突触体

摘要： 目的 研究菖蒲郁金汤对抽动秽语综合征(Tourette syndrome,TS)模型大鼠突触体中SNARE蛋白复合体的调控作用,揭示菖蒲郁金汤治疗TS的药效机制.方法 选择3周龄SD大鼠240只,依据随机数字表将SD大鼠分为空白组(60只)和造模组(180只),采用3,3'-亚氨基二丙腈(IDPN)腹腔注射法制备TS动物模型.造模成功后,再次随机将造模组大鼠分为模型组、硫必利组及菖蒲郁金汤组,每组60只.从造模完成后次日(即d0)开始灌胃给药,空白组与模型组给予生理盐水,其余各组给予相应药物,每日1次,连续给药4周.各组大鼠分别于第0、7、14、21、28天(即d0,d7,d14,d21,d28),随机抽取12只大鼠,麻醉后取纹状体,采用Percoll密度梯度离心法制备纹状体中的突触体,并在透射电镜下进行形态学鉴定.ELISA法检测纹状体多巴胺(Do-pamine,DA)含量,qPCR 和 Western blot法检测突触体中SNAP-25、Syntaxin-1a和VAMP-2 mRNA及蛋白的表达,免疫组织化学法检测纹状体上述指标的表达.结果 与空白组相比,模型组各观察点纹状体中DA含量降低(P＜0.01),突触体/纹状体中SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2 mRNA及蛋白的表达量显著降低(P＜0.05,P＜0.01);与模型组相比较,硫必利组及菖蒲郁金汤组在干预期间的各观察点(d7,d14,d121,d28)纹状体中DA含量以及突触体/纹状体内SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2 mRNA及蛋白的表达量呈逐渐升高趋势.在治疗结束后(d28),菖蒲郁金汤组突触体中SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2 mRNA,Syntaxin-1a蛋白及纹状体中SNAP-25、VAMP-2蛋白的表达高于硫必利组(P＜0.05,P＜0.01).结论 菖蒲郁金汤通过调控SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2的表达促进DA的释放,进而发挥其抗抽动的作用.

摘要： 目的 分析测定大鼠脊髓突触体中生理活性物质氨基酸神经递质、ATP、Ca2+等.方法 不连续性Percoll密度梯度离心法从Sprague-Dawley雌性大鼠中提取脊髓突触体.采用高效液相色谱仪检测其中氨基酸神经递质,紫外分光光度计检测ATP含量、Na+-K+-ATP酶活性、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性、总ATP酶活性,荧光分光光度计检测Ca2+浓度.结果 氨基酸神经递质主要为天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酸、γ-氨基丁酸;ATP浓度约414.7461μmol/mg,总ATP酶活性>Na+-K+-ATP酶活性>Ca2+-Mg2+-ATP酶活性;Ca2+浓度可用吸光度值直接换算.结论 大鼠脊髓突触体中含有多种生理活性物质,以上方法能准确地进行检测分析,了解其生理活性.

摘要： 目的研究人参对大脑皮质及海马突触体蛋白质的影响,揭示人参对中枢神经系统疾病防治的本质。方法将人参连续灌胃给予大鼠后,取其皮质及海马组织,采用密度梯度离心法制备突触体,经透射电镜及Western蛋白印迹实验验证后,提取各组织突触体中的蛋白质,应用蛋白质组学的方法检测突触体中蛋白质,进而对差异蛋白进行生物信息学分析并进行验证。结果本研究成功制备了大鼠脑组织的突触体;采用二维液相质谱系统结合TMT同位素标记技术,同时定性并定量了突触体中的5000多个蛋白质;大鼠给予不同剂量的人参后,在皮质及海马组织的突触体中,导致下调的差异蛋白明显多于上调的差异蛋白;生物信息学分析显示,这些差异蛋白主要定位于线粒体,直接或间接影响其氧化磷酸化过程。底物-解偶联抑制剂滴定实验证实,人参中的主要代表性皂苷可明显抑制线粒体的氧化磷酸化过程。结论人参可以调节线粒体的呼吸功能,进而改变细胞的能量代谢,这可能是人参防治神经系统疾病的原因之一。

