甲基转移酶

摘要： 结直肠癌是消化道常见的恶性肿瘤。近年来,基于m6A甲基化修饰的研究拓宽了表观遗传学在结直肠癌转录后水平的视野。m6A修饰由甲基转移酶、去甲基化酶和甲基识别蛋白共同调控。METTL3和METTL14作为m6A甲基转移酶复合物的核心成分参与了结直肠癌的发生与进展。本文主要综述METTL3和METTL14在结直肠癌增殖、凋亡、侵袭转移以及耐药中的作用,以期为结直肠癌的治疗提供新的途径。

摘要： 上海交通大学医学院上海市免疫学研究所李华兵研究员团队于2022年3月在Science Advances在线发表了题为m^(6)A mRNA modification maintains colonic epithelial cell homeostasis via NF-κB-mediated anti-apoptotic pathway的研究论文。该研究构建肠上皮N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)敲除小鼠模型和肠道上皮干细胞甲基转移酶样蛋白14(methyltransferase 14,Mettl14)条件性敲除小鼠。

摘要： RNA N6-甲基腺嘌呤(m6A)甲基化修饰是广泛存在于真核生物中的一种动态可逆的化学修饰,受到甲基转移酶和去甲基化酶的调控,并被m6A结合蛋白识别加工,进而调节RNA的剪切、出核、稳定性以及翻译过程等。在细胞癌变的过程中,m6A修饰可以通过调控肿瘤相关基因的转录后表达来影响多种肿瘤的增殖、浸润和转移等过程,进而调控肿瘤的发生发展。本文就参与m6A甲基化修饰的3种蛋白、m6A甲基化修饰与多种泌尿系统肿瘤关系的研究进展做一综述。

摘要： 表观遗传修饰异常与心血管疾病的发生、发展密切相关。SET结构域(SETD)家族是一类含有SETD的重要表观遗传修饰酶,主要通过修饰组蛋白H3K4、H3K9、H3K36和H4K20的甲基化而影响基因表达;也可以催化非组蛋白的甲基化而影响信号转导及转录活化因子1、Wnt/β-catenin、缺氧诱导因子1α和Hippo/YAP等重要信号途径的信号转导。SETD家族对心血管发育和疾病的作用主要体现在以下几个方面:调控冠状动脉的形成和心脏发育;保护缺血再灌注损伤的心脏组织;调控糖尿病心血管并发症中的炎症反应、氧化应激和细胞凋亡;参与肺动脉高压形成;调控血栓形成、心肌肥大和心律失常等。本文综述了SETD家族成员的组成、表达调控机制及其在心血管发育和疾病中的作用研究进展,以期为深入理解心血管疾病发生和发展的分子机制及治疗靶点提供参考。

摘要： 为探究I型RM系统甲基转移酶基因hsdM对维氏气单胞菌运动性的影响,研究构建hsdM基因敲除的维氏气单胞菌突变株ΔhsdM,并探究该基因敲除对维氏气单胞菌生长、运动能力及鞭毛基因表达的影响。生长曲线测定结果表明:ΔhsdM菌株的生长速率在对数期生长后期开始缓慢降低,但总体生长水平与野生型基本一致;平板运动实验结果显示,hsdM基因敲除后,维氏气单胞菌运动性极显著下降;RT-qPCR结果表明,ΔhsdM菌株部分鞭毛基因表达显著下调。探究hsdM基因敲除对细菌表观性状的调节作用,为进一步探究N6-甲基腺嘌呤(6mA)甲基化调节基因表达的机制奠定理论基础。

摘要： 生命科学和计算机科学技术的迅猛发展不仅带动了人们对肿瘤疾病机制的认识,而且随着人工智能、机器学习技术的成熟,在治疗方面也提高了脑部治疗的精准程度。脑癌的肿瘤标志物——甲基转移酶是判断脑部肿瘤良恶的检查标志。为提高重要生物遗传标志状态,解决生物遗传标志的预测问题,本文采用ResNet网络对脑癌治疗中重要生物遗传标志的状态检测,通过对公开的脑胶质瘤重要生物遗传标志数据集进行分析,对重要生物遗传标志特征进行分析,通过对数据模型进行训练,并在测试集进行实验验证,实验结果表明该方法能有效检测遗传标志。

