清道夫受体

摘要： 【目的】研究尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)胶原样结构巨噬细胞受体(macrophage receptor with collagenous structure,Marco)的结构特征和免疫功能,为揭示尼罗罗非鱼免疫应答机制提供理论基础。【方法】采用聚合酶链式反应从尼罗罗非鱼脾脏克隆marco基因序列,利用生物信息学和亚细胞定位等手段分析其结构特征,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测其表达情况。【结果】尼罗罗非鱼marco基因(Onmarco)的开放阅读框(open reading frame,ORF)长1071 bp,共编码356个氨基酸,具有跨膜结构域、典型的胶原样结构域和C端富半胱氨酸受体(scavenger receptor cystein-rich,SRCR)结构域;多序列比对和系统进化分析表明,Marco在硬骨鱼类中具有较高的保守性;亚细胞定位显示,尼罗罗非鱼Marco(OnMarco)在HEK-293T细胞中为全细胞分布,主要在细胞膜上表达;qRT-PCR结果显示,Onmarco在健康尼罗罗非鱼各组织中均有表达,但在血液中的表达量最高;经灭活的无乳链球菌和聚肌胞苷酸(Poly I:C)刺激后,Onmarco在罗非鱼肠道、头肾和脾脏中的表达量均呈时序性变化;用脂多糖(LPS)、Poly I:C和灭活后的无乳链球菌刺激罗非鱼头肾白细胞,Onmarco表达量均显著升高。【结论】Onmarco基因可能在鱼体抵御细菌和病毒入侵的免疫反应中发挥重要作用。

摘要： 为了分析绵羊清道夫受体MARCO基因的启动子序列特点,初步研究其功能及转录调控机理,以绵羊肺组织DNA为模板,通过PCR扩增绵羊MARCO基因启动子序列,对其序列进行生物信息学分析,并构建双荧光素酶报告基因载体。结果显示,成功克隆绵羊MARCO基因启动子,大小为1002 bp;预测了其核心活性区域,发现有1个潜在的活性区域位于5′端-790~-741,同时发现了1个TATA-box元件和多个转录因子结合位点,未发现CpG岛。结果表明,位于绵羊MARCO基因启动子区域的TATA-box元件和Sp1、NF-1、NF-κB、C/EBPalp、c-Jun等转录因子,可能影响绵羊MARCO基因启动子的激活,为后续研究MARCO基因的转录调控机理提供了参考依据。

摘要： 目的 探讨清道夫受体CD36基因缺陷对正常高值血压患者血压昼夜节律及代谢性指标的影响.方法 纳入200例初诊正常高值血压患者,通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)筛选CD36基因缺陷者31例作为观察组,CD36基因正常者169例作为对照组.比较两组患者24小时动态血压及代谢性指标,分析CD36基因缺陷与血压昼夜节律及代谢性指标的相关性.结果 观察组24 h平均动脉压(24h MAP)、非杓型血压患者比例及甘油三酯(TG)水平、BMI、胰岛素抵抗指数均高于对照组(P<0.05).Logistic多元逐步回归分析结果显示,CD36基因缺陷与正常高值血压患者动态血压节律改变、24h MAP升高、肥胖、高TG血症、胰岛素抵抗具有相关性(P<0.05).结论 清道夫受体CD36基因缺陷可能对正常高值血压患者的血压昼夜节律及部分代谢性指标产生影响,有必要对CD36基因缺陷的正常高值血压患者进行有效的干预措施.

