生物活性测定

摘要： 2018—2020年,杭州佳慧芦笋种植基地疑似发现芦笋茎枯病危害,为了明确病原菌种类,将采集的病样进行致病菌分离纯化和鉴定,明确该病害为芦笋茎枯病,根据病原菌形态特征、通用引物及特异性引物扩增序列比对结果,该病原菌与天门冬拟茎点霉〔Phomopsis asparagi(Sacc.)Bubak〕同源性为100%,鉴定为天门冬拟茎点霉。生物学活性测定结果表明,25%吡唑醚菌酯悬浮剂对该病菌菌丝完全抑制,75%百菌清可湿性粉剂对菌丝的抑制作用次之,EC_(50)为0.13μg·mL^(-1)。盆栽试验验证,25%吡唑醚菌酯悬浮剂对茎枯病防治效果最好,达94.56%,可作为防治芦笋茎枯病高效药剂。

摘要： 为寻找有效提高草莓白粉病防效的药剂组合,采用孢子萌发法测定了Streptomyces parvus33菌株发酵液干燥物对草莓白粉菌孢子的室内毒力,药剂终质量浓度为25、50、100、200、400μg/mL,以苯醚甲环唑作为阳性对照,计算药剂对病菌孢子萌发的抑制率。按照GB/T 17980.119—2004杀菌剂防治草莓白粉病方法进行Streptomyces parvus 33发酵液与吡唑醚菌酯或吡唑萘菌胺复配物的田间试验,试验共设7个处理,即Streptomyces parvus 33发酵干燥物原始浓度;25%吡唑醚菌酯;30%吡唑萘菌胺;30%发酵液干燥物+吡唑醚菌酯混合物(20%+10%);40%发酵液干燥物+吡唑醚菌酯混合物(20%+20%);20%发酵液干燥物+吡唑萘菌胺混合物(10%+10%);15%发酵液干燥物+吡唑萘菌胺混合物(5%+10%),同时以清水为对照。采用常规的喷雾措施,均匀喷洒在草莓的整个植株全株,第1次施药选择在草莓白粉病发病初级阶段,14 d后进行第2次用药,共施药2次。结果表明,Streptomyces parvus 33菌株发酵液干燥物对草莓白粉病菌分生孢子萌发具有明显的抑制作用。大棚药效试验结果表明,Streptomyces parvus 33发酵液干燥物与吡唑醚菌酯、吡唑萘菌胺中的组合制剂施用对田间草莓白粉病的防治效果较单纯使用一种药剂明显提升。

摘要： 目的:从与注射用灯盏花素功能主治相关的药效学实验方法中筛选合适的生物活性测定指标.方法:选取不同规格不同批号的注射用灯盏花素从与其功能主治相关的小鼠常压耐缺氧实验、小鼠体内血栓实验、小鼠凝血时间实验中筛选1～2种设计合理,操作简便,指标明确,灵敏度高,重现性好的方法作为其生物活性测定指标.结果:不同批号的注射用灯盏花素生物活性测定结果有所不同,小鼠常压耐缺氧实验和小鼠凝血时间实验符合要求,可以作为其生物活性测定指标.结论:质量标准中的含量测定项并不能全面反映中药注射剂产品的有效性,在注射用灯盏花素质量标准中建立生物活性测定项是必要和可行的.

摘要： [目的]筛选防治玉米大斑病的有效药剂,为病害防治提供理论依据.[方法]采用菌丝生长速率法,测定10种杀菌单剂和5种混剂对玉米大斑病菌的抑制作用,选择效果较好的药剂进行田间试验.[结果]10种杀菌单剂中丁香菌酯、吡唑醚菌酯、戊菌唑、戊唑醇和氟硅唑对玉米大斑病菌的EC50值分别为0.033、0.068、0.042、0.093、0.025 mg/L,抑菌效果较好.丁香菌酯和戊唑醇的质量比为1∶3时,EC50值为0.034 mg/L,增效值为4.99,表明2种药剂按1∶3混配后表现为很好的增效作用.田间药效结果表明:丁香菌酯+戊唑醇1∶3(45+135 g a.i./hm2)时,对玉米大斑病的防效可达84.09％.[结论]丁香菌酯和戊唑醇二元混配对防治玉米大斑病具有增效作用,可有效控制病害发生,为农业生产提供科学指导.

