海洋细菌

摘要： 为了筛选可以耐受高浓度铯离子(Cs^(+))的海洋细菌并探究细菌耐受Cs^(+)的机制,本研究从广西近海沉积物样品中筛选出一株能够耐受700 mmol/dm^(3) Cs^(+)的海洋细菌,是目前已报道的可耐受最高浓度Cs^(+)的细菌。通过形态学分析、16S rRNA序列分析及生理生化特性的测定,确定该菌属于芽孢杆菌属(Bacillus),故将该菌株命名为Bacillus sp.Cs-700。在添加有700 mmol/dm^(3)氯化铯的培养基中,菌体对铯的移除率最高可达52.06%。研究结果表明Bacillus sp.Cs-700不但具有耐受高浓度Cs^(+)的特性,还具有较好的铯移除能力,具有修复放射性铯污染环境的潜力。本研究可为探索海洋放射性铯的生态修复提供参考。

摘要： 膜囊泡是一类由细菌释放并携带复杂蛋白质、核酸、信号分子等重要信息物质的生物纳米颗粒,参与了水平基因转移、群体感应、生物膜形成等多种生理生化活动。海洋中的细胞膜囊泡可能是除噬菌体和细菌之外的第三大生物实体,其介导的跨越物种的细胞间通讯对海洋生态系统而言有重要意义。然而,我们对膜囊泡在海洋生物圈中具体的生态角色与生物功能所知甚少。因此,本综述从细菌膜囊泡在海洋微生态、海洋共生体系中的作用及其物质流转对生态系统的影响等方面开展讨论,分析了目前细菌膜囊泡在海洋生态功能研究中尚未解决的科学问题,并对未来的研究方向进行了展望。

摘要： 从海洋中筛选高效降解亚硝酸盐的低温细菌,以降低食品及环境中亚硝酸盐存在的潜在危害。利用降解亚硝酸盐菌株的产酸、氧化或还原特性,分别使用含有0.01%亚甲基蓝(蓝板)和1% CaCO_(3)(白板)的两种鉴别培养基,对海洋样品进行筛选分离,共得到30株菌,均具有降解亚硝酸盐能力,降解率在91%~99.7%之间;其中菌株“8”对亚硝酸盐降解率高达99.7%,作用环境pH为3.98,经16S rDNA基因序列比对和系统发育树分析鉴定为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus.)。本实验首次使用含亚甲基蓝成分的培养基作为氧化或还原反应降解亚硝酸盐菌的筛选培养基,筛选效率高;而含CaCO_(3)的培养基可作为以产酸性物质降解亚硝酸盐菌的筛选培养基。试验所采用的策略,降低了筛选成本和时间,大大提高了效率,且筛选得到的细菌对亚硝酸盐具有高降解率,有极大的应用潜力。

摘要： 从大连新港石油污染海域海底沉积物中分离获得了5株菌株,编号分别为p14、p22、p23、p35和p37。经16S rDNA测序分析,菌株p14、p22、p23、p35和p37分别与Halomonas titanicae BH1^(T)、Halomonas alkaliphila 18bAG^(T)、Halomonas venusta DSM 4743^(T)、Halomonas alkaliantarctica CRSS^(T)和Halomonas pacifica DSM 4742^(T)最相似。实验研究其石油降解特性表明:该5株细菌菌株皆可降解石油,降解率分别为31.0%、47.8%、18.6%、3.8%、40.2%,菌株p22石油降解性能最佳,高达47.8%,菌株p37其次,高达40.2%。此外,5株细菌菌株均能降解十二烷、十六烷、蒽、萘、菲和芘,其中,p22、p23对芳烃降解性能更好,p14对芳烃的降解能力最差。菌株p14对烷烃降解能力较强,菌株p35、p37对烷烃降解能力较差。表明5株盐单胞菌菌株具有环境污染修复能力,是潜在的优良降有机污染物降解菌剂。

