粟酒裂殖酵母

摘要： 首次将源于白囊耙齿菌(Irpexlacteus,I.lacteus)的一种锰过氧化物酶基因mnp(GenBank:MH120207.1)经密码子优化后与无任何抗性基因且有Gfa基因的高效表达载体pREP相连,构建原核-真核穿梭表达载体pREP-mnp,再电转化导入Gfa营养缺陷型粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)中,构建生物安全级粟酒裂殖酵母,SDS-PAGE验证目的蛋白表达。所构建的工程菌胞外表达MnP,酶活力在第4天达到峰值,为17.46 U/L。所构建的工程菌经混菌发酵菌种筛选和氮源优化,在菌酶协同发酵中有显著的促进玉米秸秆木质素降解的效果。玉米秸秆中添加0.5%尿素、2%(NH_(4))_(2)SO_(4)、0.02%Tween-80、使基质终浓度为0.5 mmol/L的草酸、0.5%CaCl_(2)、0.3%MnSO_(4),S.pombe-pREP-mnp与N.crassa、S.pombe-man、C.utili、1%Lac、0.4%GOD协同发酵3 d后,玉米秸秆中木质素、半纤维素和纤维素的降解率分别为60.79%、27.61%和25.49%,真蛋白含量提高了310.99%。

摘要： 为筛选出发酵玫瑰香葡萄酒效果最佳的粟酒裂殖酵母菌株,该试验首先通过不同发酵温度(23、25、28°C)和不同接菌量(1×10^(6)、5×10^(6)、1×10^(7) CFU/mL)对玫瑰香葡萄进行发酵,优选出适用于粟酒裂殖酵母的最适发酵温度和最适接菌量。然后利用前期根据发酵动力学试验筛选出的16株粟酒裂殖酵母对玫瑰香葡萄进行单独发酵。结果表明:适合粟酒裂殖酵母的发酵温度为25°C,接菌量为5×10^(6) CFU/mL。相较于其他发酵菌株,筛选出的粟酒裂殖酵母Sp-410单独发酵玫瑰香葡萄酒的苹果酸的降解率(97.98%)和色度值(1.26)最高,乙酸含量(0.18 g/L)和乙醛含量(48.46 mg/L)最低,因此,优选出的粟酒裂殖酵母菌Sp-410为酿造优质玫瑰香葡萄酒的优良菌种。

摘要： 耐热克鲁维酵母(Lachancea thermotolerans,LT)具有高产L(+)-乳酸特性,可作为葡萄酒酿造中的生物酸化剂;粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe,SP)具有较高的乙醇发酵和苹果酸转化能力。以优选的本土酵母菌株为发酵剂,旨在探讨优选非酿酒酵母混合发酵对干红葡萄酒品质的影响,为其增香酿造和感官特性的调整作用提供参考。试验以美乐葡萄为原料,将本土菌株LT和SP分别以10^(3)∶1、10^(4)∶1和10^(5)∶1的比例混合接种发酵,并以商业酿酒酵母(Vintage Red,VR)单独发酵为对照。结果表明,在混合发酵中,SP定殖能力良好,始终存在于酒精发酵过程,LT在第4天达到最大生长量后开始逐渐下降,发酵结束时(14 d)无法检测到该菌株的存在。SP酒样的苹果酸降解率达81.86%,不同比例同时接种酒样的苹果酸降解率为67.91%~75.35%,乳酸产量为2.71~2.85 g/L。LT菌株接种比例的增大有利于提高C_(6)醇,中链脂肪酸乙酯,琥珀酸二乙酯和乳酸乙酯等香气物质的含量,其中以10^(5)∶1比例接种的酒样增加最为显著。感官分析表明,高比例同时接种处理明显增加酒样的花香和果香。综上,LT和SP以10^(5)∶1的比例同时接种在提升葡萄酒香气和改善品质方面具有较好的应用潜力。

摘要： 对白云边酒酿造酒醅中分离得到的不同种属的酵母菌进行发酵性能比较,从中筛选一株耐温性好、产酒力强、产正丙醇低的酵母Schizosaccharomyces pombe Scc7。与S.pombe标准菌株1056相比,Scc7在高粱糖化液中发酵酒精度提高了8.7%,正丙醇含量降低了9.9%,乙酸乙酯含量提高了22.2%,并产生3-羟基丁酮。以麸皮为培养基发酵制备Scc7菌剂模拟固态白酒发酵后发现,与储存4个月的大曲相比,将Scc7菌剂以30%比例同1个月大曲混合发酵可使酒精度提高20.8%,正丙醇降低57.78%。本研究表明,Scc7制备的功能菌剂在白酒酿造中具有良好的应用前景。

