禽呼肠孤病毒

摘要： 为了了解禽呼肠孤病毒(ARV)在我国的流行情况及其生物学特性和致病特点,通过细胞传代、RT-PCR检测及序列分析,从山东省送检的病鸡关节组织中成功分离到1株病毒,将其命名为ARV-SD20-3203,样品中未检测到其他常见外源禽类病毒的核酸。禽呼肠孤病毒主要保护性抗原σC基因的遗传进化分析结果表明,ARV-SD20-3203属于ARV基因V型,与基因Ⅴ型参考毒株918和1017-1的遗传距离较近,其氨基酸序列同源性分别为93.0%和92.4%,而与其他基因型毒株的遗传距离较远。ARV-SD20-3203毒株在LMH细胞上增殖良好;对鸡胚和雏鸡均具有明显的致病性,接种鸡胚可引起100%死亡,接种1日龄SPF雏鸡可引起75%死亡,其中SPF雏鸡接种病毒后第5天为死亡高峰期,第8天之后,不再出现SPF雏鸡死亡。该研究分离到1株基因V型ARV毒株,这为了解我国ARV变异株的流行及遗传进化特征提供了重要的材料。

摘要： 近年来,禽呼肠孤病毒(ARV)在我国白羽肉鸡群中的感染率呈上升趋势,流行范围较广,给我国肉鸡养殖企业带来了较大经济损失。ARV易变异重组,因此全面了解其分子流行病学特征具有十分重要的意义。为了解我国白羽肉鸡群中ARV的遗传变异特点,2020—2021年从山东、河北、福建、安徽、辽宁、江苏等6个省份收集疑似ARV感染样品,采用RT-PCR方法筛选阳性样本,然后对阳性样本进行σC基因(1088 bp)测序,根据测序结果分析ARV不同基因型分布规律及占比。结果显示:2020—2021年,从6个省份中,经RT-PCR检测,检出ARV阳性样品157份,总阳性检出率为62.1%,不同省份的阳性检出率为44.4%~77.3%。157份阳性样品可分为6个基因型,其中基因1型61份(38.85%)、基因2型41份(26.11%)、基因3型15份(9.56%)、基因4型9份(5.73%),基因5型30份(19.11%),基因6型1份(0.64%);61份基因1型样品中,38份与标准ARV疫苗株(S1133)属于同一亚分支,另外23份与4599参考株处于单独的另一亚分支。结果表明:我国肉鸡群中存在一定程度的ARV流行;流行的ARV基因型较为复杂,且存在基因1型变异毒株,当前的疫苗株已不能对其提供足够的保护。结果提示,今后需要进一步开展ARV感染监测,评估其流行及变异情况,调整免疫策略,加快新疫苗等防疫技术及产品研发。本研究初步了解了我国部分省份的ARV分子流行病学特征,对我国ARV感染的防控具有重要意义,也为变异株新型疫苗研发提供了依据。

摘要： 禽呼肠孤病毒可引起鸡多种疾病,如病毒性关节炎或腱鞘炎、呼吸道疾病、矮小综合征、肠道疾病、吸收不良综合征和免疫抑制等,还与泄殖腔黏连和溃疡性肠炎等肠道疾病、呼吸道疾病、包涵体肝炎、心脏病变导致的雏鸡猝死等其他疾病有关。

摘要： 1鸡传染性生长障碍综合征1.1特点此类病症由于主要侵蚀的对象为肉用仔鸡,因此又会被称作是传染性腺胃炎。目前来看,其病源仍然没有得到明确,根据相关研究暂定为禽呼肠孤病毒。主要表现便是饲料带来的实际效果有所降低,仔鸡的生长速度减缓,存在一定的运动障碍。由于表现并不明显,因此经常会被养殖户忽略,从而带来了无形的经济损失。此类病症主要的传播渠道为两个,分别是水平传播和垂直传播。

摘要： 禽呼肠孤病毒(avian reovirus, ARV)主要引起家禽病毒性关节炎和免疫抑制,进而导致继发感染。近年来,随着ARV及其变异毒株的出现,加之传统疫苗对变异株的保护力不足,且没有特效药物治疗,使我国禽养殖业面临ARV感染的巨大风险。目前禽养殖场主要通过严格的生产管理结合周期性检测对禽呼肠孤病毒病进行防控。因此,本文着重介绍并分析了国内外已报道的ARV检测方法,为ARV的监测及新型诊断技术的研发提供依据,同时也为疫病的防控提供参考。