摘要： 目的:研究抑郁症发病过程中突触蛋白表达的变化.方法:小鼠随机分为对照组和造模组,使用社会失败模型对造模组小鼠造模,之后将其分为对抑郁症敏感组及对抑郁症不敏感组.将以上3组小鼠分别断头取前额叶皮层、海马、纹状体并提取突触小体,通过免疫印迹检测突触小体内突触后致密蛋白95 (PSD-95)、桥尾蛋白(gephyrin)及突触蛋白1(synapsin-1)蛋白表达的变化.结果:与对照组相比,在前额叶皮层,对抑郁症敏感组及对抑郁症不敏感组小鼠的PSD-95水平下降,而对抑郁症敏感组小鼠的synapsin-1表达增多;在海马,对抑郁症敏感组及对抑郁症不敏感组小鼠的PSD-95水平下降;在纹状体,对抑郁症不敏感的小鼠gephyrin、synapsin-1蛋白表达显著增加.结论:在抑郁症发病中突触体内兴奋性及抑制性蛋白发生了变化,这些可能与突触功能的紊乱相关.

摘要： 目的 探讨大鼠衰老过程中脊髓突触体外周型苯二氮卓受体(PBRs)的变化以及与血小板膜PBRs的相关性. 方法 实验动物SD大鼠(雌雄各半)分为3月龄青年组和24月龄老龄组.动物断头处死后,迅速取脊髓.采用梯度离心技术制备脊髓突触体,低渗溶血法制备外周血血小板膜.应用放射配基[3H]PK11195结合实验测定PBRs结合活力. 结果 各组动物雄性、雌性间比较,脊髓突触体、外周血血小板膜PBRs结合活性差异均无显著意义(P＞0.05).3月龄和24月龄脊髓突触体[3H]PK11195结合活性分别为(213.94±10.65)和(50.65±2.74) fmol/mg pro.(t=51.418,P＜0.001),外周血血小板膜[3H]PK11195结合活性分别为(104.97±2.24)和(56.20±5.36) fmol/mg pro.(t=29.041,P＜0.001).与青年组比较,老龄组大脊髓突触体及血小板膜[3H]PK11195结合活性分别下降了76.33％、46.46％.血小板膜[3H]PK11195结合活性与脊髓突触体[3H]PK11195结合活性间具有显著相关性(r=0.985,P＜0.001). 结论 脊髓突触体PBRs水平呈增龄下降改变,血小板膜[3H]PK11195结合活性能够反映脊髓组织该指标的变化.%Objective To investigate the changes of peripheral benzodiazepine receptors (PBRs)in rat spinal cord synaptosomes during ageing and to explore the correlation between PBRs in spinal cord synaptosomes and PBRs on platelet membranes.Methods A total of 24 Sprague-Dawley rats were divided into 3-month group and 24-month group (n=6 males and 6 females for each).All animals were sacrificed by decapitation and the spinal cords were immediately removed.Synaptosomal fractions from spinal cords were isolated by gradient centrifugation.The platelet membranes were prepared from venous blood by the method of hypotonic haemolysis.The specific binding of the radioactive PBRs antagonist [3H]PK11195 to membranes was determined.Results No significant differences in [3H] PK11195 binding activity in spinal cords and platelet membranes were observed between male and female rats in the same group (all P＞0.05).[3H] PK11195 binding activity in spinal cords and platelet membranes were higher in 3-month group than in 24 month group [(213.94±10.65) fmol/mg pro.vs.(50.65± 2.74) fmol/mg pro.,(104.97± 2.24) fmol/mg pro.vs.(56.20±5.36) fmol/mg pro.,respectively,t=51.418,29.041,both P＜ 0.001].There was a positive correlation between [3H]PK11195 binding activity in platelet membranes and in spinal cord synaptosomes (r=0.985,P＜0.001).Conclusions The level of PBRs is gradually decreased in rat spinal cord synaptosomes with ageing.[3H] PK11195 binding activity of platelet membranes can reflect the changes of PBRs in spinal cords.