摘要： 采用生物信息学方法分析粟酒裂殖酵母SpTrz2蛋白的生物学特性,利用PCR方法扩增粟酒裂殖酵母yAS56菌株SpTrz2的全长和N-末端一半的编码基因,通过NdeⅠ和XhoⅠ酶切位点将SpTrz2的全长和N-末端一半编码基因定向插入pET-28a(+)原核表达载体中,并转化大肠埃希菌BL21(DE3);经过IPTG诱导表达后采用SDS-PAGE电泳切胶纯化法获得重组蛋白,以此为抗原免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,通过Western blotting检测抗体特异性.结果表明,SpTrz2是一个跨膜蛋白,含有3个跨膜结构域,具有多个B细胞抗原表位.SDS-PAGE电泳分析发现,粟酒裂殖酵母SpTrz2的全长和N-末端一半(SpTrz2和SpTrz2N)都以包涵体形式高效表达,其理论相对分子质量分别约为75.99 ku和44.77 ku.Western blotting检测显示,制备的兔抗SpTrz2和SpTrz2N多克隆抗体可以特异性识别天然的SpTrz2蛋白.本研究成功诱导表达、纯化重组蛋白SpTrz2和SpTrz2N,并制备了多克隆抗体,为SpTrz2蛋白的生物学功能相关研究奠定了基础.

摘要： 为了明确粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)参与发酵对干红葡萄酒品质的影响,以'黑比诺'葡萄为原料,选用S.pombe为供试菌株,分别以6、8、10和12 d的间隔时间与商业酿酒酵母顺序接种发酵,以单独接种酿酒酵母并完成苹果酸-乳酸发酵为对照,监测酒精发酵过程中2种酵母菌株生长动态,检测成品酒中色泽指标、苹果酸含量及香气化合物含量,并结合感官评价分析S.pombe和酿酒酵母顺序发酵对'黑比诺'干红葡萄酒品质的影响.结果表明:各顺序接种发酵中S.pombe菌株生长趋势基本一致,酒精发酵结束后S.pombe和酿酒酵母菌株生物量无明显差异;各顺序接种酒样的色度值、色调值、总花色苷含量与对照无显著差异;各顺序接种发酵对苹果酸的降解能力显著提高,且间隔8d接种的酒样降解苹果酸的能力显著高于对照和其他处理酒样,其柔和指数与对照差异不显著,但显著高于其他处理酒样,其香气组分优于对照和其他酒样,其中月桂酸乙酯、己酸乙酯、辛酸乙酯、癸酸乙酯、正戊醇、苯乙醇和香茅醇等物质的含量明显增加;感官评价结果也表明间隔8 d接种的葡萄酒具有良好的口感和较为复杂的香气.综上所述,S.pombe和酿酒酵母菌株以间隔8 d的顺序接种方式能够较好地降解葡萄酒中的苹果酸,并且对干红葡萄酒的香气复杂性具有一定程度的积极影响.

摘要： 在305.15 K条件下,应用生物微量仪测得不同浓度磺胺嘧啶钠(SD-Na)作用下的粟酒裂殖酵母(S.pombe)生长代谢曲线,并根据生长代谢曲线计算得到其生长速率常数k、最大发热功率Pmax、抑制率I、传代时间tG、半抑制浓度CI,50等热动力学参数.实验结果表明:在研究浓度范围内,SD-Na对S.pombe具有较好的抑制作用,其半抑制浓度CI,50为13.4751×10-4 mol·L-1.

摘要： 通过荧光显微镜观察、线粒体提取、基因敲除和免疫印迹等技术,研究粟酒裂殖酵母Atp25蛋白定位和Atp25蛋白缺失对线粒体功能的影响.Atp25是核基因组编码蛋白质,生物信息学预测和荧光显微镜观察结果显示Atp25蛋白定位在线粒体中,免疫印迹技术进一步验证了Atp25蛋白的定位.表型研究结果显示,Δatp25菌株存在生长及呼吸缺陷.Δatp25菌株中线粒体呼吸链复合体亚基蛋白(Cox1、Cox2、Cox3、Cob1、Atp6)水平显著降低.实时荧光定量PCR结果表明,Δatp25菌株中这些复合体亚基的mRNA水平没有变化.