摘要： 从大连新港石油污染海域海底沉积物中分离获得了5株菌株,编号分别为p14、p22、p23、p35和p37.经16S rDNA测序分析,菌株p14、p22、p23、p35和p37分别与Halomonas titanicae BH1T、Halomonas alkaliphila 18bAGT、Halomonas venusta DSM 4743T、Halomonas alkaliantarctica CRSST和Halomonas pacifica DSM 4742 T最相似.实验研究其石油降解特性表明:该5株细菌菌株皆可降解石油,降解率分别为31.0％、47.8％、18.6％、3.8％、40.2％,菌株p22石油降解性能最佳,高达47.8％,菌株p37其次,高达40.2％.此外,5株细菌菌株均能降解十二烷、十六烷、蒽、萘、菲和芘,其中,p22、p23对芳烃降解性能更好,p14对芳烃的降解能力最差.菌株p14对烷烃降解能力较强,菌株p35、p37对烷烃降解能力较差.表明5株盐单胞菌菌株具有环境污染修复能力,是潜在的优良降有机污染物降解菌剂.

摘要： 对分离自日本海域海带的产褐藻胶裂解酶的细菌A78菌株进行鉴定,通过生理生化特征及16S rDNA基因序列分析,鉴定为假交替单胞菌(Pseudoalteromonas nigrifaciens).不同浓度褐藻酸钠诱导实验表明,菌株A78产酶最佳诱导物浓度为1％褐藻酸钠.不同的温度梯度(20～55°C)及pH值梯度(4～10)实验表明,菌株A78产褐藻胶酶的最适温度为30～31°C,最适pH值为5～5.5之间.菌株A78的产酶曲线表明培养初期的4h左右酶活最高.菌株A78发酵液上清液和菌体中均含有褐藻胶裂解酶,上清液加菌体酶活最高.本研究的结果对产褐藻胶酶菌株的进一步应用研究提供数据支持.

摘要： 康氏菌科(Kangillaceae)是海洋螺杆菌目(Oceanosprillales)下的科级分类单元,包含康氏菌属(Kangiella)、异康氏菌属(Aliikangiella)和Pleionea三个属.在康氏菌属高度精简的基因组中存在异常丰富的胞外蛋白酶编码基因,暗示此类海洋细菌对海洋颗粒有机物中的蛋白质成分降解具有重要贡献.鉴于已分离鉴定的康氏菌属模式菌株专一性利用蛋白类营养物质,我们建议将该属译为“食朊菌属”.本文将结合本实验室的研究进展,对康氏菌科细菌的分离培养过程、系统发育关系、代谢特点和潜在生态功能进行综述,为研究此类海洋细菌的生理生态功能提供思路.

摘要： 有关具转糖苷活性的几丁质酶研究目前鲜有报道,挖掘新型具转糖苷活性产几丁质酶的菌株并进行相关研究具有重要意义.从海泥中筛选几丁质酶产生菌,对菌株进行了鉴定和酶学性质研究.从连云港海域沙泥中筛选获得具有转糖苷活性几丁质酶产生菌CZW019,通过形态学、生理生化及16S rDNA序列分析将菌株鉴定为Dyadobacter sp..对CZW019几丁质酶酶学性质进行研究,结果表明该几丁质酶水解几丁质生成几丁单糖和几丁二糖,并具有转糖苷活性.该酶最适反应温度为35°C,最适pH为7.0,金属离子Mg2+和Zn2+对酶活有显著促进作用,Hg2+对酶活有显著抑制作用.α-几丁质、β-几丁质和胶体几丁质作为底物时,以胶体几丁质作为底物酶活最高.

摘要： 为探究B族维生素对海洋细菌生物被膜形成、海洋贝类幼虫变态所产生的作用,本研究首先使用维生素B7(VB7)和B12(VB12)直接刺激厚壳贻贝(Mytilus coruscus)幼虫,观察其对变态的直接诱导活性;然后通过添加VB7和VB12,与海假交替单胞菌(Pseudoalteromonas marina)共同形成生物被膜,分析B族维生素对生物被膜形成及其生物学特性的影响;同时检测生物被膜变化对厚壳贻贝幼虫变态发育的影响.研究结果显示,0.02 mmol/L浓度VB7和VB12可以直接诱导厚壳贻贝幼虫的变态,且效果最为显著(P<0.05);0.02 mmol/L浓度VB7和VB12处理后的海假交替单胞菌生物被膜对幼虫附着变态的诱导作用均显著提高(P<0.05);进一步通过细菌密度计数、膜厚度分析、可拉酸染色和定量等方法,揭示VB7和VB12处理后生物被膜细菌密度、膜厚度以及胞外多糖、蛋白和脂质均显著增加(P<0.05).研究结果证实,VB7和VB12可能通过改变海洋细菌生物被膜的生物学特性,进而调控厚壳贻贝幼虫变态发育.本研究为探究厚壳贻贝幼虫附着变态的分子机制提供了新的理论依据和创新思路,同时为B族维生素在提高厚壳贻贝人工育苗技术、改善厚壳贻贝养殖产业问题和促进海洋牧场生态修复建设等方面的应用提供了理论基础.