摘要： [目的]为明确不同杀菌剂对芝麻黑斑病菌的抑制作用及田间防效,满足生产上防病需求.[方法]采用菌丝生长速率法测定了7种药剂对芝麻黑斑病菌的室内生物活性,并对这7种药剂进行了田间发病药效试验.[结果]7种药剂对芝麻黑斑病菌生长均具有一定抑制作用,其中62％嘧环·咯菌腈WG和60％唑醚·代森联WG抑制作用最强,EC50值分别为0.1328、0.3541 mg/L,田间防效为94.78％和92.8％,可提高芝麻产量34％以上.[结论]62％嘧环·咯菌腈WG和60％唑醚·代森联WG可以作为防治芝麻黑斑病的优选药剂.

摘要： 目的 研究丹参注射液的体外抗血小板聚集活性,建立丹参注射液的生物活性测定法,从而探索一种反映其有效性的新质控模式.方法 通过丹参注射液体外抗血小板聚集作用为试验系,进行量效学关系考察和规定效价,采用量反应平行线法进行实验设计并计算效价,建立基于体外抗血小板聚集活性的丹参注射液生物活性测定法.结果 丹参注射液浓度在37.7％～52.2％范围内具备显著量效关系,规定标准品效价为1 000 U·L-1,由此测定其他8 个批次(170203、20180601、180727B1、1807241、170204、20180701、180725B1、1807251)效价依次为 931.2、1 584.9、1 252.7、1 054.1、990.1、2 667.9、1 312.1、1 035.7 U·L-1,方法 学考察表明方法 可靠,重复性良好.结论 利用以抗血小板聚集活性为指标的丹参注射液生物活性测定法可对丹参注射液的药效活性进行区分评价,操作简单易行、方法 可靠,对于补充调整中药、中药复方及制剂的全面质量控制具有重大意义.

摘要： 目的建立科学的血塞通注射液生物活性测定方法,进一步完善其质量标准。方法随机选择不同厂家的血塞通注射液,在小鼠常压耐缺氧实验、抗疲劳游泳实验、体内血栓实验、断头存活时间实验中筛选合适的生物活性测定方法。结果小鼠常压耐缺氧实验,4个批号的血塞通注射液与与阴性对照组比较喘息时间延长,差异有统计学意义(P<0.05),符合要求;小鼠体内血栓实验,4个批号的血塞通注射液与阴性对照组进行比较小鼠的未偏瘫个数和偏瘫后恢复个数增多,统计结果具有统计学意义(P<0.05),符合要求。结论血塞通注射液质量标准中建立生物活性测定项是可行的。

摘要： [目的]探索屏边三七种子经层积处理后,种子中内源抑制物质的活性变化.[方法]采用系统溶剂法提取层积不同天数的屏边三七种子的内源抑制物,并用提取液对白菜种子进行发芽试验测定.[结果]通过生物活性测定,表明了屏边三七种子随着层积时间的延长,抑制作用不断减弱,层积175 d,抑制作用基本解除.[结论]层积处理的屏边三七种子各部位的抑制物活性为种胚大于种皮,对白菜种子发芽率和生长的抑制强度依次为层积175 d＜层积140d＜层积105 d＜层积70 d＜层积35 d.

摘要： 目的：确定红花注射液的限值剂量,建立红花注射液生物活性测定方法.rn 方法：选用小鼠体内血栓试验及家兔血小板聚集试验,以红花注射液对体内血栓的保护率及血小板最大聚集抑制率为考核指标,采用正交试验、优化实验方案,用6个厂家6个批次红花注射液进行限值和质量标准的验证.rn 结果：小鼠体内血栓试验中红花注射液浓度和血栓诱导剂配比浓度这两个因素是影响试验结果的主要因素,血栓诱导剂配比和末次给红花注射液至注射血栓诱导剂之间的时间有交互作用,且胶原蛋白0.6mg/ml-肾上腺素0.02mg/ml的配比(血栓诱导剂)与给药30min后尾静脉注射诱导剂组合最佳,当红花注射液限值剂量为3.34g生药/kg(相当于人用剂量20倍)时,形成血栓后红花注射液保护率≥50％,且经卡方检验与模型组有显著性差异,可以此指标作为判定产品合格的标准;家兔血小板聚集试验中红花注射液浓度和ADP浓度是影响结果的主要因素,三个因素间均存在交互作用,红花注射液浓度为5.01g生药/kg、ADP浓度为50μg/ml是最佳组合,当红花注射液限值剂量为5.01g生药/kg(临床人用剂量30倍)时,家兔血小板聚集抑制率≥25％,且经T检验与模型组有显著性差异,可以此指标作为判定产品合格的标准.用上述两种确定的质量标准,通过6个厂家6个批次的红花注射液对上述指定的限制和质量标准进行适用性研究.rn 结论：确定小鼠体内血栓试验的限值剂量为3.34g生药/kg(相当于人用剂量20倍);确定体外家兔抗血小板聚集试验的限值剂量为5.01g生药/kg(临床人用剂量30倍).

