粘红酵母

摘要： 以模拟日光照射为非生物环境胁迫条件,通过单因素试验和正交试验对粘红酵母(Rhodotorula glutinis)合成类胡萝卜素的发酵条件进行优化,研究光胁迫对粘红酵母生长和类胡萝卜素合成的影响。结果表明:光照强度为5000 Lux时,可显著提高粘红酵母生物量和类胡萝卜素产量;碳源对类胡萝卜素的合成影响最大,以甘油和葡萄糖最佳;最佳发酵条件为甘油质量浓度20 g/L、酵母粉质量浓度3.5 g/L、初始pH值5.0、培养温度25°C;5 L发酵罐培养144 h,生物量和类胡萝卜素产量分别达14.2 g/L和17.3 mg/L,比优化前分别提高了24.5%和21.0%;光胁迫在提高类胡萝卜素产量的同时,可有效提高高值化类胡萝卜素(红酵母红素和圆酵母素)在类胡萝卜素中的占比。

摘要： 该研究从赤霞珠酿酒葡萄表皮分离高产类胡萝卜素的酵母菌株,并研究了温度、氧化剂、还原剂及酸度调节剂等因素对菌株所产类胡萝卜素稳定性的影响.结果表明,从酿酒葡萄表皮分离到6株产类胡萝卜素较强的酵母菌,其中酵母菌Y7在以葡萄糖为碳源、蛋白胨为氮源的液体培养基中类胡萝卜素产量较高.经形态观察、生理生化特性和ITS基因序列分析鉴定,菌株Y7属于粘红酵母(Rhodotorula glutinis).酵母菌生产色素的基本稳定性良好,但高温(>40°C)、添加氧化剂(H2O2)、还原剂(亚硫酸钠、抗坏血酸)和酸度调节剂(柠檬酸、柠檬酸钠)使其稳定性下降,但影响较小,加入苹果酸和氢氧化钠对类胡萝卜素有增色的效果.研究结果将为粘红酵母Y7在类胡萝卜素商业化生产中的应用提供参考.

摘要： 以学校食堂餐饮废水为原料,通过发酵培养获得粘红酵母和地衣芽孢杆菌菌液,按照不同比例混合菌液制备微生物液体菌肥,在盆栽小油菜种植中检测其应用效果.利用餐饮废水发酵所得粘红酵母和地衣芽孢杆菌菌液pH为5.5 ～7.5,未检出杂菌且有效活菌数高于80亿/mL,N、P、K总养分大于4.6％,以体积比为4∶1混合施用于盆栽小油菜,其鲜重、叶绿素含量和过氧化氢酶活性与对照组相比分别提高了33.4％、34.1％和8.2％.

摘要： Objective To realize the resource utilization of waste tobacco stem (WTS) and obtain cheap fermentation substrate of microbial oil. Methods Rhodotorula glutinis CA815 was used as the starting strain, and solid-state fermentation of WTS was performed by shake flask method. After fermentation, a proper amount of normal saline was added and mixed evenly, and the biomass of Rhodotorula glutinis CA815 was obtained by double layer gauze filtration. The yeast cell lipid was extracted by acid-heating method. Plackett-Burman (PB) design was employed to evaluate some variables which were relevant to lipid production of Rhodotorula glutinis CA815 under solid-state fermentation of WTS. Results The PB design results showed that among eleven selected variables,peptone, yeast powder and culture time, as three key factors, were found to significantly rrninfluence lipid production,the highest biomass of Rhodotorula glutinis CA815 could reach 79.00 rrnmg/g, and the maximum production of lipid could reach 4.633 μg/g. Conclusion Under PB design rrnconditions, WTS is used as the main substrate of Rhodotorula glutinis CA815. By adding rrnappropriate amount of yeast powder, peptone and optimizing culture time,the lipid can be rrnproduced by solid -state fermentation from WTS.%目的 资源化利用废弃烟梗(waste tobacco stem,WTS)并获取微生物油脂的廉价发酵基质.方法 以一株粘红酵母(Rhodotorula glutinis)CA815为出发菌株,采用摇瓶方式固态发酵WTS,发酵后加入适量生理盐水并混合均匀,双层纱布过滤获得固态发酵的酵母生物量,采用酸热法提取酵母细胞油脂;采用Plackett-Burman(PB)实验设计法对影响微生物油脂产生的相关因素进行方差及贡献率分析.结果 PB试验结果统计学分析表明:在选择的11个相关因素中,酵母粉、蛋白胨和培养时间是影响酵母油脂产量的3个关键供试因素,粘红酵母CA815生物量最高值可达79.00 mg/g,油脂的最高产量可达4.633μg/g.结论 粘红酵母CA815以WTS为主要基质,通过添加适量酵母粉和蛋白胨、优化培养时间,既可资源化利用WTS,又可通过固态发酵的方式获得微生物油脂.