摘要： SETD8/SET8/Pr-SET7/KMT5A是唯一已知的催化组蛋白H4K20甲基化的赖氨酸单甲基转移酶(H4K20me1),参与组蛋白翻译后修饰,染色质和细胞核功能的调节,对多种细胞生命活动产生了重要影响。临床上越来越多的证据表明,SETD8与癌症分期和不良预后密切相关,并参与免疫调节。因此,明确SETD8在肿瘤与免疫调节中的作用,将为肿瘤治疗提供更多理论依据。现对SETD8在肿瘤发生发展和免疫调节中的作用机制予以综述。

摘要： 目的:研究SET结构域分支型1(SETDBl)在口腔癌中的表达及其临床意义。方法:收集口腔癌及对应癌旁组织各47例,qRT-PCR检测组织中SETDBl mRNA相对表达水平,免疫组化法SP和Western blot检测SETDBl蛋白的表达,统计学分析SETDBl与患者临床病理特征的相关性。结果:癌组织中SETDBl mRNA相对表达量较癌旁组织显著增高(P0.05)。结论:口腔癌中SETDBl表达水平异常升高并与肿瘤进展密切相关。

摘要： N6-甲基腺苷(m6 A)是动态可逆的转录后修饰,是真核信使RNA(mRNA)上最普遍的内部修饰.越来越多的证据表明,m6 A可改变基因表达,从而调节细胞的自我更新、分化、侵袭和凋亡等过程,并且m6 A甲基化失调与异常的RNA代谢直接相关,可导致肿瘤的发生和药物反应的改变.m6 A修饰主要由m6 A甲基转移酶催化,m6 A去甲基酶去除,并由m6 A结合蛋白识别,从而参与mRNA的所有代谢过程.文章就m6 A RNA修饰与肿瘤发生发展相关研究的最新进展进行综述.

摘要： N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)是哺乳动物中最丰富的RNA碱基修饰,尤其是在真核信使RNA(mRNA)中.m6A修饰可调节RNA的剪接,易位和稳定性,进而影响蛋白质的合成.m6A修饰被RNA甲基转移酶(writers)催化;通过去甲基酶(erasers)还原;还可以被甲基化识别酶(readers)识别.基因的m6A水平异常变化与肿瘤的发生和发展密切相关,即包括增殖、生长、侵袭和转移等.在肿瘤的放射治疗过程中,m6A修饰通过影响DNA损伤、肿瘤干细胞生成、以及肿瘤细胞辐射敏感性等,进而影响放疗疗效.本文就RNA的m6A修饰的表观遗传调控在恶性肿瘤中的作用以及在肿瘤放疗中作用机制的研究进展进行了综述,旨在为临床肿瘤分子靶向疗法和放射增敏剂的研发提供新的思路.

摘要： DNA甲基化作为一种重要的表观遗传现象,通过DNA甲基转移酶的作用,能够在不改变DNA序列的情况下调节基因的功能,在调控不同基因表达过程中发挥重要作用,DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变等,从而控制基因表达.

摘要： 目的:研究替莫唑胺衍生物465化合物的抗肿瘤活性及其作用机理.rn 方法:MTT实验和成克隆实验检测465化合物对肿瘤细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测465化合物引起的肿瘤细胞周期阻滞,蛋白免疫印迹法检测465化合物引起的肿瘤细胞凋亡,免疫荧光和脉冲场凝胶电泳检测465化合物引起的DNA损伤.rn 结果:MTT实验和成克隆实验显示465化合物可以抑制肿瘤细胞增殖,并且受O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)影响较小;流式结果显示465可以使肿瘤细胞周期阻滞在G2-M期;免疫荧光和脉冲场凝胶电泳显示465可以产生DNA损伤、通过外源性途径促进肿瘤细胞凋亡.rn 结论:465化合物可以抑制对TMZ有耐药性的肿瘤细胞增殖、产生周期阻滞、引起DNA双链断裂、导致细胞凋亡,引起MGMT蛋白水平和mRNA水平下调.总而言之,465化合物的抗肿瘤活性与MGMT和MMR无关.

