直接免疫荧光

摘要： 黏膜类天疱疮(MMP)是一种慢性瘢痕化的系统性自身免疫性大疱病,主要累及黏膜,呈慢性、进展性病程,主要受累的部位常包括但不限于眼、鼻咽部、口腔、食管、直肠及生殖器-肛门区[1],其临床特征是皮肤、黏膜疱性溃疡和瘢痕形成,水疱消退后留有永久性瘢痕,又可称为瘢痕性类天疱疮(CP)[2]。实验室检查特征为组织活检可见免疫球蛋白和补体沉积,直接免疫荧光(DIF)示黏膜上皮和上皮下连接处的表皮基底膜带(BMZ),可观察到有免疫复合物(免疫球蛋白IgG、IgA、IgM和/或补体C3)在基底膜区呈均一线状沉积[3-4]。

摘要： 目的 探讨天疱疮的临床、病理表现及免疫荧光特点.方法 对18例天疱疮患者的临床病理及免疫荧光资料进行回顾性分析.结果 18例天疱疮患者中,男女比例为1.25:1,平均发病年龄(56.06±16.63)岁.大多数患者临床表现为皮肤或红斑基础上出现松弛性水疱、大疱.组织病理表现为棘层下方或基底细胞层上方出现棘层松解,可见水疱或裂隙形成,呈"墓碑状"改变.直接免疫荧光检查显示,IgG占18例(100.00％),C3占15例(83.33％),IgM占13例(72.22％),IgA占3例(16.67％),IgG+C3占15例(83.33％),IgG+C3+IgM占10例(55.56％),IgG+C3+IgA占4例(22.22％),IgG+C3+IgM+IgA占4例(22.22％).结论 天疱疮是一种自身免疫性大疱性皮病,需结合临床表现、组织病理及免疫荧光对其进行诊断.

摘要： 目的 通过对四川大学华西第二医院就诊的7 360例急性呼吸道感染患儿进行呼吸道病毒抗原检测,分析不同病毒在急性呼吸道感染中的分布情况,为儿童呼吸道感染的早期诊治提供流行病学依据.方法 提取患儿鼻咽拭子,采用直接免疫荧光法(DFA)检测7种呼吸道病毒抗原,包括流感病毒A型(Flu A)、流感病毒B型(Flu B)、副流感病毒1型(PIV1)、副流感病毒2型(PIV2)、副流感病毒3型(PIV3)、呼吸道合胞病毒(RSV)和腺病毒(ADV).结果 7 360例急性呼吸道感染患儿中,检出呼吸道病毒783例,检出率为10.64％.其中检出率最高的是RSV 545例(7.40％),其次分别为PIV3 107例(1.45％),ADV 62例(0.84％),Flu B 25例(0.34％),Flu A 24例(0.33％),PIV1 18例(0.24％),混合型8例(0.11％),PIV2 2例(0.03％).结论 7项呼吸道病毒检测可以明确引起患儿急性呼吸道感染的病原体,为临床用药提供合理诊断依据,对临床药物合理使用具有指导意义.

摘要： 患儿女,12岁,因反复皮肤红斑、水疱半年,关节疼痛3月余就诊。患儿半年前反复出现口腔溃疡、糜烂,伴低热,逐渐出现口周及面部红斑、水疱,就诊当地医院,予对症治疗,病情无好转。5个月前红斑及水疱逐渐扩散至全身,外院查血常规示WBC 3.38×10^9/L,抗双链DNA(dsDNA)阳性,皮肤病理检查示表皮下水疱形成,大量中性粒细胞浸润,直接免疫荧光(DIF)示基底膜区(BMZ)IgG、IgM、IgA和C3线状沉积。

摘要： 目的 了解宿州地区住院患儿急性呼吸道感染病毒病原学特征及流行趋势,为临床治疗及疾病防控提供参考依据.方法 选取皖北煤电集团总医院2017年3月至2018年2月儿科住院患者的鼻咽分泌物,用直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、副流感病毒1、2、3型(PIV1、2、3)、流感病毒A、B型(IFVA、IFVB)等七种呼吸道病毒抗原.结果 3 965例患儿中检出592例病毒感染,阳性检出率为14.93％.各种呼吸道病毒检出情况,RSV阳性率最高占57.94％,其次是IFVA 15.03％、PIV3 13.34％.本地区呼吸道病毒感染有明显的季节性,冬季检出率最高27.73％,其次是秋季13.91％.结论 儿童急性呼吸道感染的病毒病原体,以冬季检出率最高,呼吸道合胞病毒(RSV)是本地区儿童急性呼吸道感染的最主要病毒性病原,其次是甲型流感病毒.

