细胞存活

摘要： 目的探讨微小RNA(miRNA/miR)-138-5p、Kelch重复蛋白(KLHDC10)在缺氧/复氧(H/R)心肌细胞H9C2中增殖、凋亡的功能及二者的作用关系。方法2018年5月至2019年12月,建立H/RH9C2细胞模型;正常培养的H9C2细胞记为对照组。用miRNA阴性对照(miR-con)、miR-138-5p模拟物(miR-138-5p mimics)、过表达空载体(pcDNA-con)和KLHDC10过表达载体(pcDNA-KLHDC10)不同处理方法处理H/RH9C2细胞。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白质印迹法(Westernblotting)检测细胞中miR-138-5p、KLHDC10、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、活化胱天蛋白酶-3(cleaved-caspase-3)的表达水平;细胞计数试剂盒(CCK-8)法和流式细胞术检测细胞的存活和凋亡;双荧光素酶报告基因实验检测细胞的荧光素酶活性。结果H/R组于对照组,H/RH9C2细胞中miR-138-5p的表达水平明显降低[(0.34±0.03)比(1.00±0.11)],KLHDC10的表达水平明显升高,细胞存活率显著降低[(62.03±6.20)%比(100.04±10.05)%],凋亡率显著升高[(28.16±2.82)%比(7.22±0.72)%],同时下调cyclinD1、上调cleaved-caspase-3的蛋白水平(P<0.05)。过表达miR-138-5p、抑制KLHDC10可明显促进H/R H9C2细胞存活,抑制凋亡,上调cyclinD1、下调cleaved-caspase-3的蛋白水平。miR-138-5p明显抑制野生型KLHDC10的H9C2细胞荧光素酶活性,并负向调控H9C2细胞中KLHDC10蛋白水平;过表达KLHDC10可逆转miR-138-5p对H/RH9C2细胞的存活和凋亡的调控作用。结论miR-138-5p可促进H/RH9C2细胞的存活,抑制凋亡,其机制之一为靶向下调KLHDC10。

摘要： 目的探讨铁调节蛋白2(IRP2)高表达对PC12细胞的细胞活力及铁调节蛋白1(IRP1)表达水平的影响。方法培养具有分泌多巴胺性能的PC12细胞,分别转染Vector空载质粒(Vector组)和携带IRP2基因的质粒(IRP2组)。通过MTT法检测两组细胞的存活率,通过免疫印迹法检测两组细胞中IRP1蛋白的表达情况。结果与Vector组相比,IRP2组细胞存活率显著降低(t=3.97,P<0.01);与Vector组相比,IRP2组IRP1蛋白的表达水平显著升高(t=2.59,P<0.05)。结论IRP2高表达导致PC12细胞存活率降低,同时导致细胞中的IRP1表达升高,但具体生理机制有待进一步研究。

摘要： 目的探讨铁调节蛋白2(IRP2)高表达对1-甲基-4-苯基吡啶阳离子(MPP^(+))损伤的PC12细胞存活率的影响。方法以MPP^(+)诱导PC12细胞损伤,依据对细胞的处理方式不同分为vector组(转染Myc-vector质粒)、IRP2组(转染Myc-IRP2质粒)、vector/MPP^(+)组(转染Myc-vector质粒并以MPP^(+)诱导细胞损伤)和IRP2/MPP^(+)组(转染Myc-IRP2质粒并以MPP^(+)诱导细胞损伤),采用免疫印迹法检测各组细胞中IRP2的表达水平,采用CCK-8测定法检测各组细胞的存活率。结果免疫印迹法检测结果显示,IRP2组和IRP2/MPP^(+)组细胞中IRP2的相对表达量较vector组和vector/MPP^(+)组均明显升高(F=15.38,P<0.05)。CCK-8法检测结果显示,IRP2和MPP^(+)可协同诱导PC12细胞损伤(F_(转染类型*损伤处理)=4.34,P<0.05);各组间细胞存活率比较差异均有显著性(P<0.05)。结论IRP2高表达和MPP^(+)均可致PC12细胞损伤,且IRP2高表达可加剧MPP^(+)对PC12细胞的损伤作用。