摘要： 为建立一种高效的粘红酵母ATP-柠檬酸裂解酶粗酶提取方法,对比了酶法、研磨法、超声波法和玻璃珠法对粘红酵母胞内粗酶提取的影响,通过可溶性蛋白浓度分析和ATP-柠檬酸裂解酶活性测定,对粗酶提取方法进行评价,并在此基础上从震荡时间和珠体装量方面对玻璃珠法粘红酵母ATP-柠檬酸裂解酶提取工艺进行了优化.可溶性蛋白浓度分析和ATP-柠檬酸裂解酶活性测定结果表明:玻璃珠法提取粗酶优于其他3种方法.对玻璃珠法进行进一步优化,得到的最优化的提取条件为细胞干重与珠体重量之比为1∶1,冰浴震荡时间为20min,在此条件下,ATP-柠檬酸裂解酶比活可达到0.98U· mg-1,分别是酶法、研磨法、超声波法测得酶活性的1.9,2.2,2.1倍,可溶性蛋白浓度为6.5mg· mL-1,分别是酶法、研磨法、超声波法测得酶活性的1.4,4.1,3.3倍.经过优化的玻璃珠法提取粘红酵母胞内粗酶液操作简便,且能够保持较高的ATP-柠檬酸裂解酶活性,是较理想的粘红酵母粗酶提取方法.

摘要： 酪氨酸解氨酶是苯丙氨酸代谢途径的关键酶之一.酪氨酸经其催化生成对香豆酸,可进一步生成白藜芦醇、柚皮素等具有抗氧化、抗衰老作用的苯丙素类天然产物.作者选取来源于粘红酵母(Rhodotorula glutinis)的酪氨酸解氨酶,对其基因进行大肠杆菌(Escherichia coli)密码子偏好性优化,合成基因后于E.coli BL21 (DE3)中成功表达.经过硫酸铵分级沉淀、QFF阴离子交换层析、分子筛纯化后得到了纯化的酪氨酸解氨酶,比酶活达到1.78 U/mg.在相同的培养条件下,以不同的质粒作为表达载体,获得了不同的对香豆酸产量.其中以酪氨酸为底物发酵24 h,当以pET-32a(+)作为表达载体时,获得最高的对香豆酸产量196.3 mg/L.经密码子优化后的酪氨酸解氨酶基因可更好地应用于苯丙素类物质的合成途径构建,不同载体的应用也为生物法生产对香豆酸提供了更多的选择依据.

