白血病细胞

摘要： 目的:研究漆姑草醇提物(HSJ)对人慢性髓系白血病细胞(K562)的诱导分化作用。方法:实验设HSJ不同浓度(250、125、62.5μg/mL)实验组,阴性对照组(等体积1640培养基),作用48 h后,采用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测K562细胞增殖抑制率;瑞氏-吉姆萨染色观察K562细胞形态;硝基四氮唑蓝(NBT)还原实验法测定K562细胞分化能力;流式细胞术检测K562细胞分化相关抗原CD11b、CD14、CD41a和CD42b阳性细胞的表达率;Western blot法检测K562细胞中珠蛋白转录因子1(GATA1)和造血转录因子1(PU.1)蛋白的表达。结果:与阴性对照组比较,各浓度HSJ均能有效抑制K562细胞的增殖(P<0.05);经HSJ作用后,各实验组K562细胞核浆比例减小,出现分叶状细胞核,部分细胞核凹陷出现明显的细胞分化形态;与阴性对照组相比,3个不同浓度HSJ组的NBT还原率均提高(P<0.05);CD11b、CD14、CD41a和CD42b阳性细胞表达率均增加(P<0.05);GATA1和PU.1蛋白相对含量亦增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:漆姑草醇提物能诱导K562细胞向成熟细胞方向分化。

摘要： 目的:研究漆姑草醇提物(HSJ)对人慢性髓系白血病细胞(K562)的诱导分化作用.方法:实验设HSJ不同浓度(250、125、62.5μg/mL)实验组,阴性对照组(等体积1640培养基),作用48 h后,采用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测K562细胞增殖抑制率;瑞氏-吉姆萨染色观察K562细胞形态;硝基四氮唑蓝(NBT)还原实验法测定K562细胞分化能力;流式细胞术检测K562细胞分化相关抗原CD11b、CD14、CD41a和CD42b阳性细胞的表达率;Western blot法检测K562细胞中珠蛋白转录因子1(GATA1)和造血转录因子1(PU.1)蛋白的表达.结果:与阴性对照组比较,各浓度HSJ均能有效抑制K562细胞的增殖(P<0.05);经HSJ作用后,各实验组K562细胞核浆比例减小,出现分叶状细胞核,部分细胞核凹陷出现明显的细胞分化形态;与阴性对照组相比,3个不同浓度HSJ组的NBT还原率均提高(P<0.05);CD11b、CD14、CD41a和CD42b阳性细胞表达率均增加(P<0.05);GATA1和PU.1蛋白相对含量亦增加,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论:漆姑草醇提物能诱导K562细胞向成熟细胞方向分化.

摘要： 白血病是造血干细胞和祖细胞的一种恶性克隆疾病。由于白血病细胞不受控制的增殖、分化障碍和细胞凋亡的阻碍,白血病细胞在细胞发育的不同阶段停滞不前。在骨髓和其他造血组织中,白血病细胞大量增殖和积累,抑制正常的造血,渗透到其他器官和组织。《血液科临床护理思维与实践》一书有朱霞明、刘明红、葛永芹主编于2020年1月由人民卫生出版社。

摘要： 目的 探讨中草药提取物白花丹醌对人白血病细胞系HL-60甲基化的影响机制.方法 MTS法确定不影响细胞生长的白花丹醌研究浓度;白花丹醌研究浓度作用于HL-60细胞不同时间,ELISA法测定其甲基化水平和DNA甲基转移酶(DNMT)活性;实时荧光定量PCR评估DNMT酶类基因mRNA表达水平.结果 选定白花丹醌0.8μmol/L作为研究浓度,作用18h,HL-60细胞甲基化水平显著下降[(1.63±0.27)ng比(2.42±0.41)ng,P0.05];白花丹醌作用12h后,与对照组比较出现DNMT总体活性的下降[(0.91±0.09)OD·h-1·μg-1比(1.24±0.19)OD·h-1·μg-1,P<0.05],作用24h后活性下降更明显[(0.69±0.08)OD·h-1·μg-1比(1.24±0.19)OD·h-1·μg-1,P<0.01];白花丹醌对DNMT1、DNMT3b基因的表达具有明显抑制作用(P<0.05),对DNMT3a基因的表达作用不明显.结论 低浓度白花丹醌以ROS为重要介质,能够诱导白血病细胞去甲基化,这种作用与抑制DNMT活性,抑制DNMT1和DNMT3b基因的表达有关.