摘要： 目的本实验将具有多向分化潜能的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)作为种子细胞,诱导分化为组织工程脂肪,探讨其在脂肪移植中提高脂肪存活率的能力。方法选取健康雄性BALB/c裸鼠30只,随机分为7、14、28 d组,每组10只;选取健康雄性SD大鼠10只,脱椎处死后按照常规方法提取肠系膜、腹股沟处脂肪颗粒。培养hUC-MSCs并进行成脂诱导后混合大鼠脂肪颗粒移植于3组裸鼠左侧腹部筋膜下作为实验侧,将相同剂量的单纯脂肪颗粒移植于右侧腹部筋膜下作为对照侧。移植后对3组裸鼠的移植脂肪进行组织病理学检测,并比较移植脂肪组织的质量维持率。结果7、14及28 d组裸鼠间,实验侧移植脂肪组织质量维持率逐渐降低(F=58.47,P<0.05),对照侧移植脂肪组织质量维持率也逐渐降低(F=225.28,P<0.05);在3组裸鼠中,实验侧移植脂肪组织质量维持率均显著高于对照侧(F=1490.66~2142.95,P<0.05)。结论hUC-MSCs来源的脂肪细胞与天然的脂肪细胞颗粒混合后移植可以有效提高移植后脂肪细胞的存活率。本研究为以hUC-MSCs作为种子细胞的组织工程脂肪在脂肪移植中的应用奠定了实验基础。

摘要： 细胞是生命的基本单位,了解它的过去、现在和未来不仅有助于我们了解正常的发育过程,也对理解疾病的产生和发展至关重要。然而,想要看清细胞的“前世今生”仍然面临很大的技术困难。8月17日,中国科学院深圳先进技术研究院合成生物学研究所研究员陈万泽以共同第一作者身份在国际顶级期刊《自然》杂志上发表长文,介绍了他们研究团队在国际首创的活细胞转录组测序技术(Live-seq),该技术首次让单细胞进行转录测序后,依然能保持细胞存活,首次实现了活细胞全基因表达的连续观测。

摘要： 目前,临床对成分输血的需求越来越大,而无论是制备浓缩红细胞还是单采血小板,均主要采用白细胞滤器.白细胞滤器可使成分血中的绝大部分白细胞被阻隔在滤器内而被清除,并且最终白细胞滤器通常也作为生物垃圾被处理.然而,白细胞滤器中的白细胞是可供基础研究和临床应用的细胞资源,并且逐步获得相关研究者的关注.笔者拟就白细胞滤器中白细胞的回收方法、细胞活性及生物学特点等进行介绍,旨在为促进白细胞滤器中白细胞的再利用,以及白细胞滤器回收所得白细胞的科研和临床应用提供理论基础.

摘要： 目的 分离和鉴定外泌体并将硬脂酞辅酶A去饱和酶1(SCD-1)-小干扰RNA(siRNA)载入外泌体,探究SCD-1-siRNA外泌体对甲状腺未分化癌(ATC)Hth7和人甲状腺癌细胞(FRO)存活的影响.方法 先验证ATC细胞和正常甲状腺细胞中SCD-1表达差异,再从人胚胎肾细胞(HEK293)细胞中分离外泌体并对外泌体的形态结构和ATC细胞摄取情况进行鉴定.通过电穿孔的方式将SCD-1-siRNA载入外泌体完成SCD-1-siRNA外泌体的构建,并分析SCD-1-siRNA外泌体对ATC Hth7和FRO细胞存活的影响.结果 在ATC Hth7和FRO细胞中SCD-1表达明显高于甲状腺滤泡上皮Nthy细胞;成功分离外泌体并构建SCD-1-siRNA外泌体.SCD-1-siRNA外泌体可进入Hth7和FRO细胞,抑制SCD-1表达,抑制细胞存活,促进细胞死亡.结论 SCD-1-siRNA外泌体可抑制ATC细胞的存活,SCD-1-siRNA外泌体可能作为ATC潜在的治疗方案.

