CTAB法

摘要： 转基因大豆基因组DNA的提取是进行大豆油脂代谢研究的必要环节之一,所以提取质量好、数量多的基因组DNA是进行转基因研究最基础的一步。本研究采用CTAB法和SDS法分别从大豆幼嫩叶片中提取其基因组DNA,并用1%琼脂糖凝胶电泳进行观察比较,建立了快速、有效提取大豆叶片基因组DNA的方法。本研究发现,CTAB法分离的DNA数量多、质量好,能够满足各种后续的研究,是一种简单、高效的转基因大豆基因组DNA提取方法。CTAB法简易、高效,适宜在大豆DNA提取工作中推广使用。

摘要： 为了研究不同方法对锐尖山香圆基因组DNA提取质量的影响,以选择出最适宜的提取方法。以锐尖山香圆叶片为试验材料,采用CTAB法、SDS法、高盐低pH值法和尿素法提取其基因组DNA,并对提取的基因组DNA OD_(260/280)值、OD_(260/230)值、DNA浓度、DNA产率、琼脂糖凝胶电泳、酶切验证和ISSR-PCR扩增产物进行比较分析。结果表明,应用高盐低pH值法和尿素法提取的基因组DNA含有蛋白质和多糖等杂质较多,DNA纯度较低;CTAB法提取的基因组DNA含有一些酚类物质和盐等杂质,DNA纯度较低;SDS法提取的基因组DNA纯度、浓度和产率最高,酶切和ISSR-PCR检测效果最好。SDS法提取的锐尖山香圆基因组DNA质量和产量最好,可用于后续相关分子生物学研究。

摘要： 醉马草是一种多年生牧草,为禾本科芨芨草属,常用于机场草坪建植和草原生态恢复,因其重要的经济与生态价值近年来被广泛研究关注.醉马草幼苗含有的酚类、蛋白质等杂质严重影响DNA的提取质量,常规技术不能很好地满足高质量的实验要求.本实验以醉马草幼苗为材料,分别采用SDS、CTAB、高盐法提取醉马草幼苗全基因组DNA.研究发现使用SDS法提取的DNA浓度为176ng·μL-1,提取率为30％,A值为1.7.使用CTAB法提取的DNA浓度为140ng·μL-1,提取率为23％,A值为1.68.使用高盐法提取的DNA浓度为37.7ng·μL-1,提取率为6％,A值为1.1.利用CTAB对提取出的DNA进一步纯化,用琼脂糖凝胶电泳和超微量分光光度计检测DNA的浓度和纯度,通过PCR分析验证优化后CTAB法提取DNA的效果.结果 表明各方法纯化后的DNA浓度为:SDS法(223ng·μL-1)＞CTAB法(219ng·μL-1)＞高盐法(77ng· μL-1);A值为:SDS法(1.8) ＞CTAB法(1.77)＞高盐法(1.4),其中DNA浓度较纯化前分别提高27.1％(SDS法)、57.1％(高盐法)、51.0％(CTAB法),且电泳图片显示DNA条带清晰明亮,无明显拖尾现象.因此,三种方法间使用SDS法提取DNA的效果最佳,且加入纯化步骤可进一步提高DNA提取质量.本研究旨在为醉马草的分子生物学研究提供技术支持与科学依据.