摘要： 目的 比较ELISA、组织病理和直接免疫荧光(DIF)对天疱疮(P)、大疱性类天疱疮(BP)的检测结果.方法 选择2015年12月至2016年11月安徽医科大学第一附属医院确诊的32例P患者和64例BP患者,抽取静脉血样采用ELISA法检测天疱疮抗体,并同时切取皮损组织和水疱周围正常皮肤分别进行组织病理和DIF检查,对各检测结果与临床诊断的符合率进行比较.结果 32例P患者的天疱疮抗体实验、组织病理、DIF与临床诊断的符合率分别为93.75％、56.25％和93.75％,差异有统计学意义(P＜ 0.05).64例BP患者的符合率分别为82.81％、87.50％和96.87％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 DIF仍是目前诊断和鉴别诊断大疱性皮肤病的可靠方法,但是增加天疱疮抗体检测会提高临床诊断P、BP的准确性.

摘要： 目的 探讨抗桥粒芯蛋白Dsg1、Dsg3抗体水平在天疱疮诊断和病情评估中的应用价值.方法 选择经组织病理及直接免疫荧光法检查确诊的63例天疱疮患者(试验组)及同期40例排除大疱性皮肤病诊断的健康人群(对照组),分别采集静脉血使用酶联免疫吸附法检测血清中抗桥粒芯蛋白Dsg1、Dsg3抗体,对比酶联免疫吸附法与直接免疫荧光法两者符合率,分析Dsg1、Dsg3抗体水平与临床病情的相关性.结果 63例经组织病理及直接免疫荧光法检查确诊的天疱疮患者利用酶联免疫吸附法检测其血清中抗桥粒芯蛋白Dsg1、Dsg3抗体水平与直接免疫荧光法对比结果的一致性(符合率)为88.89%.抗桥粒芯蛋白Dsg1抗体水平治疗中及治疗后(158.70±62.62、81.98±45.23)与治疗前(232.61±80.67)有显著性差异(P<0.05),Dsg3抗体水平治疗中及治疗后(52.24±15.58、39.58±52.72)与治疗前(78.87±13.7)有显著性差异(P<0.05).结论 酶联免疫吸附法检测患者血清中抗桥粒芯蛋白Dsg1、Dsg3抗体水平用于天疱疮疾病的诊断与直接免疫荧光法一致性较高,且血清中抗桥粒芯蛋白Dsg1、Dsg3抗体水平与病情疗效呈正相关性,可用于疾病治疗疗效观察.

摘要： [目的]本文旨在研究大肠杆菌表达的猪瘟病毒(CSFV)荧光抗体用于病毒直接免疫荧光检测的可行性。[方法]在基因水平上对编码猪瘟病毒纳米抗体(VHH)与绿色荧光蛋白(EGFP)的融合基因进行密码子优化,优化后的融合基因插入p ET32a(+)载体并在大肠杆菌BL21(DE3)中融合表达。表达的融合蛋白经过SDS-PAGE、Western blot进行表达及可溶性鉴定。利用镍柱亲和层析获得纯化的重组蛋白,经浓缩后用于猪瘟病毒直接免疫荧光检测并与CSFV间接免疫荧光试验进行效果比较,将该荧光抗体孵育CSFV、伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒2型(PCV-2)感染的PK15细胞从而鉴定荧光抗体的特异性。[结果]SDS-PAGE结果表明荧光抗体在大肠杆菌中实现部分可溶性表达。特异性试验结果表明,只有接种CSFV的PK15细胞组出现明显的绿色荧光,而其他组不出现或只出现少量非特异性荧光。与用商品化单抗建立的间接免疫荧光试验结果相比,该荧光抗体建立的直接免疫荧光方法具有更强的清晰度。[结论]猪瘟荧光抗体可在大肠杆菌中高效表达,纯化后的抗体具有良好的特异性,且该抗体具有生产操作简单、制备周期短和成本低等特点。

摘要： 目的：探讨直接免疫荧光法快速检测早期甲型流感病毒抗原及其临床应用。方法选择临床上诊断为急性呼吸道感染入院的患者，采集标本200例，将其分为两组：冬春两季流行季节儿童组（100例）和夏秋两季非流感流行期间儿童组（100例），使用美国D3 Ultra甲型流感病毒抗原检测试剂，采用荧光标记的单克隆抗体对感冒患者进行甲型流感病毒抗原检测。结果在冬春两季流感流行期间，100例儿童检测有8例阳性，阳性率为8％；在夏秋两季非流感流行期间100例儿童检测有2例阳性，阳性率为2％；两组阳性率比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论运用直接免疫荧光法快速检测甲型流感毒感抗原是一种经济、高效、快速、特异的检测方法，能指导临床快速诊断，合理用药。%Objective To study the direct immunofluorescence method for rapidly detecting influenza A virus antigen and its clinical application .Methods The inpatients with clinically diagnosed acute respiratory tract infection were selected .Two hundred samples were collected and divided into two groups :the winter and spring epidemic seasons children group and the summer and au‐tumn non‐epidemic seasons children group ,100 cases in each group .The US D3 Ultra influenza A virus antigen detection reagent was used .The fluorescence labeled monoclonal antibody was adopted to detect influenza A virus antigen in the patients with cold . Results During the winter and spring seasons of influenza prevalence ,8 cases of 100 detected cases were positive with the positive rate of 8% ;during the summer and autumn seasons of non‐influenza prevalence ,2 cases of 100 cases were positive with positive rate of 2% ,the difference in the positive rate between the two groups had statistical significance(P<0 .05) .Conclusion Applying the direct immunofluorescence method for rapidly detecting influenza A virus antigen is an economical ,efficient ,rapid and specific detec‐tion method ,and can guide clinical rapid diagnosis and rational medication .