摘要： 方法确认(procedure validation)是保证所用分析方法达到其预期使用目的的重要过程和内容.因为该概念及其相应理论的发展与完善关乎所确认的实验方法的可靠性和公认性,所以人们对该领域越来越重视.本文对近年来关于方法确认相关内容的最新研究进展进行概述,主要包括:1.引入"质量源于设计(QbD)"和"分析目标概貌(ATP)"的理念,充实/拓展了现有的"确认(validation)"概念;2.针对方法确认所规定的参数,配套建立起对应的各参数满足标准的统计计算方法及其计算原理;3.修改或删除了一些表述不准确或不必要的参数(如线性、定量限LOQ);4.针对生物活性测定方法(Bioassay)的特殊性,建立起单独的确认指导原则;5.对新方法替代法定方法,提出"等效或优于"的相关统计比较原则.

摘要： 重组人促红细胞生成素生物活性分析方法主要包括体内法和体外法.报告基因法的原理是:药物作用于细胞后，通过信号通路最终激活或失活特定的将转录因子的特定DNA反应元件插转录因子，从而引起某些基因的表达提高或降低。入报告基因的启动子区，并导入药物反应性细胞，通过检测药物作用后报告基因表达的变化来测定药物的生物学活性。报告基因法以其准确,简便,快速等优点已成功应用于多种生物技术药物生物活性的测定.报告基因法被广泛应用于1)基因表达研究;2)蛋白质间相互作用研究;3)建立检测方法;4)RNA干扰研究等。目前多种生物技术药物己经有应用报告基因法进行生物学活性的测定的报道，如干扰素(IFN)，生长激素释放激素(GHRH)，重组人骨形成蛋白(rhBMP)。

摘要： 从西南大学农场牧草试验地里分离出的尖孢镰刀菌产生的毒素是一种非寄主专化性毒素，经生物活性测定表明：该毒素对苜蓿幼苗有致病作用，并对苜蓿种子的萌发和胚根生长有较强的抑制作用，对其他作物胚根生长也有较强的抑制作用。含原液25％的毒素滤液对苜蓿不同品种胚根生长的抑制率差异显著(P<0.05)，其中甘农2号胚根的抑制率最小，为49.23％;抑制最强的是Trifecta和盛世。分别为71.87％和71.63％。

摘要： 以对苯二酚和1,1,1,3-四氯丙烷为起始原料经3步反应合成中间体3-(2,6-二氯-4-(3,3-二氯-烯丙氧基)苯氧基)丙-1-醇,再与2-氯-5-三氟甲基吡啶反应得到目标产物三氟甲吡醚,目标化合物经1H NMR确证,生物活性测定结果表明该化合物对鳞翅目害虫如小菜蛾、甜菜夜蛾等具有优异的杀虫活性。

摘要： 采用特戊酰氯与3-(1,3,4-三甲基吡唑-5-基)-2-(4-叔丁基苯基)-3-羟基丙烯腈酯化的方法,合成出cyenopyrafen及其立体异构体(Z式构型),经核磁及X-射线单晶衍射确认结构。生物活性测定表明,cyenopyrafen对朱砂叶螨具有很高的杀螨活性,且杀螨活性高于其Z式异构体。

摘要： 葡糖胺合酶(GlmS)普遍存在于多种生物体和组织中,该酶是催化UDP-N-乙酰葡糖胺合成的关键酶,能够影响生物体内多种生物大分子的合成.实验室克隆、表达、提取并纯化GlmS,并建立了酶抑制剂的筛选方法以进行杀菌活性化合物GlmS酶抑制活性研究,初步结果表明,实验室以GlmS酶为靶标设计合成的多个化合物均有较好的酶抑制活性与杀菌活性,二者具有一定的相关性.

摘要： 葡糖胺合酶(GlmS)普遍存在于多种生物体和组织中,该酶是催化UDP-N-乙酰葡糖胺合成的关键酶,能够影响生物体内多种生物大分子的合成.实验室克隆、表达、提取并纯化GlmS,并建立了酶抑制剂的筛选方法以进行杀菌活性化合物GlmS酶抑制活性研究,初步结果表明,实验室以GlmS酶为靶标设计合成的多个化合物均有较好的酶抑制活性与杀菌活性,二者具有一定的相关性.