摘要： 醉马草是一种多年生牧草,为禾本科芨芨草属,常用于机场草坪建植和草原生态恢复,因其重要的经济与生态价值近年来被广泛研究关注。醉马草幼苗含有的酚类、蛋白质等杂质严重影响DNA的提取质量,常规技术不能很好地满足高质量的实验要求。本实验以醉马草幼苗为材料,分别采用SDS、CTAB、高盐法提取醉马草幼苗全基因组DNA。研究发现使用SDS法提取的DNA浓度为176ng·μL^-1,提取率为30%,A值为1.7。使用CTAB法提取的DNA浓度为140ng·μL^-1,提取率为23%,A值为1.68。使用高盐法提取的DNA浓度为37.7ng·μL^-1,提取率为6%,A值为1.1。利用CTAB对提取出的DNA进一步纯化,用琼脂糖凝胶电泳和超微量分光光度计检测DNA的浓度和纯度,通过PCR分析验证优化后CTAB法提取DNA的效果。结果表明各方法纯化后的DNA浓度为:SDS法(223ng·μL^-1)﹥CTAB法(219ng·μL^-1)﹥高盐法(77ng·μL^-1);A值为:SDS法(1.8)>CTAB法(1.77)﹥高盐法(1.4),其中DNA浓度较纯化前分别提高27.1%(SDS法)、57.1%(高盐法)、51.0%(CTAB法),且电泳图片显示DNA条带清晰明亮,无明显拖尾现象。因此,三种方法间使用SDS法提取DNA的效果最佳,且加入纯化步骤可进一步提高DNA提取质量。本研究旨在为醉马草的分子生物学研究提供技术支持与科学依据。

摘要： 为探究兰科植物DNA的提取条件,以兰科独蒜兰属台湾独蒜兰(Pleione formosana)幼嫩叶片作为试验材料,在传统的CTAB法上进行改良,设计L9(34)正交试验,探究不同因素、不同处理对DNA产率、纯度的影响.结果表明:4个因素对DNA产率的影响顺序为样品质量>水浴温度>清洗时间>水浴时间,最佳提取条件为样品重量30 mg、清洗20 min、55°C水浴2.0 h,该处理下DNA主条带清晰,得率为148.98 ng·μL-1,A260/A280均值为1.89.

摘要： 目的 研究分析丹参DNA提取方法 的优化.方法 针对丹参DNA提取方法 展开相应研究,选取盆栽陕西商洛一年生紫花丹参的叶片为研究材料,比较4种方法 提取丹参DNA的效果.结果 改良版CTAB法的DNA提取质量大于SDS法2、CTAB法、SDS法1(P<0.05).四种DNA提取方法 提取的丹参DNA浓度、纯度存在明显差异(P<0.05).结论 改良版CTAB法提取丹参DNA的效果最好,操作步骤简单,值得推广应用.

摘要： [目的]针对核桃组织中富含多酚、多糖及黄酮类物质含量较高的特点,筛选经济高效、适合核桃不同发育时期叶片及不同组织总RNA的提取方法.[方法]以核桃幼嫩、成龄和衰老叶片为材料,分别采用改良硼砂—CTAB法、改良硼砂—CTAB—异丙醇法、改良SDS法、改良Trizol法Ⅱ以及试剂盒法进行总RNA的提取.以筛选与优化的改良硼砂—CTAB法、改良硼砂—CTAB—异丙醇法分别提取核桃胚、叶柄、韧皮部、雄花的总RNA,并对RNA产量、纯度、电泳图谱和RT-PCR进行分析.[结果]5种方法都可获得核桃总RNA,其中,改良硼砂—CTAB法能够从幼嫩叶片、成龄叶片、叶柄和雄花中获得质量高、完整性好的总RNA,28SrRNA 亮度约为 18SrRNA 的2倍,A260/A280介于1.9?2.1 之间,A260/A230 大于2.0,且总RNA质浓度可达1 185.2 ng·μL-1;改良硼砂—CTAB—异丙醇法则适合衰老叶片、胚和韧皮部的提取,总RNA质量浓度可达1 019.0 ng ·μL-1.通过RT-PCR在不同组织中均能扩增出核桃18SrRNA和翻译起始因子(JreIF1A)片段.[结论]改良硼砂—CTAB法和改良硼砂—CTAB—异丙醇法相比其他3种方法更易排除蛋白质、酚类等杂质干扰,对于不同时期不同组织均有更好的适用性,提取所获得的总RNA纯度和浓度完全符合后续的分子生物学试验要求.

