低。近些年来，由于斑马鱼发育迅速、产卵量大、饲养简单、胚胎透明等优势，已经成为线粒体相关疾病研究最受欢迎的模式动物之一。本发明相比现有技术，实现了快速、简单、高效地对斑马鱼幼鱼整体进行线粒体COX活力评估，能够十分方便观察遗传或环境因素造成特异性组织线粒体活力改变，且对设备及环境要求低，有利于推广和应用。