摘要： 有关具转糖苷活性的几丁质酶研究目前鲜有报道,挖掘新型具转糖苷活性产几丁质酶的菌株并进行相关研究具有重要意义。从海泥中筛选几丁质酶产生菌,对菌株进行了鉴定和酶学性质研究。从连云港海域沙泥中筛选获得具有转糖苷活性几丁质酶产生菌CZW019,通过形态学、生理生化及16S rDNA序列分析将菌株鉴定为Dyadobacter sp.。对CZW019几丁质酶酶学性质进行研究,结果表明该几丁质酶水解几丁质生成几丁单糖和几丁二糖,并具有转糖苷活性。该酶最适反应温度为35°C,最适pH为7.0,金属离子Mg 2+和Zn 2+对酶活有显著促进作用,Hg 2+对酶活有显著抑制作用。α-几丁质、β-几丁质和胶体几丁质作为底物时,以胶体几丁质作为底物酶活最高。

摘要： PPC(Pre-Peptidase C-terminal)结构域广泛存在于分泌型海洋细菌蛋白酶的C末端,对蛋白酶的分泌,锚定及与底物相互吸附起到重要作用.为了进一步对不同来源的PPC结构域的进化关系进行系统研究,选取61条来自于39个细菌所分泌的不同蛋白酶的PPC的氨基酸序列进行系统发育分析.发现PPC结构域在生物进化过程中序列变异性大,保守性弱.其中,有些细菌PPC结构域可能来源于自身基因重复产生,有些细菌PPC结构域则可能由水平基因转移产生.

摘要： 目的:rn 本文目的是从海洋细菌Cellulophaga sp.KY 2-8中分离纯化得到新型褐藻胶裂解酶AlyC,并进行酶学性质研究.rn 方法:rn 利用唯一碳源培养基筛选产生褐藻胶裂解酶的海洋细菌,通过16S rDNA序列比对进行菌种鉴定,利用硫酸铵沉淀、疏水层析色谱纯化褐藻胶裂解酶,根据其对不同底物的降解活性来研究酶的降解底物偏好性,利用薄层层析确定降解褐藻胶的终产物组成.rn 结果:rn 筛选得到一株海洋细菌KY 2-8,鉴定为噬纤维菌属.从其发酵上清中分离纯化得到褐藻胶裂解酶AlyC,分离纯化结果表明该酶被纯化了8.9倍,回收率为43.6％,SDS-PAGE电泳分析显示AlyC分子量大小为33 kDa.AlyC对多聚古洛糖醛酸片段(polyG)具有偏好性,酶解褐藻胶的主产物为二糖和三糖.rn 结论:rn 本文从菌株Cellulophaga sp.KY 2-8中分离纯化得到一个polyG偏好性降解的褐藻胶裂解酶AlyC,可用于大量制备褐藻胶寡糖,酶解褐藻胶的终产物为二糖和三糖，可用于高效便捷的制备褐藻胶二糖和三糖，目前报道褐藻二糖和褐藻胶三糖具有很强的抗氧化活性，该酶的发现能够有效的促进海洋寡糖类药物和生物制品的开发和利用。

摘要： 本研究检测了66株近海海洋细菌的群体感应信号分子及生物膜形成能力，评估细菌群体感应信号分子与生物膜形成能力间的关系，对于环境细菌，具有群体感应信号分子活性(特别是AHLs)的菌株，其生物膜形成能力往往较强。并采用群体感应抑制物筛选系统，首次发现能降解群体感应信号分子AHLs的赤杆菌属细菌，这一结果丰富了群体感应降解菌的来源。