摘要： 为了从可口革囊星虫体壁中提取高质量的RNA,以便深入开展分子生物学研究。采用改良Trizol法、Trizol法和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法3种方法提取可口革囊星虫体壁中总RNA,并通过琼脂糖凝胶电泳比较不同方法提取总RNA的效果。结果表明:改良Trizol法提取的总RNA经电泳后能看到清晰完整的28S r RNA、18S rRNA和5S rRNA条带,无拖尾现象;而Trizol法和CTAB法提取的总RNA电泳条带完整性较差,缺少28S rRNA。传统的Trizol法和CTAB法不适用于可口革囊星虫体壁总RNA的提取;改良Trizol法提取的总RNA电泳条带清晰、完整性好,质量符合cDNA合成、RT-PCR扩增等后续实验要求,适用于提取可口革囊星虫体壁总RNA。

摘要： 目的研究分析丹参DNA提取方法的优化。方法针对丹参DNA提取方法展开相应研究,选取盆栽陕西商洛一年生紫花丹参的叶片为研究材料,比较4种方法提取丹参DNA的效果。结果改良版CTAB法的DNA提取质量大于SDS法2、CTAB法、SDS法1(P<0.05)。四种DNA提取方法提取的丹参DNA浓度、纯度存在明显差异(P<0.05)。结论改良版CTAB法提取丹参DNA的效果最好,操作步骤简单,值得推广应用。

摘要： 为筛选出适合马铃薯组培苗的RNA提取方法,本试验以‘青薯9号’马铃薯组培苗叶片为材料,采用植物RNA提取试剂盒法(R6827-01)、CTAB法和SDS法等3种方法提取马铃薯组培苗叶片的RNA,并对其提取的RNA样品进行电泳及凝胶成像分析.实验结果表明:SDS法提取RNA的OD260/OD280比值平均值为1.367,OD260/OD230比值平均值为1.067,并且电泳条带模糊有拖尾现象,不适合马铃薯组培苗的RNA提取.CTAB法的OD260/OD280比值平均值为1.961,OD260/OD230比值平均值为2.073,并且电泳条带较为清晰,可用于马铃薯组培苗的RNA提取.试剂盒法的OD260/OD280比值平均值为1.987,OD260/OD230比值平均值为2.100,并且条带清晰亮度明显,适用于马铃薯组培苗的RNA提取.

摘要： 为筛选出适合马铃薯组培苗的RNA提取方法,本试验以‘青薯9号’马铃薯组培苗叶片为材料,采用植物RNA提取试剂盒法(R6827-01)、CTAB法和SDS法等3种方法提取马铃薯组培苗叶片的RNA,并对其提取的RNA样品进行电泳及凝胶成像分析.实验结果表明:SDS法提取RNA的OD260/OD280比值平均值为1.367,OD260/OD230比值平均值为1.067,并且电泳条带模糊有拖尾现象,不适合马铃薯组培苗的RNA提取.CTAB法的OD260/OD280比值平均值为1.961,OD260/OD230比值平均值为2.073,并且电泳条带较为清晰,可用于马铃薯组培苗的RNA提取.试剂盒法的OD260/OD280比值平均值为1.987,OD260/OD230比值平均值为2.100,并且条带清晰亮度明显,适用于马铃薯组培苗的RNA提取.

摘要： 为筛选出适合马铃薯组培苗的RNA提取方法,本试验以‘青薯9号’马铃薯组培苗叶片为材料,采用植物RNA提取试剂盒法(R6827-01)、CTAB法和SDS法等3种方法提取马铃薯组培苗叶片的RNA,并对其提取的RNA样品进行电泳及凝胶成像分析.实验结果表明:SDS法提取RNA的OD260/OD280比值平均值为1.367,OD260/OD230比值平均值为1.067,并且电泳条带模糊有拖尾现象,不适合马铃薯组培苗的RNA提取.CTAB法的OD260/OD280比值平均值为1.961,OD260/OD230比值平均值为2.073,并且电泳条带较为清晰,可用于马铃薯组培苗的RNA提取.试剂盒法的OD260/OD280比值平均值为1.987,OD260/OD230比值平均值为2.100,并且条带清晰亮度明显,适用于马铃薯组培苗的RNA提取.

