纳豆芽孢杆菌

摘要： 以肉骨粉为主要发酵基质,以纳豆菌(Bacillus natto)NT-6作为发酵菌和功能菌进行固态发酵,制备微生物肥料。以菌量为指标,通过单因素试验和响应面设计确定最佳发酵条件,并在此基础上利用盆栽试验探索成品对作物茎基腐病病原菌——立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kühn)的抗性。结果显示,将肉骨粉与麸皮按照7.8∶2.2的质量比混合,设定水分含量58.19%、稻壳添加量0.82 g、发酵时间100 h,菌量最高(2.92×10^(10) CFU·g^(-1))。制得的微生物肥料对番茄种子发芽的促进作用不明显,但可提高番茄的生物量。在染菌园土上,番茄苗因茎基腐病导致的死苗率为55%,施用制得的微生物肥料后,番茄苗因茎基腐病导致的死苗率降至20%。结果说明,用纳豆菌NT-6发酵肉骨肥可以制作微生物肥,应用于番茄上,不仅可提高其生物量,而且对立枯丝核菌也具有明显的抗性。

摘要： 纳豆是由大豆经纳豆芽孢杆菌发酵而成,营养价值丰富,具有多种生理功能。纳豆芽孢杆菌作为益生菌,环境适应能力强,广泛应用于微生态制剂、抗菌剂和水质改良剂等研究领域。文章简述了纳豆起源与制作及其营养保健作用、纳豆芽孢杆菌的生物学特性、多样性及菌株筛选,并展望了纳豆和纳豆芽孢杆菌的应用前景,以期为提高纳豆的大众认知度、推动纳豆产业和充分发挥纳豆芽孢杆菌的作用提供参考。

摘要： 为开发新型海参精深加工产品,以蛋白酶活性为指标,在单因素试验的基础上,采用响应面法对纳豆芽孢杆菌发酵海参的各个工艺条件进行优化。结果表明,纳豆菌发酵海参的最佳工艺条件为海参添加量35%,葡萄糖添加量7.5%,接种量4%,在该条件下测得蛋白酶活性为535.12 U/mL,与理论值522.56 U/mL相近。为新型海参精深加工产品的开发与应用提供科学依据。

摘要： 研究旨在探讨蛋鸡饲粮中添加纳豆芽孢杆菌对蛋鸡产蛋性能、蛋品质以及血清生化指标的影响。选择产蛋均匀的350日龄蛋鸡,对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中分别添加100 g/t和200 g/t纳豆芽孢杆菌,每组4个重复,每个重复8 500只;预试期7 d,正式试验期28 d。结果表明:①与对照组相比,各组产蛋性能、孵化性能及蛋品质无显著差异(P>0.05);②200 g/t组血清白蛋白、低密度脂蛋白胆固醇、脂多糖、钙显著降低(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇显著升高(P<0.05);③试验组血清免疫球蛋白G极显著提高(P<0.01)。综上所述,饲粮中添加200 g/t的纳豆芽孢杆菌对350日龄蛋鸡产蛋、孵化性能有一定的改善,同时可以显著减轻蛋鸡炎症反应的发生并提高免疫水平。

摘要： 以我国云南、贵州、陕西、湖南4个不同产地的豆豉为材料,分离出30株具有不同纳豆激酶酶活的纳豆菌。经复筛获得4株纳豆激酶活性较高的菌株,分别为N2、G1、S3和H3,其纳豆激酶酶活力分别为1926.41U·mL-1、1791.41U·mL-1、2079.65U·mL-1和1616.28U·mL-1,对上述菌株的温度和pH耐受性进行研究,结果显示,N2和S3菌株对温度、pH具有良好的耐受性。

摘要： 利用纳豆芽孢杆菌发酵紫菜,采用单因素试验和正交试验研究发酵温度、发酵转速、发酵时间、氯化钠添加量对纳豆芽孢杆菌液体发酵氨基酸态氮含量和感官评分的影响.结果表明:最优发酵条件为发酵温度35°C、发酵转速200 r·min^(-1)、发酵时间27 h、氯化钠添加量1.0%,在此条件下,纳豆芽孢杆菌发酵紫菜氨基酸态氮含量最高(1.59 g·L^(-1)),感官评分最高(9.02).经过纳豆芽孢杆菌发酵的紫菜蛋白质水解程度更高,利于人体消化吸收,可应用于生产发酵紫菜酱.