摘要： 目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)在急性髓系白血病细胞中的表达。方法:选取2017年1月至2019年5月怀集县人民医院收治的急性髓系白血病患者120例,其中初始急性髓系白血病患者79例,复发急性髓系白血病患者41例,并选取怀集县人民医院接受健康体检的健康者20例作为对照组,分析三组研究对象血清以及细胞中VEGF水平。结果:复发急性髓系白血病患者的血清VEGF水平高于初始急性髓系白血病患者以及对照组,而初始急性髓系白血病患者高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);复发急性髓系白血病患者细胞中的VEGF表达高于初始急性髓系白血病患者以及对照组,而初始急性髓系白血病患者高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:在白细胞增殖以及迁移过程中,VEGF发挥着重要的作用,且复发患者VEGF水平高于初始患病患者。

摘要： 泽陆蛙是我国南方蛙类优势种之一,对维护农业生态系统,以及病虫害的生物防治有重要意义。本研究采用流式细胞术,用碘化丙啶(PI)染色细胞核,首次以人白血病HL60细胞基因组DNA为对照标准品,测定了舟山地区泽陆蛙的基因组大小。实验共测定了5组泽陆蛙雌性样本,测算出泽陆蛙基因组DNA质量为2.21±0.17 pg,基因组大小为2.16±0.16 Gb。结果表明,可以选择白血病细胞为对照,应用流式细胞术估算泽陆蛙基因组大小,泽陆蛙基因组大小与已知的多数蛙类基因组大小相近。测定结果为泽陆蛙基因组学和系统进化的后续研究提供了数据基础。

摘要： 为了探究松萝酸对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响,体外培养人白血病细胞U937、人骨肉瘤细胞MG-63、人黑色素瘤细胞A375,用不同浓度的松萝酸分别作用于3种细胞24 h和48 h,用MTT法检测3种肿瘤细胞的增殖情况.Hoechst 33342染色观察U937经松萝酸处理后细胞形态的变化,Western Blot检测U937中凋亡相关蛋白的表达情况.结果 发现,松萝酸对U937、A375和MG-63细胞增殖均有抑制作用,且均呈现出时间和剂量依赖性.3种肿瘤细胞中,松萝酸对U937增殖的抑制效果最好.通过Hoechst 33342染色发现,随着松萝酸浓度的升高,凋亡的U937细胞数逐渐增多.U937细胞经松萝酸处理后,Bax蛋白的表达量增高,Bcl-2蛋白和Caspase-3蛋白的表达量降低,Bax蛋白表达量与Bcl-2蛋白表达量的比值增加.由此认为,松萝酸诱导的U937细胞凋亡与Caspase依赖性线粒体途径有关.

摘要： 目的:研究STAT3在耐药白血病细胞凋亡及免疫逃逸中的作用,并探讨白血病微小残留病引起的白血病复发的可能机制.方法:用pcDNA3.1-STAT3质粒转染K562细胞,建立耐药白血病细胞株K562/STAT3细胞.RQ-PCR和(或)Western blot检测空载质粒转染的对照细胞株K562/-细胞和K562/STAT3细胞中STAT3、BAX以及NKG2D配体的表达.流式细胞术检测K562/-细胞和K562/STAT3细胞的凋亡情况及NK细胞对K562/-细胞和K562/STAT3细胞的杀伤作用.结果:K562/STAT3细胞中总STAT3和STAT3磷酸化水平均明显升高,而且其耐药蛋白P-gp mRNA的表达明显升高(P ＜0.005).与K562/-细胞相比,K562/STAT3细胞促凋亡基因BAX mRNA的表达水平明显下降(P =0.005),且多柔比星引起的K562/STAT3细胞凋亡明显减少(P =0.002);用STAT3抑制剂(SH-4-54)处理K562/STAT3细胞后,促凋亡基因BAX mRNA的表达水平明显升高(P=0.017),同时细胞凋亡也明显增加(P=0.005).与K562/-细胞相比,K562/STAT3细胞NKG2D配体(MICA和ULBP1)mRNA的表达水平明显下降(P ＜0.0001),MICA和ULBP1蛋白的表达水平亦明显下降(MICA:P =0.001,ULBP1:P=0.022);用STAT3抑制剂(SH-4-54)处理K562/STAT3细胞后,MICA mRNA和蛋白表达水平升高(mRNA:P =0.001,蛋白:P =0.002),但ULBP1 mRNA和蛋白无明显改变(mRNA:P =0.137,蛋白:P =0.1905).NK细胞对耐药K562/STAT3细胞的杀伤能力较K562/-细胞下降(P =0.002),但是STAT3抑制剂恢复了K562/STAT3细胞对NK细胞的杀伤敏感性(P=0.006).结论:STAT3磷酸化介导了耐药白血病细胞抗凋亡,降低其对NK细胞的杀伤敏感性.STAT3抑制剂可以促进耐药白血病细胞凋亡并增加其对NK细胞的杀伤敏感性.