摘要： 为探寻alg3、vps1301、rad51基因缺失对粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)生长及接合生殖的影响,在25°C条件下,培养野生型和3种基因缺失的粟酒裂殖酵母,统计并分析其生长情况;将野生型和3种基因缺失菌株分别各自交配产孢,分析对比野生型和基因缺失菌株的接合生殖情况.结果 显示,生长实验中,25°C条件下,12 h内,野生型菌株、alg3A菌株、vps1301Δ菌株和rad51Δ菌株的平均生长速度分别为0.0425、0.0098、0.0193、0.0369OD595/h.结果 提示,粟酒裂殖酵母缺失alg3基因后,其生长速度受影响最大.在细胞接合生殖实验中,3种基因缺失菌株产孢数目都出现异常,其中alg3A菌株产孢数与野生型表现出显著差异.同时,alg3基因和vps1301基因缺失后孢子长度与野生型存在极显著差异.结果 表明,alg3基因缺失对粟酒裂殖酵母的接合生殖影响最大.综上所述,缺失上述3种基因都对粟酒裂殖酵母的生长和接合生殖有不同程度的影响,其中alg3基因缺失对其影响最严重,其次是vps1301基因,rad51基因对其影响最小.

摘要： 为研究粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)在干红葡萄酒酿造中的应用潜力以及S.pombe菌株与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)共酵的最佳比例.本实验以'黑比诺'葡萄为原料,采用S.pombe SP1260和商业S.cerevisiae红佳酿(Vintage Red,VR)以不同接种比例混合发酵为处理,以VR单独接种完成乙醇发酵后再接种商业酒酒球菌(Oenococcus oeni)完成苹果酸-乳酸发酵的酒样为对照,分析乙醇发酵过程中菌株生物量的变化,所得酒样的相关理化指标、色泽参数、苹果酸及主要挥发性香气化合物含量,结合感官评价分析S.pombe和S.cerevisiae不同接种比例共同接种发酵对'黑比诺'干红葡萄酒品质的影响.结果 表明:菌株SP1260与VR以1000∶1的比例接种时,VR对SP1260菌株生长影响较弱,乙醇发酵结束后,SP1260菌株生物量为106 CFU/mL;酒样中苹果酸含量与对照酒样无显著差异,苹果酸均被完全降解;酒样的色度值、总花色苷含量显著高于对照;香气组分中的高级醇、脂肪酸含量显著降低,乙酸异戊酯、辛酸甲酯、癸酸乙酯和丁香酚等含量较高,果香、花香较浓郁;感官评分表明,1000∶1接种的酒样呈深宝石红色,透亮澄澈,酸甜平衡,余味较长,酒体香气浓郁,感官品质最优.综上所述,SP1260与VR以1000∶1同时接种发酵具有代替苹果酸-乳酸发酵的潜能,能够提升干红葡萄酒色泽,改善口感,增加酒体的果香和花香.

摘要： 本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种耐酸性能强、产乙醇能力强的粟酒裂殖酵母及其应用。具体为粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)Sujiu.065，该菌株是从酱香型酒醅中分离筛选获得的，保藏编号CGMCC No.21792。该菌株耐酸性能优良，在非胁迫条件下与工业酿酒酵母产酒能力相当。在模拟酱香型白酒液态发酵以及固态发酵培养基的高酸环境下，具有突出的产酒优势，并且有助于提高四甲基吡嗪的产生。本发明能够为解决酱香型白酒生产中酒醅酸度大、酵母发酵力不足而造成的原料利用率低、生产掉排、生产成本高等问题提供帮助。

摘要： 本发明提供一种具有高乙酸耐受性的粟酒裂殖酵母，属于微生物技术领域。具体为粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)Sujiu.014，该菌株筛选自酱香型白酒生产酒醅，保藏编号CGMCC No.21791。所述菌株具有极强乙酸耐受能力，较好的耐乳酸、耐高温、耐乙醇能力的粟酒裂殖酵母。能够耐受20g/L乙酸，为目前报道乙酸耐受能力最高的酵母菌株，同时能够耐受60g/L乳酸、40°C温度以及8％的乙醇。能够解决高浓度乙酸环境下酵母菌发酵受抑制的问题。