摘要： 目的：评价直接免疫荧光法对儿童呼吸道病毒抗原的诊断价值，并探讨儿童呼吸道病毒的流行特征。方法用直接免疫荧光法检测6282例住院儿童呼吸道分泌物中呼吸道合胞病毒（RSV），流感病毒A型（FLUA），流感病毒B（FLUB），副流感病毒1型（PIV1），副流感病毒2型（PIV2），副流感病毒3型（PIV3）和腺病毒（ADV）7种呼吸道病毒。结果6282例标本中病毒阳性检出835例，总阳性率13．29％；其中RSV最高，阳性率8．83％；其次是PIV3，阳性率2．80％；冬季发病较高，夏季最少。0～6个月的幼儿发病率较高。结论直接免疫荧光法简单、快速，可用于儿童呼吸道病毒感染的早期诊断。

摘要： 利用实验室研制成功的猪瘟E2蛋白单克隆抗体,以异硫氰酸荧光素(FITC)为标记物,通过透析法进行标记.利用标记单抗建立直接免疫荧光检测猪瘟病毒抗原的方法,并开展了该方法的抗体使用最佳稀释度、特异性、重复性、敏感性等方面的研究,同时运用冰冻切片技术处理组织病料后检测,与目前实验室检测常用的RT-PCR方法对84份临床病料进行同步检测,结果显示该检测方法与RT-PCR方法的符合率达83.9％,直接免疫荧光检测方法具有快速特异性强,并能准确对病原进行定位等特点,可以用于临床初步检测以及猪瘟病毒在组织内增殖动力学研究.

摘要： 发明人提出一种杂交捕获免疫荧光分析法，通过杂交捕获获取待测样本中的目标核酸片段，通过荧光信号识别，对样本中目标核酸进行检测和一种用于核酸杂交捕获免疫荧光检测的免疫荧光层析试条和试剂盒。核酸杂交捕获免疫荧光检测方法快速，操作简单，加样后的反应过程中在常温中进行，无变温环节，而且检测灵敏度与市场上同类产品一致。

摘要： 本发明提出了免疫荧光层析检测试纸条、免疫荧光层析检测系统以及确定样品中待测物含量的方法。所述免疫荧光层析检测试纸条包括：本体，所述本体上限定出依次相连的样品区、结合区、检测区、吸附区；荧光微球标记的第一抗体，所述第一抗体包被于所述结合区，所述第一抗体特异性识别待测物；检测线和质控线，所述检测线和质控线设置在所述检测区中；第二抗体，所述第二抗体包被于所述检测线上，所述第二抗体特异性识别所述待测物；以及第三抗体，所述第三抗体包被于所述质控线上，所述第三抗体特异性识别所述第一抗体，其中，所述荧光微球为近红外II区高分子荧光微球。利用本发明的免疫荧光层析检测试纸条检测的准确性强、灵敏度高、精密度高。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及增强LGI1免疫荧光的方法、LGI1抗体的免疫荧光检测方法及应用。本发明利用共表达LGI1和ADAM22；或共表达LGI1和ADAM23的方式增强LGI1免疫荧光，所述ADAM22蛋白或ADAM23蛋白可以促使细胞内LGI1驻留在细胞膜上，并且捕获细胞外的LGI1，能够增强LGI1免疫荧光信号，只需微量的ADAM22或ADAM23质粒即可检测出LGI1信号，解决免疫荧光检测血清中LGI1自身抗体信号差的问题。

摘要： 本发明涉及一种独立多通道免疫荧光微流控芯片和免疫荧光检测方法。该独立多通道免疫荧光微流控芯片包含至少两个独立的通道，每个通道包含依次连接的等量均分流道、过滤区、缓冲区、荧光包被区、时控阀门、检测区和废液区，各个通道的等量均分流道连接同一个进液口。本发明的独立多通道免疫荧光微流控芯片，在进样本阶段即对液体进行等量均分，不同通道拥有独立的荧光抗体包被区以及时空阀门，拥有独立的废液区，解决了不同检测项目可能造成互相干扰的问题；每个独立通道可以集成互相不干扰的多个检测项目，在实现了高通量的同时，提高了检测精度和效率，降低了成本。

