玉米赤霉醇

摘要： 目的:评定QuEChERS-液相色谱-串联质谱法测定猪肝中玉米赤霉醇含量的不确定度。方法:参照不确定度评测数学模型和方法学评价指标,构建相关统计分析模型,获得真值结果的离散程度,分析该方法在生产实践中的优劣,并分析其在应用过程中影响不确定值的主要因素,最终确定猪肝中玉米赤霉醇含量的扩展不确定度。结果:当猪肝中α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇残留量分别为9.49μg/kg、9.21μg/kg时,其扩展不确定度分别为1.04μg/kg、0.96μg/kg (k=2)。结论:该方法测量误差较小,测量结果可信赖程度高。影响测量不确定度的主要来源是标准溶液的配制、标准曲线拟合和方法的添加回收,在实际检测应用中需加强控制。

摘要： 当前在玉米赤霉烯酮类的真菌毒素检测中,使用液相色谱和液相色谱-质谱的方法较多,本文则构建了一种针对食品中6种玉米赤霉烯酮类真菌毒素的免疫亲和净化-超高效液相色谱-串联质谱检测法,包括玉米赤霉酮、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉烯酮。本检测方法的前处理工序非常简便,利用免疫亲和柱进行净化及液标法进行定量,能够同时测定6种玉米赤霉烯酮类真菌毒素。除了谷物以外,本检测方法还能应用于肉、蛋、乳等食品的检测。

摘要： 仪器分析方法作为食品分析技术的一种,具有发展速度快、实用价值高及应用范围广泛等特点,表现出高灵敏度及高准确度多项优势,在食品安全检测技术中发挥出至关重要的作用,保障了食品安全性,保护人们生活健康.本文总结了当前玉米赤霉醇检测中仪器分析技术的研究新进展,为今后的研究提供参考.

摘要： [Objective]The research aimed to establish a rapid strip detection method for zeranol by immune gold colloid technology.[Meth-od]The hapten of zeranol was prepared via a synthetic organic method,and was conjugated with the carrier protein to obtain the antigen.Mon-oclonal antibody was obtained with the artificial immune method and its affinity was verified with the enzyme immunoassay.The colloid gold immunochromatographic strip was prepared with monoclonal antibody conjugated gold colloid which was stored in microwells,and a PVC liner which was assembled with nitrocellulose membrane sprayed with zeranol antigen and goat anti-mouse IgG,sample pad and absorbent pad.[Re-sult]The strip had a detection limit in the range of 0.5 -1.0 μg/kg with the advantages of fastness,easiness,etc.In addition,the strip did not cross-react with most of the pyrethroid pesticides tested.[Conclusion]With the strip,the accurate determination of the addition of zearalan in raw milk is achieved.This strip is expected to achieve fast screening of zearalenol residues in raw milk.%[目的]采用免疫胶体金技术,建立了一种快速检测玉米赤霉醇的试纸条方法.[方法]利用有机合成方法,研制了一种玉米赤霉醇半抗原,将其载体蛋白偶联得到免疫抗原,并通过人工免疫的方法获得单克隆抗体.通过酶联免疫法对制备的单克隆抗体的性能进行了验证.玉米赤霉醇层析试纸条是利用单克隆抗体标记胶体金,其原理是玉米赤霉醇抗原和羊抗鼠IgG分别喷到自制的膜(硝酸纤维)上,然后将样品垫、吸水垫分别放置在PVC板上,再制成试纸条.[结果]试纸条检测限可达0.5~1.0 μg/kg,具有速度快、简单等优点.此外,该试纸条与大部分的玉米赤霉醇没有明显的交叉反应.[结论]利用该试纸条可实现对生鲜乳中玉米赤霉醇添加试验的准确判定.该试纸条有望实现对生鲜乳中玉米赤霉醇残留的快速筛查.

摘要： 本文建立了饲料中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮和己烯雌酚的UPLC-MS/MS分析方法.饲料样品经正己烷-乙酸乙酯溶液(V/V=85:15)提取,离心后提取液氮气吹干,正己烷溶解后经-OH净化柱净化,用50％乙腈水溶液洗脱,UPLC-MS/MS分析.结果表明,3种目标化合物药物在10.0～50.0 μg/kg浓度范围内线性关系良好,r≥0.99.以玉米、DDGS、配合饲料、精料补充料等为添加基质,其回收率在61.7％～99.4％之间,检出限为10 μg/kg,定量限为20 μg/kg.说明本方法灵敏度高,专属性好,操作简单,结果可靠,可满足饲料中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮和己烯雌酚的分析检测.

