眼镜蛇毒

摘要： 目的 通过层析法从广西眼镜蛇毒中分离得到电泳纯的细胞毒素-2(CTX-2),探索CTX-2对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的增殖抑制作用.方法 采用DEAE-Sepharose CL-6B阴离子交换层析、Spehadex G-50凝胶层析和Macro-prep High S阳离子交换层析结合的方法分离眼镜蛇毒粗毒;经SDS-PAGE电泳鉴定蛋白纯度;NanoLC-ESI-MS/MS质谱方法鉴定其组分并测定分子量;CCK-8法检测CTX-2对HSC-T6的增殖抑制作用,确定其最小有效浓度.结果 眼镜蛇毒粗毒经分离纯化获得电泳纯的CTX-2,其分子量约为9.548 kD;不同浓度CTX-2作用于HSC-T6细胞24 h后,其增殖抑制作用随浓度增加而增大,呈量效关系,抑制增殖的最小有效浓度为8 mg/L,IC50为11.52 mg/L.结论 广西眼镜蛇毒粗毒经三步分离法得到电泳纯且具有高生物活性的CTX-2;广西眼镜蛇毒CTX-2可抑制HSC-T6细胞增殖,抑制作用呈量效关系.

摘要： 目的 探讨眼镜蛇毒神经生长因子NGF对肝纤维化关键细胞LX2的作用及机制.方法 采用CCK-8法检测不同浓度NGF和LY294002对LX2细胞增殖的影响,流式法检测NGF对LX2细胞凋亡的影响,Western blot法研究NGF和LY294002单用与联用对p-Akt蛋白水平表达的影响.结果 NGF可降低LX2细胞存活率,最小有效浓度为1 mg?L-1;增加LX2细胞凋亡率;降低p-Akt表达水平,而对Akt的表达水平无明显影响.结论 NGF可通过抑制PI3K/Akt信号通路的激活,促进LX2细胞凋亡,并有一定的浓度依赖性.本研究对阐明肝纤维化的发病机制,为临床上治疗肝纤维化均有重要意义.%Aim To study the effect of cobra venom nerve growth factor ( NGF) on inducing the apoptosis of LX2 cells, the key cells of hepatic fibrosis , through Akt signaling pathway and its underlying mechanism .Methods CCK-8 method was used to detect the pro-liferation of LX2 cells at different concentrations of NGF and LY294002 .Flow cytometry was applied to detect the effect of NGF on the apoptosis of LX 2 cells. Western blot was used to study the effects of NGF and LY294002 respectively , and their combination on the p-Akt protein level .Results NGF could decrease the survival rate of LX2 cells, and the minimum effective concentration was 1mg· L-1; it increased the apopto-sis rate of LX2 cells within the rise of concentration un-der a certain of range and decreased the expression level of p-Akt, but it had no significant effect on the ex-pression of Akt .Conclusions NGF may promote the apoptosis of LX2 cells by inhibiting the activation of PI3K/Akt signaling pathway in a concentration-de-pendent manner .The study of the pathogenesis of liver fibrosis is significant for the clinical treatment of liver fibrosis.

摘要： 目的:研究江西眼镜蛇细胞毒素对白血病CEM细胞的抑制作用及其机制.方法:以急性T淋巴细胞白血病CEM细胞作为研究对象,采用CCK-8比色试验检测江西眼镜蛇细胞毒素对CEM细胞的抑制作用;光镜下观察细胞毒素作用CEM细胞后的抑制情况和细胞形态学改变;Western blotting检测细胞毒素对CEM细胞的凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-8表达影响.结果:江西眼镜蛇细胞毒素能明显抑制CEM细胞的增殖,抑制率与剂量成正相关;细胞毒素高浓度(2μM以上)作用下,抑制作用随时间延长呈现先增加后有所降低的趋势,最佳的作用时间在24h,此时IC50为1.613μM;细胞毒素在低浓度(0.25μM以下)时,随着作用时间的延长,抑制作用迅速下降.倒置显微镜下观察到各给药组作用24h后CEM细胞数目随药物浓度的增加而减少且折光能力也逐渐降低.光镜下观察到各给药组CEM细胞体积明显缩小,胞膜皱缩,甚至还个别细胞出现核膜裂解、染色质分割成块状.Western blotting检测到眼镜蛇细胞毒素不同浓度组的Caspase-3、Caspase-8蛋白表达比对照组均有增加,以高浓度(2μM)组增加明显.结论:江西眼镜蛇细胞毒素可以抑制CEM细胞增殖,其机制可能与其诱导CEM细胞凋亡有关.