摘要： DNA甲基转移酶被认为在配子发育、胚胎形成、体组织发育和脂肪沉积等过程中与甲基化形态的获得有关.DNA甲基化作为DNA序列的修饰方式,是哺乳动物的一种最要的表观遗传机制,在CpG二核苷酸位点上将胞嘧啶甲基化,形成5'甲基胞嘧啶.像瘦素基因、生长激素基因、脂肪酶基因等几种基因已经被认为与脂肪组织含量和NDA甲基化的水平就有相关性.rn 近年来，牛肉质量的改进得到日益的关注，因此，提高牛肉的品质成为肉牛饲养主要的目标。牛肉的质量性状包括:大理石花纹、被脂肪厚度、脂肪颜色分数和眼肌等部位。有报道表明其中一些质量性状和脂肪沉积有关。于是提出这样的假设:DNMT3a和DNMT3b的表达水平可能会影响脂肪沉积相关基因的表达，进而影响牛肉的质量。本研究测定了DNMT3a和DNMT3b在肝脏和眼肉中的表达量，进而对这两种基因对牛肉质量性状产生的影响进行分析，应用于雪龙黑牛肉牛品种繁育，提高雪龙黑牛品质。

摘要： 目的:观察病毒白细胞介素6(viral interleukin-6,vIL-6)对甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)表达的影响.方法:vIL-6真核表达质粒转染293T细胞,荧光定量RT-PCR和western blot法检测DNMT1表达的变化,比色法检测DNMT1的活性.结果:荧光定量RT-PCR和western blot均表明vIL-6可显著促进DNMT1的表达,且vIL-6能上调DNMT1的活性.结论:vIL-6能诱导DNMT1的表达,可能是KSHV致DNA甲基化异常,促进肿瘤发生发展的分子机制之一.

摘要： 烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)是最稳定的病毒之一,有着非常广泛的寄主,包括蔬菜、观赏植物、豆科植物和其他重要的农作物,特别是烟草和其他茄科植物.N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)是高等真核生物中RNA最普遍和广泛的一种修饰形式.文献报道RNA中m6A的甲基化过程是由甲基转移酶(METTL14和METTL3)催化,并由剪切因子WTAP共同完成.最近研究发现FTO(fat mass and obesity-associated protein)和ALKBH5是m6A的去甲基化酶,这说明RNA的甲基化过程是一个动态的可逆过程.在mRNA中m6A甲基化的过程中,甲基转移酶充当"画笔",去甲基化酶则扮演着"橡皮擦"的角色,共同完成m6A甲基化的动态可逆过程.尽管如此,人们对m6A的生物功能依然不太清楚.有研究发现当生物体中某种缺陷引起m6A甲基化异常时,会引起RNA功能障碍,从而导致疾病.那么当植物被病毒感染后,m6A甲基化水平是否会发生异常,然后引起RNA功能障碍,从而使植物代谢紊乱,表现出病症呢?针对这一问题,在本研究中,采用超高效液相色谱-高分辨质谱串联质谱联用(UPLC-MS/MS检测烟草K326中的m6A,研究健康和感病烟草中m6A甲基化水平的差异,并用荧光定量PCR(RT-PCR)分析烟草中潜在的甲基转移酶和去甲基化酶的基因表达量差异.结果表明,烟草在感染TMV7,10,14,和21d后,烟叶中m6A的水平下降,RT-PCR的检测发现,其中潜在的去甲基化酶XM009801708.1在烟草感染TMV14和21d时基因表达量上调,而潜在的甲基转移酶下调.这个发现说明m6A在烟草的生长发育中扮演着重要的角色,XM_009801708.1极可能是烟草中去甲基化酶之一,m6A可能参与了TMV的致病过程.

