牛血红蛋白

摘要： 为研究不同溶剂体系对咖啡酸与牛血红蛋白相互作用及其抗氧化性的影响。在水溶液、10%乙醇和10%二甲基亚砜体系中,通过紫外光谱、荧光光谱、同步荧光光谱、红外光谱和对DPPH自由基和ABTS+自由基清除能力的测定,研究咖啡酸和牛血红蛋白的相互作用及其对咖啡酸抗氧化性的影响。结果表明,在3种不同溶剂体系中,随咖啡酸浓度的增加,其对牛血红蛋白的荧光猝灭均逐渐增强,猝灭方式和相互作用均分别为静态猝灭和疏水作用,结合位点更靠近Trp残基,牛血红蛋白空间构象更加伸展。在10%乙醇和10%二甲基亚砜体系中,牛血红蛋白的酰胺I带和酰胺II带发生明显红移且二级结构由α-螺旋逐渐向β-折叠转变。牛血红蛋白-咖啡酸复合物显著降低了咖啡酸对DPPH自由基的清除率,但对ABTS+自由基的清除率无明显影响。在3种不同溶剂体系中,咖啡酸均可使牛血红蛋白空间构象发生改变,同时牛血红蛋白也会不同程度地影响咖啡酸的抗氧化性。

摘要： 【目的】试验旨在获得分子质量小、溶血性低、稳定性好的抗菌肽。【方法】以牛血红蛋白β亚基的氨基酸序列为基础,以抗菌肽的构效理论为指导,筛选出1条多肽(YKK-18),并以其为模板肽设计了3条长度为18个氨基酸残基的改造多肽(LJ-1、LJ-2和DLK-3),通过最小抑菌浓度的测定反映4条多肽的抗菌活性,采用琼脂糖扩散法分析有抗菌活性多肽的热稳定性、酸碱稳定性、盐离子稳定性和反复冻融稳定性,用分光光度法测定有抗菌活性多肽的溶血性。【结果】设计的4条多肽均为带正电荷的亲水性多肽,与APD3数据库中收录的抗菌肽氨基酸序列相似性均低于50%,二级结构中均有较高含量的α-螺旋,改造多肽的两亲性程度均高于模板肽,模板肽对测试菌株没有抗菌活性,而改造多肽对测试的大肠杆菌、沙门菌、绿脓假单胞菌、葡萄球菌、白色念珠菌等均有不同程度的抗菌活性,其中DLK-3和LJ-1的抗菌活性优于LJ-2,但对奇异变形杆菌均没有抗菌活性,在100°C高温、pH 4.0~10.0、生理浓度的盐离子(Na~+、K~+、Ca、Mg、Fe、Cu)和14次反复冻融等条件下仍有较好的抗菌活性,DLK-3的溶血作用呈剂量依赖性,在200μg/mL时的溶血率已超过50%,而LJ-1和LJ-2的溶血率在高浓度(200μg/mL)时仍低于5%。【结论】本研究结果为抗菌肽的分子设计和改造提供了参考,获得的抗菌肽LJ-1和LJ-2具有成为抗生素替代物的潜力。

摘要： 以pH值=10.1 NH_(4)Cl-NH_(3)·H_(2)O为缓冲溶液,牛血红蛋白催化L-酪氨酸和H_(2)O_(2)反应产生荧光,而没食子酸丙酯对体系的荧光有猝灭作用,据此建立一种测定微量没食子酸丙酯的新方法。在优化的实验条件下,没食子酸丙酯含量在0.00417~0.117 mg/L范围内与体系406 nm处的荧光强度降低值呈良好的线性关系,其线性回归方程为ΔF=10781ρ+270.67(ρ的单位为mg/L),相关系数(R)为0.9949,检出限为5.4×10^(-4)mg/L。该方法用于测定食用油中没食子酸丙酯的含量,测定结果的RSD为2.5%~3.1%,回收率为99.3%~105.2%。

