中国红豆杉

摘要： 本文针对中国红豆杉种子种皮透性较差且休眠时间段较长,用种子人工繁殖育苗比较困难的问题,根据中国红豆杉生物学特性,结合长期以来总结的相关经验,分别介绍了中国红豆杉大田直播育苗和容器袋育苗两种种子育苗方法。从播前准备(包括种子采收、催芽处理、苗圃地选择及整地作床)、播种育苗(播种时间、方法)、苗期管理(包括苗期遮阴、水肥管理、中耕除草、病虫害防治)三个阶段具体阐述了一套育苗技术规程,经多年试验示范,该技术具有一定的系统性、规范性、操作性、实用性。

摘要： 抗癌药物紫杉醇生物合成途径中羟化酶的发现是当今研究的热点和难点.文中利用前期分析得到的1个新的中国红豆杉羟化酶基因TcCYP725A22 (GenBank登录号:MF448646.1),构建了亚细胞定位载体pCAMIBA1303-TcCYP725A22-EGFP,瞬时侵染洋葱表皮细胞,激光共聚焦显微镜观察结果发现该基因编码蛋白定位在细胞膜.进一步构建了植物表达载体pBI 121-TcCYP 725A22,经根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens LBA4404介导转化到中国红豆杉细胞中过表达后,利用荧光定量PCR (qRT-PCR)和液质联用(LC-MS)分析TcCYP725A22过表达对紫杉醇生物合成的影响.结果 显示,瞬时转化pBI 121-TcCYP725A22的红豆杉细胞中TcCYP725A22基因的转录水平明显高于pBI121空载体对照组.随着TcCYP725A22基因过表达,几个已知的紫杉醇合成关键酶基因的表达量也都有不同程度的上调,且细胞中各紫杉烷的含量普遍提高.这些结果说明羟化酶基因TcCYP725A22极有可能参与紫杉醇的生物合成路径.

摘要： 为探索中国红豆杉的快繁技术,以其10年树龄红豆杉2年生、3年生、4年生插穗枝条为试验材料,在3种不同的基质中进行扦插,以150mg/L的吲哚丁酸(IBA)溶液对扦插枝条进行处理.在扦插初期初步探索出适合中国红豆杉的最佳扦插基质及插穗枝条.结果表明:扦插基质为森林腐殖土、园土、河沙(1∶1∶1)混合基质时,成活率最高,尤其是3年生枝条,能达到90％以上,而在对照组河沙基质中成活率仅在50％左右,芽萌动期都为19天左右,生根期为70天左右.新梢生长量在扦插后的第二个月都达到高峰期.

摘要： 为了掌握中国红豆杉[Taxus chinensis (Pilg.) Rehder.]盆栽技术,以3年生中国红豆杉扦插苗为试验材料,通过试验因素设置与试验结果分析,得到了栽培基质、肥料、光照、水等因素对盆栽幼树生长量的影响情况,并依据试验结果与试验中采取的管理措施,总结形成了材料选择、栽植、养护管理、档案管理等中国红豆杉盆栽技术.

摘要： 本文通过分析中国红豆杉扦插前的准备、扦插中的技术保障和后期的管护措施落实等关键的环节，对人工扦插中国红豆杉如何提高成活率进行有益的尝试和探索，关键技术措施得力，实际利用率高，可操作性强。

摘要： 水杨酸(SA)可诱导红豆杉细胞中紫杉醇的合成,病程相关基因非表达子基因(NPR1)是SA介导的植物系统获得性抗性(SAR)信号途径中的关键信号分子.本研究从中国红豆杉(Taxus chinesis)细胞中克隆了TcNPR1基因,该基因完整的开放阅读框大小为1857 bp,编码蛋白序列由619个氨基酸组成,含有典型的NPR1保守结构域、锌指结构域和锚蛋白结构域.进化树分析发现,TcNPR1蛋白与拟南芥AtNPR3和AtNPR4类蛋白的亲源关系较近.TcNPR1基因表达响应SA、干旱和NaCl胁迫处理,且随着处理时间增加,TcNPR1基因表达量逐渐增大.超表达TcNPR1的转基因烟草植株对干旱的耐受力增强,叶片内可溶性糖含量达43.8 mg/g (FW),比对照高出2倍左右,说明TcNPR1基因具有表达功能,此结果为探究中国红豆杉细胞响应SA诱导大量合成紫杉醇的信号途径提供了依据.