摘要： 研究替来他明-唑拉西泮合剂对大鼠大脑皮质突触体钙离子浓度的影响,探讨突触体钙离子浓度变化与替来他明-唑拉西泮合剂麻醉的关系.密度梯度离心法制备SD大鼠大脑突触体悬液,分别加入高、中、低浓度的替来他明-唑拉西泮合剂,1mol/L KCl诱导作为对照,采用荧光分光光度法测定突触体内钙离子浓度.结果表明,加入替来他明-唑拉西泮合剂后,突触体内钙离子浓度升高,与对照组比较差异极显著(P＜0.01)；随着药物浓度的增加,突触体内钙离子浓度逐渐升高；替来他明-唑拉西泮合剂麻醉对大鼠大脑皮质突触体钙离子浓度的影响存在浓度依赖性.结果提示,替来他明-唑拉西泮合剂引起大鼠脑神经突触前钙离子内流使突触体内钙离子浓度升高,促使突触囊泡释放抑制性神经递质可能是其产生全身麻醉作用的机理之一.

摘要： Aim:To explore the protective effect and mechanism of curcumin against gpl20 V3 loop-induced neuronal synaptosome insult in rat hippocampal neurons in vitro. Methods-. Hippocampal neu-rons of neonatal rats were isolated and cultured in the serum-free culture median] 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide (MTT) assay was used to measure cell viability with application of different doses of curcumin and gpl20. Fura-2/AM fluoremetry technique was used to detect the Ca concentration and observe the microstructure of hippocampal synaptosomes with transmission electron mi-croscope. Stereologic method was applied to analyze mitochondria Vvm, Nm, Vm in hippocampal synap-tosomes. Results-. 1 μnol/L curcumin showed no effect on neurons survival in 48 h, 2 μmoI/L and more higher concentration of curcumin can inhibit cell survial in 12 h(P 0. 05) , but cell survial depressed after 12 h (P <0. 05). gpl20 V3 loop induced synapto-somes swelling, and increased the mitochondrial Vum, Nm, Vm and Ca2+ concentration in the hippocampal synaptosomes (P<0. 05). Curcumin and nimodipine inversed the effect of gpl20 V3 loop, depressed synaptosomes swelling, decrease the mitochondria/Vum, Nm, Vm and Ca2+ concentration in the hippocam-pal synaptosomes (P<0. 05). Conclusion;The protective effect of curcumin on hippocampal neurons in a protective dose dependent manner and the neurotoxicity of gpl20 V3 loop was time dependent. Curcu-min can protect the hippocampal neurons through inhibiting the over-activated L-type Ca + channel and depressing the intracellular Ca + concentration, protect the modality and functions of neuronal synapto-somes, which may be beneficial treatment of HAND.%目的:探讨姜黄素对gp120 V3环所致大鼠海马神经元突触体损伤的保护作用及其机制.方法:采用无血清培养法培养大鼠海马神经元,MTT法确定姜黄素神经元保护性剂量和gp120 V3环神经元毒性剂量.应用Fura-2/AM钙离子探针检测各组突触体内Ca2+浓度,透射电镜观察突触体形态改变,体视学方法分析线粒体体密度Vvm、线粒体数密度Nm、线粒体的平均体积Vm.结果:浓度为1μmol/L的姜黄素在48h内对细胞的存活率无明显影响,浓度为2 μmol/L的姜黄素作用12 b以及更高浓度,显著抑制细胞存活率(P＜0.05)；gp120 V3环对大鼠海马神经元的毒性具有时间依赖性,其中各浓度gp120 V3环在作用2～8h范围内对细胞存活率无明显影响,在作用12 h后细胞存活率显著降低(P＜0.05),浓度为1 nmol/L的gp120 V3环作用24h后细胞存活率降低为(85.3±2.8)％,因此采用浓度1 nmol/L gp120 V3环观察其对大鼠海马神经元突触体损伤效应.与对照组相比,gp120 V3环孵育的突触体内线粒体明显肿胀,Vom、Nm、Vm增大,Ca2浓度升高(P＜0.01)；与模型组相比,姜黄素+gp120 V3环组与尼莫地平+ gp120 V3环组V(o)m、Nm、Vm明显减小(P＜0.01),Ca2+浓度降低(P＜0.05),差异有统计学意义.姜黄素或尼莫地平单独作用于突触体对其形态及Ca2+浓度无影响.结论:姜黄素对大鼠海马神经元的药理作用具有浓度依赖性；gp120 V3环对大鼠海马神经元的损伤具有时间依赖性.姜黄素可减轻gp120 V3环导致的神经元突触体损伤,减小gp120V3环引起的突触体内增大的线粒体V(om)、Nm、Vm,其机制可能抑制gp120 V3环过度激活的Ca2+通道,从而降低细胞内升高的Ca2+浓度.