摘要： 为了探究溴化1-丁基-3-甲基咪唑([C 4mim]Br)离子液体形成双水相及萃取生物活性物质的能力,采用[C 4mim]Br离子液体浓溶液与Na_(2)CO_(3)溶液形成双水相,并进行了牛血红蛋白的萃取试验。结果表明:[C 4mim]Br离子液体可与Na_(2)CO_(3)形成双水相。[C 4mim]Br溶液(91.87%)与Na_(2)CO_(3)溶液(0.208 g·mL^(-1))以体积比1∶5形成的双水相,分相后离子液体相(上相)体积变为原体积的2.30倍,相界面清晰,分相速度快。采用浊度滴定法测定了该双水相体系双节线,其拟合方程为:ω1=-0.2036 ln(ω2+0.0064)-0.2742,σ2=0.0038。在静态条件下利用该双水相体系萃取牛血红蛋白,采用光纤光谱仪连续测定离子液体相中血红蛋白的吸光度,吸光度值在8 min内达到稳定。分析了该体系快速萃取牛血红蛋白的机理,紫外-可见吸收光谱及圆二色光谱(CD)分析结果表明萃取前后血红蛋白的二级结构未发生改变。浓度在0.010~0.200 mg·mL^(-1)之间时,该双水相体系对牛血红蛋白萃取率在93.40%~99.62%之间。建立了用该双水相体系萃取并检测牛血中血红蛋白的方法并测定了新鲜抗凝牛血中血红蛋白的含量,双水相上相中血红蛋白吸光度的线性方程为:A=1.814 c+0.024,n=7,R^(2)=0.9959,线性范围为0.010~0.450 mg·mL^(-1)。三份新鲜抗凝牛血中血红蛋白含量在102.0~118.6 mg·mL^(-1)之间,回收率在99.4%~105.0%,该离子液体双水相体系适用于新鲜抗凝牛血中血红蛋白含量的测定。

摘要： 目的:本研究将水溶性柱[5]芳烃(WP5)修饰在金纳米粒子(Au nanoparticles, AuNPs)表面,作为复合材料修饰玻碳电极(GCE),建立了一种检测牛血红蛋白的光电化学传感方法。利用Au NPs在可见光照下的局域表面等离子共振效应,WP5与多巴胺(DA)的主客体络合作用,及这二者的协同作用,检测溶液中的多巴胺。由于多巴胺与牛血红蛋白(BHb)的吸附作用,向DA中依次滴加不同浓度的牛血红蛋白。随着牛血红蛋白的加入,多巴胺产生的电信号会减弱,从而达到对牛血红蛋白的间接性检测。结果表明,在牛血红蛋白的浓度为10−11~10−4 mg/mL浓度范围内,阳极峰电流密度与牛血红蛋白的浓度呈较好的线性关系,检出限为5.2 ×10−12 mg/mL (S/N = 3)。

摘要： 在dH2O、10％ DMSO和10％ EtOH溶剂体系中,利用紫外光谱、荧光光谱、同步荧光光谱和红外光谱法及对DPPH和ABTS自由基清除法,研究牛血红蛋白与根皮苷的相互作用及对根皮苷抗氧化性的影响.结果 表明:在3种不同溶剂体系中,随根皮苷浓度的不断增加,其对牛血红蛋白的荧光猝灭均逐渐增强,猝灭机理均为静态猝灭和非辐射能量转移,相互作用力以范德华力和氢键为主,根皮苷与牛血红蛋白的结合位点更接近Trp残基.在dH2O体系中,酰胺Ⅰ带和Ⅱ带发生轻微红移.除10％ EtOH-DPPH体系外,根皮苷-牛血红蛋白均增加了根皮苷对DPPH和ABTS自由基的清除率.该研究表明,溶剂极性可不同程度影响根皮苷与牛血红蛋白的相互作用和抗氧化性.

摘要： 过渡金属离子在生理条件下会影响血红蛋白的功能,可利用光谱法对其作用机理进行研究.通过紫外可见光谱法研究了过渡金属离子对牛血红蛋白中亚铁离子的影响;通过荧光光谱法研究了过渡金属离子与牛血红蛋白之间的荧光猝灭类型和相互作用力.结果表明:过渡金属离子可部分置换血红蛋白中的亚铁离子,形成血红蛋白衍生物,衍生物的稳定性与过渡金属离子中d轨道上的电子数目(d电子数)有关;过渡金属离子通过静态猝灭显著降低牛血红蛋白的荧光强度,二者通过静电作用力形成稳定不发荧光的基态复合物;过渡金属离子通过增强牛血红蛋白中色氨酸残基的疏水性改变蛋白质构象.因此,过渡金属离子可在一定程度上影响血红蛋白的结构.