摘要： 饥饿应激在哺乳动物新生儿存活、肿瘤微环境及缺血再灌注等一系列生理和病理过程中发挥重要作用。代谢调控对于饥饿条件下细胞及机体维持能量稳态及存活非常关键。蛋白激酶RIPK1是细胞存活与死亡的重要调控因子。1998年,人们发现RIPK1缺失的小鼠会在出生后1~3 d内死亡,但分子机制一直不明确。新生小鼠刚出生后,由于脱离了母体营养的供应,处于严重的饥饿状态。在正常情况下,新生儿会启动细胞自噬等代谢反应以抵御饥饿直到获取新的营养供给。RIPK1缺失小鼠的出生致死表型提示RIPK1对饥饿应激调控至关重要。

摘要： 目的 探讨磷酸酶-张力蛋白同源物(PTEN)和细胞因子信号转导抑制蛋白3(SOCS3)缺失对视神经损伤大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)存活和轴突再生的影响.方法 将Thy1-YFP/PTENF/FSOCS3F/F大鼠作为对照组,玻璃体内注射腺相关病毒(AAV)介导PTEN基因缺失的Thy1-YFP/PTENF/F大鼠为PTEN-/-组;玻璃体内注射AAV介导SOCS3基因缺失的Thy1-YFP/SOCS3 F/F大鼠为SOCS3-/-组;玻璃体内注射AAV介导PTEN基因和SOCS3基因均缺失的Thy1-YFP/PTENF/F SOCS3F/F大鼠为PTEN-/-SOCS3-/-组,每组各20只.HE染色观察各组大鼠视网膜组织病理学形态,免疫荧光染色鉴定各组大鼠RGCs存活情况,流式细胞仪检测各组大鼠RGCs凋亡情况,并对比轴突再生数量;利用Western blot检测各组大鼠RGCs中GFAP和GAP-43的蛋白相对表达水平.结果 对照组大鼠视网膜细胞炎症反应明显,细胞间层次结构混乱、连接差,分散性强;PTEN-/-组和SOCS3-/-组大鼠视网膜整体结构较规则,层次较清晰,炎症反应有所减轻;PTEN-/-SOCS3-/-组大鼠视网膜结构清晰,较规则,细胞之间连接紧密,炎症反应明显减轻.PTEN-/-组和SOCS-/-组大鼠RGCs存活率均显著高于对照组(均为P<0.001).PTEN-/-SOCS3-/-组大鼠RGCs存活率均明显高于PTEN-/-组和SOCS3-/-组(均为P<0.001).PTEN-/-组和SOCS3-/-组大鼠RGCs凋亡率显著低于对照组(均为P<0.001),PTEN-/-SOCS3-/-组大鼠RGCs凋亡率均明显低于PTEN-/-组和SOCS3-/-组(均为P<0.001).PTEN-/-组和SOCS3-/-组大鼠视神经轴突数目均显著多于对照组(均为P<0.001),PTEN-/-SOCS3-/-组大鼠视神经轴突数目均明显多于PTEN-/-组和SOCS3-/-组(均为P<0.001).PTEN-/-组和SOCS3-/-组大鼠RGCs中GFAP和GAP-43蛋白表达均显著低于对照组(均为P<0.001),PTEN-/-SOCS3-/-组大鼠RGCs中GFAP和GAP-43蛋白表达均明显低于PTEN-/-组和SOCS3-/-组(均为P<0.001).结论 PTEN和SOCS3基因缺失与视神经损伤大鼠RGCs存活和轴突再生具有一定的关系,不仅能够促进RGCs的增殖,抑制其凋亡,还能够促进视神经轴突再生,同时敲减PTEN和SOCS3基因最为显著.

摘要： 肿瘤细胞通常处于营养匮乏的微环境中,细胞会产生一系列的适应性反应来维持代谢压力下的存活与增殖.然而长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在这一过程中的调控作用并不清楚.为了探究lncRNA是否参与调控代谢压力下肝癌细胞的存活,转录组测序鉴定出一个受葡萄糖缺乏诱导的lncRNA GIMA(glucose-deprivation induced modulator of ATF4),且GIMA的无糖上调依赖于ATF4的激活.荧光素酶实验(luciferase assay)和染色质免疫共沉淀实验(chromatin immunoprecipitation assay,ChIP)表明GIMA是ATF4的转录靶基因.进一步研究发现,GIMA通过抑制ATF4的表达来促进葡萄糖缺乏条件下肝癌细胞的存活.以上结果暗示了GIMA可能是一个新的肝癌治疗潜在靶点.