摘要： 水杨酸（SA）可诱导红豆杉细胞中紫杉醇的合成,病程相关基因非表达子基因（NPR1）是SA介导的植物系统获得性抗性（SAR）信号途径中的关键信号分子。本研究从中国红豆杉（Taxus chinesis）细胞中克隆了TcNPR1基因,该基因完整的开放阅读框大小为1857 bp,编码蛋白序列由619个氨基酸组成,含有典型的NPR1保守结构域、锌指结构域和锚蛋白结构域。进化树分析发现,TcNPR1蛋白与拟南芥AtNPR3和AtNPR4类蛋白的亲源关系较近。TcNPR1基因表达响应SA、干旱和NaCl胁迫处理,且随着处理时间增加,TcNPR1基因表达量逐渐增大。超表达TcNPR1的转基因烟草植株对干旱的耐受力增强,叶片内可溶性糖含量达43.8 mg/g（FW）,比对照高出2倍左右,说明TcNPR1基因具有表达功能,此结果为探究中国红豆杉细胞响应SA诱导大量合成紫杉醇的信号途径提供了依据。

摘要： 紫杉醇是从红豆杉树皮中分离到的二萜化合物,它对乳腺癌、卵巢癌等具有显著的疗效,应用相当广泛.令人遗憾的是红豆杉生长缓满,资源量有限,特别是紫杉醇含量低,资源与开发矛盾突出.研究紫杉醇生物合成途径中有关基因及其调控机理对于提高红豆杉枝叶和培养细胞中紫杉醇产量都有重要意义.本试验利用高通量测序技术对中国红豆杉(Taxuschinesis)枝条的转录组进行了分析,找到了紫杉醇生物合成途径中几乎所有的已知基因. 我们还发现了其他P450基因Scaffold 77个和NADH dehydxogenase基因Scaffold 2个.除了这些结构调基因外,我们还发现了19个MYB transcription factor基因Scaffold、3个MYC基因Scaffold、8个AP2 domain-containing transcription factor基因Scaffold和6个Ethylene-responsive transcription factor基因Scaffold,这些结构基因和调节基因的Scaffold是今后对紫杉醇生物合成进行有效调控的重要资源.

摘要： 研究了中国红豆杉细胞的高密度培养，采用３０ｇ／Ｌ的起始糖浓度，通过在细胞对数生长后期补料的方法成功地在２５０ｍｌ摇瓶和１．５Ｌ搅拌式生物反应器中实现了细胞高密度培养届２０ｄ的培养时间里，细胞干重超过２５ｇ／Ｌ。在反应器培养中，次生代谢产物紫杉烷的产量较低通过高密度培养，不但增加了细胞量，还有效的提高了紫杉烷的产量。

摘要： 该文研究了在中国红豆杉细胞培养中，初始糖浓度和补糖对细胞生长和紫杉烷生产的影响，采用２０ｇ／Ｌ的初始糖并在生长后期补糖改善了细胞生长，细胞干重超过２７ｇ／Ｌ（２３）天。紫杉烷（Ｔａｘｕｙｕｎｎａｎｉｎｅ Ｃ）生产与细胞生产状况有关，其最高含量达１５ｍｇ／ｇＤＷ。补料培养提高了紫杉烷产率，最高可达９．３ｍｇ／Ｌ．Ｄ。

摘要： 应用植物细胞培养技术来生产抗癌新药紫杉醇正受到人们的极大重视。

摘要： 本发明公开一种用于区分云南红豆杉和南方红豆杉的代谢标志物及其检测方法。紫杉氰醣甘作为鉴定云南红豆杉和南方红豆杉的代谢标志物上的应用，云南红豆杉中紫杉氰醣甘的质量含量是南方红豆杉的5‑10倍。本发明可用于野外采集的样本，无需冷冻保存，采集的样本室温下简单干燥保存即可用于代谢标志物的提取和检测。本发明所需的检测样本生物量较少，仅为25mg，对于需鉴定的珍稀红豆杉幼苗的伤害较小。

摘要： 本发明提供一种用于区分曼地亚红豆杉和东北红豆杉的代谢标志物及其检测方法。紫杉碱A作为鉴定曼地亚红豆杉和东北红豆杉的代谢标志物上的应用。曼地亚红豆杉中紫杉碱A的质量含量是东北红豆杉的20‑25倍。本发明的特点是为区分曼地亚红豆杉和东北红豆杉提供了一种可靠、快速的鉴别方法，为濒危珍稀植物的保护和人工栽培提供了有效的分子手段。

摘要： 本发明提供一种用于区分密叶红豆杉和云南红豆杉的代谢标志物及其检测方法。通过色谱结合UPLC‑MS/MS技术，大规模地对密叶红豆杉和云南红豆杉进行非靶向高通量代谢组学分析。明确了密叶红豆杉和云南红豆杉的代谢谱，筛选得到紫杉叶素乙酸酯(Taxifolin 3‑O‑acetate)为一种显著差异的小分子代谢标志物，其显著积累于密叶红豆杉中。本发明的特点是为区分密叶红豆杉和云南红豆杉提供了一种可靠、快速的鉴别方法，为濒危珍稀植物的保护和人工栽培提供了有效的分子手段。

