纯合子

摘要： Gitelman综合征(gitelman syndrome,GS)是一种常染色体隐性遗传性肾小管疾病,家族性发病多见,少数为散发性,患病率大约为1/40000~50000。临床上以低钾代谢性碱中毒、低镁血症、低尿钙为主要临床表现。本文就我院收治的1例Gitelman综合征患者临床资料回顾,并通过该家系SLC12A3基因分析探讨其基因变异类型,现报告如下。

摘要： 目的研究安徽合肥地区原发性高血压(essential hypertension,EH)与血管紧张素转化酶(angiotensinconverting enzyme,ACE)基因多态性的关系,分析年龄、性别、吸烟、饮酒、饮食、家族史等因素对EH的影响。方法选择2022年3月至2022年5月安徽中医药大学第一附属医院心内科就诊的EH患者400例作为EH组,同期健康体检者100例作为对照组,采用多重高温连接酶检测反应(improved multiple ligase detection reaction,imLDR)技术检测ACE基因rs12709426多态性;利用问卷调查表采集患者一般情况及各项影响因素,采用全自动生化分析仪检测相关指标。结果ACE基因rs12709426只有纯合子AA基因型,无基因位点多态性;EH组基因型多态性频率与对照组比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0,P>0.999)。两组人群饮酒、饮食、家族史、体质量指数(body mass index,BMI)、谷氨酸(glutamate,GLU)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterin,LDL⁃C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterin,HDL⁃C)等因素比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论安徽合肥地区EH患者ACE基因rs12709426只有纯合子AA基因型,与EH发病无明显相关性;饮酒、饮食、家族史、BMI、GLU、LDL⁃C、HDL⁃C与EH发病具有明显相关性。

摘要： 目的 探讨分层应变技术评估纯合子型家族性高胆固醇血症(HoFH)发生主动脉瓣上狭窄(SVAS)患者左心室功能的价值.方法 入选确诊的HoFH患者57例,根据超声结果将其分为SVAS组(25例)和非SVAS组(32例).采用EchoPAC软件获得左心室心内膜层整体纵向应变(GLSendo)、中层心肌整体纵向应变(GLSmyo)和心外膜层整体纵向应变(GLSepi)等指标进行统计学分析.分析两组患者心肌分层应变参数的变化.结果 SVAS 组及非 SVAS 组 GLSendo、GLSmyo、GLSepi 呈梯度递减(P＜0.05);SVAS 组 GLSendo、GLSmyo及 GLSe-pi 显著低于非 SVAS 组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 心肌分层应变可早期准确评估HoFH患者发生SVAS左心室功能变化.

摘要： Evinacumab是血管生成素样3(ANGPTL3)重组人单克隆抗体抑制剂.2021年2月11日美国食品药品管理局批准Evinacumab(商品名Evkeeza)用于治疗12岁及以上儿童和成人纯合子家族性高胆固醇血症(HoFH).Evinacumab可显著降低HoFH患者的血脂水平,且不依赖低密度脂蛋白受体的活性.本文从药理作用及作用机制、药物代谢动力学、临床疗效评价、安全性评价、用法用量、药物相互作用等方面对Evinacumab进行综述.

摘要： 为了在体外获得表达量高、储存容易、成本低且免疫活性高的H9N2亚型HA蛋白,利用水稻胚乳表达系统表达HA蛋白.首先,将HA基因根据水稻偏好密码子进行优化,合成到pUC57载体上,通过双酶切、连接将HA基因先后构建到中间载体pMP3和植物表达载体pCAMBIA1300上;再通过电极法将pCAMBIA1300-HA导入到根癌农杆菌EHA105中;然后用农杆菌侵染TP309水稻愈伤组织;最后经潮霉素筛选、分化、生根、移栽至田间种植.利用CTAB法提取叶片基因组DNA,PCR鉴定T0阳性植株;利用Dot Blot和Western Blot检测HA蛋白在水稻胚乳中的表达;提取阳性的T1叶片DNA,通过荧光定量PCR方法筛选纯合植株;利用温汤杀雄剪颖授粉法,将含有HA蛋白的TP309与低谷蛋白水稻杂交;利用Western Blot检测杂交后的T3植株蛋白表达量;利用双抗夹心ELISA方法比较水稻源和昆虫表达HA蛋白的活性.结果显示,成功构建了中间载体pMP3-HA和植物表达载体pCAMBIA1300-HA,且pCAMBIA1300-HA成功导入到根癌农杆菌EHA105中;PCR检测到有66株植株的HA基因成功整合到水稻基因组;Dot Blot和Western Blot检测结果表明,HA蛋白在水稻胚乳中成功表达;利用荧光定量PCR方法,107株T1中筛选到31株纯合植株;Western Blot检测结果表明,杂交后的HA蛋白表达量大幅度提高;双抗夹心ELISA结果证实,水稻胚乳表达的HA蛋白的活性高于杆状病毒-昆虫细胞.