摘要： 目的:研究江西眼镜蛇细胞毒素对白血病CEM细胞的抑制作用及其机制.方法:以急性T淋巴细胞白血病CEM细胞作为研究对象,采用CCK-8比色试验检测江西眼镜蛇细胞毒素对CEM细胞的抑制作用;光镜下观察细胞毒素作用CEM细胞后的抑制情况和细胞形态学改变;Western blotting检测细胞毒素对CEM细胞的凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-8表达影响.结果:江西眼镜蛇细胞毒素能明显抑制CEM细胞的增殖,抑制率与剂量成正相关;细胞毒素高浓度(2μM以上)作用下,抑制作用随时间延长呈现先增加后有所降低的趋势,最佳的作用时间在24h,此时IC50为1.613μM;细胞毒素在低浓度(0.25μM以下)时,随着作用时间的延长,抑制作用迅速下降.倒置显微镜下观察到各给药组作用24h后CEM细胞数目随药物浓度的增加而减少且折光能力也逐渐降低.光镜下观察到各给药组CEM细胞体积明显缩小,胞膜皱缩,甚至还个别细胞出现核膜裂解、染色质分割成块状.Western blotting检测到眼镜蛇细胞毒素不同浓度组的Caspase-3、Caspase-8蛋白表达比对照组均有增加,以高浓度(2μM)组增加明显.结论:江西眼镜蛇细胞毒素可以抑制CEM细胞增殖,其机制可能与其诱导CEM细胞凋亡有关.

摘要： 目的:探讨皖南地区眼镜蛇毒活性组分(cobra venom analgesic factor,CVAF)外用镇痛的效应及其可能的作用机制。方法:雄性SD大鼠分为生理盐水对照组(NS组)、完全弗氏佐剂炎痛组(CFA组)、双氯芬酸钠镇痛阳性对照组(CFA+SL组)、氟比洛芬镇痛阳性对照组(CFA+FB组)、CVAF镇痛实验组(CFA+CVAF组),比较观察CVAF凝胶局部外用的镇痛效果。分别采用热刺痛仪及机械压痛仪测定各组大鼠痛阈,ELISA法检测各组大鼠脊髓匀浆中IL-1、TNF-α的含量,HE染色法观察大鼠足趾组织病理变化。结果:与CFA组比较,CVAF镇痛组大鼠在给药后的第7日和第14日的体质量差异具有统计学意义(P <0. 05、P <0. 01),CVAF组大鼠的机械压痛阈和热痛阈都有所提高(P <0. 01),脊髓匀浆中IL-1、TNF-α的浓度相对减少,差异有统计学意义(P <0. 01),在HE染色中,CVAF组大鼠足趾组织水肿明显减轻,炎性浸润相对不显著。结论:皖南地区CVAF凝胶局部外用可提高炎痛大鼠热痛阈和机械压痛阈,其机制可能与减少炎症介质释放,抑制炎症反应有关。