摘要： 玉米赤霉醇是一种违法的畜禽增重剂,国家明确将其列入非食用物质.针对牛奶样品前处理方法进行优化,采用高效液相色谱-三重四级杆串联质谱联用仪(HPLC-MS/MS)法测定牛奶中两种玉米赤霉醇的含量.样品直接采用乙腈提取,Waters MAX固相萃取小柱净化,负离子模式下,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,以多反应监测(MRM)模式记录玉米赤霉醇的离子碎片响应进行定性定量分析.结果表明:采用优化后的提取方法、色谱条件及质谱条件,两种玉米赤霉醇的线性关系良好,线性范围为2.5 ng/mL~80.0 ng/mL,线性相关系数R2>0.999,α、β-玉米赤霉醇的平均回收率分别为108.5%和102.1%.该法简单、快捷,确证可靠,适用于牛奶基质样品中玉米赤霉醇类物质的检测.%Zeranol is one of the extender for livestock. It is included in the non edible substance list. A method for determination of zeranol in milk by HPLC-MS/MS was described. The samples were extracted with acetoni-trile, cleaned up with Waters MAX-SPE. After elution, the samples were analysed by MRM method in Negative mode. Acetonitrile-water was used as mobile phase and Ion fragment response was used to quantitative analysis. The linear range was 2.5 ng/mL-80.0 ng/mL, R2>0.999. Recoveries were 108.5%and 102.1%. The method is simple, rapid and reliable. It can be speculated that this method would be applied in the field of zeranol detec-tion in milk matrix.

摘要： 旨在合成玉米赤霉醇(ZER)人工抗原,并用其免疫小鼠以获得含高滴度ZER多克隆抗体的小鼠血清,为ZER单克隆抗体的制备奠定基础.改造ZER第16位上的羟基,合成半抗原ZER-16-羧丙基丁醚,然后分别采用混合酸酐法和碳二亚胺(EDC)法将改造后的半抗原与载体蛋白BSA或OVA偶联,制备免疫原ZER-BSA和包被原ZER-OVA,并采用凝胶电泳、动物免疫对人工抗原进行质量鉴定,间接ELISA测定抗血清效价,间接竞争(阻断)ELISA测定抗血清的敏感性和特异性.结果表明,用制备的免疫原免疫小鼠血清效价均已达到1∶104以上.6号鼠的血清敏感性最高,对ZER的半数抑制质量浓度(IC50)达15.77 ng/mL,获得的血清除与α-玉米赤霉醇特异性反应外,与其结构类似物β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、玉米赤霉烯酮分别有12.5％、100％、12.5％、25％、100％的交叉反应,与其他霉菌毒素交叉反应性均小于0.5％.表明试验成功获得ZER人工抗原,通过动物免疫制备敏感性好、特异性强的ZER多克隆抗体,为ZER单克隆抗体的制备及其免疫学检测方法的建立奠定基础.

摘要： 建立了牛乳中己烯雌酚、玉米赤霉醇和玉米赤霉酮的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)快速检测法.牛乳中的目标物经乙腈提取后,在上清液中加入一定比例的水,并调节pH值至11.0,再经MAX固相萃取柱净化、浓缩,超高效液相色谱-串联质谱仪测定,外标法定量.方法中己烯雌酚、玉米赤霉醇和玉米赤霉酮的回收率分别为72.3％ ～ 94.5％、72.8％～87.4％和88.9％～110.6％.该方法快速、准确,回收率高,可用于牛乳中己烯雌酚、玉米赤霉醇和玉米赤霉酮的快速检测.

摘要： 鱼体中玉米赤霉醇残留量的测定是分析判断水产品质量的重要技术.为了获得切实可行的鱼体中硝基苯残留量检测方法,本文通过试验优化了鱼体中玉米赤霉醇残留量测定的前处理方法、确定了仪器的使用条件.首先用氨基固相萃取柱提取,最后用UPLC/MS/MS液相色谱法检测.该方法在1.0μg/kg～20.0μg/kg的线性范围内,方法定量限为1.0μg.kg-1,回收率为70％～110％,相对标准偏差6.4％～14.2％.结果证明了该方法便于操作,所需时间短,特异性强,适用于鱼等生物体中玉米赤霉醇残留量的检测。