摘要： 乙酸是木质纤维素在水解过程中的主要副产物,高浓度的乙酸严重影响产油微生物的生长和油脂合成.本文研究了粘红酵母对乙酸的耐受性及其利用乙酸合成微生物油脂的能力.结果表明,在初始葡萄糖、木糖浓度分别为6 g/L和44 g/L的混合糖培养基中,乙酸浓度低于10 g/L时,不会对菌体生长产生抑制作用,油脂合成还得到了促进.当乙酸添加量为10 g/L时,生物量、油脂产量、油脂含量较对照组分别提高了21.5％、171.2％和121.6％.进一步研究表明,粘红酵母具备利用乙酸合成油脂的能力,当以乙酸为唯一碳源,浓度为25 g/L时,油脂产量达到3.20 g/L,油脂质量得率为13％.微生物油脂成分分析表明,粘红酵母以乙酸为底物制得的油脂可以作为制备生物柴油的油脂原料,其主要成分为棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸,其中饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸含量分别为40.9％和59.1％.由于粘红酵母具有利用乙酸合成微生物油脂的能力,在以木质纤维素水解液为原料生产微生物油脂的脱毒过程中,一定浓度的乙酸可以不必脱除.

摘要： 为深入了解光信号对酵母菌生长发育的影响,研究红光和蓝光对粘红酵母菌生长及产物产量的影响.结果表明,红光培养促使粘红酵母生物量显著增加,还可提高粘红酵母中蛋白质和核酸的含量,提高粘红酵母类胡萝卜素和麦角固醇含量,因此可考虑在粘红酵母工业化生产类胡萝卜素和麦角固醇时引入红光这一参数.蓝光在提高粘红酵母生物量方面不明显,但可增加粘红酵母细胞质膜的通透性,并提高粘红酵母油脂和麦角固醇含量.光质在粘红酵母生长过程中的确有重要作用,其作用机制和原理尚需进一步深入研究与探讨.

摘要： 本文中研究了粘红酵母利用柠檬酸废水生产微生物油脂.研究了废水稀释比例、初始pH、摇床转速、初始补糖浓度对发酵的影响.结果表明:最适的发酵条件为使用废水原液,pH为5.5,初始补糖浓度为20g/L,摇床转速为180rpm,30°C发酵72h.此时,粘红酵母的生物量、油脂含量、油脂产量和COD降解率分别达到9.18g/L,37.66％,3.27g/L和63.3％.并且利用气相色谱-质谱分析了脂肪酸的组成.所产菌体的油脂成分中,不合和脂肪酸的含量较基础培养基提高了10.5％,高达88.32％,主要成分是油酸和亚油酸.表明柠檬酸废水适于粘红酵母进行微生物油脂的生产,并进一步用于生物柴油的制备.

摘要： 为实现含糖废水资源化利用,通过复合诱变,采用流式细胞仪筛选高产油脂粘红酵母,最终得到一株油脂含量高达45％的菌株.分别采用淀粉废水和味精废水培养该菌株,在小试的基础上,确定出2种废水300L中试水平最佳发酵工艺:在适当添加金属离子的前提下,淀粉废水连续不灭菌批次发酵35h时,生物量达40～45g/L,废水COD降解75％以上,油脂含量40％以上;味精废水采用1号废水(pH2.3)调节车间洗涤废水(pH8.1),作为种子培养基,1号废水和2号废水以1∶3的比例稀释,作为发酵培养基,不调节pH发酵45h,生物量达35～40g/L,废水COD降解80％以上,油脂含量35％～40％.经气相分析,油脂主要成分以18C和16C的脂肪酸和甘油三酯为主,其中脂肪酸含量相对较高,占60％以上,完全满足生物柴油原料的要求.

摘要： 随着社会及科学技术的不断发展,油脂需求量的大幅增长,能否确保油脂供应充足是个十分严峻的问题.油脂既是构成和维持生命活动的基本物质之一,也是重要的工业原料,具有广泛的应用价值.本文对高产油脂粘红酵母的提油工艺进行研究,通过单因素实验对影响粘红酵母提取油脂的主要因素进行了研究,结果表明,影响油脂提取的因素有酸处理时间、沸水浴时间、超声时间、超声功率、提取液配比、提取时间、NaCl,通过Plackett-Burmen试验设计,以P＜0.05为准,筛选出酸处理时间(P=0.0360)、超声处理时间(P=0.0105)、提取液配比(VCHC13∶VCH3OH)(P=0.0105)三个对粘红酵母Rhodotorula glutinis油脂提取具有显著影响的因素.在此基础上,通过Box-Behnken试验设计,对酸处理时间、超声处理时间、提取液配比(VCHC13∶VCH3OH)三个显著因子进行响应面优化,得到最佳工艺参数为酸处理时间34min,超声时间7.5min,提取液配比(VCHC13∶VCH3OH)1.9∶1.与原始工艺相比,湿菌油脂重量从42.67±1.43mg/g提高到57.33±2.4mg/g,提高了36.5％.