摘要： 本文对1例短肋-胸廓发育不良3型(SRTD3)进行遗传学分析,以了解其临床及基因突变特点.该患者超声提示为短肋、胸廓狭小、长骨短小的胎儿,采集胎儿脐带和父母外周血进行外显子组测序,Sanger验证.全外显子测序检测出胎儿为DYNC2H1基因纯合突变,为c.4267C>T(p.Arg1423Cys),基因及表型均符合SRTD3的诊断,通过Sanger验证,均遗传于表型正常父母亲.该研究结果提示了DYNC2H1基因的c.4267C>T纯合突变是导致该SRTD3病例的致病原因,属于隐性遗传,孕前应加强优生优育门诊咨询,必要时采用辅助生殖获得健康后代.

摘要： 生物学中许多遗传计算、分析题对学生来说存在一定的难度,但如果能巧妙应用数学的思维方法和解题方法,那么很多题目便可以迎刃而解,既可以提高解题的速度和准确率,还可以深化学生对知识的理解。1.用数学归纳法证明自由交配淘汰隐性个体的公式【例1】基因型为Aa的个体,随机交配n代,每一代淘汰其中的隐性个体。

摘要： 目的:研究载脂蛋白E基因携带及其剂量对脑皮层厚度变化的影响.方法:研究对象包含44个不携带ApoEε4等位基因,32个ApoEε4杂合子和27个ApoEε4纯合子中年受试者.Freesuffer软件将每个对象的左右脑分别分割为35个感兴趣区域并获取皮层厚度.结果:在ApoEε4等位基因携带者和非携带者间,多个脑区存在显著的皮层厚度差异.同时,其中的部分脑区与认知能力和ApoE ε4等位基因遗传剂量间存在显著相关.结论:MRI是一个对早期AD病理脑结构重组敏感的检测工具.

摘要： 目的：对突变卷毛大鼠的表型特征及遗传方式进行研究。方法：察卷毛突变大鼠的表型,并通过遗传测交实验测定其遗传规律。结果：突变卷毛大鼠的被毛和触须卷曲,而且,纯合子被毛受累比杂合子更严重,通常大约在4周后开始出现短暂的脱毛现象,几乎变为全身无毛,然后被毛重新生长,但毛发稀疏。突变大鼠的卷毛性状呈半显性遗传,由常染色体上单一显性基因控制。结论：卷毛大鼠表型特征明确,遗传方式清楚,将是一种较有价值的动物模型。

摘要： 本发明公开了一种IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠的扩繁方法及其应用，所述扩繁方法为先将购买的IFN–γ基因缺陷杂合子交配，再将其子代中的纯合子和杂合子进行交配，再将子代中的雄性和雌性纯合子交配即可获得大量IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠，实现IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠的扩繁，同时获得的IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠较直接购买的IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠体质正常，可更好用于隐孢子虫体外感染模型建立，极低剂量即可造成快速、慢性感染，且过程中小鼠死亡率低，可以满足隐孢子虫感染需要较长研究周期的要求。而且扩繁后获得的FN–γ基因缺陷纯合子小鼠可再直接纯纯交配产后代，实现大量扩繁，无需再经过复杂的纯杂交配。

摘要： 本发明提供了一种诱导Epoa基因敲除斑马鱼胚胎纯合子血红蛋白表型的方法，该方法通过对Epoa基因敲除斑马鱼胚胎纯合子的Epob基因进行基因沉寂来诱导Epoa基因敲除斑马鱼胚胎纯合子血红蛋白表型。本发明的方法提出了通过对Epob基因进行基因沉寂来诱导Epoa基因敲除斑马鱼胚胎纯合子血红蛋白表型，该方法操作简单，诱导效果稳定、明显。在本发明的方法过程中还能够对单一斑马鱼胚胎同时实现基因测序及RT‑PCR测定。

摘要： 本发明公开了一种不同斑纹品种混精杂交筛选转基因家蚕纯合子的方法，采用标记基因筛选、雄蛾测交、雌蛾混精杂交相结合的方法进行转基因家蚕纯合品系的筛选。该法无须任何的分子生物学实验，操作技术要求低，可快捷、高效的筛选出双亲均为转基因纯合子的后代进行留种继代，保证外源基因在宿主基因组上的纯合性，缩短了获得基因型纯合的转基因家蚕所需的时间与成本，而且单拷贝和多拷贝整合的转基因家蚕品种均适用，可广泛应用于转基因家蚕遗传分析及品种培育研究，为该转基因家蚕品种的研究与开发奠定坚实基础。