摘要： 本发明提供了一种从红豆杉枝、叶、皮、根中提取精油混合物的方法及该红豆杉精油混合物，该提取方法包括如下步骤：红豆杉枝、叶、皮、根的选取、清洗、烘干或者自然晾干、粉碎、酶解、烘干、研磨、加盐、浸出法萃取。本发明要提供了一种从红豆杉枝、叶、皮、根中提取没有毒素、含有宏量与微量元素的红豆杉精油混合物的方法。红豆杉精油混合物用于制备红豆杉日用品或者外用药，作为其活性成分，在病痛治疗过程中疗效显著。

摘要： 本发明公开了一种红豆杉转录因子TcMYB29在调控红豆杉愈伤中紫杉醇生物合成中的应用。TcMYB29转基因红豆杉愈伤能够显著提高愈伤中紫杉醇含量，本发明经过一系列实验分析发现，TcMYB29能够调控紫杉醇生物合成基因T5OH的转录。本发明挖掘了TcMYB29的功能，对基因工程技术提高紫杉醇含量提供了重要的理论依据，具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明涉及一种红豆杉籽提炼红豆杉精油方法，本发明的红豆杉籽提炼红豆杉精油方法，包括以下步骤：S10：将红豆杉籽脱皮处理；S20：对红豆杉籽进行一次烘干处理，将一次烘干后的红豆杉籽内的水分控制在15％‑20％；S30：对红豆杉籽进行碾压，直至使红豆杉籽开裂和/或破碎；S40：对红豆杉籽进行二次烘干处理，将经所述二次烘干后的红豆杉籽内的水温控制在1％‑8％；S50：对红豆杉籽进行炒制；S60：对红豆杉籽进行榨油处理；S70：对所榨取的红豆杉籽油进行静止，静止完成后得上清液装罐以完成对红豆杉籽油的制备和罐装。

摘要： 本发明公开了一种具有降肌酐、提高内生肌酐清除率作用的红豆杉多糖的制备方法及应用，具体的红豆杉多糖的制备方法包括以下步骤：A)预处理；B)水提醇沉；C)洗涤；D)去蛋白；E)透析；F)冷冻干燥。并且公开了使用该方法制备得到的红豆杉多糖在降肌酐和/或提高内生肌酐清除率方面的应用，以及公开了使用该方法制备得到的红豆杉多糖而制备得到的降肌酐和/或提高内生肌酐清除率的药剂。本发明提取红豆杉多糖成本低，提取率以及纯度高，得到的红豆杉多糖具有降肌酐、提高内生肌酐清除率的功效。

摘要： 本发明公开了一种用于鉴定欧洲红豆杉或曼地亚红豆杉的SNP分子标记，所述SNP分子标记位于SEQ ID NO.1所示序列的第450位碱基，若第450位的碱基为C，则鉴定为欧洲红红豆杉或曼地亚豆杉。本发明基于SNP分子标记建立起了快速鉴定欧洲红红豆杉或曼地亚豆杉的体系。从而达到快速、准确检测欧洲红豆杉或曼地亚红豆杉的目的，对于口岸物种检验工作等具有重大的意义。

摘要： 本发明提供一种用于区分密叶红豆杉和云南红豆杉的代谢标志物及其检测方法。通过色谱结合UPLC‑MS/MS技术，大规模地对密叶红豆杉和云南红豆杉进行非靶向高通量代谢组学分析。明确了密叶红豆杉和云南红豆杉的代谢谱，筛选得到紫杉叶素乙酸酯(Taxifolin 3‑O‑acetate)为一种显著差异的小分子代谢标志物，其显著积累于密叶红豆杉中。本发明的特点是为区分密叶红豆杉和云南红豆杉提供了一种可靠、快速的鉴别方法，为濒危珍稀植物的保护和人工栽培提供了有效的分子手段。

摘要： 本发明公开一种用于区分云南红豆杉和南方红豆杉的代谢标志物及其检测方法。紫杉氰醣甘作为鉴定云南红豆杉和南方红豆杉的代谢标志物上的应用，云南红豆杉中紫杉氰醣甘的质量含量是南方红豆杉的5‑10倍。本发明可用于野外采集的样本，无需冷冻保存，采集的样本室温下简单干燥保存即可用于代谢标志物的提取和检测。本发明所需的检测样本生物量较少，仅为25mg，对于需鉴定的珍稀红豆杉幼苗的伤害较小。