摘要： 对味精废水主要成分进行了分析，采用长期驯化粘红酵母方法，提高其耐高COD的能力，最终驯化出一株耐COD 达67000mg/L的菌株。5L 发酵罐实验表明，1 号废水与洗涤废水按1:3的比例稀释，初始糖浓度为20g/L、pH4.8、接种量为10%、400rpm、30°C培养该菌株，最终COD 降解率达58.9%，生物量最高达19g/L，糖转化为生物量率约70%，最高油脂含量于60h 达22.8%。该方法为工业化处理味精废水，实现废弃物资源化利用提供了新思路。

摘要： 通过摇瓶培养粘红酵母(Rhodotorula glutinis)对与菌体产油脂相关的因素进行了正交试验,确定了摇瓶发酵培养的最佳产油脂条件:葡萄糖70g/L,酵母膏0.5g/L,磷酸二氢钾1.0g/L,硫酸铵2.0g/L,硫酸镁0.5g/L,初始pH值6.0,接种量为10％,培养温度32°C,培养6d后,可得到菌体生物量15.3g/L,干细胞的油脂含量为46.87％.

摘要： 本文利用固定化粘红酵母细胞，以苯丙氨酸解氨酶(PAL)/肉桂酸途径制备 L-Phe。并对固定化条件、固定化细胞部分酶活性质、效应因子和戊二醛化学修饰对固定化细胞酶活的影响、酶反应条件以及固定化细胞批式反应制备L-Phe进行了研究。并通过对固定化细胞酶反应条件的优化，确定最优的酶反应条件。

摘要： 采用体外粘液粘附模型,评价了粘红酵母、乙醇假丝酵母与大菱鲆肠粘液的粘附性能;以β-巯基乙醇-甘露醇法提取粘红酵母表面蛋白;酵母表面蛋白和肠粘液蛋白分别经凝胶电泳分离固定于PVDF膜上,然后与辣根过氧化物酶标记的肠粘液蛋白或酵母表面蛋白分别进行Western blotting.结果表明,粘红酵母的粘附是由表面蛋白与粘液受体的特异性结合介导,其高粘附性能是由于酵母表面存在大量粘附相关蛋白和粘液受体.

摘要： 以粘红酵母31229为试验菌种,研究了以Mg2+、Na+、pH、西红柿汁、花生油作为促进剂对红酵母产β-胡萝卜素的影响,在单因素试验基础上,利用响应面法优化培养基配方.结果表明,最适的添加量:Mg2+为0.13％,西红柿汁为3％,花生油为0.1％,在此条件下,β-胡萝卜素的OD值为0.802.

摘要： 微生物油脂的生产是解决生物柴油原料问题的重要途径之一。以制糖厂废糖蜜为原料,通过间歇发酵试验,考察了装液量、pH、接种量、温度以及氮素和碳素等因素对粘红酵母(Rhodotorula glutinis)增殖与油脂合成的影响。结果表明,在稀释糖蜜COD浓度11100 mg/L、初始pH6.5、30°C和160 r/min的条件下发酵132 h,粘红酵母的总细胞干重和油脂产量可分别达到2.42 g/L和0.8g/L,去除单位COD的细胞产量和油脂产量分别为0.35 kg/kg和0.12 kg/kg：在粘红酵母发酵系统中,氮源的补充对细胞增殖具有显著刺激作用,但对油脂的合成与积累无显著影响;在发酵过程中一次性补加碳源葡萄糖10g/L,可使粘红酵母的细胞和油脂产量分别提高到3.74g/L和1.31g/L。