摘要： 本研究根据GenBenk中σC的序列设计特异性引物,通过PCR扩增σC基因,构建真核表达载体pEF1α-HA-σC,转染DF1细胞,在DF1细胞中表达ARVσC蛋白。结果显示,成功在DF1细胞中表达ARVσC蛋白,大小约为37 ku,Western-blot分析表明,表达的蛋白具有良好的反应原性,激光共聚焦显微镜观察发现在DF1细胞中表达的σC蛋白定位于细胞质中。本研究为今后深入研究σC蛋白在ARV感染过程中的功能和在ARV天然免疫中的具体调控机制奠定了基础。

摘要： 旨在研究肉鸡呼肠孤病毒分离株致病与基因组变异情况.2017年从山东潍坊地区跗关节肿胀、出血严重商品肉鸡中收集病料,进行病毒分离,通过RT-PCR检测、电镜观察对病毒进行鉴定;将分离到的病毒回归商品肉鸡;设计18对引物对分离株全基因组扩增测序,并进行了遗传进化分析;将分离毒株与经典毒株S1133进行血清交叉中和试验.结果表明分离到一株禽呼肠孤病毒(命名为WF17),回归商品肉鸡能完全复制出临床症状,并能从试验鸡中重新分离到该病毒.该分离株基因组完全符合禽呼肠孤病毒基因组结构特点,主要抗原σC蛋白基因与台湾918株最接近,相似性为92.7％,与S1133株的相似性只有55.9％.WF17株与S1133株的抗原相关指数(R值)只有0.19.目前以S1133株为主的商品化疫苗无法对禽呼肠孤病毒变异株产生有效保护.

摘要： 为了解规模化肉鸡场鼻气管鸟杆菌(Ornithobacterium rhinotracheale,ORT)、禽呼肠孤病毒(Avian Reovirus,ARV)和禽偏肺病毒(Avian metapneumovirus,aMPV)的感染情况,用ELISA方法对2017年冬季和2018年春季自河北唐山地区动态采集的肉鸡血清进行了ORT、ARV和aMPV抗体检测.结果表明:唐山地区规模化肉鸡场在冬、春两季均存在ORT、ARV和aMPV这3种病原的混合感染,尽管冬、春两季肉鸡群3种抗体水平存在动态差异,但两季均各出现了2次ORT感染、2次ARV感染和1次aMPV感染.应引起相关部门和人员高度重视.

摘要： [目的]构建鸡胚成纤维细胞(CEF)的cDNA文库并筛选与禽呼肠孤病毒(ARV)σA蛋白相互作用的宿主蛋白,为揭示互作蛋白对ARV复制及凋亡的分子调控机制打下基础.[方法]采用TRIzol法提取CEF细胞总RNA,以SMART技术和LD-PCR合成双链cDNA(ds cDNA),ds cDNA和pGADT7-Rec共转化Y187酵母感受态细胞,构建cDNA文库;将pGBKT7-σA诱饵质粒转至Y2HGold酵母感受态细胞中,并与构建的cDNA文库进行酵母双杂交筛选,筛选出的候选文库菌经质粒提取后与pGBKT7-σA诱饵质粒再共转化Y2HGold酵母菌,筛选出能在SD-/Trp/-Leu/-Ade/-His/X-α-Gal/Aba固体培养基上生长且明显变蓝的菌落,最后提取蓝色酵母菌质粒进行测序分析.[结果]构建的CEF细胞cDNA文库库容为1.6×106 CFU,文库滴度为3.1×108 CFU/mL,插入片段大小集中在300～2000 bp,重组率为91.67％.以含有pGBKT7-σA的Y2HGold酵母菌与cDNA文库酵母菌进行双杂交,阳性克隆能在SD-/Trp/-Leu/-Ade/-His/X-α-Gal/Aba(SD/-4/X/A)固体培养基上长出菌落且明显变蓝,测序结果显示共筛选出4个能与σA蛋白相互作用的宿主蛋白,分别是初期多肽相关复合体α亚基(NACA)、核苷二磷酸激酶2(NME2)、假定蛋白及线粒体核糖体蛋白S9(MRPS9).[结论]通过SMART技术构建的CEF细胞cDNA文库具有较好的库容和滴度,且从cDNA文库中筛选出4种与ARVσA蛋白相互作用的宿主蛋白,为后续研究互作蛋白对ARV复制及凋亡的分子调控机制提供了可靠数据.