摘要： 本文应用荧光光谱法、紫外光谱法、圆二色谱技术研究水溶性核壳量子点与牛血红蛋白的相互作用，确定荧光碎灭机理，计算出二者相结合的结合常数，推断二者相互作用的主要作用力，探讨了水溶性核壳量子点对牛血红蛋白构象的影响。rn 牛血红蛋白中因含有色氨酸，酪氨酸等氨基酸残基而具有内源荧光，核壳量子点的荧光发射波长与其发射波长无干扰，当核壳量子点与其相互作用后，牛血红蛋白内源荧光有碎灭现象。研究表明:量子点与牛血红的结合常数在104数量级，说明核壳量子点与牛血红有较强的结合，结合作用力主要为疏水作用力。rn通过考察酸度及温度对相互作用的影响发现，在pH为7.40时，二者更易结合;升高温度，有利于二者的结合;而同步荧光光谱，紫外吸收光谱，CD光谱数据均表明量子点对牛血红的二级结构有一定的影响。

摘要： 近年来,陆续有蛋白质测定方法的报道,这些方法在临床医学、食品检测和生命科学研究中具有一定的应用价值.本文采用反相流动注射方法,研究了碱性介质中次氯酸钠氧化荧光素-牛血红蛋白标记物的化学发光行为、反应条件和阳离子表面活性剂的增敏作用.通过条件选择及优化,提出了反相流动注射化学发光测定牛血红蛋白的新方法.

摘要： 纳米颗粒与环境生物体中的生物大分子与进行着复杂的化学、物理和生物反应, 使其结构、形态和毒性发生变化,世界卫生组织呼吁要优先研究超细微的颗粒物尤其是纳米尺度颗粒物的生物机制11。Science 和Nature等报道了植物中铝的致毒机制[2], 由于铝对生物代谢的潜在的危害,有必要从分子水平上系统研究纳米形态铝与生物大分子的作用机制及影响.

摘要： 多组分蛋白质在离子交换色谱介质上的吸附是设计和开发高效蛋白质色谱技术的基础.本文选取牛血清白蛋白(BSA)和牛血红蛋白(bHb)为模型蛋白,研究了双组分蛋白在Q Sepharose FF介质上的吸附行为,考察了pH值、离子强度、蛋白质初始浓度质量比以及吸附次序对吸附平衡的影响.研究结果显示,双组分吸附中BSA 占据优势地位,其吸附量要高于bHb.这主要归结于BSA的平衡常数KBSA 要显著大于KbHb.主要参数来自单组分吸附数据的SMA模型能够较好地预测BSA和bHb 双组分体系中吸附作用较强的BSA的吸附行为.此外,初始蛋白溶液中特定蛋白含量的提高可增加蛋白质与色谱介质作用的机率,从而增大其在色谱介质上吸附的可能性.来自此次序吸附的实验结果表明,BSA的最终吸附量与双组分蛋白同时吸附条件下的结果是一致的;而Hb在次序吸附中的吸附量相较于同时吸附情况则有所增强.

摘要： 本文以硅胶为载体.在其表面同时衍生氨基和双键,然后引入醛基与蛋白质形成亚胺键将蛋白质共价固定在硅胶表面,以丙烯酰胺为功能单体,N,N'-亚甲基双丙烯酰胺为交联剂,在硅胶表面合成聚合物,对印迹聚合物进行了表征,并考察了印迹聚合物对模板分子的吸附特性和识别选择性。

摘要： 本文运用紫外-可见吸收光谱(UV-vis)、荧光光谱、同步荧光光谱、圆二色光谱(CD)、傅立叶变换红外光谱(FT-IR)及拉曼光谱等手段，研究牛血红蛋白(Bovine Hemoglobin，简称BHb)、马心细胞色素C(Cytochrome C,Cyt-C)与纳米雄黄的相互作用。