摘要： 为筛选出适合马铃薯组培苗的RNA提取方法,本试验以‘青薯9号’马铃薯组培苗叶片为材料,采用植物RNA提取试剂盒法(R6827-01)、CTAB法和SDS法等3种方法提取马铃薯组培苗叶片的RNA,并对其提取的RNA样品进行电泳及凝胶成像分析.实验结果表明:SDS法提取RNA的OD260/OD280比值平均值为1.367,OD260/OD230比值平均值为1.067,并且电泳条带模糊有拖尾现象,不适合马铃薯组培苗的RNA提取.CTAB法的OD260/OD280比值平均值为1.961,OD260/OD230比值平均值为2.073,并且电泳条带较为清晰,可用于马铃薯组培苗的RNA提取.试剂盒法的OD260/OD280比值平均值为1.987,OD260/OD230比值平均值为2.100,并且条带清晰亮度明显,适用于马铃薯组培苗的RNA提取.

摘要： 为筛选出适合马铃薯组培苗的RNA提取方法,本试验以‘青薯9号’马铃薯组培苗叶片为材料,采用植物RNA提取试剂盒法(R6827-01)、CTAB法和SDS法等3种方法提取马铃薯组培苗叶片的RNA,并对其提取的RNA样品进行电泳及凝胶成像分析.实验结果表明:SDS法提取RNA的OD260/OD280比值平均值为1.367,OD260/OD230比值平均值为1.067,并且电泳条带模糊有拖尾现象,不适合马铃薯组培苗的RNA提取.CTAB法的OD260/OD280比值平均值为1.961,OD260/OD230比值平均值为2.073,并且电泳条带较为清晰,可用于马铃薯组培苗的RNA提取.试剂盒法的OD260/OD280比值平均值为1.987,OD260/OD230比值平均值为2.100,并且条带清晰亮度明显,适用于马铃薯组培苗的RNA提取.

摘要： 本研究分别采用CTAB法和试剂盒法,对朱顶红的嫩叶、成熟叶、花瓣、试管苗叶、试管苗鳞茎和试管苗根6种材料进行基冈组DNA提取.DNA检测结果表明,对于6种组织材料,CTAB法提取DNA的纯度和产量均较高.而对于试管苗鳞茎,则CTAB法和试剂盒法提取的DNA纯度均较高,产量也较高.

摘要： 本研究分别采用CTAB法和试剂盒法,对朱顶红的嫩叶、成熟叶、花瓣、试管苗叶、试管苗鳞茎和试管苗根6种材料进行基冈组DNA提取.DNA检测结果表明,对于6种组织材料,CTAB法提取DNA的纯度和产量均较高.而对于试管苗鳞茎,则CTAB法和试剂盒法提取的DNA纯度均较高,产量也较高.

摘要： 本研究分别采用CTAB法和试剂盒法,对朱顶红的嫩叶、成熟叶、花瓣、试管苗叶、试管苗鳞茎和试管苗根6种材料进行基冈组DNA提取.DNA检测结果表明,对于6种组织材料,CTAB法提取DNA的纯度和产量均较高.而对于试管苗鳞茎,则CTAB法和试剂盒法提取的DNA纯度均较高,产量也较高.

摘要： 本研究分别采用CTAB法和试剂盒法,对朱顶红的嫩叶、成熟叶、花瓣、试管苗叶、试管苗鳞茎和试管苗根6种材料进行基冈组DNA提取.DNA检测结果表明,对于6种组织材料,CTAB法提取DNA的纯度和产量均较高.而对于试管苗鳞茎,则CTAB法和试剂盒法提取的DNA纯度均较高,产量也较高.