摘要： 本研究旨在对临床发现的河北某规模鸡场疑似禽呼肠孤病毒和巴氏杆菌混合感染的病死肉鸡进行诊断,为临床上诊断和控制该疫病提供借鉴.病料采自2014年11月河北某规模鸡场4周龄左右的病死肉鸡.根据发病鸡的流行病学调查、临床症状和病理变化特点对疫病进行初步诊断.将采集的病料进行RT-PCR检测,细菌的分离和PCR检测,病理组织学观察等系统分析;同时,对分离细菌进行药物敏感试验,筛选敏感药物.经禽呼肠孤病毒σB基因和多杀性巴氏杆菌KMT-1基因特异性引物的扩增结果均为阳性；镜检分离菌，可见两极深染的短杆菌；病理组织学观察可见心脏、肝脏水肿，并伴有异嗜性粒细胞浸润，肺脏出血严重。同时结合流行病学调查、临床症状和病理变化特点，最终确诊该病为肉鸡禽呼肠孤病毒和巴氏杆菌混合感染。药敏试验结果表明，该巴氏杆菌分离株对头孢曲松、头孢哌酮等药物高度敏感。

摘要： 研究禽呼肠孤病毒S1基因编码的σ3基因在烟草中的表达及其表达产物的反应原性.根据GenBank中公布的禽呼肠孤毒株S1133的基因序列,设计特异引物扩增σ3基因,构建重组植物表达载体pBI121-σ3,热激法转化农杆菌EHA105感受态细胞,筛选含有重组质粒的pBI121-σ3的阳性工程菌株EHA105.采用农杆菌介导的叶盘法转化野生型烟草,卡那霉素筛选获得抗性植株.随后通过σ-3基因的特异引物,PCR方法初步筛选获得转σ3基因的烟草植株.进一步对阳性植株通过实时荧光定量PCR方法检测σ3基因在转基因烟草中的拷贝数.并通过Western-blotting方法对转基因烟草中表达的σ3融合蛋白的反应原性进行分析.结果成功地构建了植物表达载体pBI121-σ3，筛选获得低拷贝的转σ3基因的烟草，σ3融合蛋白能够在烟草中表达且具有相应的反应原性，为进一步研究σ3基因的功能和利用植物作为生物反应器生产σ盯3蛋白口服疫苗的研发奠定了基础。

摘要： 为了研究在禽呼肠孤病毒(ARV)不同毒力毒株感染后不同时间点宿主细胞中蛋白质组变化,运用双向凝胶电泳技术和质谱鉴定的蛋白质组学方法,对ARV强毒株S1133、弱毒疫苗株aS1133感染Vero细胞和对照细胞在不同时间点的蛋白样品进行检测.鉴定结果表明共鉴定出45个差异表达蛋白,这些蛋白包括α-烯醇化酶(a-enolase)、过氧化物酶(Prx4)、hnRNPs、微管蛋白(Tubulin)、蛋白磷酸酶、转录延伸因子等.GO软件分析显示这些差异蛋白主要参与细胞信号、细胞骨架组成、能量代谢、核酸代谢、蛋白质折叠、细胞增殖及凋亡等生物学功能.荧光定量RT-PCR验证表明hnRNP和Prx-4在S1133感染细胞中表达水平持续上调,而Tubulin和a-enolase仅分别在48h和24h是表达上调,与双向凝胶电泳的结果一致.以上试验数据揭示了ARV不同毒力毒株感染后细胞中蛋白表达的差异变化,为进一步阐明ARV感染致病机制奠定了基础.

摘要： 构建一种用于检测禽呼肠孤病毒(ARV)的新型电化学免疫传感器.制备石墨烯-甲壳胺-金纳米粒子(G-Chi-Au)纳米复合物用于修饰金电极作为传感器平台用于固定待测样品,同时制备石墨烯-甲壳胺-银纳米粒子-禽呼肠孤单克隆抗体(G-Chi-Ag-MAb-ARV)纳米复合物作为传感器的信号放大材料,构建电化学免疫传感器.所建立的电化学免疫传感器ARV的检测敏感度为1015 TCID50/mL,对非目标禽病原体,如H5N1、H3N6和H9N2亚型禽流感病毒、新城疫病毒(NDV)、鸡白痢沙门氏菌(SP)、喉气管炎病毒(LTV)、传染性支气管炎病毒(IBV)和传染性法氏囊病毒(IBDV)等检测没有出现G-Chi-Ag-MAb/ARV的特征吸收峰,表明该传感器具有很高的敏感性和特异性.本研究所建立的传感器特异性高,敏感性好,为禽呼肠孤病毒提供一种新的快速检测诊断技术.