摘要： 本实验室从威海海域分离出一株具有很强降解琼胶能力的海洋细菌,编号为HQM9,通过对其基因组进行测序,预测出34条疑似琼胶酶基因序列。本论文选用其中的基因aga16G在大肠杆菌中进行克隆与表达。生物信息学分析结果表明,与其编码的氨基酸序列最相近的序列为Agarivoran.s sp.LQ48的一个p-琼胶酶agaA,相似度仅为47％.根据aga16 G序列，利用软件primer premier5设计特异性引物引物(包括酶切位点和His标签)，扩增目的片段，然后将基因连接到原核表达载体pET24a(+)，构建表达载体pET24a-agal6G，转化大肠杆菌扩增菌株DHS中，提取扩增之后的重组质粒转化至大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中进行表达，经0.1mM的IPTG诱导后检测到菌体内有大量蛋白表达，且发酵上清液中能够检测到琼胶酶活性，证明基因agal6G为琼胶酶基因，综合其序列相似性分析，可以初步确定基因aga16G为新的琼胶酶基因，表达后的重组琼胶酶命名ragal6G，对重组酶的酶学性质进行测定，发现其最适底物浓度1%琼脂糖，最适反应温度为50°C，最适pH为6.0，最适条件下，比酶活可达13.6U/mg。

摘要： 从大连海域的贝类、海鱼、海参肠中筛选得到一株产碱性蛋白酶较高的海洋细菌C6-7,经形态学鉴定和16S rDNA序列分析为枯草芽孢杆菌.将该菌株接入发酵培养基中,30°C、160 r/min、摇床培养48 h,Folin酚法测定其酶活力.结果发现菌株C6-7所产蛋白酶最造作用温度为40°C,最适作用pH值为9.0；并对该菌株产酶发酵培养基进行了研究,通过单因素试验和正交试验,确定了最适产酶培养基组成为葡萄糖2.0％、牛肉膏1.0％、酵母粉2.0％、CaCl2 0.05％、NaCl 1.0％,优化后菌株C6-7产碱性蛋白酶的酶活力达到531U/mL.

摘要： 本实验室通过对海洋细菌A.agarilytica ZC1菌株进行基因组精细图测序，研究β-琼胶酶(M672)的基因，将其克隆到表达载体pET-32a(+)中，并转入大肠杆菌Rossetta中进行表达，纯化与测定其酶活性质。结果表明:M672的基因长度为2067bp, Blastp相似性为41%，推测属于GH16水解家族。该酶的最适pH为7，且在pH5-8中具有较高的酶活性;最适反应温度为25°C，在20-40°C中酶活性较高;金属离子Na+,K+对该酶活性影响不大，而Cuz+,Znz+,Mgz+对其活性有较大的抑制作用;p-Me,SDS和Urea对该酶有不同程度的抑制作用;该酶的酶解产物主要是四糖、六糖与八糖。本文通过研究重组酶M672的酶学性质证明该酶在室温中就能获得较高的降解效率，可望用于制备琼胶寡糖。

摘要： 选取常见赤潮优势种中肋骨条藻(Skeletonema costatum)作为对象,研究海洋细菌与其种间化感效应,利用共培养和添加细菌胞外代谢物,以S.costatum生长量及叶绿素a含量为参数,研究细菌对S.costatum生长及光合作用的影响.结果显示:菌液浓度104以上对S. costatum生长产生抑制，培养至第10d，104、106、108组藻生长量分别是对照组的70%,23%,22%。叶绿素合成量是对照组88%,62%,60%；抑制效应随菌浓度的增加有逐渐增加的趋势。

摘要： 本实验室通过对海洋细菌A.agarilytica ZC1菌株进行基因组精细图测序，研究β-琼胶酶(M672)的基因，将其克隆到表达载体pET-32a(+)中，并转入大肠杆菌Rossetta中进行表达，纯化与测定其酶活性质。结果表明：M672的基因长度为2067bp，Blastp相似性为41%，推测属于GH16水解家族。本文通过研究重组酶M672的酶学性质证明该酶在室温中就能获得较高的降解效率，可望用于制备琼胶寡糖。

