粪菌移植

摘要： 非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是最常见的慢性肝脏疾病,其疾病谱主要包括非酒精性肝脂肪变、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝硬化及肝细胞癌(HCC)。近年研究揭示肠-肝轴与NAFLD发生、发展相关,运动、饮食、微生态制剂、抗生素、粪菌移植、噬菌体等干预措施均可以通过改变肠道菌群缓解NAFLD。本文综述了肠道菌群与NAFLD的关系和作用机制及以调整肠道菌群为NAFLD治疗靶点的研究进展,发现肠道菌群与NAFLD密切相关,调控肠道菌群可作为NAFLD治疗的新靶点,将为临床医师治疗NAFLD提供新的思路和参考。

摘要： 本研究旨在探讨低聚木糖(xylooligosaccharides,XOS)对慢性腹泻的改善作用。基于随机平行对照实验原则,将临床慢性腹泻患者随机分为3组:安慰剂组(CK组,每天3 g麦芽糊精)、低剂量组(3X组,每天3 g XOS)和高剂量组(6X组,每天6 g XOS);干预4周后,记录患者腹泻症状评分,测定患者血清生化指标、粪便中短链脂肪酸和肠道菌群的变化。随后用3组干预后患者粪菌液分别灌胃3组小鼠,连续灌胃24 d,测定其肠道通透性及炎症因子水平。结果表明,与安慰剂组相比,XOS干预患者4周后,患者腹泻症状和脂代谢有改善趋势,粪便中丁酸含量提高。与干预前相比,XOS干预患者粪便中Blautia、Bifidobacterium、Lachnospiraceae_unclassified等物种相对丰度增加,Prevotella等菌属相对丰度下降。与灌胃安慰剂组患者粪菌液的小鼠相比,灌胃XOS干预组患者粪菌液的小鼠肠道屏障趋于稳定状态,结肠炎症显著缓解,肠道通透性相关指标明显改善,血清中D-乳酸水平显著降低(P<0.05、P<0.01),闭锁小带蛋白(zonula occludens-1,ZO-1)和紧密连接蛋白Occludin表达量增加。综上,XOS在慢性腹泻的改善中发挥了较好的效果,具有潜在缓解慢性腹泻的作用。

摘要： 目的:探讨粪菌移植(FMT)治疗轻中度溃疡性结肠炎的临床疗效。方法:回顾性分析2019年8月~2020年8月在弋矶山医院采用单次FMT治疗轻中度溃疡性结肠炎的患者8例,对比治疗前与治疗8周后的相关临床指标。结果:患者FMT治疗后CRP、ESR、排便次数、改良Mayo评分均较治疗前改善,差异有统计学意义(P0.05)。结论:本研究结果提示FMT治疗轻中度溃疡性结肠炎临床有效,但仍需进一步扩大样本量予以临床验证。

摘要： 功能性便秘(FC)是消化系统的常见疾病之一,主要表现为排便困难、排便次数减少及大便干结等,但内镜下肉眼及病理结果提示无肠道器质性病变,且要求不符合便秘型肠易激综合征(IBS)的诊断标准。证据表明,肠道菌群紊乱在FC的发生发展中起重要作用^([1]),传统治疗手段对临床症状有缓解作用,但不能从病因上根除^([2])。粪菌移植(FMT)是将正常人的功能菌群植入患者的肠道中,重建正常的肠道菌群^([3])。

摘要： 肠道菌群与慢性乙型肝炎(CHB)存在密切关系。近年研究表明,肠道菌群的失调与CHB病情的发生、发展及预后有关,且随着疾病的进展,肠道菌群环境也可能发生变化,二者相互影响,相互作用。本文综述了肠道菌群影响CHB及其相关肝病的病情发展和菌群的调节在CHB及其相关肝病诊治中的作用,以期为CHB的临床治疗提供新思路。