摘要： 维生素K2(menaquinone-7,MK-7)是一种人体必不可少的维生素,具有抗凝血、预防骨质疏松及抗肝癌等功能。全反式天然维生素K2(MK-7)的合成主要是由微生物发酵法而得。为了获得高产MK-7且传代稳定的生产菌株,以1株实验室前期分离自纳豆生产MK-7的纳豆芽孢杆菌Bacillus natto ND-1为出发菌株,采用常压室温等离子体(ARTP)诱变技术进行菌株诱变。经过1羟基2萘甲酸(HNA)抗结构类似物的初筛,发酵后比较MK-7浓度来复筛,获得了具有高效生产MK-7且传代稳定的突变株ND-1-A27,MK-7产量达到48.05 mg/L,是原始菌株的1.60倍。在此基础上,对突变株ND-1-A27发酵培养基组分及其培养条件进行了优化,最适发酵工艺为甘油70 g/L、大豆蛋白胨180 g/L、酵母粉30 g/L、K2HPO40.06 g/L、种子液接种量2%、发酵温度40°C、静置培养。在最佳工艺条件下,突变菌株ND-1-A27生产MK-7的产量达到(53.88±2.03)mg/L。

摘要： 为提高纳豆芽孢杆菌对无机硒的生物转化率,通过单因素实验和响应面法对纳豆芽孢杆菌富硒的发酵条件进行优化,对样品进行透析和消化处理,并采用流动注射氢化物-火焰原子吸收光谱法测定有机硒含量,获得最佳有机硒转化率.优化后的发酵条件为:添加亚硒酸钠的同时接入菌株,亚硒酸钠质量浓度为10μg/mL,培养基初始pH为7.5,培养时间为10 h,接种量为3.5％,最佳转化率达到91.21％.各单因素对有机硒转化率影响的大小为:接种量>培养基初始pH值>培养时间.

摘要： γ-聚谷氨酸是一种由微生物发酵产生的具有较强保健功能的生物高分子,在食品、医药、化妆品等行业具有广泛的应用。但因筛选方法效率低下,导致其菌株选育效率难以提高。研究筛选出一株高产γ-PGA(γ-聚谷氨酸)菌株并对其进行形态、生化与分子鉴定发现,该菌株为纳豆枯草芽孢杆菌。根据菌株的产物特征,系统分析了酪蛋白板初筛、多孔板复筛和摇瓶复筛,结果发现三者筛选结果基本一致,且多孔板复筛与酪蛋白平板形成的纳豆菌的圈径比具有线性关联。在此基础上,应用ARTP辐照纳豆菌群,并仅用酪蛋白平板法,快速筛选出一株γ-PGA高产菌株,产量较出发菌株提升了22%,且遗传稳定性良好,表明酪蛋白平板透明圈快筛方法有效,大幅压缩了筛选的时间,显著提升了菌株诱变选育的效率。

摘要： γ-聚谷氨酸是一种由微生物发酵产生的具有较强保健功能的生物高分子,在食品、医药、化妆品等行业具有广泛的应用.但因筛选方法效率低下,导致其菌株选育效率难以提高.研究筛选出一株高产γ-PGA(γ-聚谷氨酸)菌株并对其进行形态、生化与分子鉴定发现,该菌株为纳豆枯草芽孢杆菌.根据菌株的产物特征,系统分析了酪蛋白板初筛、多孔板复筛和摇瓶复筛,结果发现三者筛选结果基本一致,且多孔板复筛与酪蛋白平板形成的纳豆菌的圈径比具有线性关联.在此基础上,应用ARTP辐照纳豆菌群,并仅用酪蛋白平板法,快速筛选出一株γ-PGA高产菌株,产量较出发菌株提升了22％,且遗传稳定性良好,表明酪蛋白平板透明圈快筛方法有效,大幅压缩了筛选的时间,显著提升了菌株诱变选育的效率.