摘要： 建立了一种基于超高效液相色谱-离子阱-飞行时间质谱(UPLC-IT-TOF MS)联用的非靶标代谢组学方法,研究了人慢性髓系白血病细胞及其阿霉素耐药细胞(K562和K562-ADM)之间的代谢物差异.考察了细胞破碎方法、提取溶剂体系和溶剂体积对细胞代谢物提取效果的影响,实验发现采用超声破碎法,以800 μL的80％甲醇提取时可得到较多的代谢特征峰,方法重复性和稳定性较高.将建立的方法应用于K562及K562-ADM细胞的代谢组差异研究,对所得数据进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA).结果 显示2种细胞的代谢特征存在显著差异,并发现40个对分类有显著贡献的代谢物,差异代谢物主要参与氨基酸代谢、鞘脂代谢、嘌呤代谢和嘧啶代谢等通路.该方法可用于K562和K562-ADM细胞的代谢组差异研究,可望为白血病细胞耐药性的代谢组学研究提供帮助.

摘要： 目的：探讨下调WAVE1表达对白血病细胞自噬及化疗敏感性的机制.rn 方法：将表达WAVE1shRNA慢病毒载体导入HL-60细胞中,Western blot和RT-PCR方法检测下调WAVE1基因在转染前后的表达;Western blot法、免疫荧光和透射电镜检测阿霉素(ADM)对转染前后HL-60细胞自噬水平的影响;MTT法检测下调WAVE1表达对细胞存活率的影响.rn 结果：成功构建了低表达WAVE1的慢病毒载体，通过MTT法和流式细胞术筛选出病毒最佳感染复数，此时细胞存活率和细胞绿色荧光强度最高。rn 结论：下调WAVE1表达增强了白血病细胞的化疗敏感性，该作用可能与下调WAVE1基因抑制细胞自噬水平相关，提出自噬可能是白血病细胞死亡的一种重要保护机制。

摘要： 目的：本文研究ALK阻滞白血病细胞进入增殖周期,诱导原始细胞分化的作用,并通过DNA甲基化表观遗传的调控而抗白血病.rn 方法：①中剂量ALK孵育K562,HEL,SHI-1和Meg-01白血病细胞48h，流式细胞术检测对细胞增殖周期的影响。②Western blot分析增殖相关MAPK信号传递途径多种蛋白激酶的表达水平。rn 结果：ALK有效地阻滞白血病K562,HEL,SHI-1和Meg-01进入增殖周期，S期细胞的百分率显著下降，增殖指数(%)明显低于对照细胞。同时，上调细胞周期抑制因子P21蛋白的表达水平。rn 结论：ALK通过阻滞细胞增殖周期，上调周期抑制因子而有效地抑制白血病细胞的异常增殖。诱导分化是药效学研究的突破点，具有重要的实用价值。ALK通过诱导DNA甲基化表观遗传的调控，上调抑癌基因、DNA修复和分化相关基因，下调致癌基因和抗凋亡基因的表达，而发挥抑制增殖和诱导分化的抗白血病功效，机制不同于传统化疗药。综合其它的白血病动物模型、细胞学、分子实验及毒理学等结果，证明ALK能够有效地抗白血病而无明显毒副反应，为中药5类新药的开发奠定基础，可成为安全有效治疗白血病的中药新药。