摘要： 目的:从巨噬细胞泡沫化角度探讨温胆汤抗动脉粥样硬化的作用机制.方法:采用MTT法确定温胆汤的无毒性干预浓度;药物干预后,采用油红O染色法检测泡沫细胞的形成;采用酶法检测细胞内胆固醇水平及细胞胆固醇流出;采用Western blot检测巨噬细胞膜蛋白CD36、A类清道夫受体(SR-A)及ATP结合盒转运体A1(ABCA1)和B类I型清道夫受体(SR-BI)的蛋白表达水平.结果:温胆汤冻干粉溶液对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激的THP-1细胞源性巨噬细胞的无毒性干预浓度为0～6 g/L,于是设置温胆汤干预浓度梯度为1.5、3和6 g/L进行后续实验.各浓度温胆汤干预可抑制ox-LDL诱导的泡沫细胞形成,半定量分析显示温胆汤浓度依赖性降低细胞内脂质沉积(P<0.05或P<0.01).温胆汤浓度依赖性降低细胞内总胆固醇、胆固醇酯和胆固醇酯化率(P<0.05或P<0.01),促进细胞胆固醇流出(P<0.01),减少CD36表达(P<0.01).6 g/L温胆汤显著减少SR-A的表达(P<0.05);3和6 g/L温胆汤显著促进ABCA1和SR-BI的表达(P<0.05或P<0.01).结论:温胆汤显著抑制巨噬细胞泡沫化,相关机制可能是通过抑制巨噬细胞膜蛋白CD36和SR-A表达而减少巨噬细胞对胆固醇的内化吞噬,同时上调巨噬细胞膜蛋白ABCA1和SR-BI表达,从而促进巨噬细胞内胆固醇流出.

摘要： 20世纪70年代末,Goldstein等[1]首先报道了巨噬细胞上存在乙酰化低密度脂蛋白(acetylated low density lipoprotein,AcLDL)的结合部位,可以介导AcLDL的摄取和降解,之后又发现能特异性结合并摄取氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,oxLDL),故将这个可以结合多种化学修饰脂蛋白的糖蛋白受体命名为清道夫受体(scavenger receptor,SR)。1983年Brown等[2]发现SR可以无限制地摄取oxLDL或AcLDL,造成胆固醇在细胞内大量堆积,最终形成泡沫细胞,导致动脉粥样硬化形成。

摘要： [目的]探究锌离子在动脉粥样硬化巨噬细胞泡沫化及斑块形成过程中的影响及其机制.[方法]用氧化低密度脂蛋白(oxLDL)刺激THP-1细胞建立巨噬细胞泡沫化模型,用油红0染色法检测在0、30和60μmol/L锌浓度环境下泡沫化程度,用荧光标记法检测巨噬细胞对脂质的吞噬情况,用免疫印迹法检测相关清道夫蛋白CD36、SR-A蛋白的表达,用实时荧光定量PCR检测锌离子转运体的mRNA相对表达量.用ApoE-/-小鼠随机分4组:正常饲料组(Chow group)、高脂缺锌组(HFD-ZnD)、高脂正常锌组(HFD)、高脂高锌组(HFD-ZnS).直至第13周检测小鼠血脂、主动脉斑块及主动脉蛋白表达情况.[结果]缺锌组与正常锌组相比,加oxLDL刺激后巨噬细胞油红O密度显著增加(P＜0.05);补充锌离子可减缓巨噬细胞对DiI-oxLDL的摄取(P＜0.01);泡沫细胞SR-A、CD36蛋白表达增加(P＜0.05),15μmol/L的Zn2+处理后与oxLDL组相比,细胞SR-A、CD36蛋白的含量减少(P＜0.05).oxLDL处理组与对照组相比,锌调控-铁调控相关蛋白基因(ZIP)中,ZIP10、ZIP12、ZIP14的mRNA表达量升高(P＜0.05),ZIP4、ZIP7、ZIP8的mRNA表达量降低(P＜0.05);而锌转运蛋白(ZnT)基因中,ZnT4的mRNA表达量上调(P＜ 0.01),ZnT1的mRNA表达量下调至(P＜0.05).与Chow组对比,HFD组和HFD-ZnD组小鼠低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)分别升高(P＜0.05);HFD-ZnD组的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著升高.且HFD-ZnS组较HFD-ZnD组小鼠的LDL-C显著降低(P＜0.05).HFD组和HFD-ZnD组较Chow组小鼠主动脉SR-A表达有升高,HFD-ZnS可显著抑制此升高(P＜0.05).HFD-ZnD组与Chow组相比主动脉内壁斑块面积占总动脉管腔面积的比率显著升高(P＜0.01),HFD-ZnS可显著抑制此升高(P＜0.01).[结论]缺锌加重了巨噬细胞脂质沉积,其机制可能是通过上调清道夫受体SR-A、CD36进行调控.锌离子转运体参与巨噬细胞泡沫化及动脉斑块的形成,缺锌可以增加LDL-C、促进高脂饮食诱导的动脉斑块的增加.