摘要： 目的 评价异氟醚麻醉对老龄大鼠海马突触体蛋白质组的影响.方法 雌性SD大鼠27只,22月龄,体重480～550 g,采用随机数字表法,将其随机分为2组:对照组(C组,n=6)和异氟醚麻醉组(Ⅰ组,n=21).C组吸入含80％氧气的空氧混合气体2h,Ⅰ组吸入3％异氟醚麻醉诱导后,经口明视气管插管,吸入2％异氟醚+80％氧气维持麻醉2h.麻醉结束后24h时,进行Y型迷宫实验测试大鼠认知功能,记录训练次数.以训练次数＞ 75次为判断认知功能低下的标准,将Ⅰ组大鼠分为2组:认知功能低下组(IA组)和认知功能未低下组(IB组).Y型迷宫实验结束后,处死大鼠,取双侧海马组织,提取突触体,进行双向凝胶电泳和质谱分析.结果 Ⅰ组有6只大鼠发生认知功能低下,有13只大鼠未发生认知功能低下.与C组和IB组比较,IA组训练次数增多(P＜0.05)；C组和IB组间比较训练次数差异无统计学意义(P＞0.05).IB组和IA组差异表达的蛋白质有21个,其中11个蛋白质表达上调,10个蛋白质表达下调.C组和IA组差异表达的蛋白质有19个,其中12个蛋白质表达上调,7个蛋白质表达下调.经质谱分析鉴定出31个蛋白质.结论 异氟醚麻醉导致老龄大鼠认知功能低下可能与突触部位能量代谢相关蛋白、突触部位的细胞骨架结构及调节蛋白的改变有关.%Objective To investigate the effects of isoflurane anesthesia on hippocampus synaptosomes proteome in aged rats.Methods Twenty-seven 22- month-old SD rats weighing 480-550 g were randomly divided into 2 groups: control group (group C,n =6) and isoflurane group (group Ⅰ,n =21 ).In group C inhaled mixed gas containing 80％ oxygen for 2 h.In group Ⅰ the animals were endotracheal intubated after induction by 3％ isoflurane and inhaled 2％ isoflurane and 80％ oxygen for 2 h.Cognition function was evaluated by Y-maze at 24 h after anesthesia and the total training times were recorded.The total training times ＞ 75 was defined as cognitive dysfuction.In group Ⅰ the animals were divided into cognitive dysfuction group (group ⅠA) and non-cognitive dysfuction group (group IB) according to the results of Y-maze test.The animals were sacrificed and their hippocampi were removed and synaptosomes were extracted for two-dimensional gel electrophoresis.The different protein spots were analyzed by mass chromatographic analysis.Results Six rats had cognitive dysfuction (group IA) and another thirteen rats had no cognitive dysfuction (group IB).The total training times were significantly higher in group IA than in groups C and IB( P ＜ 0.05).There was no significant difference in the total training times between groups C and IB (P ＞ 0.05).There were 21 (11/10) different protein spots between groups IB and IA,and 19 (12/7) different protein spots between groups C and IA.Thirty-one protein spots were identified by means of MALDI-TOF-MS.Conclusion The cognitive dysfuction after isoflurane anesthesia in aged rats may be related to the changes of energy metabolism protein,cytoskeletal structure and regulatory protein in synapse of hippocampus.

摘要： 目的 建立小鼠突触体快速制备的新实验方法.方法 采用密度梯度离心法制备小鼠突触体,透射电镜观察其形态.结果 本实验所获突触体具有膜包围的连续椭圆形结构,其中可见线粒体和大量突触小泡,具有典型突触体形态结构特征.结论 本实验提供一种快速、简便、有效的小鼠突触体制备方法.