摘要： 肠道菌群是人体的重要“器官”。工业化世界的发展加速了对肠道菌群研究从“传统结构”向“工业结构”的转变,而纠正肠道微生态失衡已成为解决重大慢性非传染性疾病传播难题的核心策略之一。然而,目前开发的靶向调节肠道菌群结构与功能的传统微生态疗法,如益生元疗法、益生菌疗法和粪菌移植疗法,只有少数被用于临床多发难治性重大慢病的防治,且出现了可控性差、菌群遗传背景不清晰等安全问题。合成生物学技术手段的迭代发展推动了新型微生态药物的研发,成为对重大慢病进行精准识别和精准施策的关键。本文首先以消化系统疾病、代谢性疾病和精神疾病等重大慢性疾病的干预和治疗为切入点,回顾了基于合成生物学方法设计构建工程益生菌的研究进展,并对以工程益生菌为核心的微生态疗法在上述重大慢病中的应用进行了综述。同时,考虑到单一工程益生菌的负荷和抗干扰能力等问题,本文还提出了利用工程益生菌构建人工合成肠道菌群开发新一代微生态疗法的设想,分析了这一过程所面临的机遇与挑战,旨在为工程益生菌和人工合成肠道群落基础研究和临床应用的双向转化提供借鉴,从而推动新型微生态药物的研发。

摘要： 近年来,慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)越来越成为全球性的公共健康问题,在中国乃至全世界范围内的疾病负担逐渐加重。现代很多研究证实,肠道菌群失调与很多疾病都存在相关性,肠道菌群失调与慢性肾脏病的关系也成为研究的热点。CKD患者由于尿毒症毒素在体内的蓄积,改变了肠道菌群的结构和组成,破坏了肠道上皮的屏障功能,激活了肠道的免疫调节功能,使得细菌和毒素等有害物质入血,诱导全身性的病变,最终损害肾脏,形成恶性循环。而益生菌等微生态制剂、粪菌移植、中医药等干预手段通过稳定肠道菌群,修复肠道上皮黏膜的屏障功能,减少肠源性尿毒素的蓄积,延缓CKD进展,发挥肾脏保护的作用。因此,调节肠道菌群紊乱可能作为防治CKD的新靶点。

摘要： 脓毒症患者肠道菌群失调导致肠道菌群代谢产物短链脂肪酸减少。而正常水平的短链脂肪酸可以影响全身免疫稳态并增强病原体清除。因此,调节短链脂肪酸恢复免疫稳态是脓毒症患者重要治疗方法。近年来,粪菌移植、短链脂肪酸制剂等成为调节脓毒症短链脂肪酸水平的新型疗法。本文重点讨论短链脂肪酸通过抑制组蛋白去乙酰化酶、激活G蛋白偶联受体及激活芳香烃受体来维持肠道免疫,探索短链脂肪酸基于微生物组治疗脓毒症的研究进展。

摘要： 背景溃疡性结肠炎被世界卫生组织列为现代难治性疾病之一。目前治疗技术均有相应的不足之处,粪菌移植(FMT)治疗溃疡性结肠炎的有效性已被证实,但疗效参差不齐。目的比较FMT治疗小鼠普通型溃疡性结肠炎模型(CUCM)与湿热型溃疡性结肠炎模型(DUCM)的效果及FMT(新金汁)的中药性味。方法于2019年12月9—28日,将35只雄性SPF级C57BL/6小鼠分为7组,分别为正常对照组(Control组)、CUCM组、CUCM+FMT组、CUCM+5-氨基水杨酸(5-ASA)组、DUCM组、DUCM+FMT组、DUCM+5-ASA组,每组各5只小鼠。Control组不做任何干预处理;CUCM组和DUCM组根据造模需求分别制备模型;CUCM+FMT组和DUCM+FMT组于造模成功后,给予制备的粪菌液0.2 ml对小鼠进行灌肠;CUCM+5-ASA组和DUCM+5-ASA组于造模成功后,给予0.0195 g/ml 5-ASA对小鼠进行灌肠。通过HE染色观察各组肠组织的变化,透射电镜观察组织的超微结构变化,流式细胞检测辅助性T细胞1(Th1)、Th2细胞含量,血常规检测血液中白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血小板计数(PLT)和血红蛋白(HGB),尼莫地平法评估干预前后疗效指数,16S rRNA高通量测序技术检测肠内容物中的菌群分布。结果各组小鼠均造模成功。肠组织HE染色显示:CUCM组与DUCM组肠黏膜表面出现不同程度的缺损或脱落坏死;CUCM+FMT组、CUCM+5-ASA组、DUCM+FMT组、DUCM+5-ASA组肠黏膜基本完整;并且DUCM+FMT组与CUCM+FMT组相比,前者腺体较后者排列整齐并紧密。肠组织透射电镜超微结构显示:CUCM组与DUCM组上皮细胞表面微绒毛稀疏,杯状细胞减少;CUCM+FMT组、CUCM+5-ASA组、DUCM+FMT组、DUCM+5-ASA组微绒毛较为致密,杯状细胞数目较多;并且DUCM+FMT组与CUCM+FMT组相比,前者微绒毛较后者紧密,杯状细胞也较后者多。各组小鼠Th1、Th2细胞含量、WBC、RBC、PLT、HGB比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。CUCM+5-ASA组、DUCM+FMT组、DUCM+5-ASA组疗效指数高于CUCM+FMT组(P<0.05)。菌群分析显示CUCM组与DUCM组中丰度显著降低的属是Ruminococcus,显著升高的属是Akkermansia,经过FMT治疗后,CUCM+FMT组、DUCM+FMT组有逐步向Control组靠拢的趋势,表明肠道菌群正在改善。结论FMT可治疗溃疡性结肠炎模型小鼠,且针对DUCM疗效更佳,FMT(新金汁)的中药性味苦寒,推测其发挥功效的途径可能是通过调节肠道菌群进而改善Th1/Th2细胞平衡,达到治疗的目的。