摘要： 通过正交实验对粘红酵母两段法发酵生产微生物油脂的影响因素进行了考察,得到最佳发酵条件为:初始葡萄糖浓度为45g/L,C/N 比为80,浓缩比为3,种龄为0.58,培养时间为12h.在最佳发酵条件下,摇瓶生物量最高可达48.7g/L,油脂含量最高为34.2%,这大大缩短了发酵时间,很大程度上节约了经济成本,具有很好的应用前景.

摘要： 本发明提供一种提高粘红酵母油脂得率和纯度的组合物及其制备方法和使用方法。本发明组合物中包括马鞭草2～3份、鱼腥草2～3份、满天星3～5份和壳聚糖1～2份，本发明组合物对粘红酵母油脂中的杂质具有吸附作用，通过吸附作用，明显降低微生物油脂中的杂质含量，提高油脂品质；本发明组合物可促进粘红酵母细胞破壁，使微生物油脂从细胞中完全释放，提高成品得率。采用本发明方法，粘红酵母油脂的得率最高达到99.3％，所得微生物油脂中杂质含量可低至0，不皂化物含量低至0.1％，油脂质量佳。

摘要： 本发明属于酪醇生产技术领域，提供了一种用粘红酵母生产酪醇的方法，将粘红酵母(Rhodotorulaglutinis)按照接种量为4％‑10％接种至培养基中；在28‑32°C条件下进行摇床发酵，转速为100～180r/min，培养12～16h；然后添加质量浓度为2％的L‑苯丙氨酸溶液，每次添加溶液体积为培养基体积的5％，添加次数为2～4次，相邻两次添加的时间间隔在20～30h，温度降至20～25°C发酵，发酵40～120h；发酵完成后将发酵液进行真空冻干处理，向冻干物质中加甲醇溶液萃取6～12h；萃取液离心除杂，上清液浓缩；浓缩液经硅胶柱层析和薄层色谱检测，收集主斑点为酪醇的洗脱液重结晶得酪醇产品。本发明利用粘红酵母菌生物合成酪醇，周期短，可实现连续生产，生产方法简单，高效。

摘要： 本发明涉及一种提高粘红酵母油脂产量的培养基，包括葡萄糖、酵母浸粉、磷酸氢二钾、硫酸铵、硫酸钠、七水硫酸镁的和螺旋藻蛋白酶解物。本发明所述的培养基，可将螺旋藻蛋白酶解物可作为功能性促进物直接添加到葡萄糖培养基中，也可作为一种有机氮源部分或全部替代葡萄糖培养基中的有机氮源酵母浸粉，可根据不同的情况调整添加方式，以达到在较低成本的前提下得到较高的油脂产量。

摘要： 本发明涉及一种粘红酵母培养物的制备方法，包括：将粘红酵母接种至斜面培养基上，获得长满粘红酵母菌落的斜面；将所述菌落接种至液体种子培养基上，得到粘红酵母种子液；将所述粘红酵母种子液接入固体发酵培养基中，将所述固体发酵培养基混合均匀后，进行浅盘发酵；发酵周期结束后，关闭通风口，无菌收集发酵产物。本发明将粘红酵母通过液体深层发酵培养和固体发酵培养相结合，生产一种富含天然β‑胡萝卜素的酵母培养物。该产品兼具天然β‑胡萝卜素和微生态制剂双重功效，且使用成本较低，目前市场尚无同类产品，市场前景广阔。