摘要： 本研究以携带有呼肠孤病毒的雏鸭为试验动物，人工感染解没食子酸链球菌巴氏亚种，旨在为临床发病鸭的有效诊断提供科学依据。本研究采用解没食子酸链球菌巴氏亚种接种AL101002菌株感染携带有禽呼肠孤病毒的7日龄雏鸭10羽，颈部皮下接种TSB菌液0.2 mL/羽，CFU为1.5×109/mL，复制雏鸭的混合感染模型，分别在感染后5d,14d对雏鸭的临床症状、剖检症状、组织学病理变化进行观察。研究结果表明:禽呼肠孤病毒感染雏鸭可以引起雏鸭的免疫抑制，从而导致雏鸭机体的免疫力下降，但雏鸭的死亡率很低，人工接种高毒力株解没食子酸链球菌巴氏亚种后，雏鸭的死亡率显著升高。显然当雏鸭的免疫器官受到损伤时，解没食子酸链球菌巴氏亚种可以乘机侵人血液，导致多器官损伤及败血症，尤其是较单独感染时脑组织的损伤最为严重。因此，携带有禽呼肠孤病毒的雏鸭在感染解没食子酸链球菌巴氏亚种后，更有助于细菌侵人机体，逃避宿主的免疫机制，近而在机体内大量增殖，对雏鸭造成更严重的病理损伤。

摘要： 目的：建立的双抗体夹心ELISA方法检测禽呼肠孤病毒特异、敏感。方法：应用Western-blotting,Dot-ELISA、直接免疫荧光(FA)法检测检测单抗，并用单抗分型系统对制备的以灭活的纯化病毒按每鼠100μg的用量免疫BALB/c小鼠,制备的分泌单克隆抗体进行鉴定。用单抗建立双抗体夹心ELISA方法检测禽呼肠孤病毒，并进行特异性和敏感性实验。结果：经鉴定获得1株能稳定分泌抗ARV抗体的阳性杂交瘤细胞株SF6-3 K3。结论：所建立双抗体夹心ELISA检测禽呼肠孤病毒特异，能检出5X 10-5μg,/μL的病毒量。

摘要： 目的：针对ARV sigmaC基因的引物和1条特异性TaqMan探针，建立了一种快速检测ARV病毒载量的TaqMan荧光定量RT-PCR方法。方法：根据GenBank中发布的ARV基因组序列设计1对针对σC基因的引物以及1条特异性TaqMan探针，利用建立的real-time RT-PCR进行特异性检测。结果：均为阴性，而阳性质粒标准品有良好的扩增，表明该方法具有良好的特异性。结论：建立的检测禽呼肠孤病毒real-time RT-PCR方法，从病毒RNA的提取、反转录到荧光定量RT-PCR检测可在较短的时间内完成，比传统的病毒分离实验、病毒中和实验等省时省力，极大的提高了效率。

摘要： 为确定禽呼肠孤病毒(ZJS株)种毒最高使用代次，将禽呼肠孤病毒C4-C7、C10和c15共6个代次种毒进行了对雏鸡的免疫攻毒保护试验，结果所有使用代次的种毒免疫攻毒后的保护率均达到80%以上，各代次之间没有明显差异，最高代次(C15代)仍具有良好的免疫原性，因此，确定禽呼肠孤病毒基础种毒为C2-C4代，生产种毒为C5～C7代，产品最高代次不超过C10代，可以保证种毒的免疫原性和产品的质量。

摘要： 本研究对ARV 15个蛋白的氨基酸序列进行了分析，表明其中σA、σNS、μA、μB和μNS共5个蛋白具有PXXP和YXXXM/YXXM基序（即这5个蛋白具有潜在激活PI3K/Akt信号通路的活性），并且这些氨基酸序列在ARV不同毒株之间都是保守的。因此本课题选取这5个蛋白作为研究对象，构建了重组质粒σA-pcA-GEN、σNS-pcAGEN、pdA-pcAGEN、μB-pcAGEN和μLNS-pcAGEN，转染Vero细胞后，分析Vero细胞P-Akt表达量的差异。结果说明，ARV的crA蛋白和σNS蛋白能激活P13K/Akt信号通路，使细胞P-Akt的表达量增高。