摘要： 神经退行性疾病(neurodegenerative diseases,NDs)是一组病因不明的慢性进行性神经系统变性疾病,主要包括AD、PD、肌萎缩性侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)、亨廷顿病(Huntington’s disease,HD)等,老年人常见,随病程进展出现功能障碍,表现为运动、认知、记忆功能的丧失。常见的危险因素包括遗传易感性、氧化应激、生理创伤等[1-3]。

摘要： 溃疡性结肠炎的病因病机目前尚不十分明确,随着发病率的逐年提升,指南推荐的治疗手段存在着许多弊端,近年来肠道菌群的深入研究为我们治疗溃疡性结肠炎提供了新的思路和方法,已有许多研究证实粪菌移植治疗溃疡性结肠炎疗效可靠.

摘要： 本例患者行同胞全相合造血干细胞移植，于+71出现腹泻，开始解黄色糊状稀便，后加重为黄色稀水样便，偶有腹痛，排便后缓解，大便培养未见异常。首先考虑肠道GVHD。但肠道GVHD可以由细菌、真菌、CMV病毒、EBV病毒、腺病毒等感染触发或与感染并存。他克莫司抗GVHD泼尼龙，加用生长抑素减少肠液分泌，亚胺培南，更昔洛韦、伏立康哇继续抗感染，效果仍不理想。加用外购CD25单抗抗肠道GVHD，患者腹泻、腹痛症状仍未见明显缓解，住院期间监测CMV-DNA, EBV-DNA:阴性。患者经过积极抗感染及免疫调节治疗后，腹痛、腹泻症状未见明显缓解，此时转换诊治思路考虑肠道微生态治疗方案可行性，经与患者家属沟通后先后两次行粪菌移植术，术后患者腹泻、腹痛症状明显好转。治疗有效。肠道微环境的改善可以直接改善全身的免疫状态，对于难治性的肠道aGVHD效果非常显著，值得进一步推广。

摘要： 文章报告1例应用粪菌移植成功治疗重症患者顽固腹泻的病历，粪菌移植(fecal microbiota transplantation,FMT)是从健康人粪便中分离功能菌群,然后移植到患者消化道,通过重建患者肠道菌群而实现对疾病的治疗.至少有1700年历史的粪菌移植现已广泛用于治疗各种顽固的肠道疾病.

摘要： 粪菌移植当选世界医学突破是认识的突破，肠道菌群失调的救命之策是粪菌移植，中华粪菌库向全国提供非营利性异地救援服务。

摘要： 溃疡性结肠炎是一种结肠和直肠的慢性非特异性炎症性疾病.近年来,国内外关于UC的治疗取得了很大的进展,本文现从药物治疗、手术治疗、干细胞移植、粪菌移植等方面,将其最新的治疗情况作一综述.