摘要： 本文以野葛植物为研究对象,旨在从分子角度解析野葛植物异黄酮物质修饰代谢过程;LC-MS分析显示,野葛植物异黄酮修饰代谢主要体现在糖基化与甲基化过程,其中包括3'-位置甲氧基化、4'-位置甲氧基化、4'-位置糖基化、4',7-位置双糖基化以及8-位置碳糖基化过程,而且这些修饰代谢物主要在该植物根组织部位积累;利用RNA-sequencing技术构建了野葛植物根与叶器官的转录组学数据库,发现了一批可能参与异黄酮修饰代谢过程的糖基转移酶与甲基转移酶基因;利用异源蛋白表达与生物化学技术,明确了3'-位置甲氧基化、4'-位置甲氧基化、4'-位置糖基化与4',7-位置双糖基化关键酶基因,尤其是异黄酮3'-位置甲氧基化与4'-位置糖基化酶在植物界尚属首次发掘;结合植物转基因策略与蛋白互作技术,解析了异黄酮物质甲基化修饰代谢的调控机理,发现了野葛植物异黄酮物质甲基化修饰调控发生在蛋白质水平而非转录水平,在外界逆境信号诱导下,异黄酮修饰酶分子与上游骨架形成酶形成蛋白复合体,最终强化了野葛植物异黄酮物质修饰代谢路径.

摘要： 目的：(1)检测Pax2基因在人输尿管组织的表达情况.(2)检测Pax2基因启动子DNA甲基化水平.(3)通过检测DNA甲基转移酶(Dnmt)的表达分析引起DNA甲基化差异的可能原因.方法：(1)材料:病例组标本21例,来自我院泌尿外科行输尿管再植术的Ⅲ级以上原发性VUR患儿术中切下的异常输尿管下段组织,对照组3例,分别为外伤行肾、输尿管切除术,左输尿管结石伴末端狭窄行输尿管再植术,及肾移植术中取得的输尿管下段组织.(2)方法:通过免疫组织化学、Western blot及Real-time PCR检测VUR及对照组输尿管组织蛋白质及mRNA的表达,然后通过重亚硫酸盐测序(BSP)方法检测VUR及对照组输尿管组织Pax2基因启动子DNA甲基化水平,最后通过Real-time PCR检测VUR及对照组输尿管组织三种DNA甲基转移酶的mRNA表达.结果：(1)Pax2表达于VUR输尿管上皮细胞胞核,且VUR组Pax2蛋白质(P=O.011)及mRNA(P＜0.0001)表达水平显著高于对照组.(2)Pax2的蛋白质表达量在不同年龄(P=0.309)、性别(P=0.316)及反流等级(P=0.339)的VUR中无显著差异.(3)VUR组Pax2基因所测启动子序列的DNA甲基化水平显著低于对照组(P=0.045),但与mRNA的表达无显著相关性(P=0.091).(4)Pax2基因所测启动子序列的DNA甲基化水平在不同年龄(P=0.574)、性别(P=0.347)、反流等级(P=0.881)的VUR中无显著差异.(5)VUR组Dnmt3a显著低于对照组(P=0.027),但Dnmt1、Dnmt3b的差异无统计学意义.结论：(1)VUR组Pax2基因蛋白质及mRNA的表达显著高于对照组,其表达的意义有待进一步研究.(2)VUR组Pax2基因所测启动子序列的DNA甲基化水平显著低于对照组,在一定程度上可以解释Pax2在输尿管上皮细胞的高表达.(3)Pax2基因所测启动子的DNA低甲基化可能是由低水平的Dnmt3a所引起.