摘要： 目的：探讨TRAIL对巨噬细胞的脂质吞噬功能的影响.方法：体外培养小鼠(RAW264.7)和人(THP-1)的巨噬细胞系.基因表达用real-time PCR和westernblot检测.脂质吞噬用DiI标记的乙酰化LDL荧光检测.泡沫细胞形成用氧化LDL和Oil red O染色检测.结果:发现TRAIL能够剂量和时间依赖性地增加清道夫受体SR-AI和SR-BI的表达，而CD36和lectin-like low-density lipoprotein receptor-1(LOX-1)的表达没有显著变化。TRAIL的作用在long/ml时达到最高，在100ng/ml时作用反而减弱。TRAIL的作用依赖其受体DR5o TRAIL同时增加巨噬细胞对乙酞化或氧化低密度脂蛋白的摄取，形成泡沫细胞。这种作用可被SR-AI的抑制剂Poly或siRNA所阻断，而SR-BI的特异性抑制剂BLT-1没有明显作用。TRAIL处理巨噬细胞后激酶ERK1/2, p38和JNK都被激活，而只有p38的抑制剂SB202190阻断了TRAIL对SR-AI的上调作用。同时发现在高浓度时TRAIL引起巨噬细胞的凋亡。在内质网应激状态下，转录调节蛋白CHOP通过上调DR5的表达增加巨噬细胞对TRAIL的敏感性。结论:结果证实TRAIL可以通过调节巨噬细胞表面清道夫受体的表达促进泡沫细胞形成，提示在一定浓度条件下TRAIL可能有促动脉硬化斑块形成的作用。

摘要： 目的：为研究清道夫受体在树突状细胞提呈口蹄疫病毒VP1-VP4融合蛋白中的作用。方法：构建了pET32a-VP1-VP4原核表达载体,获得重组蛋白VP1-VP4.制备骨髓源树突状细胞(BMDC)和淋巴结T细胞,首先通过清道夫受体抑制剂poly(I)处理BMDCs,然后将VP1-VP4融合蛋白质负载处理后的BMDCs,再与淋巴结T细胞共培养,收集不同时间点共培养上清液,ELISA检测其中IFN-γ含量.结果：经poly(I)处理的实验组在每个时间点产生的IFN-γ含量均明显高于对照组,且差异极显著(P＜0.01)。结论：清道夫受体在树突状细胞提呈口蹄疫病毒VP1-VP4融合蛋白抗原的过程中发挥负调节作用.

摘要： 目的：研究清道夫受体在树突状细胞提呈口蹄疫病毒抗原中的作用。方法：构建pET-32a-VP1-VP4原核表达载体，经IPTG诱导表达并纯化重组蛋白VP1-VP4。制备骨髓源树突状细胞(BMDC)和淋巴结T细胞，通过蛋白酶体抑制剂、溶酶体抑制剂和清道夫受体抑制剂以不同组合处理骨髓源树突状细胞(BMDCs)然后将VP1-VP4融合蛋白质负载处理后的BMDCs，与淋巴结T细胞共培养，以单独的BMDCs组和T细胞组为对照，收集不同时间点共培养上清液，ELISA检测其中IFN-γ含量。结果：本实验成功构建了pET-32a-VP1-VP4原核表达载体，并获得了VP1-VP4融合蛋白质。经poly(1)处理的试验组S4组除24h和经乳胞素和poly(1)共同处理的试验组S1组无统计学差异(P>0．05)之外，在每个时间点产生的IFN-γ，含量均明显高于其他各组，且差异极显著(P<0．01);S1组在每个时间点产生的IFN-γ含量均高于经乳胞素和氯喹及poly(1)处理的试验组S3组、经氯喹和poly(1)处理的试验组S2组、BMDCs组及T组，且差异极显著(P<0．01)。结论：清道夫受体在BMDCs提呈VP1-VP4抗原进而活化淋巴结T细胞过程中发挥负调节作用。