摘要： 为了研究海洋细菌YS-80的沙雷氏金属蛋白酶MP与其抑制剂lupI的相互作用机制,利用大肠杆菌表达了抑制剂及其突变体蛋白,研究抑制剂及其突变体对蛋白酶活性的影响.发现,lupI的N端突出干状结构突变后,使抑制活性大大降低,这说明N端突出结构起着至关重要的作用;突出干状结构后面紧挨着的α-螺旋突变后,导致抑制活性有所下降.但是,单独合成的N端突出结构短肽和N端突出结构及α-螺旋短肽均没有抑制活性,这说明lupI的抑制活性应该还依赖于β-桶结构.因此突变了lupI的β-桶结构与蛋白酶MP位置邻近的一个loop环结构,结果导致抑制活性降低,这进一步证实了β-桶结构起到稳定抑制剂与蛋白酶相互作用的角色.因此证实lupI对蛋白酶MP的抑制作用是各个结构域协同作用的结果.

摘要： 通过离子交换色谱和凝胶过滤色谱对AgarivoransalbusYKW-34产琼胶酶进行分离纯化,并对其酶学性质和降解产物进行研究.离子交换色谱表明,A.albusYKW-34能产生两种琼胶酶,AgaA34和AgaB34.AgaA34进一步通过凝胶过滤色谱得以纯化.SDS-PAGE和凝胶过滤色谱表明此酶由单一肽链组成,分子量为50kDa.纯化的回收率为30％,纯化倍数为10倍.AgaA34的酶学性质分析表明,此酶的最适pH为8.0,在pH6.0-11.0稳定;最适温度为40°C,在温度≤50°C时稳定.MALDI-TOF MS和13C NMR分析表明AgaA34的琼胶酶解产物为75mo1％新琼二糖和25mo1％新琼四糖.薄层层析色谱表明此酶能将新琼四糖降解为新琼二糖.

摘要： 本发明涉及微藻培养技术领域，尤其涉及筛选海洋微藻共生细菌的方法。本发明提供了一种有效的筛选海洋微藻共生细菌的方法，该方法分离对数期藻液，取菌体经抗生素溶液洗涤、灭菌陈海水洗涤后，以灭菌陈海水重悬获得菌悬液；然后以2216E平板分离获得共生菌的单菌落。以本发明提供的方法，筛选获得的共生菌能够有效促进微藻生长，且该方法简单易行。

摘要： 本发明提出了一种培养海洋光合细菌光‑暗发酵耦联制氢的方法，涉及生物制氢领域。一种培养海洋光合细菌光‑暗发酵耦联制氢的方法，包括：采用海洋底泥、海水和无机物为暗发酵培养基，培养得到菌群，经富集后得到暗发酵菌的纯菌株；采用海洋底泥、海水和光发酵培养基为底物，在光照条件下培养得到菌群，经富集后得到光发酵菌的纯菌株；往暗发酵培养基中加入木薯粉，接种暗发酵菌进行发酵产氢，在暗发酵菌接种50～60h后接种光发酵菌继续制氢。本发明实现持续、高效、稳定的产氢能力，创造了协同生长的生存环境，使两种细菌充分发挥共生协同互补作用。

摘要： 本发明提供了一种产红色素的海洋细菌，其保藏号为CGMCC NO.0527。本发明还提供了一种生产天然红色素的方法，包括：培养权利要求1所述的海洋细菌；和从培养物中提取红色素的步骤。本发明还提供了一种红色素。

摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一种海洋细菌及其在修复海洋重金属污染上的应用，该细菌分类命名为短杆菌，拉丁名为Brevibacterium sp.，已于2020年09月01日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为：CGMCC No.20580。该菌株具有Ni2+耐受浓度高达800mg/L，镍富集量为100.95mg/g。与物理、化学重金属污染修复方法相比，基于该菌株的微生物修复技术具有环境友好、修复效率高等特点。