摘要： 针对IBD的非药物疗法主要有粪菌移植、选择性白细胞吸附以及干细胞治疗，并介绍了治疗过程以及疗效评价。

摘要： 本发明公开了一种粪便移植治疗中标准粪菌冻干粉制备工艺，包括以下步骤：(1)标准粪菌液制备；(2)冻干保护剂配制；(3)三步法冷冻，真空干燥；其中,冻干保护剂的配制为在无菌生理盐水中分别加入10‑20％海藻糖，5‑10％甘油和0.02‑0.05％维生素C混匀，滤过除菌。本发明特制的冻干保护剂可以在冻干过程中保护粪菌不损失活性，提高粪菌成活率；特定的冻干程序既能使粪菌快速进入休眠状态，又不会损失其活性，有效保护了有效成份的稳定性。实验表明，经本发明提供的工艺制备的冻干粉有效保持了粪便中粪菌的活性，大大提高了存活率。

摘要： 本发明公开了一种粪便移植治疗中标准粪菌液制备工艺，包括以下步骤：(1)粪便匀质处理：包括采集粪便和制备粪便稀释液。(2)逐级过滤：将粪便稀释液先后经过80目标准筛、300目标准筛、20μm滤膜、5μm滤膜、0.8μm滤膜过滤并收集滤液；(3)离心，制备混悬液。本发明采用的逐级过滤的方式以及过滤工具的设置，不仅有效过滤食物残渣，且能保持粪菌中微生物活性，提高活菌数；特定的缓冲液能够更好地在过滤过程中维持细菌活性。经实验表明，本发明既能去除掉有害的食物残渣，又极大地提高了粪菌提取率和存活率，且操作简洁有效。

摘要： 本发明涉及一种粪菌移植技术的粪菌收集、冻存及解冻方法，包括步骤如下：(1)粪菌的制备；(2)将步骤(1)制备的粪菌进行玻璃化冷冻，得到冻存的粪菌；(3)将步骤(2)得到冻存的粪菌进行解冻与复苏。本发明采用了玻璃化冷冻技术，极大地提高冷冻速率(＞20000°C/min)，使细胞在快速降温的过程中迅速形成“玻璃态”，避免了细胞内外形成冰晶，不会对粪菌中的菌群造成过度损伤，且在冷冻保护剂加入了抗冻蛋白，避免了冷冻保护剂的细胞毒性，使得解冻后粪菌液中的菌群的存活率提高至90％以上。

摘要： 本发明公开了一种粪菌冻干保护剂及其在粪菌移植中的应用，属于生物技术领域。本发明公开的一种粪菌冻干保护剂，由以下组分组成：5％‑15％海藻糖，5％‑25％可食用物质，余量为无菌水。本发明采用可食用物质，经过合理组方，能够稳定冻干粉中微生物的存活率，可以保护肠道菌群的活性；采用冻干粉技术，便于菌群移植的实施，操作方便。

摘要： 本发明涉及粪菌移植治疗产品技术领域，提供一种用于粪菌移植治疗的粪菌冻干及胶囊制备工艺。粪菌胶囊的制备包括以下几个过程：(1)粪菌液的制备、留样；(2)冻干保护剂的配制；(3)培养基的配制；(4)梯度降温法冻干；(5)灌装胶囊。冻干保护剂各组分含量组成为10％～20％脱脂奶粉，1％～5％蔗糖，1％～3％明胶，其余为无菌蒸馏水。培养基的含量组成为6.43％MRS粉末，其余为无菌蒸馏水。本发明的冻干保护液的加入可以避免在冻干过程中水产生冰晶损伤细菌，配合梯度降温，有效降低在冻干过程中细菌总量的损失；粪菌胶囊肠溶胶囊壳可以保证粪菌到达肠道内发挥作用，避免胃酸将粪菌杀死。