摘要： Objective:To study the anti-tumor effects of scorpid poison combination with cobra venom to BGC-803 of gastric cancer cell in vitro and to explore its possible mechanism. Methods:To treat cultured gastric cancer cell line BGC-803 with scorpid poison and( or)cobra venom. Viable cell was counted by trypan blue stain and cell pro-liferation inhibitive rate was calculated,cell apoptosis rate was determined by flow cytometry. Observed expression of apoptosis-related genes of Bcl-2 by RT-PCR. Results:Scorpid poison combined with cobra venom had a stronger inhibition function on BGC-803 of gastric cancer cell than scorpid poison or cobra venom,the expression of Bcl-2 was down(p﹤0. 05). As the concentrations increased of scorpion venom and cobra venom,difference was more sig-nificant(p﹤0. 05). In the same drug concentration effect,24 hours compared to 48 hours also statistically significant (p﹤0. 05). Conclusion:Scorpid poison combined with cobra venom have the synergistic effects on gastric cancer cell,and the mechanisms may be related to apoptosis-inducing effects and through regulating the expression of the related genes Bcl-2.%目的：探讨蝎毒（ scorpid poison）与眼镜蛇毒（ cobra venom）联合应用对胃癌细胞BGC-803凋亡的影响及作用机制。方法：用蝎毒和（或）眼镜蛇毒处理体外传代培养的胃癌细胞株BGC-803。荧光显微镜下观察细胞增殖变化、进行活细胞计数及计算细胞增殖抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡，RT-PCR观察凋亡相关基因Bcl-2表达的变化。结果：蝎毒与眼镜蛇毒联合应用相对于单用蝎毒或眼镜蛇毒可显著提高胃癌细胞凋亡率、抗凋亡基因Bcl-2表达明显下降（ p﹤0.05）。随着蝎毒和眼镜蛇毒合用浓度的增高，胃癌细胞凋亡率增加、抗凋亡基因Bcl-2表达下降更明显（ p﹤0.05）。同一药物浓度作用24h与48h相比，亦有明显差异（p﹤0.05）。结论：蝎毒与眼镜蛇毒联合应用具有协同抗胃癌细胞的作用，并具有浓度和时间依赖性，其机制可能与增强诱导胃癌细胞凋亡及调控凋亡相关基因Bcl-2的表达有关。

摘要： Objective To observe the effects of Naja naja atra venom on the expression of NOS in the SON of rats . Methods SD rats were randomly divided into normal group ,saline group and Naja naja atra venom group ,immunohistochemical staining ,observe and compare the distribution of NOS in the hypothalamus of rats in the groups of supraoptic nucleus . Results The number of NOS positive cells in Supraoptic nucleus of Najanaja atravenom group were higher markedly than that of saline and control groups(P<0.01) . Conclusion Najana‐j a atra venom appears to facilitate up‐regulation of NOS expression in the SON of rats .%目的：观察眼镜蛇毒对大鼠视上核NOS表达的影响。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、生理盐水组和眼镜蛇毒组，采用免疫组织化学染色法，观察并比较 NOS阳性神经元在各组大鼠下丘脑视上核的分布情况。结果眼镜蛇毒组大鼠视上核 NOS阳性神经元比生理盐水组、正常对照组表达明显增强（P＜0.01）。结论眼镜蛇毒对大鼠下丘脑视上核 NOS 的表达有上调作用。

摘要： Objective To investigate the effects of Naja (N.atra,Chinese cobra)venom on the expression of c-fos and c-jun protein in ventral posterolateral thalamic nucleus(VPL)of rats. Methods Twenty-four Sprague-Dawley rats were randomly divided into groups of normal control,normal saline and Naja venom (n=8 for each group).Rat poisoning models were developed by injection of the crude venom of cobra at dosage of 0.5 μl/kg via left posterolateral limb,and killed 30 minutes after observation.An immunohistochemistry technique was used to measure the expression of c-fos and c-jun in VPL. Results The number of c-fos and c-jun immuno - positive cells in the VPL of rats intervened with Naja venom group was increased and more intensively expressed as compared with those from the control and normal saline groups(P <0.05). Conclusion The c-fos and c-jun expression were up-regulated in VPL of rats treated with Naja venom, suggesting that these proteins may be involved in the pathological process of neurotoxicity of Najra venom.%目的：探讨眼镜蛇毒对大鼠丘脑腹后外侧核(VPL)c-fos、c-jun 蛋白表达的影响。方法将24只 SD 大鼠随机分为正常对照组、生理盐水组和眼镜蛇毒组，每组8只。眼镜蛇毒按0.5μl/kg 注入大鼠左后肢外侧复制蛇伤模型，观察30 min 后处死，采用免疫组织化学方法，检测 VPL 的 c-fos、c-jun 的表达。结果眼镜蛇毒组大鼠 VPL 区 c-fos、c-jun 免疫阳性细胞数量及表达强度与正常对照组和生理盐水组比较均显著增高(P <0.05)。结论眼镜蛇毒组大鼠VPL 区的 c-fos 和 c-jun 表达显著增加，可能参与了眼镜蛇毒神经毒性的病理过程。

