盐芥

摘要： 盐芥是研究耐盐机理的模式植物。为从蛋白质水平揭示盐芥响应盐胁迫的分子机制,本研究采用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术对不同NaCl浓度处理7 d的盐芥叶片进行差异蛋白质组学分析。结果表明,盐芥叶片中共鉴定到4607个蛋白质,其中281个蛋白质的表达丰度显著增加,95个蛋白质的表达丰度显著降低。盐胁迫差异表达蛋白质的KEGG代谢通路和蛋白质互作网络分析结果表明,促进植株光合作用可帮助盐芥适应低盐环境;抑制叶绿素和支链氨基酸合成、调控应激反应基因的表达是盐芥应对中盐环境的重要因素;而有效清除活性氧、提高渗透物质积累量和增加能量供应可能是盐芥耐受高盐环境的关键。本研究结果为揭示盐芥应答盐胁迫的分子响应机制提供了理论基础。

摘要： [目的]本试验以野生型(WT)和转盐芥TsIPK2基因的水稻为材料,研究NaCl胁迫条件下过量表达TsIPK2基因对水稻植株抗盐胁迫能力的影响.[方法]取水稻材料种子和其3叶龄幼苗,分别在不同NaCl浓度(0、50、100、150、200 mmol/L)下进行处理.检测WT与过量表达TsIPK2基因水稻种子的发芽率、主根长和芽长、幼苗的丙二醛(MDA)和脯氨酸的含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性,以及与胁迫相关的5个基因的表达.[结果]在盐胁迫下,与野生型相比,转基因水稻具有更好的发芽率、主根长和芽长.野生型和转基因水稻两者的脯氨酸含量增加,转基因水稻的积累量显著高于野生型,但是转基因水稻MDA含量增加幅度小于野生型.野生型和转基因水稻幼苗SOD酶活性均增加,但转基因植株的酶活性显著高于野生型;二者POD酶活性呈现先升高后下降的趋势,但是二者活性没有显著的差别;转基因水稻的CAT活性也呈现先升高后下降的趋势,然而野生型水稻的CAT活性在盐胁迫下没有显著的变化.高盐处理后,野生型和转基因水稻的5个与胁迫相关的基因表达倍数都增加,与野生型相比,转基因水稻的OsP5CS1、OsSOD、OsCATB和OsLEA3的表达量显著升高,而OsPOX1基因的表达量变化不显著.[结论]过量表达TsIPK2基因能够通过增强水稻的渗透调节能力、抗氧化胁迫能力并调节胁迫相关基因的表达,以提高水稻的耐盐性.

摘要： 为研究不同NaCl浓度和pH值对盐芥种子萌发和组培苗生长的影响,探讨其作用机理,本文设置不同NaCl浓度和pH值梯度的MS培养基,测定盐碱胁迫下盐芥种子萌发和组培苗生长的各项指标.结果表明,低盐浓度(50～100 mmol/L)、低pH值(5.0～8.0)下组培苗生长良好,随NaCl浓度升高(>200 mmol/L)和pH值增加,对组培苗生长的抑制作用也逐渐增强.可见,高盐碱可降低盐芥种子萌发率,延缓或抑制盐芥组培苗的生长.

摘要： Phosphorus (P) is one of the most limiting mineral nutrients for plant growth and development.In plants,the uptake from soil and intercellular transport of inorganic phosphate (Pi) are mediated by the PHT1 family.In this work,we obtained the ThPHT1;8 gene through cloning from cDNA of Thellungiella salsuginea seedings roots.Bioinformatics analysis indicated that ThPHT1;8 protein had 525 amino acid residues.The molecular weight of the protein was 58.1 ku and the isoelectric point was 6.33.It was a hydrophobic and non-secreted protein with no signal peptide.ThPHT1;8 possessed the major characteristics of high-affinity phosphate transporters,such as transmembrane structure.Real-time quantitative PCR showed that the expression of ThPHT1;8 was strongly enhanced by low phosphorus stress in roots of Thellungiella salsuginea and the patterns of expression were different under different phosphorus stresses.The biological function of ThPHT1;8 gene indicated that 35S:ThPHT1;8 transgenic Arabidopsis had longer primary roots and less lateral root density than wild-type Arabidopsis under deficient phosphorus conditions.The contents of inorganic phosphorus,total phosphorus and chlorophyll increased in the 35S:ThPHT1;8 transgenic Arabidopsis,but the content of anthocyanin decreased.To conclude,ThPHT1;8 could enhance the tolerance of plants to low environmental phosphorus and improve transgenic Arabidopsis resistance to low phosphorus capacity.The study offers a functional candidate gene for efficient utilization of soil phosphorus.%磷(P)是植物生长发育过程中重要的矿质营养元素之一,PHT1磷酸转运蛋白家族负责调控植物从土壤中吸收磷以及细胞间无机磷(Pi)的转运.本文以盐芥幼苗根cDNA为材料,克隆到盐芥磷酸转运蛋白ThPHT1;8基因.生物信息学分析结果表明,ThPHT1;8蛋白编码525个氨基酸残基,蛋白分子质量为58.1 ku,等电点6.33,是一个定位在细胞膜上的疏水、无信号肽的非分泌性蛋白,含有高亲和力磷酸转运蛋白典型的跨膜结构.实时定量PCR结果显示,低磷胁迫能促进ThPHT1;8基因在盐芥根部的表达,而且不同磷浓度处理下ThPHT1;8基因表达的模式不同.ThPHT1;8基因在转基因拟南芥中的生物学功能研究表明,不同浓度低磷胁迫处理下,与野生型拟南芥相比,35S:ThPHT1;8转基因拟南芥幼苗的主根根长显著增加、侧根密度显著降低,叶绿素含量、无机磷和总磷含量提高,花青素含量降低.上述结果表明,盐芥ThPHT1;8基因确实参与低磷胁迫时植物的应答,能够提高转基因拟南芥的耐低磷能力,为土壤磷高效利用提供了一种有潜力的候选功能基因.