摘要： 本发明公开了五种延长细胞寿命的粘红酵母sir2同源基因及其产物的应用，属于生物技术领域。本发明将具有延长细胞寿命的五种粘红酵母sir2同源基因

摘要： 本发明公开了一种粘红酵母sirtuin4蛋白的制备方法及其应用，属于生物技术领域。本发明通过大肠杆菌重组表达制备粘红酵母sirtuin4蛋白的方法的步骤有：质粒的构建，大肠杆菌感受态细胞的制备，质粒转化，提取，鉴定，重组大肠杆菌蛋白表达验证，大肠杆菌发酵表达目的蛋白，提纯目的蛋白。本发明经实验发现，重组表达的粘红酵母sirtuin4蛋白具有激活受损线粒体自噬相关蛋白，改善线粒体形态和增强线粒体功能的功能，为治疗和预防线粒体功能障碍和衰老的功能性食品和药品的制备提供了新的思路。

摘要： 本发明公开了一种改善线粒体功能的sirtuin2蛋白的应用及阐述其作用机制，属于生物技术领域。本发明将具有重构线粒体网络和改善哺乳动物衰老细胞表型功能的粘红酵母sirtuin2基因在哺乳动物细胞中重组表达。实验结果表明其可以提高融合蛋白Mfn1，Mfn2和分裂蛋白Drp1的表达水平，降低哺乳动物细胞的SA‑β‑gal活性水平，增强CK19、β1整合素的表达水平，降低细胞内ROS水平水平，明显提升细胞内ATP水平，改善线粒体形态，从而改善了线粒体网络和提高了细胞抵抗衰老的能力，为使用sirtuin2蛋白治疗线粒体功能障碍和预防衰老提供了新的策略。

摘要： 本发明公开了一种粘红酵母去乙酰化酶2蛋白的制备及其应用，属于生物技术领域。本发明通过大肠杆菌重组表达制备粘红酵母sirtuin2蛋白的方法的步骤有：质粒的构建，大肠杆菌感受态细胞的制备，质粒转化，提取，鉴定，重组大肠杆菌蛋白表达验证，大肠杆菌发酵表达目的蛋白，提纯目的蛋白。本发明经实验发现，重组表达的粘红酵母sirtuin2蛋白具有增强线粒体功能和重构线粒体网络的功能，可用于治疗和预防线粒体功能障碍和衰老的功能性食品和药品的制备。

摘要： 本发明公开了一种改善线粒体功能的sirtuin4蛋白的应用及阐述其作用机制，属于生物技术领域。本发明将具有重构线粒体网络和改善哺乳动物衰老细胞表型功能的粘红酵母sirtuin4基因在哺乳动物细胞中重组表达。实验结果表明其可以激活受损线粒体自噬的相关蛋白，显著降低哺乳动物细胞的SA‑β‑gal活性水平，增强CK19、β1整合素的表达水平，降低细胞内ROS水平水平，明显提升细胞内ATP水平，改善线粒体形态，从而改善了线粒体网络和提高了细胞抵抗衰老的能力，为使用sirtuin4蛋白治疗线粒体功能障碍和预防衰老提供了新的策略。

摘要： 本发明涉及一种重组粘红酵母携带外源多肽的活细胞脂质体及其应用，同源重组法构建外源磷酸胞苷胆碱转移酶基因CCT整合表达载体，并以CCT基因重组的工程菌为载体，成功将外源多肽引入重组的工程菌的体内。本发明的有益效果：实现了CCT的稳定、长久表达，且CCT的表达水平提高了1.5倍左右；与野生型菌株相比，卵磷脂及脂肪酸含量显著提高，电穿孔技术将外源多肽转入菌株胞内，外源多肽因其自身亲脂性而进入重组菌株的脂滴内，实现了外源多肽的成功包裹。小鼠口服整个携带胰岛素的菌株GM4‑CCT‑insulin 7天，发现小鼠血清和重要器官（肝、肺、脾、肾）中insulin的含量增加，糖尿病小鼠口服菌株GM4‑CCT‑insulin，其血糖显著降低，GM4‑CCT‑insulin作为外源性胰岛素具有显著的降血糖的作用。