摘要： 研究中华眼镜蛇毒组分C(Fraction C from Naja Naja Actra Venom,FC)体外对人胶质瘤细胞株U-251的细胞毒作用,并与传统脑肿瘤化疗药进行比较.

摘要： 目的:对"中华眼镜蛇毒神经生长因子(nervegrowthfactorofthevenomofNajanajaatra,NGF)"的药物代谢动力学及体内分布进行研究.方法:采用固相氧化剂法(Iodogen法),制备125I-中华眼镜蛇毒神经生长因子(125I-NGF)作示踪剂.结果:在本实验条件下,125I-NGF标记率为41.4％;静脉注射后,大鼠体内血药浓度时程曲线为三房室模型,T1/2γ为16.89h,小鼠尾静脉注射后,各脏器分布以肾脏为主,1h时肾最高(95％).125I-NGF主要从尿排泄,静脉注射后,72h内尿排泄率累计达72.5％,而粪排泄率累计仅为1.35％.结论:中华眼镜蛇毒神经生长因子的药物代谢动力学特征符合三房室模型,静脉注射后主要从尿排泄.

摘要： 目的：探讨蛇伤药酒对眼镜蛇毒中毒的治疗效果.方法：用中华眼镜蛇毒于家兔制作的病理模型并用蛇伤药酒于注毒局部外敷治疗,再进行中毒表现和血液指标等观察.结果：与蛇毒组相比,药酒组局部和全身症状均较轻,死亡率较低;MBC、CK和CRP变化没有那么明显,PLT、PT和FBG水平基本没有变化.结论：蛇伤药酒能减轻炎症反应,防止急性DIC发生和保护机体组织受损,故有较好的对抗眼镜蛇的作用.

摘要： 目的:建立肝星状细胞(HSC-T6)双向凝胶电泳图谱,初步分析NGF对HSC-T6细胞蛋白质表达的影响.方法:实验设立空白对照组和NGF(4mg·L-1、8mg·L-1、16mg.L-1)处理组,分别作用于HSC-T6细胞,24小时后提取细胞总蛋白;利用2-DE分离空白对照组和NGF处理组细胞总蛋白质后,经图像分析识别差异表达的蛋白点,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定差异蛋白质;生物信息学对差异蛋白质点进行GO分类及信号传导通路分析.结果:比较分析空白对照组和NGF作用组的2-DE图谱,找到差异蛋白质点47个,其中在NGF作用组表达上调22个,下调25个,差异蛋白质点的表达部分随着NGF浓度的增加呈递增性,部分随着NGF浓度的增加呈递减性,对其中18个表达差异1.8倍以上的蛋白质点进行肽质量指纹图分析,鉴定出13个与细胞信号传导、细胞增殖、氧化代谢有关的蛋白质; 结论:眼镜蛇毒NGF能改变HSC-T6细胞信号通路中相关蛋白质的差异表达,为在蛋白质水平研究NGF抗机制提供理论依据.