摘要： The ubiquitin-conjugating enzymes play key biochemical roles in the ubiquitination modifica-tion.The in vitro ubiquitination assay is essential to the study of the predicted ubiquitin-conjugating enzyme, which supplies important clues for the following study.So far,the in vitro ubiquitin-conjugating enzyme ac-tivity analysis needs huge amount of works such as protein expression and purification.The process is com-plex,and the ratio of false negative is high.In this study,we developed a new system to detect the plant ubiq-uitin-conjugating enzyme activity which omits the protein purification and in vitro reaction steps in the old method.This new system is more convenient and stable.We applied this system to detect Arachis hypogaea UBC34 and Eutrema salsugineum(Thellungiella salsuginea)UBC33, and proved the ubiquitin-conjugating enzyme activity of these two proteins.%泛素结合酶是一类在泛素化修饰过程中起重要生物化学功能的蛋白.对于被预测为泛素结合酶的蛋白进行体外泛素化活性检测,是确定其泛素结合酶功能必不可少的试验步骤,试验结果可以为后续研究提供重要的线索.目前体外泛素化反应存在体外表达纯化蛋白工作量大、反应复杂、假阴性率高等问题.本研究针对以上问题进行了改良,开发出一种新的植物泛素结合酶活性体外检测方法,该方法无需裂解细胞提取、纯化蛋白,也不需要做体外反应,简便易行,结果更稳定可靠.应用该方法对花生泛素结合酶AhUBC34和盐芥泛素结合酶TsUBC33进行了检测,结果证明这两个蛋白都具有泛素结合酶活性.

摘要： 旨在揭示盐芥(Eutrema salsugineum)ABCG25的结构及其对干旱、盐害以及温度等胁迫的响应.以山东生态型盐芥作为材料,通过电子克隆以及RT-PCR技术,获得一个腺苷三磷酸结合盒转运蛋白G(ABCG)家族成员基因的全长cDNA序列,命名为EsABCG25,GenBank登录号为KY111263.EsABCG25全长2 154 bp,含1 983 bp的开放阅读框,编码一个含有660氨基酸的蛋白分子.该基因定位于盐芥第5染色体,含有4个外显子和3个内含子.EsABCG25蛋白具有一个核苷酸结合结构域(NBD)和一个跨膜结构域(TMD),与来源于同科植物芜菁的ABCG25亲缘关系最近.对高通量测序数据分析表明该基因在盐芥的茎部表达最为丰富,在莲座叶中表达丰度最低,且在不同组织中均有可变剪接事件.Real-time PCR结果显示,该基因表达受多种逆境影响,尤其受到ABA的明显诱导.EsABCG25具有ABCG家族的典型序列特征;该基因在盐芥不同组织中的表达丰度存在差异,表达受到多种逆境的诱导,与盐芥的抗逆性关系密切.

摘要： 为揭示盐芥和拟南芥表皮蜡质中响应低温胁迫的关键化学组分及关键代谢基因表达的变化,以盐芥和拟南芥为材料,通过化学分析和荧光定量PCR技术,比较和研究了4°C低温胁迫处理下2种植物表皮蜡质的组成及蜡质代谢相关基因的表达差异.结果表明,与对照(22°C)相比,在4°C胁迫条件下,盐芥和拟南芥叶片表皮总蜡质含量以及蜡质各组成成分的含量均增加.经低温胁迫处理后,2种植物中组成蜡质的优势组分均未发生变化,表现为烷烃含量最多、初级醇含量次之、脂肪酸含量位居第3.对所选取的28个蜡质代谢相关基因的表达量进行分析,结果显示,盐芥中有23个基因上调,拟南芥中有13个基因上调,暗示盐芥和拟南芥中表皮蜡质代谢基因对低温的响应不同.