摘要： 目的：探讨S100A8对化疗诱导的白血病细胞自噬的调控,以阐明其通过自噬抑制凋亡,提高白血病细胞对化疗药物抵抗的作用机制.rn 方法：检测不同白血病细胞内S100A8mRNA和蛋白的表达情况,四甲基偶氮唑蓝(methylthiazolyltertrazolium,MTT)法检测细胞存活率,并获得相应药物的半数抑菌浓度(IC50).以K562及MV4-11细胞为研究对象,通过基因转染、RNA干扰技术、药物阻断等上调或抑制S100A8及相关通路信号蛋白的表达,通过western blotting、免疫共沉淀等方法：检测白血病细胞S100A8、ULK1、BECN1,PI3KC3、ATG7及自噬相关标志蛋白的变化和蛋白间的相互作用,透射电镜观察细胞自噬小体的变化;通过流式细胞术检测细胞凋亡率.rn 结果：耐药细胞系(K562/A02,HL60/ADR)的S100A8蛋白及mRNA表达水平均高于其相应非耐药细胞系(K562,HL60);而不同的细胞系间(K562.Jurkat及MV4-11)，对同一药物的耐药性越高，S100A8的表达也越高;表明白血病细胞的耐药性增加与S100A8的表达呈正相关。K562、HL60、Jurkat及MV4-11细胞分别加入ADR,VCR作用48h后，相应细胞系S100A8的mRNA及蛋白的表达水平均明显增加，证实白血病细胞在受到化疗药物刺激时S100A8的表达会增高。rn 结论:S100A8是化疗诱导的白血病细胞自噬的重要调节因子，并由此参与了白血病细胞对化疗药物抵抗的调控，为白血病的靶向治疗提高了新的思路。

摘要： 目的：研究黏着斑激酶(focaladhesion kinase,FAK)基因沉默对白血病细胞化疗耐药性及迁移能力的影响.rn 方法：构建FAK shRNA慢病毒载体及空白病毒载体,分别转染至REH白血病细胞株,建立稳定转染细胞株.体外予不同浓度药物强的松龙处理转染后的REH白血病细胞,并予荧光染料JC-1标记细胞观察细胞凋亡情况.体外应用Transwell培养体系,观察白血病细胞在细胞因子SDF-1作用下的迁移能力.将REH细胞予绿色荧光CFSE进行标记,经尾静脉注射到SCID小鼠,4h后观察白血病细胞在动物体内归巢情况.rn 结果：成功建立FAK shRNA慢病毒载体，该载体能有效沉默FAK基因表达。rn 结论：FAK shRNA能增强白血病细胞对化疗药物敏感性，并明显降低白血病细胞迁移能力，提示FAK基因沉默有望成为白血病治疗的新策略。

摘要： 目的：观察人白血病细胞经过长期传代后,细胞内脱氧胞苷激酶(deoxycytidine kinase,dck)mRNA表达及其酶活性的变化规律,来探讨dck与阿糖胞苷(Ara-C)疗效及耐药现象发生的相关性.方法：早幼粒白血病细胞系(H L-60)及其耐药细胞株(HL-60/R)经过体外长期传代过程中,采用实时PCR方法、核素液闪法测定HL-60和HL-60/R细胞内dck的mRNA表达水平及其酶活性水平.通过体外培养传代,观察两种细胞株经长期传代(5、10、20、30、40、50代)后细胞内dck的mRNA表达及酶活性的变化规律.结果：传代初期结果显示,HL-60和HL-60/R两组细胞株之间的mRNA表达水平分别为0.37±0.03和0.17±0.03,活性值分别为0.069±0.006nmol/min/mg.protein和0.019±0.007nmol/min/mg.protein,HL-60的dck mRNA表达水平和酶活性均明显高于HL-60/R(P＜0.05).HL-60和HL-60/R两组各传代节点(10、20、30、40和50代)的dck mRNA表达水平与酶活性与本组第5代细胞相比,则无明显变化(P＞0.05).结论：HL-60及HL-60/R两组细胞株间的mRNA表达和酶活性在传代初期存在显著差异,且两组间的差异持续存在.但与各自的初期传代相比,长期传代后的mRNA表达和酶活性变化并不明显,提示dck仅与Ara-C的初期疗效明显相关,而与Ara-C耐药现象的发生可能无关.