摘要： 目的：建立动物源性食品牛肉中玉米赤霉醇的残留分析方法。方法：采用叔丁基甲醚溶剂提取牛肉中玉米赤霉醇的残留，以乙腈-水（70：30）为流动相，流速0.8ml，进样量50μl，经高效液相色谱分离，以多反应监测（MRM）测定。结果：本方法在0.5-6.25ng/ml内线性良好（r=0.9998）；检出限0.2μg/kg； 方法回收率为80.45%，RSD 为3.21%。结论：本方法稳定、可靠、准确，可用于动物源性食品牛肉中玉米赤霉醇的残留分析方法。

摘要： 本实验建立了气相色谱-质谱法(GS/MS),可同时检测牛尿中三种玉米赤霉醇的方法,为监控可食动物产品的源头及上市提供准确有效的数据。

摘要： 玉米赤霉醇(ZER)是略带雌激素活性的合成激素,作为家蓄增重的外源激素,效果良好,但对家蓄和人体健康有影响.家蓄组织中ZER一般为10水平,确证方法采用气相色谱-质谱法和液相色谱-质谱法.近来液相色谱与质谱-质谱(LC-MS-MS)的联用得到了极大的重视和发展,本文采用LC-MS-MS方法确证鸡(兔)肝中玉米赤霉醇残留量,检测限为0.2ng/g,较文献方法灵敏.本法作为鸡(兔)肝中ZER确证方法,已在实际中得到应用.

摘要： 本发明涉及微生物领域，公开了一种复合酶和添加剂及它们的应用以及脱除玉米赤霉烯酮或α‑玉米赤霉烯醇的方法。具体地，本发明提供了一种复合酶，该复合酶含有内酯酶和漆酶，且所述内酯酶与所述漆酶的重量比为1：1‑10。本发明将内酯酶和漆酶组合使用，由此得到的复合酶能够高效且安全地脱除ZEN及其主要代谢产物α‑ZOL，特别是将其应用于粮油或饲料中时，不仅可以高效且安全地脱除其中的ZEN和α‑ZOL，还不会影响粮油或饲料的适口性，具有良好的工业应用前景。另外，在本发明的一种优选的实施方式中，复合酶还含有铜剂，例如，叶绿素铜钠盐和/或叶绿素铜钾盐，可以进一步提高ZEN及其主要代谢产物α‑ZOL的脱除率。

摘要： 本发明涉及一种玉米赤霉烯酮降解酶在水解玉米赤霉烯酮及其衍生物中的应用，所述玉米赤霉烯酮降解酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明的玉米赤霉烯酮降解酶的最适天然底物为玉米赤霉烯酮，在45°C、pH为8的条件下具有最高的酶活性，为70.42U/mg，同时具有在较宽pH条件下降解活性较高的特性，其在不同pH下的稳定性较好，还具有优良的热稳定性。

摘要： 本发明涉及玉米赤霉稀酮水解酶ZHD101突变体及利用该突变体水解玉米赤霉烯酮的方法。所述突变体是通过在野生型玉米赤霉稀酮水解酶ZHD101的三个关键位点处引入突变而得到。本发明中的ZHD101突变体与野生型ZHD101相比，在酸性条件(pH 5.5)下对ZEN水解的比活提高了至少75％；并且，与野生型ZHD101相比，在酸性条件(pH 5.5)下对ZEN水解的催化效率(kcat/KM)也可提高多达40％。由此，为进一步提高酶催化活性和实现酸性条件下的工业应用奠定了基础。

摘要： 本发明涉及微生物领域，公开了一种玉米赤霉烯酮降解酶及其基因和制备方法及应用以及降解玉米赤霉烯酮的方法。具体地，本发明提供了一种玉米赤霉烯酮降解酶，该玉米赤霉烯酮降解酶具有如下(a)和/或(b)所示的氨基酸序列：(a)SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列；(b)SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列中第1、2和4‑264位氨基酸残基中的一个或几个经过取代、缺失或添加后仍具有玉米赤霉烯酮降解酶活性的氨基酸序列。本发明提供的玉米赤霉烯酮降解酶可以高效且快速地降解ZEN，具有良好的工业应用前景。

摘要： 本发明涉及酰基辅酶A硫酯酶及其基因在降解玉米赤霉烯酮中的应用、降解玉米赤霉烯酮的制剂，属于真菌毒素生物降解技术领域。本发明中通过微生物转录组测序分析发现解淀粉芽孢杆菌H6菌株中YBGC/FADM家族的酰基辅酶A硫酯酶基因是降解玉米赤霉烯酮的关键基因，将该酰基辅酶A硫酯酶基因在大肠杆菌中进行表达，发现该蛋白为可溶性蛋白，纯化后获得重组蛋白，经玉米赤霉烯酮ELISA检测试剂盒检测发现该重组蛋白具有高效降解ZEN的生物学活性。因此酰基辅酶A硫酯酶及其编码基因能够用于降解玉米赤霉烯酮，酰基辅酶A硫酯酶能够用于制备降解玉米赤霉烯酮的酶制剂或复合酶制剂。