摘要： 目的:探讨眼镜蛇毒神经生长因子(NGF)对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖、凋亡以及蛋白质表达差异的影响,进一步为蛇毒NGF抗肝纤维化提供依据.方法:实验分为对照组(单纯HSC-T6培养)和实验组(NGF进行干预).应用MTT检测眼镜蛇毒NGF对HSC-T6细胞增殖抑制率;流式细胞技术检测眼镜蛇毒NGF对HSC-T6细胞凋亡的影响;双向电泳技术观察HSC-T6细胞蛋白质表达变化.结果:MTT结果显示NGF对HSC-T6细胞增殖具有明显抑制作用(2μg/ml NGF时抑制率为73.5％±10.2％,P＜0.05;5μg/ml NGF时抑制率为58.8％±9.5％,P＜0.05;10ug/mlNGF时抑制率为50.7％±12.1％,P＜0.05);流式细胞仪也有同样的发现,NGF干预组的凋亡率16.12％±3.02％(2ug/ml NGF)和21.15％±3.31％(5μg/ml NGF)明显高于对照组的2.7％±1.55％(P＜0.05);比较分析空白对照组和NGF作用组的2-DE图谱,找到差异蛋白质点47个,其中与对照组相比在NGF作用组表达上调22个,下调25个.结论:蛇毒NGF能抑制大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的增殖,诱导其凋亡,并且影响HSC-T6细胞蛋白质的表达.

摘要： 目的:探讨蛇伤药酒抗眼镜蛇毒、内毒素及细菌的效果。方法:抗眼镜蛇毒和内毒素试验采用鲎试剂法，抗菌试验采用纸片法。结果:眼镜蛇毒与0.5EU/ml-1鲎试剂产生凝集反应的浓度在5.0μg/ml以上；蛇伤药酒浓度为2ml/ml时有抗5倍量眼镜蛇毒的凝集反应；有抗2.5倍量内毒素的凝集反应；对多种细菌有抑制作用。结论:蛇伤药酒有抗眼镜蛇毒、细菌内毒素和多种病原菌的作用。

摘要： 目的：蛇毒应用于镇痛已有70年历史，早在20世纪初，人们就开始应用蛇毒来缓解恶性肿瘤疼痛、神经痛和关节痛。我国自1952年起，开展对蛇毒的镇痛作用研究，开发了蛇毒粗毒制剂和蛇毒神经毒素制剂，用于临床治疗疼痛。蛇毒中的毒素种类很多，大部分为蛋白质，具有许多不同的生物功能。通过应用不同的分离纯化方法，提取蛇毒中镇痛的有效组分，并研究其镇痛机制，为药物开发提供理论依据。rn 方法：运用离子交换层析，凝胶过滤层析等方法从眼镜蛇粗毒中分离得到了具有镇痛活性的蛋白，通过质谱、等电聚焦、SDS-PAGE和氨基酸测序的方法，检测了najanalgesin的相对分子质量、等电点、纯度和氨基酸组成。通过热板法和醋酸扭体法检测了najanalgesin的镇痛效果。rn 结果：从眼镜蛇粗毒中分离得到了具有镇痛活性的蛋白，根据来源，命名为najanalgesin。其相对分子质量、等电点和纯度分别是6.7×103、8.0左右和90％。眼镜蛇粗毒的腹腔注射LD50为0.9 mg/kg，najanalgesin对热刺激和化学刺激所致的疼痛均有抑制作用。通过阻断荆实验表明，najanaJgeasin的镇痛作用与中枢神经系统的胆碱受体和阿片受体都有关系。rn 结论：Najanalgesin具有外周和中枢的镇痛作用，najanalgesin起效快而且作用时间长，具有进一步开发成药物的潜力。

摘要： 本文采用柱层析液相色谱法,多步分离纯化及到眼镜蛇的细胞毒素纯品,并制成癌息定注射液,通过试管内和在体试验探讨其挖癌作用效果与机制.

摘要： 本文采用柱层析液相色谱法,多步分离纯化及到眼镜蛇的细胞毒素纯品,并制成癌息定注射液,通过试管内和在体试验探讨其挖癌作用效果与机制.