摘要： 目的:ADAR1作为RNA编辑酶,能够让双链RNA上的腺苷酸(A)转变为次黄嘌呤(Ⅰ).有研究证实ADAR1在肿瘤组织中表达较正常组织高,而且在造血过程中能够阻止细胞凋亡,这些都提示了ADAR1与人类肿瘤的形成有关.本研究在人宫颈癌细胞系Hela细胞中证明ADAR1通过抑制内源性凋亡途径促细胞存活.rn 方法:本研究利用脂质体转染将ADAR1(Human)shRNA干扰载体瞬时转入Hela细胞中,以shRNA空载体作为对照,在给予化疗药阿霉素(Adramycin,ADR)刺激不同时间点后,提取实验组及对照组Hela细胞的总RNA及细胞总蛋白裂解液,利用RT-PCR、WestemBlot等分子生物学方法进行凋亡相关基因Bcl2及Akt表达的检测.同时检测内源性凋亡相关因子Caspase3、7的活性,并利用MTT实验检测Hela细胞的存活情况.rn 结果:在实验组中Hela细胞ADAR1基因表达明显下调;在给予化疗药刺激后,实验组ADAR1较对照组的表达有明显下调,而且内源性凋亡相关基因Bcl2及Akt的表达也随之下调,凋亡相关因子Caspase3、7的活性明显升高;MTT实验结果显示实验组中Hela细胞的存活率明显低于对照组(P＜ 0.01).rn 结论:上述实验结果在细胞水平证明了ADAR1在人类宫颈癌Hela细胞中通过抑制内源性凋亡途径,促进肿瘤细胞存活.

摘要： 目的：观察腺病毒介导的心肌营养素-1 (Adv-EG FP-CT-1)对大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)神经分化中细胞存活的影响.方法：全骨髓贴壁筛选法分离培养rBMSCs,流式细胞术鉴定细胞表面标记性蛋白.将细胞分为以下4组:对照组、Adv-EGFP(重组腺病毒增强型绿色荧光蛋白)转染组、Adv-EGFP-CT-1转染组及诱导剂组,各转染组分别向培养液中加入对应的腺病毒液,转染复数MOI=200.转然后48h,除对照组外,其他各组均予神经分化诱导,于诱导后5h、24h、48h DAPI染色法观察凋亡细胞核形态;流式细胞术检测细胞的早期凋亡率.于诱导后5h、3d、7d相差显微镜下观察细胞存活情况;台盼蓝染色法检测细胞存活率.结果:诱导处理后，CT-1组及对照组，细胞核大部分为淡蓝色圆形或椭圆形，而空病毒组及诱导剂组细胞核出现染色质聚集、固缩，见较多凋亡细胞核;诱导后各时间点，CT-1组及对照组早期凋亡率较空病毒组及诱导剂组明显减少，差异有统计学意义(P0.05);空病毒组及诱导剂组差异无统计学意义(P>0.05);同时，各组细胞随时间的延长均有凋亡，且差异有统计学意义(P<0.05)。诱导后不同时间点，CT-1组及对照组存活率均高于空病毒组及诱导剂组，差异有统计学意义(P<0.05);不同时间点各组与对照组比较，存活率均低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05);各时间点空病毒组及诱导剂组差异无统计学意义(P<0.05);同时，各组细胞随时间的延长均出现死亡，差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CT-1可以维持旧MSCs神经分化过程中细胞的存活。

摘要： 基因组毒性压力是指将细胞暴露在紫外线、双氧水或DNA烷基化药物下，细胞的基因组DNA将遭到损伤，从而导致DNA修复酶PARP-1的过度激活，PARA-1是依赖于NAD+的DNA修复因子，过度激活将导致细胞内的NAD+被消耗殆尽，使其它依赖于NAD+的酶无法正常发挥作用，继而发生细胞坏死。烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)，又被称为内脏脂肪素(Visfitin)或促B细胞生长因子(PBEF)，是高等哺乳动物细胞内氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)旁路合成途径的限速酶，催化细胞内的烟酰胺(NAM)转变为烟酰胺单核苷酸(NMN)。2007年Yang等报道在细胞面临基因组毒性压力的情况下，Nampt可以通过维持线粒体内的NAD+水平，从而维持线粒体内去乙酰化酶SIRT3与SIRT4的活性，促进细胞存活，成为著名的“线粒体绿洲学说”。但最近有报道指出线粒体内缺乏完整的NAD+合成途径，因此进一步从其它生化角度探索Nampt在基因组毒性压力下促进细胞存活的途径具有重要的意义。