摘要： 本发明公开了一株同时降解精氨酸和尿素的粟酒裂殖酵母菌，属于微生物技术领域。本发明的粟酒裂殖酵母菌S.pombe C‑11对高粱汁中的精氨酸的降解能力达1.01mmol·L

摘要： 本发明公开了一种高耐酸能力的粟酒裂殖酵母菌及其构建方法，本发明通过改造粟酒裂殖酵母，构建一株过表达转录因子pap1的工程菌株pap1，通过半定量点种实验、生长曲线表征以及发酵实验评估了pap1的对乙酸、乳酸的耐受性能。本发明首次提出了转录因子pap1的过表达显著提升了粟酒裂殖酵母对乙酸、乳酸的耐受性能，并且有效地提高了粟酒裂殖酵母在酸胁迫下乙醇产生效率。

摘要： 本发明公开了一种快速鉴定及定量样本中粟酒裂殖酵母的方法，属于生物工程技术领域。本发明针对粟酒裂殖酵母乙醇脱氢酶基因Adh4设计了特异性引物SEQ ID NO:2、SEQ IDNO:3，可以通过PCR技术实现对大曲、酒醅等样本中发酵体系中粟酒裂殖酵母的快速定性和定量检测；准确性高、有效性好、灵敏性高。本发明技术方案适用发酵食品成品或者取自发酵食品发酵过程的样品。

摘要： 本发明公开了用于快速鉴定及定量粟酒裂殖酵母的引物、试剂盒、方法，属于生物工程技术领域。本发明针对粟酒裂殖酵母乙醇脱氢酶基因Adh1设计了特异性引物SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3，可以通过PCR技术实现对大曲、酒醅等样本中粟酒裂殖酵母的快速定性、定量检测；准确性高、有效性好、灵敏性高。本发明技术方案适用发酵食品成品或者取自发酵食品发酵过程的样品。

摘要： 本发明公开了快速鉴定及定量粟酒裂殖酵母的引物和方法，属于生物工程技术领域。本发明针对粟酒裂殖酵母乙醇脱氢酶设计了特异性引物对R1A1F/R1A1R，序列如SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3所示，可以通过PCR技术实现对大曲、酒醅等样本中粟酒裂殖酵母的快速定性、定量检测；准确性高、有效性好、灵敏性高。本发明技术方案适用发酵食品成品或者取自发酵食品发酵过程的样品。

摘要： 本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种耐酸性能强、产乙醇能力强的粟酒裂殖酵母及其应用。具体为粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)Sujiu.065，该菌株是从酱香型酒醅中分离筛选获得的，保藏编号CGMCC No.21792。该菌株耐酸性能优良，在非胁迫条件下与工业酿酒酵母产酒能力相当。在模拟酱香型白酒液态发酵以及固态发酵培养基的高酸环境下，具有突出的产酒优势，并且有助于提高四甲基吡嗪的产生。本发明能够为解决酱香型白酒生产中酒醅酸度大、酵母发酵力不足而造成的原料利用率低、生产掉排、生产成本高等问题提供帮助。

摘要： 本发明提供一种具有高乙酸耐受性的粟酒裂殖酵母，属于微生物技术领域。具体为粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)Sujiu.014，该菌株筛选自酱香型白酒生产酒醅，保藏编号CGMCC No.21791。所述菌株具有极强乙酸耐受能力，较好的耐乳酸、耐高温、耐乙醇能力的粟酒裂殖酵母。能够耐受20g/L乙酸，为目前报道乙酸耐受能力最高的酵母菌株，同时能够耐受60g/L乳酸、40°C温度以及8％的乙醇。能够解决高浓度乙酸环境下酵母菌发酵受抑制的问题。

摘要： 本发明公开了粟酒裂殖酵母绝对定量的探针、试剂盒及应用，属于生物领域、发酵领域、检测领域。本发明的粟酒裂殖酵母定量探针和试剂盒，能够实现粟酒裂殖酵母的总量检测，用于检测和粟酒裂殖酵母定量时不需要使用昂贵仪器，可在2.5h内快速完成定量工作。同时，本发明所使用的样品不必须进行核酸提取。基于本发明的探针、检测试剂盒用于粟酒裂殖酵母定量，具有快速、方便、便宜、准确的特点。