摘要： 纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)是枯草芽孢杆菌的一个亚种,经过发酵后可以得到多种生理活性物质,包括维生素K2,纳豆激酶,生物表面活性剂,生物多糖等.维生素K2(menaquinone,简写为MK,甲萘醌类)是一种具有叶绿醌生物活性的萘醌基团衍生物,具有治疗和预防骨质疏松症,预防肝硬化进展为肝癌,强化肝脏的解毒功能,及治疗维生素K2缺乏性出血症等作用.本研究以实验室菌株纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)BN-2-5-3为出发菌株，研究了发酵过程中维生素K2合成与纳豆激酶酶活之间的关系，并开发了通过分阶段调控pH提升维生素K2及纳豆激酶产量的发酵工艺。采用pH调控发酵过程，纳豆激酶较未优化前产量提高了50%，维生素K2较未优化前产量提高了60%。利用纳豆芽孢杆菌液体发酵联产维生素K2和纳豆激酶，同时提高两种物质产量，有效提高纳豆芽孢杆菌发酵过程中附加值，提高了发酵产率。

摘要： 为了减少舍外粪便污染,研究日粮中纳豆芽孢杆菌对体外猪粪发酵液中氨气、硫化氢、粪臭素及菌群的影响.试验组生猪饲喂纳豆芽孢杆菌日粮,对照组无纳豆芽孢杆菌.猪粪液厌氧发酵,测定指标为氨气、硫化氢、色氨酸、吲哚、吲哚-3-乙酸、粪臭素及发酵液中的微生物.结果为试验组氨气、硫化氢、色氨酸、吲哚-3-乙酸、粪臭素浓度极显著低于对照组(P＜ 0.01),吲哚显著低于对照组(P＜0.05).对照组猪粪发酵液优势菌以芽孢杆菌(CWBI B1434)为主,含量为26％;试验组以非解乳糖链球菌(AF201899)为主,含量为36％,其次为噬淀粉乳酸杆菌,含量为16％.结果表明纳豆芽孢杆菌通过调整猪粪菌群降低臭味物质浓度.为了减少舍外粪便污染,建议猪日粮中添加纳豆芽孢杆菌.

摘要： 本研究目的是通过体外试验验证纳豆芽孢杆菌(BSN)能否耐受荷斯坦奶牛瘤胃及十二指肠环境，并进一步利用瘘管牛投喂BSN试验确定BSN能否在奶牛胃肠道定植，旨在为BSN在奶牛生产中的应用提供理论依据。研究结果表明，BSN不属于荷斯坦奶牛本土微生物，不能再肠胃道定植，为了维持其代谢活性并对奶牛肠胃道微生物产生影响，应在日粮中持续添加。

摘要： 以北京、大连和日本三个产地的纳豆产品为试验材料.从中筛选可用于畜禽生产的纳豆芽孢杆菌蛋白酶高产菌株。先通过酪蛋白平板初筛得到9株芽孢杆菌，再以N1型纳豆芽孢杆茼为模式菌株，对初筛得到的菌株进行菌落和菌体形态观察、生理生化鉴定，确定有5个菌株为纳豆芽孢杆菌。测定5个菌株48h发酵液中蛋白酶活性，结果显示菌株NB1为蛋白酶高产菌株，发酵液中蛋白酶活性为19.41U/mL，产蛋白酶特性在6代内可保持稳定。

摘要： 根据纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)水解酪蛋白和羧甲基纤维素的生物学特性，以菌株NB-1和NR-1为出发菌株，采用稀释涂平板法获得10株初筛纳豆芽孢杆菌，通过测定初筛菌株48h发酵液中蛋白酶活性和纤维素酶活性，确定NY-3产蛋白酶和纤维素酶活性均相对较高。同时对该菌株生长特性进行了研究，结果表明NY-3的最佳接种时间和最佳发酵时间分男q为14h和48h。