摘要： 目的：明确尼古丁对体外培养的人胰腺导管上皮细胞DNA甲基转移酶3a表达及活性变化的影响,以期为进一步研究其作用机制提供前期实验依据.方法：常规培养人胰腺导管上皮细胞,100umol/L尼古丁刺激不同时间后,应用PCT及WesternBlot检测DNMT3a表达;同时应用DNA甲基转移酶3A活性酶连续循环比色法定量测定DNMT3a酶活性的变化.结果：100umol/L尼古丁对人胰腺导管上皮细胞DNMT3a mRNA的表达及酶活性变化随着作用时间的延长而增强,12h时可达最大值,其后随着作用时间的延长而逐渐降低.结论：尼古丁作用于人胰腺导管上皮细胞，可导致DNMT3a的表达及酶活性改变，进而有可能导致抑癌基因甲基化，从而引发肿瘤发生。

摘要： 目的:初步探究Pci-LaeA在橘青霉中对其生长、发育和次级代谢产物合成的调控作用，并通过基因工程改造提高橘青霉中重要次级代谢产物美伐他汀(mevastatin/ML-236E/compactin)的生物合成量。方法:首先建立根癌农杆菌介导的橘青霉遗传转化体系;在此基础上通过同源双交换的方法构建Pci-1aeA的缺失、回补以及高表达菌株;研究原始橘青霉和这三种经遗传改造的重组橘青霉在生长形态、发育特征和次级代谢产物合成种类和含量的变化情况:通过RT-qPCR定量分析Pci-IaeA与ML-236B次级代谢基因簇中的途径特异性调控因子mlcR表达情况。结果:目前己经建立起了以根癌农杆菌LBA4404介导的橘青霉的遗传转化体系，当LBA4404<即GiHTG)(ODD=0.4)与生长4天的橘青霉(ATCC: 38065)分生抱子按照1:1的比例混合后在诱导培养基上共培养48h，再经筛选可以获得较多的转化子。结论:成功构建的LBA4404介导的橘青霉遗传转化体系说明橘青霉是可以通过根癌农杆菌介导的方式进行遗传修饰。推测Pci-LaeA也会影橘青霉的生长、发育和次级代谢产物的合成，对次级代谢产物ML-236B合成的影响很可能是通过影响其途径特异性调控因子mlcR的转录表达实现的。

摘要： 目的:初步探究Pci-LaeA在橘青霉中对其生长、发育和次级代谢产物合成的调控作用，并通过基因工程改造提高橘青霉中重要次级代谢产物美伐他汀(mevastatin/ML-236E/compactin)的生物合成量。方法:首先建立根癌农杆菌介导的橘青霉遗传转化体系;在此基础上通过同源双交换的方法构建Pci-1aeA的缺失、回补以及高表达菌株;研究原始橘青霉和这三种经遗传改造的重组橘青霉在生长形态、发育特征和次级代谢产物合成种类和含量的变化情况:通过RT-qPCR定量分析Pci-IaeA与ML-236B次级代谢基因簇中的途径特异性调控因子mlcR表达情况。结果:目前己经建立起了以根癌农杆菌LBA4404介导的橘青霉的遗传转化体系，当LBA4404<即GiHTG)(ODD=0.4)与生长4天的橘青霉(ATCC: 38065)分生抱子按照1:1的比例混合后在诱导培养基上共培养48h，再经筛选可以获得较多的转化子。结论:成功构建的LBA4404介导的橘青霉遗传转化体系说明橘青霉是可以通过根癌农杆菌介导的方式进行遗传修饰。推测Pci-LaeA也会影橘青霉的生长、发育和次级代谢产物的合成，对次级代谢产物ML-236B合成的影响很可能是通过影响其途径特异性调控因子mlcR的转录表达实现的。

摘要： 本发明涉及式(I')化合物、或其药学上或兽医学上可接受的盐、或其立体异构体、或其混合物作为抗癌剂和作为产生诱导多能干细胞的试剂的应用。其中R

摘要： 本发明涉及式(I')化合物、或其药学上或兽医学上可接受的盐、或其立体异构体、或其混合物作为抗癌剂和作为产生诱导多能干细胞的试剂的应用。其中R

摘要： 本发明提供四苯乙烯衍生物在检测甲基转移酶活性上的应用，属于生物技术领域。该检测方法首先制备淬灭分子修饰的双链核酸；然后将淬灭分子修饰的双链核酸与S-腺苷甲硫氨酸、限制性内切酶、不同浓度的甲基转移酶和酶反应的缓冲溶液反应，得到混合溶液；最后将得到的混合溶液与四苯乙烯衍生物水溶液反应，对甲基转移酶的活性进行检测。本发明还提供四苯乙烯衍生物在检测甲基转移酶抑制剂浓度上的应用。本发明的检测方法简单、快速、灵敏度高。