摘要： 目的：研究Aiolos基因过表达对白血病细胞增殖、周期、凋亡及化疗敏感性的影响,并探讨其可能的机制.方法:采用Western Blot方法检测Ball-1、Jurkat、K562、Molt-4和Nalm-6白血病细胞系中Aiolos的表达.构建Aiolos基因过表达慢病毒载体,感染Jurkat细胞并检测Aiolos过表达对细胞系增殖、细胞周期和凋亡及相关基因表达的影响,检测依托泊苷对Aiolos转染组细胞的杀伤效应.结果：(1)Aiolos在Jurkat、K562、Molt-4和Nalm-6四种白血病细胞系中均有表达.(2)Aiolos转染Jurkat细胞4天后,Aiolos基因过表达组及阴性对照组GFP表达量达80％以上,且Aiolos转染组的Aiolos蛋白表达较阴性对照组和空白对照组明显上升.(3)Aiolos转染组相对于阴性对照组和空白对照组细胞凋亡比例增加,细胞周期由G0/G1进入S期比例明显减少,增殖能力无明显变化.(4)周期相关基因Cyclin D3,Skp2表达下调,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子P21,P27表达上调;凋亡相关基因Bax表达无明显变化,Bcl-2表达下调,Bax/Bcl-2比例增加.(5)转染Aiolos基因Jurkat细胞在依托泊苷浓度40ug/ml作用时间为36h和48h后,细胞存活百分率为27.74％和16.44％,与阴性对照组和空白对照组比较明显降低(P＜0.05),化疗敏感性增强.结论：在Jurkat细胞系中介导Aiolos基因过表达能够抑制细胞进入细胞周期并提高细胞对化疗药物的敏感性.

摘要： 目的:证明在小鼠或者人的白血病细胞中同时抑制mTORC2和HSP90的功能可降解蛋白质Akt,并抑制其在体内外环境中生长和促进其死亡,从而为联合使用此两种药物治疗白血病提供理论基础.方法：①用Ab-MuLV或者P210bcr-abl病毒转染小鼠前B淋巴细胞,从而得到白血病细胞系;②分别将17 AAG或者17AAG+雷帕霉素加入培养基,培养特定时间后将白血病细胞裂解取得蛋白质,用Westernblot方法检测Akt蛋白质含量;③分别将17AAG或者17AAG+雷帕霉素加入培养基,培养特定时间后用PI与An-nexin V双染法检测凋亡与死亡细胞;用锥虫蓝拒染法计数活细胞.

摘要： 目的:基质细胞衍生因子1(SDF-1,或称CXCL12)及其特异性受体CXCR4所组成的CXCR4/CXCL12轴在介导白血病细胞向器官侵袭浸润和向骨髓基质微环境迁移方面起着关键的作用.本工作合成并研究CXCR4拮抗多肽对高表达CXCR4的白血病细胞HL-60的迁移和增殖行为的作用.

摘要： 目的：肿瘤细胞耐药多由于p53基因异常所致,小檗碱能够诱导多种肿瘤细胞发生细胞周期阻滞及细胞凋亡.本研究主要探讨小檗碱对儿童p53基因缺失的急性淋巴细胞白血病EU-4细胞凋亡诱导作用及其作用靶点.rn 方法：取对数生长期的EU-4细胞进行实验。rn 结果：小檗碱作用EU-4细胞后，细胞凋亡率显著升高(P<0.05)，并呈剂量依赖关系，凋亡相关蛋白表达出现相应变化;(2)小檗碱诱导EU-4细胞凋亡主要依赖caspase的活性，并且caspase-3的活性显著增强。rn 结论：小檗碱能够以不依赖p53的方式诱导白血病EU-4细胞凋亡，X1AP作为小檗碱的作用靶点，参与了EU-4细胞的凋亡。