摘要： 清道夫受体(SR)是一类结构多样的糖蛋白受体,分布于巨噬细胞、血管平滑肌细胞和内皮细胞等细胞上,具有广泛的配体谱和功能,在动脉粥样硬化(As)形成过程中起重要作用。在SR的几大类型中,A型(SR-AⅠ,SR-AⅡ)和B型(SR-BⅠ,CD36)与As密切相关。SR-A和CD36是吞噬变性低密度脂蛋白,形成泡沫细胞致As的主要受体;SR-BⅠ作为高密度脂蛋白(HDL)受体,介导HDL胆固醇的选择性摄取,参与胆固醇酯的逆转运过程,是重要的抗As的受体。他汀类药与非诺贝特、普罗布考、脂联素等通过影响不同的SR发挥调脂、抗As作用。转基因技术的研究值得关注。实验研究表明,粉防已碱、川芎嗪、丹参酮、壳聚糖、甲基莲心碱、漏芦、葛根素、老山云芝多糖等单味药或有效部位、成分,凉膈散、复方积雪草(制大黄,桃仁,积雪草)、加减下瘀血汤(下瘀血汤去蛰虫加当归、黄芪、积雪草)、王氏连朴饮(川连、厚朴、石菖蒲、法夏、淡豆豉、山栀)、加味连朴饮(王氏连朴饮加丹参、赤芍)及冠心康等中药复方对不同的SR有一定的干预作用,部分说明其调脂、抗As等作用机理。深入研究不同的SR的结构、功能、调节,特别是细胞内信号转导,以及SR的基因调控,进一步探讨中西药物通过干预SR实现调脂、抗As的机制,将有助于为As性疾病的防治提供更有效的途径和更有力的措施。

摘要： 目的:探讨氟伐他汀对阿霉素肾病(AN)大鼠肾脏清道夫受体A(SR-A)基因表达水平的影响及其肾保护作用。方法:一次性尾静脉注射阿霉素法制备AN大鼠模型,邻苯三酚自氧化法测定肾组织匀浆超氧化物岐化酶(SOD)活力,硫代巴比妥酸(TBA)法测定肾组织匀浆液丙二醛(MDA)水平,PCR和RT-PCR法检测大鼠肾脏SR-A基因表达水平。结果:AN大鼠尿中蛋白排泄量明显高于对照组和氟伐他汀治疗组,电镜下可见肾小球上皮细胞足突融合,内皮细胞增生,严重者肾小球基膜增厚,模糊不清,内皮细胞呈连拱状。AN组大鼠血清TP和Alb水平低于正常对照组,而TG, TC, HDL, LDL, ApoA和ApoB水平则高于正常对照组,其肾组织匀浆MDA值升高,SOD值下降,肾脏SR-A基因表达水平升高,氟伐他汀治疗后其血清TP和Alb水平升高,TG, TC, HDL, LDL, ApoA和ApoB水平和MDA值接近正常组(与AN组比较P<0.05),肾脏SR-A基因表达水平有所下降,电镜下大部分肾小球上皮细胞足突较好,仅见少部分上皮细.胞足突融合。结论:AN大鼠肾脏SR-A过度表达与肾脏脂质代谢异常有关,也是造成肾脏病理改变的主要原因之一,氟伐他汀通过抑制脂质过氧化和在转录水平阻抑SR-A的mRNA表达,从而起到非降脂肾保护作用。

摘要： 清道夫受体介导的巨噬细胞吞噬变性低密度脂蛋白,造成细胞内脂质蓄积,形成泡沫细胞,继而在血管内壁堆积形成脂质纹理,是动脉粥样硬化的早期关键特征之一.本文建立了以人清道夫受体CD36为靶点的拮抗剂高通量筛选模型，并应用此筛选模型寻找抗动脉粥样硬化候选药物。

摘要： CD163是一种清道夫受体(scavenger receptor)超家族成员,由吞噬细胞表达.CD163不仅与内源性配体结合,调节炎症反应.还能作为细菌、病毒的受体,与外源性配体结合.在PRRSV感染宿主细胞的过程中,CD163在病毒脱衣壳和基因组释放等方面起关键性的作用.本文就CD163分子的结构及功能做一介绍,以其对PRRSV感染机理的研究提供参考.