摘要： 根椐GenBank中已发表的禽呼肠孤病毒(ARV)、禽网状内皮增生病病毒(REV)、禽白血病病毒(ALV)等3种病毒基因组序列,设计了3对分别与ARV、REV和ALV某段基因序列互补的引物.在建立各病毒单项RTPCR技术的基础上,优化三重RT-PCR反应条件,建立了3种病毒的三重RT-PCR技术.结果表明,用这3对引物对同一样品中的ARV、REV、ALV核酸模板进行三重RT-PCR扩增,可同时扩增ARV的247bp,ALV的675bp,REV的467bp的特异性片段,而对其他6种禽病病原的PCR扩增结果均为阴性.敏感性测定结果表明,该三重RT-PCR技术能检出10pg的ALV、1pg的ARV和10pg的REV模板.用42份临床病料对本研究多重RT-PCR技术和单项RT-PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为92％以上.表明建立的多重RT-PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这3种病毒的同时检测和鉴别诊断.

摘要： 本发明公开了一种用于鉴定新型鸭呼肠孤病毒和新型鹅呼肠孤病毒的检测试剂盒及其应用，该试剂盒基于SEQ ID NO:3所示的探针和SEQ ID NO:1～2所示的引物对构成。基于该检测试剂盒的检测方法检测速度快且高通量，对于新型鸭呼肠孤病毒和新型鹅呼肠孤病毒具有较好的特异性，对于新型鸭呼肠孤病毒的最低检测限可达到17.8copies，对于新型鹅呼肠孤病毒的最低检测限可达到35.3copies。该检测方法对于新型鸭呼肠孤病毒和新型鹅呼肠孤病毒的监测和防控具有极为重要的意义。

摘要： 本发明公开了一种用于鉴定新型鸭呼肠孤病毒和新型鹅呼肠孤病毒的检测试剂盒及其应用，该试剂盒基于SEQ ID NO:3所示的探针和SEQ ID NO:1～2所示的引物对构成。基于该检测试剂盒的检测方法检测速度快且高通量，对于新型鸭呼肠孤病毒和新型鹅呼肠孤病毒具有较好的特异性，对于新型鸭呼肠孤病毒的最低检测限可达到17.8copies，对于新型鹅呼肠孤病毒的最低检测限可达到35.3copies。该检测方法对于新型鸭呼肠孤病毒和新型鹅呼肠孤病毒的监测和防控具有极为重要的意义。

摘要： 本发明提供一种番鸭呼肠孤病毒和新型鸭呼肠孤病毒双重TaqMan荧光定量RT‑PCR检测试剂盒，所述试剂盒包括2对引物和2条探针，具体序列如SEQ ID NO.1‑6所示。本发明通过所述试剂盒建立能够同时对鸭群中番鸭呼肠孤病毒和新型鸭呼肠孤病毒鉴别诊断的一步法检测方法，程序快速、简便、特异性强。目前，还没有基于TaqMan‑MGB的双重实时荧光定量PCR检测引物及方法可以同时鉴别检测MDRV和NDRV的发明专利，本研究可以填补这方面的空白。

摘要： 本发明涉及一种用于检测鸡呼肠孤病毒和火鸡呼肠孤病毒的双重PCR试剂盒及应用。本发明根据鸡呼肠孤病毒S3基因序列和火鸡呼肠孤病毒的S1基因序列各设计一对PCR引物，通过双重PCR可实现对鸡呼肠孤病毒和火鸡呼肠孤病毒的同步检测与鉴别。本发明适用于家禽临床样品中鸡和火鸡呼肠孤病毒的检测与鉴定，其中对鸡呼肠孤病毒和火鸡呼肠孤病毒的最低检测限分别为90.26 pg/μL、63.64 pg/μL，具有高效、快速、准确的特点。

