摘要：
目的 探讨JAK2 V617F基因突变呈阴性原发性血小板增多症(ET)患儿的临床、实验室检查及基因突变特征.方法 选择2017年2月至2019年2月于首都医科大学附属北京儿童医院血液肿瘤中心接受诊治的10例JAK2 V617F基因突变呈阴性ET患儿作为研究对象,纳入ET组(n=10).患儿中位年龄为6.8岁;男性患儿为5例,女性为5例.选择同期于本院接受诊治的4例继发性血小板增多症(ST)患儿作为对照,纳入ST组(n=4).患儿中位年龄为1.8岁,均为女性.采用病例对照的研究方法,分析2组患儿的血常规、凝血功能检查、骨髓涂片、骨髓活组织检查及相关基因突变检查结果.2组患儿年龄、血常规和凝血功能检测结果、巨核细胞总数及其比例的比较,采用Mann-Whitney U检验.性别、临床表现构成比比较,采用Fisher确切概率法.本研究遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求.所有患儿临床资料收集均已获得患儿监护人知情同意.结果 ①ET组10例患儿中,伴神经系统症状者为6例,包括头痛者4例、头晕2例;其中1例同时伴肝大;其余4例无明显临床症状.4例ST组患儿中,伴发热症状或者前驱感染者为2例,其余2例无明显临床症状.②2组患儿外周血血小板计数、血小板压积(PCT)均较正常参考值范围增高,ET组患儿中位血小板计数为1 451×109/L[(1 193～1 831)×109/L],高于ST组患儿的966×109/L[(677～989)X109/L],并且差异有统计学意义(Z=-2.404,P = 0.014);中位 PCT 为1.28％(1.12％～1.63％),亦显著高于ST组患儿的0.85％(0.62％～1.05％),并且差异有统计学意义(Z=-2.256,P=0.024).2组患儿的血小板分布宽度(PDW)均低于正常参考值范围.凝血功能相关指标中,ET组患儿中分别有4、4、4例出现凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)延长及纤维蛋白原(FIB)值低于正常参考值范围,而ST组患儿中分别为1、2、2例.2组患儿其余检查指标均正常.③2组患儿骨髓涂片结果均表现为中度增生活跃,粒、红系细胞比例正常.此外,4例ST组患儿的骨髓涂片中亦可见中性粒细胞核左移和感染相关细胞.2组患儿的骨髓活组织检查结果均表现为中度增生活跃,粒、红系细胞比例正常且巨核细胞多见,以分叶核巨核细胞为主.巨核细胞免疫组织化学染色结果示,ET组患儿骨髓中位正常巨核细胞比例显著低于ST组患儿[49.5％(44.3％～61.0％)比71.1％(61.3％～85.0％),Z=-2.404,P=0.014].④基因测序结果显示,ET组10例患儿均不伴MPL及JAK2基因突变,其中有2例检测到CALR基因突变,并且这2种CALR 基因突变均为明确与ET相关的基因突变位点.此外,筛选出4种可能与儿童ET相关的基因突变,包括KMT2A、ASXL1、CSF3R及NF1基因突变.结论 JAK2 V617F基因突变呈阴性ET患儿具有独特的临床和实验室特征,二代基因测序法发现可能与ET发生、发展相关的KMT2A、ASXL1、CSF3R及NF1基因突变,可为JAK2 V617F基因突变呈阴性ET的临床诊断提供参考.但是本研究纳入患儿例数较少,并且缺乏ST男性患儿作为对照,存在一定局限性.ET患儿的临床特点、相关实验室检查结果,及其与ST患儿的鉴别要点,有待大样本临床研究进一步证实.