摘要： 描述蛋白质静电作用吸附平衡的统计热力学（ST）模型，是在液体胞腔理论基础上考虑了吸附相中蛋白质分子间作用推导出的。通过静态吸附实验确定了不同离子强度和pH 值条件下SP Sepharose FF 分别吸附牛血红蛋白（Hb）和牛血清白蛋白（BSA）的吸附平衡数据，ST 模型可以对单组分蛋白质吸附平衡进行很好的描述，模型参数随pH 值和离子强度有规律地变化。研究了蛋白质竞争吸附条件下溶液主体蛋白质浓度和组成对双组分蛋白质吸附平衡的影响，ST 模型可以对双组分蛋白质吸附平衡进行较好的描述。

摘要： 本文研究了固相介质辅助聚乙二醇（PEG5000）修饰牛血红蛋白，制备单PEG 修饰的血红蛋白。以离子交换介质为固相辅助牛血红蛋白的PEG 修饰得到修饰率为75﹪的单聚乙二醇修饰的牛血红蛋白（Hb）。Hb 的PEG 修饰反应和产物分离在介质上一步进行，单PEG 修饰Hb 的收率可由在溶液中直接反应的30％左右提高到75％。最终产品经凝胶过滤液相色谱与多角度激光散射仪联用检测为单修饰的均一产物，SDS-PAGE 电泳显示为单带,修饰的血红蛋白活性基本保持。

摘要： 本文研究了牛血红蛋白与人血清白蛋白偶联(Hb-HSA)制备新型血液代用品,并将偶联物通过动物试验考察其安全性和有效性.采用反应活性高的戊二醛在偏酸性条件下进行偶联反应,经一步离子交换层析纯化,采用多角度激光散射检测器(MALLS)与凝胶过滤高效液相色谱(SE-HPLC)联用鉴定产物组成,结果表明，Hb-HSA偶联物表现出良好的安全性和有效性,可开发为颇有前景的新型血液代用品.

摘要： 本申请涉及生化检测技术领域，具体提供一种糖化血红蛋白抗体复合物，其包含高分子载体和至少两个糖化血红蛋白抗体，该至少两个糖化血红蛋白抗体分别与该高分子载体偶联。本发明申请还提供一种糖化血红蛋白检测试剂盒，包含试剂一和试剂二，试剂一包含胶乳微球，试剂二包含该糖化血红蛋白抗体复合物。本发明的糖化血红蛋白抗体复合物在一个高分子载体上负载至少两个糖化血红蛋白抗体，检测时所形成的“胶乳微球‑糖化血红蛋白‑糖化血红蛋白抗体复合物”颗粒迅速增大，能够提高检测的灵敏度，测定结果媲美作为糖化血红蛋白检测“金标准”的HPLC法，并且能避免现有的糖化血红蛋白检测试剂盒试剂不稳定或者操作繁琐的问题。

摘要： 本发明目的在于提供一种通过液相色谱法可以在短时间内重现性良好地测定稳定型血红蛋白A1c的方法。本发明的测定方法中，将用含有1～50重量%硅油的溶液或含有1～50重量%硅树脂的溶液处理过表面的过滤器设置在液相色谱仪的流路中，将该液相色谱仪的测定体系中产生的压力值设定为9.8×10

摘要： 公开了用于测量糖化血红蛋白的离心微流结构、用于测量糖化血红蛋白的离心微流装置和用于测量糖化血红蛋白的方法。根据该公开，仅使用单个装置同时进行免疫吸附测定和亲和测量，以检测血红蛋白变异体或干扰物质，因此，将检测结果应用于测量结果的分析，以消除和/或补偿或者校准糖化血红蛋白测量中的差错，从而更准确地测量糖化血红蛋白。

摘要： 本发明提供一种血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白联检试剂盒，包括上下卡壳、免疫试纸条、检测试纸等，含有血红蛋白单抗、血红蛋白-结合珠蛋白复合物单抗和转铁蛋白单抗的金标复合物划在硝酸纤维素膜上，硝酸纤维素膜上平行设置有3条检测线、质控线(15)以及金标复合物划膜线(8)。本发明还提供了血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白联检试剂盒的制备方法和检测方法。本发明操作方便简单，性能稳定，结果准确，在临床上对直肠癌或结肠癌等下消化道出血症状的肿瘤早期诊断和鉴别有较好的参考价值，对消化道出血性疾病的阳性检出率有显著提高。适合临床医检和家庭自检，同时为此类疾病的大规模普查提供一种手段。