摘要： 趋化因子是一类具有趋化作用的分泌型细胞因子,通过介导单核-巨噬细胞、T细胞和平滑肌祖细胞在动脉粥样硬化病变处的募集来影响动脉粥样硬化的发生、发展;并且可以作为清道夫受体,摄取氧化型低密度脂蛋白,参与泡沫细胞的形成;此外,还可以参与动脉粥样硬化的内皮修复和血管新生,对动脉粥样硬化产生有利的影响.目前,血小板源趋化因子是关注的焦点之一,本综述重点介绍.

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及飞蝗C型清道夫受体基因及其靶向dsRNA与应用。本发明提供一种昆虫特有的C型清道夫受体基因全长序列及其在保护dsRNA中的应用。具体为通过生物信息学方法，从飞蝗转录组中获取C型清道夫受体基因片段，进一步调取获得序列为SEQ ID NO：1基因全长。依据SEQ ID NO：1，设计并合成该基因的dsRNA，该基因片段的核苷酸序列为SEQ ID NO：7所示序列，将其注射进入飞蝗体腔后可以特异性沉默靶标基因，导致飞蝗血细胞对外源dsRNA的吞噬能力显著降低，对靶基因的沉默效率显著提高。由于本发明C型清道夫受体基因仅节肢动物昆虫特有，哺乳动物等高等生物并不存在，对于害虫防治具有重要的现实意义，可以为害虫防治提供新的途径。

摘要： 本发明属于水产育种技术领域，具体涉及位于凡纳滨对虾的C型清道夫受体基因(LvSRC)上一个与生长相关的分子标记及其在凡纳滨对虾遗传育种中的应用。我们通过全基因组关联分析在基因组水平上定位到一批与对虾生长性状相关的标记，通过基因注释和候选基因关联分析方法进一步筛选出位于LvSRC基因编码区的一个单核苷酸多态性(SNP)标记(LvSRC‑211‑G/T)，该标记的基因型与对虾生长性状呈显著相关(P<10‑6)。该标记位于LvSRC基因上211bp的位置，为G/T型突变，在该标记的GT基因型为明显的生长优势基因型。本发明所涉及的标记可以作为对虾育种的分子标记辅助对虾生长性状的遗传选育。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及飞蝗C型清道夫受体基因及其靶向dsRNA与应用。本发明提供一种昆虫特有的C型清道夫受体基因全长序列及其在保护dsRNA中的应用。具体为通过生物信息学方法，从飞蝗转录组中获取C型清道夫受体基因片段，进一步调取获得序列为SEQ ID NO：1基因全长。依据SEQ ID NO：1，设计并合成该基因的dsRNA，该基因片段的核苷酸序列为SEQ ID NO：7所示序列，将其注射进入飞蝗体腔后可以特异性沉默靶标基因，导致飞蝗血细胞对外源dsRNA的吞噬能力显著降低，对靶基因的沉默效率显著提高。由于本发明C型清道夫受体基因仅节肢动物昆虫特有，哺乳动物等高等生物并不存在，对于害虫防治具有重要的现实意义，可以为害虫防治提供新的途径。

摘要： 本发明涉及一种清道夫受体‑A靶向的脂肪酸修饰的白蛋白及其制备方法和应用。本发明利用脂肪酸的羧基与白蛋白赖氨酸残基的氨基进行酰化反应得到脂肪酸修饰的白蛋白；并通过溶剂挥发法成功地制备了脂肪酸修饰的白蛋白纳米粒，进一步还成功制备了用脂肪酸修饰的白蛋白修饰的具有清道夫受体‑A靶向作用的其他纳米制剂如脂质体、高分子纳米粒和胶束。本发明以脂肪酸修饰的白蛋白为新的药物载体或者靶头，通过其清道夫受体‑A靶向作用可特异性递送药物到活化的巨噬细胞。所制备的纳米制剂结构稳定，粒径均一，载药范围广，载药量高，特异性强，能显著提高药物的生物利用度，具有良好的安全性和生物相容性，在生物医药领域具备较大的应用价值。