摘要： 椰子树组织中富含多糖和酚类化合物，为了获取高质量的RNA，我们以椰子树叶片和根部为材料，比较了CrAB法和SDS法提取RNA的效果。结果表明：CrAB法提取椰子树组织的总RNA效果较好，能有效克服酚类物质和多糖对RNA提取的影响。经OD值检测和电泳检测，总RNA的28 S和18 S条带清晰可见，纯度较高，完整性好，无明显降解，以此RNA为模板进行RT-PCR反应，能获得特异条带，表明该RNA完全可以用于后续分子生物学操作。

摘要： 一种能使CTAB法提取到真菌高质量基因组DNA的方法，属于分子生物技术领域。CTAB法提取DNA的接种选用含菌种的细沙直接接种、和/或用孢子悬液接种后再添加细沙培养、和/或培养的菌丝在提取DNA磨样时添加细沙磨样，至菌丝最终呈现丝滑状超细粉末）时止。上述一种能使CTAB法提取到真菌高质量基因组DNA的方法，可以显著提高提取的DNA的含量，并且对DNA的品质及得率都有显著提高；且该方法操作方便、实验稳定性强、可重复性高、准确快捷，在满足DNA提取质量的同时，又可在磨样环节大大节省劳动强度，即使大量提取DNA样品时一样有较高的磨样速度，极大的缩短了磨样时间与人磨样的疲劳度及提取失败的概率。

摘要： 本发明涉及植物RNA提取技术领域，具体涉及一种改良CTAB法抽提多糖多酚类植物RNA的方法。该方法包括以下步骤：将植物组织样品研磨至粉末状，加入改良后的提取液水浴裂解提取，离心收集上清，加入等体积氯仿混匀后静置，离心收集上清，加入6MLiCl溶液沉淀RNA，离心收集沉淀，加入75％无水乙醇洗涤沉淀后，再加入DNA消化液，水浴溶解RNA，最后再加入DNA酶灭活试剂，室温静置后，离心取上清即得。采用本发明改良后的方法提取的多糖多酚类植物RNA可用于全长转录组文库构建，提取成功率能从64％提高到82％，建库成功率能从92％提高到98％。

摘要： 本发明涉及CTAB法提取植物基因组DNA技术领域，具体是指一种利用改良CTAB法提取铁皮石斛茎基因组DNA的方法，具体包括以下步骤：(1)材料研磨：取200mg铁皮石斛茎置于提前预冷的研钵中研磨成粉末，将研磨后的粉末转移到2.0ml的离心管中；(2)去多糖处理；(3)提取液萃取；(4)DNA抽提；(5)DNA沉淀；(6)DNA沉淀的洗涤和溶解。本发明的有益效果是：以DTT代替有毒试剂β‑巯基乙醇，大大提高了实验的安全性，在CTAB裂解细胞前，先用溶液A进行数次的去多糖处理，能有效地提高后续DNA提取的质量，同时在溶液A中加入Sorbitol，能有效稳定渗透压，并优化细胞裂解液的配方，加入适量的PVP为了多酚的去除，加入SDS为了更好地去除蛋白质，最终使得DNA质量好。

摘要： 本发明属于分子生态学实验领域，具体提供了一种针对濒危半红树植物莲叶桐基因组DNA改良版的CTAB提取方法。濒危半红树植物莲叶桐，因富含多糖多酚，其组织研磨液极其粘稠，提取质量好的核酸极其困难。本发明在传统CTAB法基础上采用改进的裂解液对细胞进行裂解，并通过一定比例的Tris平衡酚‑氯仿‑异戊醇混合液进行抽提。再用改进体积的醋酸钠‑异丙醇进行沉淀DNA、纯化DNA，从而获得高质量的基因组DNA。采用本发明提供的濒危半红树植物莲叶桐核酸提取方法提取的DNA浓度高、纯度高，还不易降解，最重要的是能够有效去除多糖多酚。为后续的PCR扩增、分子标记技术开发、基因组文库构建等分子生物学实验奠定基础。

摘要： 一种利用改良CTAB法提取兜兰基因组DNA的方法，包括以下步骤：（1）兜兰叶片的采集与筛选，（2）超低温粉碎，（3）超声波辅助温育，（4）共振声混合乳浊，（5）DNA的沉淀制备，（6）DNA的精制与储藏。本发明的提取兜兰基因组DNA的方法，获得了理想的兜兰基因组DNA提取方法，为后续以基因组DNA为基础的分子遗传学实验研究奠定了基础。