摘要： 目的 探讨母体铅染毒对仔鼠学习记忆及海马中突触体相关蛋白-25(SNAP-25)mRNA 表达的影响.方法 雌性小鼠自妊娠第1天开始经饮水染铅(0.3、1.0、3.0g/L),对照组饮蒸馏水,至仔鼠出生后21 d断乳为止.随机抽取各组仔鼠,在出生后第7、14、21天分别测其血液和海马组织中铅的含量;在出生后第21天时,进行水迷宫试验,分别采用反转录-聚合酶链反应和免疫组化方法测定各组海马组织中SNAP-25 mRNA和蛋白的表达.结果 与对照组比较,各剂量染铅组血液、海马组织中铅含量均明显升高,差异均有统计学意义(P0.05), however, the results of 1.0, 3.0 g/L groups (5.89±0.54,9.53± 1.03 ) were significantly different from those of the control group ( 1.73±0.07 ) (P<0.05 ,P<0.01 ). The expression of SNAP-25mRNA and protein was lower in lead exposed groups than that of the control group (P<0.05). Conclusion Maternal lead exposure may induce the damage in the ability of learning and memory of the offspring. The neurotoxicity of lead may be induced by decreasing the expression of SNAP-25 Mrna and protein so as to affect the release of neurotransmitter from presynaptic terminal resulted in nerve damages.

摘要： 体外测试了有机磷杀虫剂甲胺磷对神经细胞生长及脑突触体钙摄取的影响.结果表明:甲胺磷在较低浓度(0.1~1μg/ml)时可刺激成神经细胞瘤细胞生长,而在高浓度(100~1000μg/ml)却使成神经细胞瘤细胞的生长速度明显减慢;无论是高浓度还是低浓度的甲胺磷都能抑制大脑突触体对钙的摄取.钙通道阻断剂维尔帕米可以和甲胺磷协同作用抑制突触体对钙的摄取.提示有机磷杀虫剂甲胺磷的神经毒性可能与其破坏神经细胞的钙稳态相关.

摘要： 本申请实施例涉及神经网络领域。采用本发明提供的突触电路，包括：第一存储器、第二存储器和开关组件；开关组件包括第一开关管、第二开关管和第三开关管；第一开关管的第一端与第一存储器的第一端连接，第一开关管的控制端与第一位线接口连接；第二开关管的第一端与第二存储器的第一端连接，第二开关管的控制端与第二位线接口连接；第一存储器的第二端与第二存储器的第一端连接；第三开关管的第一端与第二存储器的第二端连接，第三开关管的第二端与字线接口连接，第三开关管的第三端接地。基于本申请实施例，通过第一开关管和第二开关管分别控制串联的第一存储器和第二存储器，在数据存储时可以减少存储器间的交叉干扰。

摘要： 本申请实施例涉及神经网络领域。采用本发明提供的突触模块、突触阵列以及基于突触阵列的权重调节方法，通过控制突触模块中的一个开关管处于工作状态，另一个开关管处于非工作状态，进而调节突触模块中的一个忆阻器的电导，而不影响另一忆阻器的电导，实现快速调节突触权重的同时还可以减少操作过程中串扰。此外，还通过一忆阻器存储待存储数据包括的高位数据，另一忆阻器存储待存储数据包括的低位数据，扩展了忆阻器的突触分辨率。

摘要： 表达和纯化同时缺失外显子3和5的α突触核蛋白选择性剪切体蛋白的方法，属于生物技术领域，是一种同时缺失外显子3和5的α突触核蛋白选择性剪切体蛋白在E.coli体内的表达和纯化方法。本发明的方法包括同时缺失外显子3和5的α突触核蛋白cDNA的获取、载体构建、蛋白诱导表达、GST‑α‑synδ3δ5纯化以及GST标签的去除步骤。本发明的方法实现了体外同时缺失外显子3和5的α突触核蛋白选择性剪切体的表达，为体外研究其聚集特性、细胞毒性、迁移特性以及同时缺失外显子3和5的α突触核蛋白选择性剪切体的动物模型建立奠定了基础，为深入探究其与帕金森氏症致病机制相关性研究提供了方法。

摘要： 本申请实施例涉及神经网络领域。采用本发明提供的突触模块、突触阵列以及基于突触阵列的权重调节方法，通过控制突触模块中的一个开关管处于工作状态，另一个开关管处于非工作状态，进而调节突触模块中的一个忆阻器的电导，而不影响另一忆阻器的电导，实现快速调节突触权重的同时还可以减少操作过程中串扰。此外，还通过一忆阻器存储待存储数据包括的高位数据，另一忆阻器存储待存储数据包括的低位数据，扩展了忆阻器的突触分辨率。