摘要： 本发明公开了大黄鱼清道夫受体家族基因的密码子偏好性分析方法，包括，获得大黄鱼清道夫受体家族基因；利用密码子偏好性分析软件Codon W统计所有基因的第三位密码子频率和密码子第三位为G或C的频率，同时计算所述受体家族基因的偏好性指数，得出清道夫受体家族在进化中的密码子偏好性使用情况。本发明分析方法简单可行，可准确地判断大黄鱼清道夫受体家族基因的密码子偏好性，更好地帮助认识清道夫受体家族基因特征，在后续改造基因以及实现其高效表达中发挥重要作用。

摘要： 本发明公开了清道夫受体A抑制剂在制备调节病毒感染引起脂代谢异常药物中的应用。本发明证实腺病毒感染可导致机体一系列与糖尿病相关的脂代谢和炎症应答的显著变化，实验证明，清道夫受体A抑制剂能调节由病毒感染引起的脂代谢异常。

摘要： 本发明公开了大黄鱼清道夫受体基因MARCO基因及其免疫防御功能，MARCO基因开放阅读框序列采用同源克隆法与RACE技术克隆获得，其序列如SEQ ID NO:1所示，全长为1218 bp，编码405个氨基酸，上述MARCO基因在大黄鱼免疫防御功能中的用途；免疫防御功能包括调节先天免疫维护机体的健康与进化。有益效果为：本发明采用同源克隆法与RACE技术克隆获得MARCO基因，克隆过程中总RNA提取效果好，能灭活内源RNA酶，提高总RNA的得率和纯度；MARCO基因免疫防御功能，为预防病原菌引起的疾病提供理论基础，也为揭示大黄鱼健康养殖提供理论指导。

摘要： 本发明提供一种大黄鱼清道夫受体SCARA3基因及其用途，属于基因工程技术领域，大黄鱼清道夫受体SCARA3基因完整ORF包含1938个碱基，核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，在哈维弧菌的感染下，该基因表达量上调，可应用于大黄鱼亲鱼抗哈维弧菌力的检测和/或抗哈维弧菌良种的选育，尤其可以应用于大黄鱼亲鱼抗哈维弧菌力的检测和/或抗哈维弧菌良种的选育。本发明大黄鱼清道夫受体SCARA3基因编码的大黄鱼清道夫受体蛋白的重组表达蛋白具有显著的抑哈维弧菌活性，可用于制备抑制哈维弧菌的生物制品，为大黄鱼抗哈维弧菌机理研究和抗哈维弧菌饲料添加剂的研制提供基因序列和方法。

摘要： 本发明属于水产育种技术领域，具体涉及位于凡纳滨对虾的C型清道夫受体基因(LvSRC)上一个与生长相关的分子标记及其在凡纳滨对虾遗传育种中的应用。我们通过全基因组关联分析在基因组水平上定位到一批与对虾生长性状相关的标记，通过基因注释和候选基因关联分析方法进一步筛选出位于LvSRC基因编码区的一个单核苷酸多态性(SNP)标记(LvSRC‑211‑G/T)，该标记的基因型与对虾生长性状呈显著相关(P<10

摘要： 本发明公开了清道夫受体A基因修饰的小胶质细胞及其制备方法和应用，清道夫受体A基因修饰的小胶质细胞由含清道夫受体A基因的重组真核表达载体、皂苷Quil A、甘油三脂和卵磷脂组成的复合物转染小胶质细胞制得，该细胞回输到侧脑室内能够抑制脑出血后的炎症反应，减轻脑水肿并提高神经功能损伤，可用于脑出血后的治疗，在神经免疫治疗领域有着良好的开发应用前景。