摘要： 本试验旨在研究纳豆芽孢杆菌对断奶前犊牛生长状况、生产性能、断奶日龄等指标的影响。选取14头7日龄中国荷斯坦牛公犊,随机分为2个处理组,每组7头犊牛。向所饲喂的牛奶中添加纳豆芽孢杆菌菌液,连续饲喂直到开食料采食量达到规定要求时断奶。结果表明：断奶前犊牛日增重较对照组提高26.5%(P<0.01);开食料的日采食量下降11.9%：与对照组(57d)相比,处理组能够提前断奶(49.7d),且差异显著。

摘要： 本试验旨在研究纳豆芽孢杆菌对犊牛断奶早期、断奶后8周消化道s生长发育的影响。选取24头7日龄中国荷斯坦奶牛公犊,随机分为3个处理组,每组8头犊牛。向所饲喂的牛奶中添加纳豆芽孢杆菌菌液,连续饲喂直到开食料采食量达到规定要求时断奶;断奶后随机选取4头犊牛继续饲养,8周后屠宰,称胴体重。结果表明：Na型纳豆芽孢杆菌能够使断奶早期犊牛瘤网胃重量较对照组提高(P<0.05);与对照组相比,N1型纳豆芽孢杆菌能够使断奶早期及断奶后8周瘤胃的pH值显著下降(P<0.05),使断奶早期犊牛皱胃pH值显著下降(P<0.05);Na型纳豆芽孢杆菌能够使断奶早期及断奶后8周犊牛十二指肠长度发生显著变化：与对照组相比较,断奶后8周处理组犊牛回肠长度小于对照组,且差异显著;此外犊牛饲喂纳豆芽孢杆菌可降低消化道前段食糜的pH值,有些区段可达到显著水平。

摘要： 幼犬日粮中添加0.2‰低聚木糖和2‰纳豆芽孢杆菌，研究其对幼犬血液生化指标和抗氧化能力的影响。结果表明：与对照组相比，添加低聚术糖组总蛋白含量有一定的升高，添加纳豆芽孢杆菌组总蛋白含量降低了6.03%(P>0.05)；球蛋白含量分别提高了42.63％和7.9％(P0.05)，CSH—PX增加了18.97％(P<0.01)和15.49％(P<0.05)。表明幼犬日粮中添加一定量的低聚木糖和纳豆芽孢杆菌能够提高幼犬机体免疫力和抗氧化能力。

摘要： 经硫酸铵沉淀、离子交换色谱、凝胶色谱法和羟磷灰石(HA)亲和色谱法纯化纳豆枯草芽孢杆菌谷氨酸脱氢酶(GDH),得到电泳纯,纯化倍数为34倍,酶回收为率41％,酶活为34.29U/mg.SDS-PAGE和HPLC测定GDH分子量分别为47kDa和264kDa.GDH脱氨反应的最适pH和温度分别是7.5和30°C.分别采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)、苯甲酰甲醛(PG)和苯甲基磺酰氟(PMSF)分别作为赖氨酸、精氨酸和丝氨酸活性位点残基的变性剂,利用化学改性实验测定了GDH的氨基酸活性位点.经浓度为1mM的TNBS、PG和PMSF处理后,GDH酶活分别降至10.7％、83.3％和12.8％.但加入底物保护剂后,三种试剂处理的GDH酶活均没有明显降低.未处理的GDH、分别经TNBS和PMSF处理且活性降低50％的GDH的Km值分别为0.037、0.104和0.017mM,Vmax值分别为0.048、0.022和0.031mM/s.这些结果表明在活性位点中有一个或多个赖氨酸残基,对底物结合至关重要;一个或多个丝氨酸残基对GDH构象稳定性非常重要;但精氨酸对GDH酶活的影响非常小.