摘要： 本文采用柱层析液相色谱法,多步分离纯化及到眼镜蛇的细胞毒素纯品,并制成癌息定注射液,通过试管内和在体试验探讨其挖癌作用效果与机制.

摘要： 本发明涉及医药领域，具体提供了眼镜蛇蛇毒或其提取物在制备降尿酸和/或抗痛风性关节炎的药物中的应用。本发明的眼镜蛇蛇毒能够有效降低高尿酸小鼠的血尿酸水平，同时还对痛风性关节炎有明显改善作用，能够修复尿酸钠沉积导致的关节损伤，降低关节肿胀率，改善关节滑膜组织增厚情况，减少炎症细胞浸润，保护软骨细胞，临床实验表明眼镜蛇神经毒素可以快速消除痛风患者的皮下痛风结石，患者注射三天肿块消失，无副作用，综上所述，中华眼镜蛇蛇毒在降尿酸的同时具有修复痛风性关节炎的作用，可作为治疗痛风的药物。

摘要： 本发明涉及医药领域，具体提供了眼镜蛇蛇毒或其提取物在制备降尿酸和/或抗痛风性关节炎的药物中的应用。本发明的眼镜蛇蛇毒能够有效降低高尿酸小鼠的血尿酸水平，同时还对痛风性关节炎有明显改善作用，能够修复尿酸钠沉积导致的关节损伤，降低关节肿胀率，改善关节滑膜组织增厚情况，减少炎症细胞浸润，保护软骨细胞，临床实验表明眼镜蛇神经毒素可以快速消除痛风患者的皮下痛风结石，患者注射三天肿块消失，无副作用，综上所述，中华眼镜蛇蛇毒在降尿酸的同时具有修复痛风性关节炎的作用，可作为治疗痛风的药物。

摘要： 本发明公开了一种眼镜蛇毒因子和眼镜蛇毒神经毒素的组合分离纯化方法，是首先低温高速离心处理蛇毒原液，再使用3KDa超滤膜除去蛇毒中小分子物质和低分子多肽等，两步层析分别是CM-Sephrose FF层析柱和Superdex 200凝胶层析柱，在一次生产中分别得到眼镜蛇神经毒素和眼镜蛇毒因子两种有效成分，本发明具有可以同时分离眼镜蛇毒因子和眼镜蛇神经毒素、有效提高了眼镜蛇毒的利用效率、产品纯度高、适合工业化生产的特点。

摘要： 本发明公开了一种眼镜蛇毒细胞毒素‑4N的纯化制备方法，先采用DEAE‑SepharoseCL‑6B阴离子交换柱然后再利用SephadexG‑50凝胶层析柱、Macro‑prep High S阳离子交换柱依次进行分离，每次分离后选取眼镜蛇毒细胞毒素‑4N活性最高的峰作为下步分离的样品。研究表明，应用本发明可以获得电泳纯度的CTX‑4N，其纯度高，活性高；HSC‑T6增殖抑制和凋亡实验证明，CTX‑4N对HSC‑T6细胞有杀伤作用，提示肝纤维化发展过程CTX‑4N会有抗肝纤维化的作用，具有重要的药用价值。

摘要： 本发明公开了应用多克隆抗体亲和柱纯化眼镜蛇毒神经生长因子的方法，包括以下步骤：将眼镜蛇毒预处理后，通过NGF‑多克隆抗体亲和柱进行吸附、洗脱和进一步纯化，得到眼镜蛇毒神经生长因子；所述NGF‑多克隆抗体亲和柱为：通过眼镜蛇毒NGF基因原核表达，纯化分离得到重组眼镜蛇毒NGF；将重组眼镜蛇毒NGF作为免疫原，免疫动物得到抗血清，并分离纯化得到NGF多克隆抗体；将NGF多克隆抗体与载体结合交联所得。利用基因重组技术，使用产量较高的重组神经生长因子，激发动物产生能蛇毒NGF的多克隆抗体，进而规模化制备NGF‑多克隆抗体亲和柱，利用免疫亲和的特异性及高效性；对天然蛇毒神经生长因子纯化，得到天然的、高活性的蛇毒神经因子。减少生产成本，适应规模化生产。