摘要： 以盐芥为试验材料,研究不同浓度镉胁迫下盐芥根木栓质组分及含量、木栓质代谢相关基因表达变化,旨在分析盐芥根木栓质对不同浓度镉胁迫的响应.结果表明,2种浓度(50 μmol/L、100 μmol/L)镉胁迫下,盐芥根木栓质优势组分未发生变化,检测出的4种类型的木栓质,其含量从高到低依次为ω-羟基脂肪酸、未被取代脂肪酸、α,ω-二羧酸、脂肪醇;4种类型的木栓质包括21种单体,50 μmol/L镉胁迫下,木栓质总量升高,而100 μmol/L镉胁迫下,木栓质总量未发生明显变化;对木栓质代谢相关的16个基因进行表达模式分析,50 μmol/L镉胁迫下,CYP86B1、CYP86A7、FAR4、FAR5、KCR2、ABCG2、GPAT6、FACT、MYB107、CYP86A4、KCR20、ABCG6、ABCG20、GPAT5、ASFT共15个基因显著或极显著上调表达,100 μmol/L镉胁迫下,CYP77A6、CYP86A7、FACT、CYP86A4、ABCG2、GPAT5、ASFT、MYB107共8个基因显著或极显著上调表达.

摘要： 作为植物在非生物胁迫下耐受机制研究中的模式植物之一,盐芥具有耐受干旱、高盐和高低温等抗逆性特点.本文以盐芥中脂类代谢的关键基因WBC11作为研究对象,利用q-PCR技术克隆盐芥WBC11 5'端300bp序列(简称WBC11-300),通过gateway的方法构建RNAi表达载体并成功转入农杆菌中,为探索盐芥WBC11功能的后续实验打下了基础.

摘要： [目的]对盐芥EsABI1基因进行克隆及功能预测.[方法]克隆盐芥EsABI1基因cDNA序列,对其蛋白保守结构域和系统进化进行分析.[结果]EsABI1与AtABI1属于进化上的同一分支,有最近的亲缘关系,都含有包含PP2C蛋白磷酸酶催化活性位点在内的11个保守功能域.定量PCR检测发现,盐芥EsABI1沉默植株中EsABI1表达水平较野生型均有不同程度的降低.60μmol/L ABA分别处理EsABI1沉默植株0、3和6 h后,发现EsABI1基因表达水平受ABA诱导上调,而且相比于盐芥野生型,EsABI1沉默植株中EsABI1受ABA诱导上调表达更加明显.[结论]EsABI1是ABA信号转导途径中的负调控因子,参与了盐芥对环境胁迫的响应.%[Objective]To clone the EsABI1 of Eutrema salsugineum and predict the function.[Method]The cDNA sequence of EsABI1 of E.sal-sugineum was cloned to study the protein conserved domain and phyletic evolution.[Result]EsABI1 and AtABI1 had highest similarity and be-longed to one branch in evolution,which contained 11 conserved domains,including PP2C protein phosphatase catalytic active site.Quantitative PCR detection showed that the expression level of EsABI1 in EsABI1 silent plants was lower than that in the wild type.The expression of EsABI1 had been up-regulated under 60μmol/L ABA for 0,3,6 hours in E.salsugineum,and the higher up-regulated expression of EsABI1 compared with wide type.[Conclusion] EsABI1 acted as a negative regulator in ABA signal transduction pathway of E.salsugineum,which participated in the re-sponse of E.salsugineum to environmental stress.

摘要： 本发明公开了来自盐芥的一个耐盐基因及其编码蛋白与应用。该基因为下述核苷酸序列之一：1)序列表中SEQ ID №：1的DNA序列；2)编码序列表中SEQ ID №：2的DNA序列。该基因编码蛋白的氨基酸残基序列如SEQ ID №：2所示。本发明的耐盐基因将在培育耐盐性增强的植物(特别是水稻、小麦等农作物)中发挥重要作用。

摘要： 本发明公开了来源于盐芥的一个耐盐基因及其编码蛋白与应用。其目的是提供盐芥的一个耐盐基因及其编码蛋白与其在培育耐盐性提高植物中的应用。该基因可具有下述核苷酸序列之一：1)序列表中SEQ ID №：1的DNA序列；2)编码序列表中SEQID №：2的DNA序列。该基因编码的蛋白是具有下述氨基酸残基序列之一的蛋白质：1)序列表中的SEQ ID №：2；2)将序列表中SEQ ID №：2的氨基酸残基序列经过一至十个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有提高植物耐盐性作用的蛋白质。本发明的耐盐基因将在培育耐盐性增强的植物(特别是水稻、小麦等农作物)中发挥重要作用。