摘要： 本发明公开了一种鉴定呼伦贝尔短尾羊纯合子、杂合子的特异性引物、探针及试剂盒，并提供了一种基于非标记探针高分辨率熔解曲线的呼伦贝尔短尾羊群体中纯合子、杂合子个体的鉴定方法。通过设计的非标记探针放大了纯合子和杂合子之间熔解曲线Tm值信号差异，取代传统测序，作为呼伦贝尔短尾羊基因分型的手段之一。本发明的鉴定方法操作简便，反应时间短，具有极高的灵敏性和特异性，可检测出呼伦贝尔羊群体中纯合子、杂合子个体。

摘要： 本发明公开了一种呼伦贝尔短尾羊纯合子、杂合子的鉴定引物、探针、试剂盒，并提供了一种基于该引物及探针的鉴别呼伦贝尔短尾羊纯合子和杂合子的方法。所述方法包括如下步骤：(1)提取呼伦贝尔短尾羊血液基因组DNA并稀释；(2) 对步骤(1)获得的DNA进行taqman SNP荧光探针qPCR；（3）产物检测。通过taqman SNP荧光探针qPCR，能够快速分辨出呼伦贝尔短尾羊纯合子与杂合子。本发明作为呼伦贝尔短尾羊基因分型的手段之一，鉴定方法操作简便，重复性好，反应时间短，具有极高的灵敏性和特异性。

摘要： 一种斑马鱼LGP2基因敲除纯合子制备方法，是先确定斑马鱼LGP2基因敲除gRNA靶位点，根据该靶位点设计引物LGP2‑1F/R；再利用设计的引物获得gRNA片段；然后将zCas9mRNA和gRNA混合导入野生型斑马鱼，培养获得稳定遗传的LGP2基因敲除纯合子斑马鱼。如此，能成功构建针对斑马鱼LGP2及其同源基因的敲除纯合子，可以获得LGP2功能完全丢失的斑马鱼活体，为鱼类LGP2功能的系统深入研究提供可用模型。

摘要： 本发明提供了一种提高猪纯合子获得率的显微注射方法，包括以下步骤：分别在猪孤雌胚胎的单细胞时期和二细胞时期通过显微注射基因编辑体系对靶标基因进行编辑，获得靶标基因编辑猪孤雌胚胎；进而将猪孤雌胚胎进行体外培养，5‑6天后获得高效的靶向基因修饰的纯合子猪孤雌囊胚。本发明在单细胞注射一次的基础上，再加入一次二细胞期注射，可显著提高猪孤雌胚胎注射后的编辑效率，而且纯合子的获得率也有明显提升。

摘要： 本发明公开了一种IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠的扩繁方法及其应用，所述扩繁方法为先将购买的IFN–γ基因缺陷杂合子交配，再将其子代中的纯合子和杂合子进行交配，再将子代中的雄性和雌性纯合子交配即可获得大量IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠，实现IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠的扩繁，同时获得的IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠较直接购买的IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠体质正常，可更好用于隐孢子虫体外感染模型建立，极低剂量即可造成快速、慢性感染，且过程中小鼠死亡率低，可以满足隐孢子虫感染需要较长研究周期的要求。而且扩繁后获得的FN–γ基因缺陷纯合子小鼠可再直接纯纯交配产后代，实现大量扩繁，无需再经过复杂的纯杂交配。

摘要： 本发明公开一种检测人类MIF基因CATT重复序列纯合子的试剂盒及步骤，该试剂盒由探针结合预混液、酶促反应预混液、信号放大预混液、纯合子阳性对照品、阴性对照以及标准品组成。本发明含有MIF基因CATT5重复特异性结合环锁探针的探针结合预混液、酶促反应预混液、信号检测预混液、阴性标准品和阳性标准品，通过环锁探针结合、酶促反应、等温扩增信号放大，可区分MIF基因CATT五段重复序列纯合子和非CATT五段重复序列杂合子，为精神分裂症患者治疗方案的用药选择提供了个性化的指导设计不依赖昂贵仪器、繁琐操作的快速检测试剂盒，避免非典型抗精神病药物用药副作用发生，首次实现精神疾病的个性化用药和精准快速床旁检测POCT。

摘要： 本发提供了基于HLA纯合子来源的通用型CAR‑T细胞的制备方法。本发明通过收集常见型别纯合子PBMC，构建不同HLA‑A/B型别纯合子PBMC细胞库或诱导生成iPSC细胞库。在此基础上根据病人HLA型别进一步诱导相应PBMC或iPSC到成熟T细胞,并敲除TCR并表达CAR结构，给予这种通用型CAR‑T就可以做到完全克服免疫排斥的问题。本发明在CAR结构中加入了Suicide分子开关元件，保证了临床使用安全性，可以有效的终止细胞因子风暴等不良反应。同时该方案只通过一步CRISPR/Cas9达到插入CAR并沉默TCR的目的，并且省去了敲除MHC‑I类分子的步骤，就能够避免宿主对CAR‑T的排斥，比已有的常规方法步骤更省更方便。