摘要： 采用酪蛋白平板和羧甲基纤维素钠(CMC-Na)平板初筛法，分别从北京、大连、日本三个产地的纳豆食品中分离筛选到10株产蛋白酶菌株(NY-1～NY-10)和10株产纤维素酶菌株(NS-1～NS-10)。经酶活力测定NY-1为蛋白酶活力最高菌株，NS-1为纤维素酶活力最高菌株。通过2株菌的生长曲线、芽孢形成曲线、产酶动态变化曲线和酶活力传代稳定性试验，得出NY-1的最佳种龄为16h，最佳芽孢收获时间为28h，芽孢量的对数值为6.92±0.047、蛋白酶产酶高峰时间为18h，酶活力为44.12±1.48U/mL，；NS-1的最佳种龄为14h,最佳芽孢收获时间为28h，芽孢量的对数值为8.41±0.0060，纤维素酶产酶高峰时间为40h，酶活力为60.94±1.22U/mL，蛋白酶和纤维素酶酶活力在7代内保持稳定。

摘要： 本发明公开了一种纳豆芽孢杆菌和暹罗芽孢杆菌原生质体融合的方法，包括如下步骤：两亲株原生质体的制备、菌体的筛选标记、原生质体融合。本发明优化了原生质体制备过程中溶菌酶浓度和酶解时间，以提高原生质体形成率和再生率；并通过采用PEG法与电击法相结合的方法来进行原生质体的融合，优化了PEG的浓度、PEG处理的温度和时间、电击融合的条件和时间等，提高了种间芽孢杆菌原生质体融合率，得到的融合子经过筛选，最终得到高产抗菌脂肽的融合菌株，能广泛应用于生物制药、农业、畜牧业等行业。

摘要： 本发明提供了一种利用纳豆芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌制备复合饲料添加剂的工艺。其固体培养基的各组份重量份为：麸皮26-38，秸秆10-20，豆饼粉22-30，尿素0.1-0.3，硫酸镁0.2-0.4，氯化钴0.01-0.05，氯化锌0.01-0.05，氯化硒0.01-0.05，CaCO

摘要： 本发明公开了一种纳豆芽孢杆菌和暹罗芽孢杆菌原生质体融合的方法，包括如下步骤：两亲株原生质体的制备、菌体的筛选标记、原生质体融合。本发明优化了原生质体制备过程中溶菌酶浓度和酶解时间，以提高原生质体形成率和再生率；并通过采用PEG法与电击法相结合的方法来进行原生质体的融合，优化了PEG的浓度、PEG处理的温度和时间、电击融合的条件和时间等，提高了种间芽孢杆菌原生质体融合率，得到的融合子经过筛选，最终得到高产抗菌脂肽的融合菌株，能广泛应用于生物制药、农业、畜牧业等行业。

摘要： 本发明公开了一种纳豆芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌固态微生态制备方法，它包括三大步骤，液体菌液的培养、固体基料的配制、固体基料与液体菌液的混匀，具体步骤为：把固体基料与液体菌液按重量百分比为1：1的比例混合，搅拌均匀后装盘，入无菌培养室，恒温40°C，通风，浅盘发酵36小时，可见浅盘表面和内层均长满白色菌体，提高温度至60°C，加大风量，干燥出料，测得活菌浓度1×109cfu/g，粉碎分装，即得产品。本发明的制备工艺简单并易于控制，不易染杂菌，菌株浓度高，后加工成本低，生产环境友好。

摘要： 本发明提供了一种利用纳豆芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌制备复合饲料添加剂的工艺。其固体培养基的各组份重量份为：麸皮26-38，秸秆10-20，豆饼粉22-30，尿素0.1-0.3，硫酸镁0.2-0.4，氯化钴0.01-0.05，氯化锌0.01-0.05，氯化硒0.01-0.05，CaCO

摘要： 本发明公开了一种选育纳豆芽孢杆菌与干酪乳杆菌共发酵制备富含纳豆激酶和吡咯喹啉醌的酸奶的方法，包括：将产纳豆激酶兼吡咯喹啉醌的纳豆芽孢杆菌10261和10263分别进行亚硝基胍诱变，然后混合二者诱变后代，进行细胞融合传代培养，高通量筛选得到高产纳豆激酶兼吡咯喹啉醌的纳豆芽孢杆菌；将干酪乳杆菌进行亚硝基胍诱变，从中筛选出甲硫氨酸营养缺陷型的干酪乳杆菌；将筛选出的纳豆芽孢杆菌和干酪乳杆菌共发酵鲜牛奶，得到富含纳豆激酶和吡咯喹啉醌的酸奶。本发明得到的富含纳豆激酶和吡咯喹啉醌的酸奶中，吡咯喹啉醌含量达到137-149ng/mL，纳豆激酶活力达到1935-2100U/mL。