摘要： 恶劣的肿瘤微环境:酸中毒、缺氧、营养缺乏等Warburg效应+缺氧，酸中毒动物及人体研究表明,逆转肿瘤酸性微环境能够抑制肿瘤转移并改善患者预后.酸性微环境对肿瘤细胞的影响细胞存活:凋亡减少,自噬增加;代谢改变:脂肪酸代谢、谷氨酰胺代谢等;细胞侵袭转移能力增强;细胞外基质破坏;免疫抑制.

摘要： 本发明涉及一种高增殖能力、高细胞毒活性、高存活率的CIK细胞制备方法，包括以下步骤：（1）将外周血单个核细胞分选去除CD4+CD25+Treg细胞，得到CIK前期细胞；（2）将CIK前期细胞置于含有100ng/ml PHA、100ng/ml IL-6、10ng/ml PGE2的细胞培养液中培养24小时；（3）转移至经1ug/ml CD3单抗包被的细胞培养瓶中，加入1000U/ml IFN-γ培养48小时；（4）加入1000U/ml IL-2以及100ng/ml IL-1α培养4天；（5）加入1ug/ml胰岛素继续培养7-14天。还提供了相关的CIK细胞及应用、抑制外周血单个核细胞向CD4+CD25+Treg细胞分化的方法及促进CIK细胞增殖的方法。本发明的CIK细胞制备方法设计巧妙，制备得到的肿瘤杀伤细胞-CIK细胞具有较强的增殖能力，较高的毒活性，具有更佳的肿瘤杀伤效率，提高临床疗效，适于大规模推广应用。

摘要： 本发明涉及肝细胞癌(HCC)管理的技术领域，并且更准确地为涉及HCC侵袭性的预后和相关治疗决策。本发明提供基于体外测定和分析含有基因TAF9、RAMP3、HN1、KRT19以及RAN的表达谱的HCC侵袭性的新预测方法。本发明还提供用于HCC侵袭性预后的试剂盒，以及基于所述受试者HCC侵略性的初步预后在受试者中治疗HCC的方法。

摘要： 本发明公开了一种可使细胞长时间存活的细胞冷冻保护液、细胞制剂及制备方法。所述细胞冷冻保护液是包含有人血白蛋白和CryoSure-DEX40冻存液的混合液体。所述细胞制剂包括如前面所述的细胞冷冻保护液和细胞。所述制备方法是，先将CryoSure-DEX40冻存液与人血白蛋白混匀形成如前面所述可使细胞长时间存活的细胞冷冻保护液，再将该细胞冷冻保护液缓慢注入洗涤好的细胞沉淀中，边注入边混匀，最后形成所述细胞制剂。使用本发明的制备方法制备出的细胞制剂经过长时间的冷冻保存或长途运输后，细胞的存活率仍然很高，具有临床级别的应用价值，突破了以往细胞制剂只能现制备现回输的局限性，扩大了细胞制剂使用的地理范围。

摘要： 本发明涉及一种高增殖能力、高细胞毒活性、高存活率的CIK细胞制备方法，包括以下步骤：（1）将外周血单个核细胞分选去除CD4+CD25+Treg细胞，得到CIK前期细胞；（2）将CIK前期细胞置于含有100ng/ml PHA、100ng/ml IL-6、10ng/ml PGE2的细胞培养液中培养24小时；（3）转移至经1ug/ml CD3单抗包被的细胞培养瓶中，加入1000U/ml IFN-γ培养48小时；（4）加入1000U/ml IL-2以及100ng/ml IL-1α培养4天；（5）加入1ug/ml胰岛素继续培养7-14天。还提供了相关的CIK细胞及应用、抑制外周血单个核细胞向CD4+CD25+Treg细胞分化的方法及促进CIK细胞增殖的方法。本发明的CIK细胞制备方法设计巧妙，制备得到的肿瘤杀伤细胞-CIK细胞具有较强的增殖能力，较高的毒活性，具有更佳的肿瘤杀伤效率，提高临床疗效，适于大规模推广应用。