摘要： 本申请实施例涉及神经网络领域。采用本发明提供的突触电路，包括：第一存储器、第二存储器和开关组件；开关组件包括第一开关管、第二开关管和第三开关管；第一开关管的第一端与第一存储器的第一端连接，第一开关管的控制端与第一位线接口连接；第二开关管的第一端与第二存储器的第一端连接，第二开关管的控制端与第二位线接口连接；第一存储器的第二端与第二存储器的第一端连接；第三开关管的第一端与第二存储器的第二端连接，第三开关管的第二端与字线接口连接，第三开关管的第三端接地。基于本申请实施例，通过第一开关管和第二开关管分别控制串联的第一存储器和第二存储器，在数据存储时可以减少存储器间的交叉干扰。

摘要： 本公开描述了用于存储器内或近存储器处理的方法、设备及系统。尖峰神经网络中的尖峰事件可经由存储器系统进行处理。存储器系统可存储对应于一组目的地神经元的数据。所述存储器系统可以SNN的每一时间间隔，使对应于来自相应源神经元的一组突触前尖峰事件的数据通过。可随后将对应于所述组突触前尖峰事件的所述数据存储在所述存储器系统中。

摘要： 本发明公开了外泌体介导RNA CASC15干预阿尔茨海默症突触损失的应用，本发明分析发现CASC15低表达与AD的发生显著相关，然后通过超高速离心技术分离纯化过载CASC15的外泌体，并在早期阿尔茨海默症小鼠中验证了其治疗效果。突触损失是阿尔茨海默症最早的标志性事件之一，外泌体介导的2610307P16Rik(鼠源)传递可有效富集于小鼠大脑皮层与海马组织，小鼠海马CA1区神经元的突触结构得到显著改善，治愈早期阿尔茨海默症。

摘要： 本发明为一种基于三维突触的人工环路模体结构及其制备方法。该结构分为上、中、下三层；底层包括：衬底，衬底上分布有第二金属氧化物掺杂纳米线；L形的第一源极和第一漏极的竖边分列第二金属氧化物掺杂纳米线的两侧；中层为离子胶栅介质层，覆盖在底层上；上层包括L形顶部源级、第一金属氧化物掺杂纳米线、L形顶部漏级；其中，顶部第一金属氧化物掺杂纳米线的投影位置与底层的第二金属氧化物掺杂纳米线呈60～90°夹角；“L型”的第二源极和第二漏极相向而置。本发明可实现突触器件的多端三维调制以及与生物神经环路中相似的相互抑制模式，对未来神经修复以及大规模类脑集成运算存在重要意义。

摘要： 本申请涉及人工突触技术领域，具体公开了一种基于拓扑绝缘体的人工光电突触器件，包括Sb2Te3薄膜，以及设置在所述Sb2Te3薄膜两端的两个Au电极，该光电突触器件相比于需要额外刺激栅极电压的传统三端晶体管突触，制备过程简单，本发明基于拓扑绝缘体的人工光电突触器件具有简单的架构，制备过程简单，在空气中的性能稳定，且在可见光范围内表现出优异的光电流响应，通过调整光刺激的参数能够调制器件的光响应。此外将人工光电突触器件与循环神经网络结合，用于图像信息的处理，有助于提高在循环神经网络中的识别准确性，一系列可以表征图像的突触信号作为RNN的输入，通过有效利用突触时间序列数据提高了RNN的图像识别准确率，其准确率可以达到100％。

摘要： 本发明提供了一种提取神经突触体的方法。所述提取神经突触体的方法包括于2～8°C，依次获取组织匀浆，并对组织匀浆进行一次密度梯度离心和二次梯度离心，获得神经突触体。本发明的提取神经突触体的方法，全程控制在2～8°C进行操作，能够有效保持神经突触体中细胞活度，避免了RNA的降解，通过控制离心时离心液的密度梯度分布能够高效快速地获取神经突触体，缩短了提取时间，获得的神经突触体具有较高活性和总RNA完整性。