摘要： 葡糖胺合酶(GlmS)普遍存在于多种生物体和组织中,该酶是催化UDP-N-乙酰葡糖胺合成的关键酶,能够影响生物体内多种生物大分子的合成.实验室克隆、表达、提取并纯化GlmS,并建立了酶抑制剂的筛选方法以进行杀菌活性化合物GlmS酶抑制活性研究,初步结果表明,实验室以GlmS酶为靶标设计合成的多个化合物均有较好的酶抑制活性与杀菌活性,二者具有一定的相关性.

摘要： 葡糖胺合酶(GlmS)普遍存在于多种生物体和组织中,该酶是催化UDP-N-乙酰葡糖胺合成的关键酶,能够影响生物体内多种生物大分子的合成.实验室克隆、表达、提取并纯化GlmS,并建立了酶抑制剂的筛选方法以进行杀菌活性化合物GlmS酶抑制活性研究,初步结果表明,实验室以GlmS酶为靶标设计合成的多个化合物均有较好的酶抑制活性与杀菌活性,二者具有一定的相关性.

摘要： 本发明涉及废水处理领域，公开了一种微生物含量的测定方法，包括：(1)将含有活性炭和活性污泥的体积为L1的混合污泥进行预处理；(2)将预处理后的污泥进行高温处理；(3)将高温处理后的污泥进行泥水分离；(4)将泥水分离得到的污泥烘干至恒重，得到处理后污泥，重量记为W1，处理后污泥的浓度M1＝W1/L1；(5)另取体积为L2的混合污泥烘干至恒重，重量记为W2，混合污泥的浓度M2＝W2/L2；(6)计算混合污泥中微生物含量＝M2‑M1。还公开了一种活性炭‑活性污泥耦合工艺。本发明的微生物含量的测定方法简单、准确性高；本发明的活性炭‑活性污泥耦合工艺，减少了活性炭流失，提高了出水水质。

摘要： 一种饮用水生物活性炭处理工艺的脱氢酶活性测定预处理方法，由三种试剂组合成的混合溶液，通过控制加入比例、加入时间及操作条件，完成预处理，并由此选定测定过程并绘制标准曲线。优点：本技术从化学的角度出发，利用有机试剂对吸附的微生物进行萃取洗脱，脱附程度较高；通过有效的配比和振荡方式对以活性炭为载体的脱氢酶活性进行检测，并确定最佳的有机溶剂组合和配比达到最大的测定效果；为相似生物载体的活性检测提供了借鉴方法，适用于饮用水处理工艺中生物载体的生物活性检测。

摘要： 本发明提供在利用内毒素等来自生物的生理活性物质与LAL的反应来检测上述生理活性物质或测定其浓度时，可以获得更高的测定精度的技术。在判定来自生物的生理活性物质与LAL的鲎反应的起始时刻、由该反应起始时刻求出上述来自生物的生理活性物质的浓度时，为了消除与鲎反应的状态无关地发生的逐渐减少/升高的影响，检测来自测定样品与LAL的混合液的透射光或散射光的强度，对于透射率或凝胶粒子数，取得恒定时间的变化量(差异)，以该变化量(差异)超过阈值的时刻作为反应起始时刻。还可以不使取得上述差异时的时间间隔为恒定，将时间间隔用自测定开始的时间函数来定义，使其随时间变化，或预先准备时间间隔不同的多个系列。

摘要： 本发明公开了一种基于土壤酶活性测定的土壤生物学活性和生产力评价方法，选取土壤样品，提取并测定土壤样品中脲酶、磷酸酶、β‑葡萄苷酶、芳基硫酸酯酶和N‑乙酰‑β‑D‑氨基葡萄糖苷酶的活性；根据5种土壤酶的活性大小评价土壤样品中碳、氮、磷、硫的循环和迁移能力，进而评价土壤的生物学活性和生产力；确定了培养条件、底物种类及其浓度、土样贮存方式等对5种土壤酶活性测定的符合性。本发明选择了能够代表土壤中催化碳、氮、磷、硫等有机源营养元素循环的5种酶来评价土壤质量，提出相应酶活性快速、有效、准确、稳定的测定方法，使评价土壤质量时能依据统一的酶活性测定方法，实现实验数据的可比性，便于数据处理和比较，可进行推广应用。