摘要： 本申请涉及一种利用人粪菌发酵附子制备含苯甲酰乌头原碱的粪菌移植胶囊的方法。“粪菌移植”(Fecal microbiota transplantation，FMT)是指将健康人粪便中的功能菌群，移植到患者胃肠道内，重建新的肠道菌群，实现肠道及肠道外疾病的治疗。临床发现有些病人服用附子后达不到应有的疗效，导致个体差异的其中一个主要原因是病人肠道菌群缺失不全，导致附子中的有毒物质无法正常代谢为无毒活性成分，且对活效成分的利用率低，从而不能发挥附子应有的疗效。本发明利用粪菌移植供体的健康优质粪便，在体外模拟肠道微生物对附子的转化作用，通过适当的发酵条件，将附子中的乌头碱等有毒成分转化为无毒代谢产物，同时增加苯甲酰乌头原碱等活性成分的含量。将粪菌发酵液制成粪菌胶囊，用于临床的粪菌移植治疗。

摘要： 本发明涉及一种粪菌移植技术的粪菌收集、冻存及解冻方法，包括步骤如下：(1)粪菌的制备；(2)将步骤(1)制备的粪菌进行玻璃化冷冻，得到冻存的粪菌；(3)将步骤(2)得到冻存的粪菌进行解冻与复苏。本发明采用了玻璃化冷冻技术，极大地提高冷冻速率(＞20000°C/min)，使细胞在快速降温的过程中迅速形成“玻璃态”，避免了细胞内外形成冰晶，不会对粪菌中的菌群造成过度损伤，且在冷冻保护剂加入了抗冻蛋白，避免了冷冻保护剂的细胞毒性，使得解冻后粪菌液中的菌群的存活率提高至90％以上。

摘要： 本发明公开了一种粪菌移植通过肠道菌群干预类风湿关节炎模型的构建方法，属于模型构建技术领域。本发明采用UHPLC‑Q‑Exactive Orbitrap‑MS技术，通过代谢组学分析类风湿关节炎大鼠的血清，并筛选差异代谢物，以揭示粪菌移植通过影响肠道菌群来干预RA进程的作用机制。本发明从大鼠血清中共筛选出13种差异代谢物包括花生四烯酸、二十二碳六烯酸、13S‑羟基十八碳二烯酸和L‑苯丙氨酸等，经通路富集筛选出3条代谢通路：苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成，苯丙氨酸代谢和花生四烯酸代谢。并证明风湿宁粪菌移植可通过改善类风湿关节炎大鼠的肠道菌群失调来影响花生四烯酸代谢途径，通过调节代谢紊乱来干预类风湿关节炎的进程。

摘要： 本发明公布了一种粪菌移植临床治疗中的肠道菌群制剂的工艺，包括粪便采集、肠道菌群制剂制备和肠道菌群制剂灌装三大步骤，其中粪便采集包括粪便收集和厌氧运输，肠道菌群制剂制备包括“有氧+厌氧”条件下的逐级过滤，离心后混合配置，肠道菌群制剂灌装采用甘油保护液和深低温冻存技术存储；本发明在分离肠道菌群液时采用了一种“有氧+厌氧”的新型的分离方法，根据肠道菌群生存环境特点，选用“有氧+厌氧”的分离方法能够最大程度保护肠道内“需氧菌”和“厌氧菌”的菌群多样性，同时，加入的甘油保护剂在一定时间内维持细菌活性，提高肠道菌群制剂的效果。

摘要： 本发明涉及一种粪菌移植装置，其包括粪菌胶囊和用于伸入体内的输送结构；所述输送结构包括外套管、输送管，以及与输送管内部匹配使用的操作组件；所述输送管位于外套管内部，所述操作组件位于输送管内部；所述输送管包括位于第一端的推送段，移动段和位于第二端的操作段，所述推送段设置第一管腔，在所述移动段和操作段设置第二管腔，第二管腔与第一管腔连通；所述操作组件通过第二管腔在输送管内发生有效移动；在所述第一管腔内部容纳所述粪菌胶囊；通过此种方式先将外套管伸入到体内指定位置，再将粪菌胶囊放置在输送管的推送段，使得操作组件和输送管发生相对移动，将粪菌胶囊输送到病人体内指定位置，保证治疗效果。