摘要： 本发明提供一种免疫荧光检测系统，包括：主控模块，包括主通信接口；驱动模块，与所述主通信接口连接，包括至少两个驱动接口和至少两个光耦接口，其中，每个所述驱动接口与至少两个步进电机连接，每个所述光耦接口与一光耦连接；所述主控模块根据用户所选择的样本检测项目，执行调度控制，所述驱动模块响应于所述调度控制，根据用户所选择的样本检测项目，生成相应步进电机和光耦的控制指令，以控制相应步进电机执行相应操作并监控相应光耦，从而进行样本检测项目。本发明还提供了其控制方法。本发明拓展性强，可支持多个步进电机和光耦。并且可以实现不同模块的升级更新。

摘要： 发明人提出一种杂交捕获免疫荧光分析法，通过杂交捕获获取待测样本中的目标核酸片段，通过荧光信号识别，对样本中目标核酸进行检测和一种用于核酸杂交捕获免疫荧光检测的免疫荧光层析试条和试剂盒。核酸杂交捕获免疫荧光检测方法快速，操作简单，加样后的反应过程中在常温中进行，无变温环节，而且检测灵敏度与市场上同类产品一致。

摘要： 本发明提供了一种免疫荧光分析装置与免疫荧光分析方法，所述免疫荧光分析装置包括黑色滤膜，所述免疫荧光分析方法采用黑色滤膜截留被荧光标记抗体染色的待检测对象，同时滤过未与待检测对象结合的荧光标记抗体，之后采用荧光检测装置对所述黑色滤膜表面的截留物进行分析，实现荧光点的阅读和计数；所述免疫荧光分析方法的操作步骤简单，分析成本低，并且检测结果准确；所述免疫荧光分析装置的结构简单，生产成本低，使用方便，检测效果好；本发明的免疫荧光分析装置与免疫荧光分析方法能够广泛使用，不仅适用于大型医院与专业的实验室，在基层的医疗机构也能广泛使用。

摘要： 本发明提出了免疫荧光层析检测试纸条、免疫荧光层析检测系统以及确定样品中待测物含量的方法。所述免疫荧光层析检测试纸条包括：本体，所述本体上限定出依次相连的样品区、结合区、检测区、吸附区；荧光微球标记的第一抗体，所述第一抗体包被于所述结合区，所述第一抗体特异性识别待测物；检测线和质控线，所述检测线和质控线设置在所述检测区中；第二抗体，所述第二抗体包被于所述检测线上，所述第二抗体特异性识别所述待测物；以及第三抗体，所述第三抗体包被于所述质控线上，所述第三抗体特异性识别所述第一抗体，其中，所述荧光微球为近红外II区高分子荧光微球。利用本发明的免疫荧光层析检测试纸条检测的准确性强、灵敏度高、精密度高。

摘要： 本发明涉及一种免疫荧光检测光路机构，包括光源发生装置、光学二相分镜、第一聚集透镜组件、第二聚集透镜组件及荧光采集装置，光学二相分镜设置于光源的传输光路上，第一聚集透镜组件与第二聚集透镜组件分别位于光学二相分镜的反射光的光路及透射光的光路上，荧光采集装置位于第二聚集透镜组件远离光学二相分镜的一侧；第一聚集透镜组件被配置为根据施加于其的电信号沿光学二相分镜的反射光光路方向作直线运动。如此，可将多台免疫荧光检测仪对同一待测样本的荧光试纸的荧光值进行统一，降低了因仪器中的零件差异及生产组装中产生的差异对测试结果的数值影响，提高了测试的准确性。还提供一种免疫荧光检测仪及及其校准方法。

摘要： 本实用新型涉及一种免疫荧光检测光路机构，包括光源发生装置、光学二相分镜、第一聚集透镜组件、第二聚集透镜组件及荧光采集装置，光学二相分镜设置于光源的传输光路上，第一聚集透镜组件与第二聚集透镜组件分别位于光学二相分镜的反射光的光路及透射光的光路上，荧光采集装置位于第二聚集透镜组件远离光学二相分镜的一侧；第一聚集透镜组件被配置为根据施加于其的电信号沿光学二相分镜的反射光光路方向作直线运动。如此，可将多台免疫荧光检测仪对同一待测样本的荧光试纸的荧光值进行统一，降低了因仪器中的零件差异及生产组装中产生的差异对测试结果的数值影响，降低了不同仪器之间的CV值，提高了测试的准确性。还提供一种免疫荧光检测仪。