摘要： 本发明涉及模拟海洋细菌在海洋漩涡中的培养系统。其包括培养装置、取样装置和控制装置，培养装置包括培养箱、容置箱、齿轮、第一齿条、第二齿条、支撑架、滑块、套筒和螺旋状的螺旋叶片，容置箱搭接于培养箱上，齿轮通过转轴安装于容置箱内，第一齿条和第二齿条对称安装于支撑架内，且均与齿轮相啮合；支撑架底部与滑块通过杆件相固接，滑块滑动连接于套筒内，套筒穿装并固接于容置箱底部，螺旋叶片与滑块底部通过杆件相连，控制装置设置于培养箱内侧壁上，取样装置螺纹连接于培养箱底部。通过培养装置模拟深海海洋漩涡水流，进一步探索海洋细菌在一些特殊环境下的生存情况。

摘要： 本发明提供了一种产红色素的海洋细菌,其保藏号为CGMCC NO.0527。本发明还提供了一种生产天然红色素的方法,包括:培养权利要求1所述的海洋细菌;和从培养物中提取红色素的步骤。本发明还提供了一种红色素。

摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一种海洋细菌及其在修复海洋重金属污染上的应用，该细菌分类命名为短杆菌，拉丁名为Brevibacterium sp，已于2020年09月01日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为：CGMCC No.20580。该菌株具有Ni2+耐受浓度高达800mg/L，镍富集量为100.95mg/g。与物理、化学重金属污染修复方法相比，基于该菌株的微生物修复技术具有环境友好、修复效率高等特点。

摘要： 本发明公开了一种利用海洋水色遥感数据估算海洋细菌丰度的方法，所述方法包括：获取海洋细菌丰度资料以及与海洋细菌丰度资料相应时段相应海域的海洋水色卫星遥感数据；对所获取的海洋水色卫星遥感数据做大气校正处理，以得到海域水体遥感反射率；根据所得到海域水体遥感反射率和海洋细菌丰度资料来构建海洋细菌丰度遥感算法；利用所构建的海洋细菌丰度遥感算法从海洋水色卫星遥感数据中提取得到海洋细菌丰度信息。通过利用所构建的海洋细菌丰度遥感算法可以提取大范围海域海洋细菌丰度信息，了解海洋细菌丰度的空间分布及其变化，而且测量成本低，解决现有海洋细菌丰度测量成本高、费时费力等问题，与常规的细菌丰度测量技术具有很好的互补性。

摘要： 本发明涉及模拟海洋细菌在海洋漩涡中的培养系统。其包括培养装置、取样装置和控制装置，培养装置包括培养箱、容置箱、齿轮、第一齿条、第二齿条、支撑架、滑块、套筒和螺旋状的螺旋叶片，容置箱搭接于培养箱上，齿轮通过转轴安装于容置箱内，第一齿条和第二齿条对称安装于支撑架内，且均与齿轮相啮合；支撑架底部与滑块通过杆件相固接，滑块滑动连接于套筒内，套筒穿装并固接于容置箱底部，螺旋叶片与滑块底部通过杆件相连，控制装置设置于培养箱内侧壁上，取样装置螺纹连接于培养箱底部。通过培养装置模拟深海海洋漩涡水流，进一步探索海洋细菌在一些特殊环境下的生存情况。

摘要： 本发明提供了一种嗜盐乳酸菌‑海洋细菌共发酵产褐藻胶裂解酶的方法，通过预先培养海洋细菌XS1412C菌株，将XS1412C菌株接种到发酵培养液中制备XS1412C菌株发酵培养液，再通过预先培养嗜盐乳酸菌，将嗜盐乳酸菌接种到XS1412C菌株发酵培养液中进行共生发酵培养，得到共生发酵培养液，最后离心共生发酵培养液得到含有褐藻胶裂解酶的酶液，该方法根据生物学原理，将能够发酵产生有益物质、促进菌株生长、提高菌株产酶能力的嗜盐乳酸菌与能够分泌褐藻胶裂解酶的XS1412C菌株进行共生发酵培养，既能促进褐藻胶裂解酶的分泌，保证酶的品质，有效提高酶活力，又能简化发酵过程，缩短发酵时间，降低提取成本，环保易操作，属于海洋生物技术领域。