摘要： 一种原位测定饮用水生物活性炭TTC‑脱氢酶活性的方法，涉及一种测定饮用水生物活性炭TTC‑脱氢酶活性的方法。本发明是为了解决目前间接测定饮用水生物活性炭TTC‑脱氢酶活性的方法中微生物活性在从活性炭滤料转移至溶液的过程中受损，导致在后续的测定中难以检测到其生物活性的技术问题。本发明：一、绘制TF标准曲线；二、样品处理；三、样品培养；四、样品培养；五、终止酶反应；六、比色分析；七、计算TTC‑脱氢酶活性。发明优点：本发明的更容易检测到活性炭的TTC‑脱氢酶活性，可以检测生物量为4.5×104CFU/g活性炭；本发明方法省略了对活性炭样品预处理的步骤，操作工序更为简便。

摘要： 本发明涉及废水处理领域，公开了一种微生物含量的测定方法，包括：(1)将含有活性炭和活性污泥的体积为L1的混合污泥进行预处理；(2)将预处理后的污泥进行高温处理；(3)将高温处理后的污泥进行泥水分离；(4)将泥水分离得到的污泥烘干至恒重，得到处理后污泥，重量记为W1，处理后污泥的浓度M1＝W1/L1；(5)另取体积为L2的混合污泥烘干至恒重，重量记为W2，混合污泥的浓度M2＝W2/L2；(6)计算混合污泥中微生物含量＝M2-M1。还公开了一种活性炭-活性污泥耦合工艺。本发明的微生物含量的测定方法简单、准确性高；本发明的活性炭-活性污泥耦合工艺，减少了活性炭流失，提高了出水水质。

摘要： 一种饮用水生物活性炭处理工艺的脱氢酶活性测定预处理方法，由三种试剂组合成的混合溶液，通过控制加入比例、加入时间及操作条件，完成预处理，并由此选定测定过程并绘制标准曲线。优点：本技术从化学的角度出发，利用有机试剂对吸附的微生物进行萃取洗脱，脱附程度较高；通过有效的配比和振荡方式对以活性炭为载体的脱氢酶活性进行检测，并确定最佳的有机溶剂组合和配比达到最大的测定效果；为相似生物载体的活性检测提供了借鉴方法，适用于饮用水处理工艺中生物载体的生物活性检测。

摘要： 本实用新型涉及水生产技术领域，公开了一种活性碳滤池生物量测定专用取碳器，其包括固定空心套管和活动空心套管，所述活动空心套管设于所述固定空心套管内，所述活动空心套管的外径与所述固定空心套管的内径相匹配，所述活动空心套管相对于所述固定空心套管可转动，所述活动空心套管设有多个独立空腔，每个所述独立空腔的管壁设有进碳窗口，所述进碳窗口分别与不同的活性炭层一一对应，所述固定空心套管的管壁设有与所述活动空心套管上的进碳窗口位置相对、大小和形状相同的通孔；本实用新型还公开了一种活性碳滤池。本实用新型能够简单轻松地提取活性碳滤池不同深度碳层的活性炭，为测定不同碳层的生物量提高了可靠性和准确性。

摘要： 本发明涉及一种微生物活性测定系统和微生物活性测定方法，系统包括：测定仪、反应罐、气泵、蠕动泵、氨氮测量仪、硝氮测量仪、溶解氧DO测量仪；测定仪和反应罐通过多套管道连接，所有管道的一端固定安装在测定仪上，另一端均位于反应罐内的液面以下；多套管道上分别安装气泵、蠕动泵、氨氮测量仪、硝氮测量仪、溶解氧DO测量仪；多套管道中的其中一套或两套为备用管道；安装气泵的管道的位于反应罐内的一端延伸至接近反应罐最底部；测定仪连接有系统控制柜。本发明能精确控制反应过程中溶解氧浓度；快捷测定有机物的生物可降解性；克服有机氮的降解对于硝化速率测定的影响；方便的测定活性污泥反硝化潜势；反应器温度可控而不受环境温度的影响。

摘要： 本实用新型为植物生理活性物质生物活性测定系统，解决已有装置操作效率低，筛选准确性差的问题。无土栽培装置包括贮液灌、供液管、回液管和栽培管道；每根栽培管道两端分别接入供液管和回液管，每两根栽培管道间供液管和回液管均设置阀门，阀门在药剂处理时关闭，所述喷雾装置设置于无土栽培装置顶部，所述挡板装置设置于栽培管道之间，按照试验设计重复需要几根栽培管道安装挡板，挡板用于隔离不同浓度药剂或不同剂型处理。本实用新型提供了一种智能型植物生理活性物质生物活性测定系统，可以批量处理同药剂不同浓度和不同剂型处理，从而解决了逐个药剂重复处理喷施不均和重复用药造成用药量不统一的问题，本系统能快速准确筛选植物生理活性物质的剂型及使用浓度范围。