摘要： 本发明的使血红蛋白‑触珠蛋白复合物稳定的方法包括将血红蛋白‑触珠蛋白复合物在血红蛋白分解物存在下保存的步骤。根据该方法，能够使血红蛋白‑触珠蛋白复合物稳定。

摘要： 本发明涉及免疫诊断技术领域，针对现有技术的消化道中血红蛋白易被胃蛋白酶破坏导致检测结果不准确的问题，公开了快速诊断血红蛋白、结合珠蛋白‑血红蛋白复合物的胶体金免疫层析检测试纸及制备方法，具体包括以下步骤：1）制备第一检测线T和第一质控线C；2）制备第二检测线T和第二质控线C；3）金标垫的制备；4）制备检测试纸：将吸水垫、样品垫、微球探针处理垫、包被好抗体的改性硝酸纤维素膜及PVC底板按顺序进行连接组装，即得成品。本发明采用血红蛋白+血红蛋白结合珠蛋白复合物联合检测，提高了包括上消化道出血在内的隐血检测的灵敏度，操作简便、快速，结果显示直观、准确，灵敏度高、特异性好，制备工艺简单。

摘要： 本发明提供一种测量血红蛋白类氧载体中血红蛋白含量的方法，包括以下步骤：(1)配制多个已知浓度的血红蛋白标准工作溶液并测量其吸光度，建立吸光度与浓度的标准工作曲线或标准工作曲线方程，其中，所述血红蛋白标准工作溶液包含酸性物质；(2)配制待测样品溶液并测量其吸光度，其中所述待测样品溶液包含酸性物质；(3)根据步骤(2)获得的待测样品溶液的吸光度和步骤(1)得到的标准工作曲线或标准工作曲线方程，得到待测样品中血红蛋白的含量。本发明的方法测量结果准确、操作简单、对环境友好、对设备要求低。

摘要： 本实用新型提供一种血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白联检试剂盒，包括上下卡壳、免疫试纸条、检测试纸等，含有血红蛋白单抗、血红蛋白-结合珠蛋白复合物单抗和转铁蛋白单抗的金标复合物划在硝酸纤维素膜上，硝酸纤维素膜上平行设置有3条检测线、质控线(15)以及金标复合物划膜线。该联检试剂盒操作方便简单，性能稳定，结果准确，在临床上对直肠癌或结肠癌等下消化道出血症状的肿瘤早期诊断和鉴别有较好的参考价值，对消化道出血性疾病的阳性检出率有显著提高。适合临床医检和家庭自检，同时为此类疾病的大规模普查提供一种手段。

摘要： 本发明公开了一种牛血红蛋白的纯化方法、牛血红蛋白及其应用。该纯化方法包括对牛红细胞依次进行的溶血、微滤、阴离子层析、超滤等步骤。本发明的纯化方法未对牛血红蛋白的结构与功能造成破坏，因此对其携氧/释氧能力基本无影响。该方法纯化得到的牛血红蛋白携氧/释氧能力稳定、氧化程度低，应用于HBOCs的制备中有利于获得品质稳定、安全有效的HBOCs产品。

摘要： 本发明公开了一种以牛血红蛋白为原料制备血红蛋白多肽的方法，其特征在于主要包括如下步骤：a、原料准备：选取600g的血红蛋白粗制品，加水稀释到浓度为5％～6％；b、一次酶解：加入100～150g的风味蛋白酶，pH＝6.5～7.5，温度50～55°C环境下，水解4.5～5.5h；c、降温：一次酶解后，将温度将为至43～46°C，pH调节至8.5～9.5；d、二次酶解：加入60～70g的碱性蛋白酶，酶解4.5～5.5h；e：高温灭酶：水浴灭酶10～20分钟；f、离心：弃去沉淀，得到上清液，并冷冻干燥得到血红蛋白多肽。与现有技术相比，本发明具有生产工艺简单，制备出的多肽产品具有富含血红素、苦味值较低等特点。