摘要： 目的：合成一系列2-(E)-取代-苯基亚甲基-6-(N-取代-胺甲基)环己酮／环己醇类化合物提高其抗肿瘤活性。方法：以环己酮为原料,经stork烯胺介导的Aldol反应、胺交换反应和格氏反应得到目标化合物。结果：合成了二十个化合物并测试了它们对人白血病细胞HL-60的体外生长抑制活性。结论：含有甲磺酰基的化合物4h,4i,4j表现出了较强的抗增殖活性,GI50分别为0.84,1.12和0.86μM。

摘要： 一种治疗再生障碍性贫血，急、慢性粒细胞白血病的药物，它是由生地、白芍、三棱、莪术、三七、水红花籽、当归、黄芪、藕节、阿胶、旱莲草、女真子、知母、萸肉、等中药材研末制成冲剂。

摘要： 本发明涉及一种抗PTN抗体在抑制白血病干细胞以及治疗慢性粒细胞白血病中的应用，所述抗PTN抗体能够以较高的亲和力结合PAI‑1蛋白，能够抑制CML干细胞的植入，能够抑制CML细胞生长，能够用于预防或治疗慢性粒细胞白血病，有着广阔的应用前景。

摘要： 本发明涉及白血病干细胞抑制剂及其在治疗慢性粒细胞白血病中的应用，所述白血病干细胞抑制剂为PAI‑1抗体，其能够以较高的亲和力结合PAI‑1蛋白，能够改善CML小鼠脾脏病变，能够延长CML小鼠生存期，能够用于预防或治疗慢性粒细胞白血病，有着广阔的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种用于白血病干细胞抑制增殖及诱导分化的小分子，所述小分子为甲基牛扁亭；本发明的优点在于：能够作为治疗初诊以及复发难治性AML的有效药物。

摘要： 本发明公开了一种通过施用下列固体分散体来治疗哺乳动物中的急性髓细胞白血病、急性淋巴细胞性白血病、高风险脊髓发育不良综合征和/或HR‑MDS/AML的方法，所述固体分散体包含无定形的式(1)的噻吩并三唑并二氮杂

摘要： 本发明涉及N-[2-(2,1,3-苯并噻二唑-5-基氨基)-6-(2,6-二氯苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基]-N'-(1,1-二甲基乙基)-脲和阿糖胞苷的组合产品以及它们用于治疗AML或CML的用途。

摘要： 本发明属于生物医药领域，具体涉及一种小檗碱在制备克服慢性粒细胞白血病耐药性药物或抗慢性粒细胞白血病药物增敏剂中的应用。所述的小檗碱可以增加慢性粒细胞白血病细胞对伊马替尼的敏感性和克服慢性粒细胞白血病细胞对伊马替尼的多药耐药性。其中，小檗碱主要通过泛素化的机制降解BCR‑ABL蛋白进而克服由于T315I突变引起的慢性粒细胞白血病的多药耐药性。

摘要： 本发明公开了一种用于抑制白血病细胞及白血病干细胞增殖并诱导其分化的化学小分子，所述小分子为A‑804598；本发明的优点在于：能够作为治疗初诊以及复发难治性AML的有效药物。

摘要： 本发明属于生物医药领域，具体涉及一种小檗碱在制备克服慢性粒细胞白血病耐药性药物或抗慢性粒细胞白血病药物增敏剂中的应用。所述的小檗碱可以增加慢性粒细胞白血病细胞对伊马替尼的敏感性和克服慢性粒细胞白血病细胞对伊马替尼的多药耐药性。其中，小檗碱主要通过泛素化的机制降解BCR-ABL蛋白进而克服由于T315I突变引起的慢性粒细胞白血病的多药耐药性。

摘要： 本发明提供一种从白血病细胞株分选白血病干细胞的方法，其包括如下步骤：（1）对人急性髓系白血病细胞株KG1a细胞进行培养传代；（2）免疫磁珠法分选CD34+CD38-细胞，获得白血病干细胞；所述的白血病干细胞对常规化疗和NK免疫治疗双抵抗。本发明的分选方法操作简单，能够从KG1a细胞中分离出大量高纯度的白血病干细胞，对白血病干细胞的研究具有重大意义。