摘要： 本发明公开了一种改良CTAB法提取棉花基因组DNA，包括以下步骤：（1）液氮研成粉末，加入CTAB 缓冲液65°C水浴摇动得含有DNA的提取液I；（2）冷却后加入RNase A后进行37°C水浴；（3）加入等体积的溶液A混匀离心得上清液I；（4）继续加入等体积的溶液A混匀离心得上清液II；（5）加入NaAc，然后加入无水乙醇水平摇动形成絮状沉淀；（6）离心，弃上清，洗涤沉弃去无水乙醇，干燥得沉淀DNA；（7）溶解沉淀DNA，保存于‑20°C冰箱中备用。本发明精简了CTAB法提取棉花叶片基因组DNA的步骤程序，大大缩短了实验时间，还降低了DNA提取成本，提高了RNA的消除效果，适合棉花叶片基因组DNA的大批量提取。

摘要： 一种能使CTAB法提取到真菌高质量基因组DNA的方法，属于分子生物技术领域。CTAB法提取DNA的接种选用含菌种的细沙直接接种、和/或用孢子悬液接种后再添加细沙培养、和/或培养的菌丝在提取DNA磨样时添加细沙磨样，至菌丝最终呈现丝滑状超细粉末）时止。上述一种能使CTAB法提取到真菌高质量基因组DNA的方法，可以显著提高提取的DNA的含量，并且对DNA的品质及得率都有显著提高；且该方法操作方便、实验稳定性强、可重复性高、准确快捷，在满足DNA提取质量的同时，又可在磨样环节大大节省劳动强度，即使大量提取DNA样品时一样有较高的磨样速度，极大的缩短了磨样时间与人磨样的疲劳度及提取失败的概率。

摘要： 本发明公开了一种利用CTAB法提取动物微生物粪便基因组的试剂盒及其提取方法，所述试剂盒主要是通过溶菌酶破碎粪便中的微生物细胞，利用CTAB溶液去除含有的蛋白杂质，同时利用硅基生物磁珠可以特异性吸附核酸的原理，将动物粪便中微生物的基因组吸附出来，本试剂盒操作方便、快捷，能够快速获得动物粪便微生物基因组。

摘要： 本发明涉及一种改良CTAB法提取头花蓼DNA，包括如下步骤：取材料，用液氮研成粉末，移入离心管，加入CTAB提取缓冲液，充分摇匀，并进行水浴、离心；取上清液,加入等体积的氯仿、异戊醇，取上清转移至另一离心管中，再次取上清液用氯仿、异戊醇抽提；将上清加入NaAc、异丙醇，轻轻颠倒混匀、离心，弃去上清液，用70%乙醇洗涤沉淀、离心,用小枪头吸干乙醇，风干；去除沉淀中的乙醇，用含RNA酶的TE溶解、消化至RNA完全裂解；分别用等体积的苯酚、氯仿、异戊醇，各抽提一次；将上清加入NaAc、冰冷无水乙醇，轻轻混匀、离心，沉淀用70%乙醇溶液洗涤，风干，加TE液溶解，低温保存。本发明采用改良CTAB法提取头花蓼DNA，方法简单、成本低廉，提取的头花蓼DNA纯度更高。

摘要： 本实用新型涉及一种CTAB法提取DNA的试剂盒，包括盒体，所述盒体中设有隔板，所述隔板将所述盒体依次分设为工具腔、容纳腔和试剂腔；所述容纳腔内设有与所述盒体滑动连接的抽盒；所述试剂腔所在的盒体一棱边设有与盒体铰接且与试剂腔适配的试剂箱，所述盒体外壁设有便于所述试剂箱转动于盒体外部的开口；所述盒体顶部铰接有顶盖。本实用新型提供了一种CTAB法提取DNA的试剂盒，可优化试剂配制过程，防止实验中倒置的离心管偏倒，实验过程大多数步骤均可在试剂盒上完成，提高了实验效率的同时，保证了试验数据的精确度。