摘要： 本发明公开了一种选育纳豆芽孢杆菌与干酪乳杆菌共发酵制备富含吡咯喹啉醌和纳豆激酶的薏米汁的方法，包括：将产纳豆激酶兼吡咯喹啉醌的纳豆芽孢杆菌10261和10263分别进行亚硝基胍诱变，然后混合二者诱变后代，进行细胞融合传代培养，高通量筛选得到高产纳豆激酶兼吡咯喹啉醌的纳豆芽孢杆菌；将干酪乳杆菌进行亚硝基胍诱变，从中筛选出甲硫氨酸营养缺陷型的干酪乳杆菌；将筛选出的纳豆芽孢杆菌和干酪乳杆菌共发酵薏米汁，得到富含纳豆激酶和吡咯喹啉醌的薏米汁。本发明得到的富含纳豆激酶和吡咯喹啉醌的薏米汁中，吡咯喹啉醌含量达到80-101ng/mL，纳豆激酶活力达到528-716U/mL。

摘要： 本发明公开了一种选育纳豆芽孢杆菌与干酪乳杆菌共发酵制备富含纳豆激酶和吡咯喹啉醌的玉米汁的方法，包括：将产纳豆激酶兼吡咯喹啉醌的纳豆芽孢杆菌10261和10263分别进行亚硝基胍诱变，然后混合二者诱变后代，进行细胞融合传代培养，高通量筛选得到高产纳豆激酶兼吡咯喹啉醌的纳豆芽孢杆菌；将干酪乳杆菌进行亚硝基胍诱变，从中筛选出甲硫氨酸营养缺陷型的干酪乳杆菌；将筛选出的纳豆芽孢杆菌和干酪乳杆菌共发酵玉米汁，得到富含纳豆激酶和吡咯喹啉醌的玉米汁。本发明得到的富含纳豆激酶和吡咯喹啉醌的玉米汁中，吡咯喹啉醌含量达到61-88ng/mL，纳豆激酶活力达到737-1113U/mL。

摘要： 本发明公开了一种选育纳豆芽孢杆菌与干酪乳杆菌共发酵制备富含纳豆激酶和吡咯喹啉醌的发酵羊乳的方法，包括：将产纳豆激酶兼吡咯喹啉醌的纳豆芽孢杆菌10261和10263分别进行亚硝基胍诱变，然后混合二者诱变后代，进行细胞融合传代培养，高通量筛选得到高产纳豆激酶兼吡咯喹啉醌的纳豆芽孢杆菌；将干酪乳杆菌进行亚硝基胍诱变，从中筛选出甲硫氨酸营养缺陷型的干酪乳杆菌；将筛选出的纳豆芽孢杆菌和干酪乳杆菌共发酵鲜羊乳，得到富含纳豆激酶和吡咯喹啉醌的发酵羊乳。本发明得到的富含纳豆激酶和吡咯喹啉醌的发酵羊乳中，吡咯喹啉醌含量达到100-134ng/mL，纳豆激酶活力达到1725-1900U/mL。

摘要： 本发明公开了一种纳豆芽孢杆菌，纳豆芽孢杆菌为纳豆芽孢杆菌(Bacillusnatto)PZBn03，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.21541，保藏时间为2020年12月23日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，分类命名为纳豆芽孢杆菌Bacillusnatto；以该纳豆芽孢杆菌制备具有溶栓效果的高活性纳豆激酶，过程包括：以纳豆芽孢杆菌对大豆进行发酵，待大豆成拉丝状，以清水对大豆进行清洗，收集清洗液；向清洗液中加入麦芽糊精，搅拌至麦芽糊精溶解，冻干，得纳豆激酶；纳豆芽孢杆菌制备纳豆激酶，提高了纳豆激酶的活性。