摘要： 本文提供组合疗法的方法、用途和制品，所述组合疗法涉及免疫疗法和细胞疗法以及使用促存活BCL2家族蛋白的抑制剂例如BCL2抑制剂，所述组合疗法用于治疗患有或怀疑患有癌症的受试者，以及相关的方法、用途和制品，所述细胞疗法如过继细胞疗法，例如T细胞疗法。所述T细胞疗法包括表达重组受体如嵌合抗原受体(CAR)的细胞。

摘要： 本发明涉及一种可提高细胞存活率的自体脂肪活性细胞过滤器，包括外部腔体(1)、中隔板(2)、存储罩(3‑3)吸附装置(3)、喷淋装置(4)、离心平台装置(5)、过滤罩升降装置(6)以及流体给排装置。其能够实现集清洗、过滤、干燥与一体，完成脂肪细胞在清洁、封闭的器件内部的清洗、过滤和密封，减少细胞损伤和污染，提高细胞存活率的技术效果。

摘要： 本发明涉及干细胞技术领域，具体的更涉及一种细胞存活率高的人脐带间充质干细胞的冻存方法。一种细胞存活率高的人脐带间充质干细胞的冻存方法，步骤包括：(1)消化和终止消化：将不超过5代的人脐带间充质干细胞酶解消化1～5min，再加入终止液终止消化；(2)洗涤离心：离心弃去上清，加洗涤剂重复洗涤、离心操作2～3次；(3)程序冻存：以1×107/ml细胞密度加入预冷的冻存液，重悬后，吸取1～5m细胞悬液至程序降温仪中进行程序降温冻存。本发明通过在特殊的冻存液的存在下配合适合的冻存步骤后，使细胞冻存前后细胞存活率并未明显降低、存活率在97％以上，除此之外细胞数量仍然保持较高的浓度。

摘要： 本发明涉及生物医药领域，公开了一种抑制巨噬细胞刺激乳腺癌细胞存活的高通量药物筛选系统，包括：1）初步筛选：将巨噬细胞和乳腺癌细胞混合培养，分析药物对受巨噬细胞刺激的乳腺癌细胞活性的抑制作用，得到初筛阳性药物；2）二次筛选：将初筛阳性药物加入到单独培养的巨噬细胞和乳腺癌细胞中，分析判断后，筛得能将TAM从M2表型重新塑造为M1表型或能干扰/阻断乳腺癌细胞与巨噬细胞间信号回路的药物。本发明的筛选系统能够通过单独培养及共同培养小鼠巨噬细胞RAW264.7和小鼠三阴性乳腺癌细胞4T1来筛选将巨噬细胞重塑至M1表型或能干扰/阻断乳腺癌细胞与巨噬细胞间信号回路的药物。

摘要： 本发明涉及生物细胞培育技术领域，且公开了一种生物细胞用提高细胞存活率的细胞培养装置，包括细胞培育装置主体，所述细胞培育装置主体的底部固定安装有电机，所述电机的顶部固定安装有转动轴，所述转动轴的内壁固定安装有推杆，所述转动轴的内部固定安装有定子，所述定子的外壁固定安装有气缸，所述滑板的左侧固定安装有顶块，所述气缸的顶部固定连接有导气管。通过电机带动转动轴转动，借助于转动轴带动试管转动，从而加速生物细胞和细胞生长液两者的混合，同时，转动轴内壁的推杆将会与定子表面气缸上的顶块接触，从而顶块将会被顶入到气缸内部，气缸内部的气体将会被吹入到试管内部，达到了加速细胞和细胞生长液混合。

摘要： 本发明涉及生物医学领域，特别涉及M2型巨噬细胞在制备促进移植胰岛细胞存活的制剂或药物中的应用。本发明通过建立小鼠腹腔透析模型，收集腹腔单个核细胞，在体外培养诱导成2型巨噬细胞(M2)，并且将腹腔调节性巨噬细胞输注到同种异基因胰岛移植后的糖尿病小鼠体内，观察M2对移植的胰岛存活和功能发挥的影响，并且通过体外共培养研究M2促进移植物存活的机理。