摘要： 本发明公开了盐芥的一个耐盐基因及其编码蛋白与应用。其目的是提供盐芥的一个耐盐基因及其编码蛋白与其在培育耐盐性提高植物中的应用。本发明耐盐基因的碱基序列如SEQIDNO：1所示。其编码蛋白的氨基酸残基序列如SEQIDNO：2所示。本发明的耐盐基因将在培育耐盐性增强的植物(特别是水稻、小麦等农作物)中发挥重要作用。

摘要： 本发明公开了来源于盐芥的一个耐盐、抗旱基因及其编码蛋白。该基因可具有下述核苷酸序列之一：1)序列表中SEQ ID №：1的DNA序列；2)在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID №：1限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。该基因的编码蛋白具有序列表中SEQ ID №：2的氨基酸残基序列。本发明的耐盐、抗旱基因将在培育耐盐性增强的植物(特别是水稻、小麦等农作物)中发挥重要的作用。

摘要： 本发明公开了盐芥的一个耐盐、抗旱基因及其编码蛋白，该基因的碱基序列如SEQID №：1所示，该基因编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID №：2所示。本发明的基因将在培育耐盐、抗旱性增强的植物(特别是水稻、小麦等农作物)中发挥重要的作用。

摘要： 本发明公开了来自盐芥的一个耐盐、抗旱基因及其编码蛋白。该基因碱基序列如SEQ ID NO：1所示。该基因编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明的耐盐、抗旱基因将在培育耐盐性增强的植物中发挥重要的作用。

摘要： 本发明公开了一种盐芥盐诱导表达基因TsHKT1；2启动子的克隆与应用；本发明通过构建该启动子驱动GUS的植物表达载体TsHKT1；2::GUS，并经农杆菌花序侵染法转化拟南芥，对转基因拟南芥进行染色观察。结果表明，TsHKT1；2在拟南芥苗期叶维管束组织中微弱表达，成熟期也主要在莲座叶维管束中表达。此外，对盐芥各组织的相对荧光定量PCR结果表明，TsHKT1；2基因表达受盐诱导上调，并且在各组织中表达量较高。因此，该启动子是一种较为稳定的盐芥盐诱导上调启动子，可以在植物基因改造工程中作为功能元件驱动相关功能基因的表达，可能在盐胁迫过程中的作用最为关键。

摘要： 本发明公开了一种利用盐芥转录因子基因DREB2A基因创制高耐盐耐干旱玉米的技术方法。将从盐芥中克隆的DREB2A基因以正义形式导入玉米基因组，在含盐量为1.0%~2.0%的盐碱土/盐碱地中进行种植和筛选，获得在盐碱土/盐碱地中可以完成过正常发育过程的高耐盐碱耐干旱性的玉米新品系。通过转TsDREB2A基因途径可以提高植物的耐盐碱耐干旱能力，可用于植物抗性改良和抗逆植物新种质的创制。

摘要： 本发明公开了来源于盐芥的一个耐盐基因及其编码蛋白与应用。其目的是提供盐芥的一个耐盐基因及其编码蛋白与其在培育耐盐性提高植物中的应用。该基因可具有下述核苷酸序列之一：1)序列表中SEQ ID №：1的DNA序列；2)编码序列表中SEQID №：2的DNA序列；3)在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID №：1限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。编码具有下述氨基酸残基序列之一的蛋白质：1)序列表中的SEQ ID №：2；2)将序列表中SEQ ID №：2的氨基酸残基序列经过一至十个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有提高植物耐盐性作用的蛋白质。本发明的耐盐基因将在培育耐盐性增强的植物(特别是水稻、小麦等农作物)中发挥重要作用。

摘要： 本发明公开了来自盐芥的一个耐盐基因及其编码蛋白与应用。其目的是提供来自盐芥的一个耐盐基因及其编码蛋白与其在培育耐盐性提高植物中的应用。该基因可具有下述核苷酸序列之一：1)序列表中SEQ ID №：1的DNA序列；2)编码序列表中SEQ ID №：2的DNA序列；3)在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID №：1限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。编码具有下述氨基酸残基序列之一的蛋白质：1)序列表中的SEQ ID №：2；2)将序列表中SEQ ID №：2的氨基酸残基序列经过一至十个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有提高植物耐盐性作用的蛋白质。本发明的耐盐基因将在培育耐盐性增强的植物(特别是水稻、小麦等农作物)中发挥重要作用。