摘要： 基于眼镜蛇毒PIII型金属蛋白酶，所述蛋白酶是从中华眼镜蛇又称舟山种眼镜蛇，分类名：Naja atra的蛇毒中分离纯化获得；所述蛋白酶是单链糖蛋白，结构解析表明具有3个结构域：金属蛋白酶结构域、去整合素样结构域、富含半胱氨酸结构域，属于PIII型蛇毒金属蛋白酶。其名称分别为Atrase A和Atrase B，其序列为：AtraseA：SEQIDNo.1；AtraseB：SEQIDNo.2。目标蛋白和其抗凝血药具有多重抗凝作用：抗多种凝血因子；降低纤维蛋白原水平；抗血小板聚集；抗补体从而减轻病理生理情况下炎症诱发的异常凝血。

摘要： 本发明公开了一种眼镜蛇毒因子和眼镜蛇毒神经毒素的组合分离纯化方法，是首先低温高速离心处理蛇毒原液，再使用3KDa超滤膜除去蛇毒中小分子物质和低分子多肽等，两步层析分别是CM-Sephrose FF层析柱和Superdex 200凝胶层析柱，在一次生产中分别得到眼镜蛇神经毒素和眼镜蛇毒因子两种有效成分，本发明具有可以同时分离眼镜蛇毒因子和眼镜蛇神经毒素、有效提高了眼镜蛇毒的利用效率、产品纯度高、适合工业化生产的特点。

摘要： 本发明提供了用于治疗中华眼镜蛇毒素中毒的药剂，包括prp；用于治疗中华眼镜蛇毒素中毒的药剂的其制备方法，包括以下步骤，S1、模型制作；S2、prp制备；S3、毒液注射；S4、中毒记录；S5、治疗；S6、观察；本发明的有益效果：通过将prp制备成药剂，利用各种生长因子刺激皮肤上皮细胞、血管的生长，胶原纤维的产生，从而促进皮肤溃疡的愈合；同时能够在0°C下保存，保存要求容易达到，便于携带、运输。

摘要： 本发明涉及一种眼镜蛇毒注射用NGF的制备方法，将眼镜蛇粗毒进行两次凝胶层析，其中凝胶层析Ⅰ为SP‑Sephadex G‑25柱层析，凝胶层析Ⅱ为Acta Rosorse柱层析，在凝胶层析Ⅰ之前对加入缓冲液的蛇毒和凝胶层析Ⅰ后对于粗蛇毒神经生长因子液进行冷冻处理。本发明提供的眼镜蛇毒神经生长因子制备方法简单易行、可用于工业化放大生产、活性损失小，活性损失小于10％的蛇毒NGF；可以打破蛋白质分离的常规限制，使用更高初始浓度的粗蛇毒液也可以进行有效分离；生产效率高、成本合理，特别适合工业化规模生产；得率高，超过0.6％，甚至能达到0.7％以上。

摘要： 本发明公开了本发明涉及一种眼镜蛇毒神经生长因子的制备方法，将眼镜蛇粗毒进行两次凝胶层析，其中凝胶层析Ⅰ为SP‑Sephadex G‑25柱层析，凝胶层析Ⅱ为Acta Rosorse柱层析。本发明提供的眼镜蛇毒神经生长因子制备方法简单易行、可用于工业化放大生产、活性损失小，活性损失小于25％的蛇毒NGF；可以打破蛋白质分离的常规限制，使用更高初始浓度的粗蛇毒液也可以进行有效分离；生产效率高、成本合理，特别适合工业化规模生产；得率高，超过0.5％，甚至能达到0.6％以上。