摘要： 本发明涉及禽呼肠孤病毒检测技术领域，特别涉及环介导等温扩增禽呼肠孤病毒的引物，包括三对特异性引物，序列如序列表所示。一种禽呼肠孤病毒的检测试剂盒，包括环介导等温扩增反应液，环介导等温扩增反应液中含有上述三对特异性引物。一种禽呼肠孤病毒的检测方法，使用所述的检测试剂盒对样品RNA进行环介导等温扩增反应，同时设置阳性对照组和阴性对照组，所述环介导等温扩增反应条件为：59-65°C、30-75分钟。本发明的禽呼肠孤病毒检测试剂盒，特异性和敏感性高，可检测出100个拷贝的RNA，操作简单，观察方便。

摘要： 本发明公开了一种鉴定鸡细小病毒和禽呼肠孤病毒的引物组合及其应用。本发明的引物组合由引物对I和引物对II组成。引物对I由引物ChPV‑F和ChPV‑R组成，分别如序列表1、2所示。引物对II由引物ARV‑F和ARV‑R组成，分别如序列表3、4所示。本发明还保护所述引物组合在鉴别鸡细小病毒和禽呼肠孤病毒中的应用、鉴定待测病毒是否为鸡细小病毒或禽呼肠孤病毒中的应用、鉴定待测样本是否感染了鸡细小病毒和/或禽呼肠孤病毒中的应用。本发明建立的二重PCR可用于快速检测鸡细小病毒和禽呼肠孤病毒的混合感染，适于大批量检测，既可节约成本和节省时间，又能减少污染，具有很高的实用价值。

摘要： 本发明涉及禽呼肠孤病毒检测技术领域，特别涉及环介导等温扩增禽呼肠孤病毒的引物，包括三对特异性引物，序列如序列表所示。一种禽呼肠孤病毒的检测试剂盒，包括环介导等温扩增反应液，环介导等温扩增反应液中含有上述三对特异性引物。一种禽呼肠孤病毒的检测方法，使用所述的检测试剂盒对样品RNA进行环介导等温扩增反应，同时设置阳性对照组和阴性对照组，所述环介导等温扩增反应条件为：59-65°C、30-75分钟。本发明的禽呼肠孤病毒检测试剂盒，特异性和敏感性高，可检测出100个拷贝的RNA，操作简单，观察方便。

摘要： 本发明公开了一种鉴定鸡细小病毒和禽呼肠孤病毒的引物组合及其应用。本发明的引物组合由引物对I和引物对II组成。引物对I由引物ChPV-F和ChPV-R组成，分别如序列表1、2所示。引物对II由引物ARV-F和ARV-R组成，分别如序列表3、4所示。本发明还保护所述引物组合在鉴别鸡细小病毒和禽呼肠孤病毒中的应用、鉴定待测病毒是否为鸡细小病毒或禽呼肠孤病毒中的应用、鉴定待测样本是否感染了鸡细小病毒和/或禽呼肠孤病毒中的应用。本发明建立的二重PCR可用于快速检测鸡细小病毒和禽呼肠孤病毒的混合感染，适于大批量检测，既可节约成本和节省时间，又能减少污染，具有很高的实用价值。

摘要： 本发明公开了一种用于检测或区分禽呼肠孤病毒4种不同基因型的多重PCR试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有多重PCR引物组。所述的多重PCR引物组由1条通用上游引物，和分别用于扩增ARV‑Ⅰ、ARV‑Ⅰ‑sub、ARV‑Ⅱ以及ARV‑Ⅴ特异性基因区域的4条特异性下游引物组成，其中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，分别用于扩增ARV‑Ⅰ、ARV‑Ⅰ‑sub、ARV‑Ⅱ、ARV‑Ⅴ特异性基因区域的4条特异性下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2‑5所示。实验结果表明，该方法敏感性高，特异性良好，对人工感染动物试验样品检测结果表明，mPCR与常规PCR方法检测结果一致，符合率为100％，适用于禽病毒性关节炎临床诊断、流行病学调查以及临床监测工作。

摘要： 本发明公开了禽呼肠孤病毒微滴数字PCR检测引物组合物及其检测方法，属于微生物的测定或检验方法技术领域。本发明提供检测或辅助检测禽呼肠孤病毒的引物及探针组合物，所述引物及探针组合物包括禽呼肠孤病毒引物探针，所述禽呼肠孤病毒引物探针由特异扩增含有核苷酸序列是SEQ ID No.1的DNA片段在内的禽呼肠孤病毒基因组DNA片段的引物和与核苷酸序列是SEQ ID No.1的DNA片段特异结合的探针组成。本发明提供的用于检测禽呼肠孤病毒的引物及探针组合物具有高度的灵敏性，检测线可为10copies