摘要： 本发明涉及微生物领域，公开了一种玉米赤霉烯酮降解酶及其基因和制备方法及应用以及降解玉米赤霉烯酮的方法。具体地，本发明提供了一种玉米赤霉烯酮降解酶，该玉米赤霉烯酮降解酶具有如下(a)和/或(b)所示的氨基酸序列：(a)SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列；(b)SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列中第1‑262和264位氨基酸残基中的一个或几个经过取代、缺失或添加后仍具有玉米赤霉烯酮降解酶活性的氨基酸序列。本发明提供的玉米赤霉烯酮降解酶可以高效且快速地降解ZEN，具有良好的工业应用前景。

摘要： 本发明涉及微生物领域，公开了一种复合酶和添加剂及它们的应用以及脱除玉米赤霉烯酮或α‑玉米赤霉烯醇的方法。具体地，本发明提供了一种复合酶，该复合酶含有内酯酶和漆酶，且所述内酯酶与所述漆酶的重量比为1：1‑10。本发明将内酯酶和漆酶组合使用，由此得到的复合酶能够高效且安全地脱除ZEN及其主要代谢产物α‑ZOL，特别是将其应用于粮油或饲料中时，不仅可以高效且安全地脱除其中的ZEN和α‑ZOL，还不会影响粮油或饲料的适口性，具有良好的工业应用前景。另外，在本发明的一种优选的实施方式中，复合酶还含有铜剂，例如，叶绿素铜钠盐和/或叶绿素铜钾盐，可以进一步提高ZEN及其主要代谢产物α‑ZOL的脱除率。

摘要： 关于检测不同基质中药中玉米赤霉烯酮毒素及其代谢物α-玉米赤霉烯醇毒素的方法，包括中药样品的提取，纯化及检测，所述的样品采用甲醇-水(80∶20，V/V)提取，pH7.0吐温-PBS缓冲溶液稀释，玻璃纤维膜过滤，免疫亲和柱净化。所述测定方法包括：高效液相色谱-荧光检测法，高效液相色谱-二极管阵列检测法测定，光谱及高效液相色谱-质谱联用法确证。液相色谱条件为：流动相比例乙腈∶水(50∶50，V/V)，荧光检测器波长：激发波长：270nm，发射波长：440nm；二极管整列检测器波长：236nm。液质条件：流动相A为水(含0.1％甲酸)，流动相B为乙腈(含0.1％甲酸)。流速为0.5mL/min，洗脱梯度为0.01min 10％B，0.6min 10％B，1.3min 95％B，2.5min 95％B，2.51min 10％B，4min 10B％，结束。质谱条件为采用ESI电离源，负离子扫描，MRM检测模式。本发明具有准确，精密，可靠等特点。

摘要： 本发明涉及玉米赤霉稀酮水解酶ZHD101突变体及利用该突变体水解玉米赤霉烯酮的方法。所述突变体是通过在野生型玉米赤霉稀酮水解酶ZHD101的三个关键位点处引入突变而得到。本发明中的ZHD101突变体与野生型ZHD101相比，在酸性条件(pH 5.5)下对ZEN水解的比活提高了至少75％；并且，与野生型ZHD101相比，在酸性条件(pH 5.5)下对ZEN水解的催化效率(kcat/KM)也可提高多达40％。由此，为进一步提高酶催化活性和实现酸性条件下的工业应用奠定了基础。

摘要： 本发明涉及酰基辅酶A硫酯酶及其基因在降解玉米赤霉烯酮中的应用、降解玉米赤霉烯酮的制剂，属于真菌毒素生物降解技术领域。本发明中通过微生物转录组测序分析发现解淀粉芽孢杆菌H6菌株中YBGC/FADM家族的酰基辅酶A硫酯酶基因是降解玉米赤霉烯酮的关键基因，将该酰基辅酶A硫酯酶基因在大肠杆菌中进行表达，发现该蛋白为可溶性蛋白，纯化后获得重组蛋白，经玉米赤霉烯酮ELISA检测试剂盒检测发现该重组蛋白具有高效降解ZEN的生物学活性。因此酰基辅酶A硫酯酶及其编码基因能够用于降解玉米赤霉烯酮，酰基辅酶A硫酯酶能够用于制备降解玉米赤霉烯酮的酶制剂或复合酶制剂。