摘要： 本发明特征在于测定多肽的甲基转移酶活性的方法，以及筛选甲基转移酶活性调节物的方法。本发明还提供用于利用所述调节物预防或治疗结肠直肠癌或肝细胞癌的方法或药物组合物。

摘要： 本发明公开一种基于限制性内切酶HpaⅡ和核酸外切酶Ⅲ的DNA甲基化及甲基化转移酶活性的检测方法。制备了无标记的DNA探针，该探针序列包含了限制性内切酶的切割位点和甲基化的CpG位点,通过该无标记的DNA探针与目标DNA杂交，用甲基化转移酶进行甲基化处理，再用限制性内切酶HpaⅡ的特异性切割以及作用于双链DNA的3ˊ→5ˊ外切酶活性的核酸外切酶Ⅲ作用，然后利用荧光信号分子噻唑橙对单双链DNA不同信号实现检测甲基化及甲基转移酶活性的目的。本发明无需制备复杂材料和标记DNA探针，可避免材料制备及标记DNA探针而导致检测成本高、操作烦琐，重现性差的缺陷。本发明具有成本低、快速、简便、灵敏度高的优点。

摘要： 本发明是公开将测试药剂鉴定为能够调节DNA甲基转移酶的DNA去甲基活性的调节物的方法。该方法包括：a)提供甲基化DNA；b)提供该DNA甲基转移酶；c)在测试药剂存在或不存在下，使该甲基化DNA与该DNA甲基转移酶反应一段足够的时间，以进行去甲基反应并产生去甲基DNA产物；d)分析去甲基反应的程度；以及d)比较在该测试药剂存在与不存在下的去甲基反应的程度，从而由此将该测试药剂鉴定为能够调节该DNA甲基转移酶的DNA去甲基活性的调节物。

摘要： 本发明提供四苯乙烯衍生物在检测甲基转移酶活性上的应用，属于生物技术领域。该检测方法首先制备淬灭分子修饰的双链核酸；然后将淬灭分子修饰的双链核酸与S-腺苷甲硫氨酸、限制性内切酶、不同浓度的甲基转移酶和酶反应的缓冲溶液反应，得到混合溶液；最后将得到的混合溶液与四苯乙烯衍生物水溶液反应，对甲基转移酶的活性进行检测。本发明还提供四苯乙烯衍生物在检测甲基转移酶抑制剂浓度上的应用。本发明的检测方法简单、快速、灵敏度高。

摘要： 本发明特征在于测定多肽的甲基转移酶活性的方法，以及筛选甲基转移酶活性调节物的方法。本发明还提供用于利用所述调节物预防或治疗结肠直肠癌或肝细胞癌的方法或药物组合物。

摘要： 本发明提供了高度纯化的烟草腐胺N-甲基转移酶，其纯化方法，以及PMT DNA序列的产生。纯化方法包括将烟草根提取物加样到阴离子交换介质上并用含腐胺的洗脱缓冲液特异性地洗脱腐胺N-甲基转移酶的步骤。

摘要： 本发明公开一种基于限制性内切酶HpaⅡ和核酸外切酶Ⅲ的DNA甲基化及甲基化转移酶活性的检测方法。制备了无标记的DNA探针，该探针序列包含了限制性内切酶的切割位点和甲基化的CpG位点,通过该无标记的DNA探针与目标DNA杂交，用甲基化转移酶进行甲基化处理，再用限制性内切酶HpaⅡ的特异性切割以及作用于双链DNA的3'→5'外切酶活性的核酸外切酶Ⅲ作用，然后利用荧光信号分子噻唑橙对单双链DNA不同信号实现检测甲基化及甲基转移酶活性的目的。本发明无需制备复杂材料和标记DNA探针，可避免材料制备及标记DNA探针而导致检测成本高、操作烦琐，重现性差的缺陷。本发明具有成本低、快速、简便、灵敏度高的优点。