流式细胞分析

摘要： 利用流式细胞法、细胞计数试剂盒(CCK-8)法、实时细胞功能分析(RTCA)法分别检测分选前后细胞的活性,综合比较了3种方法的检测原理、操作特点等。结果显示,流式细胞法测得的分选后细胞凋亡率为(3.85±0.008)%,分选前细胞凋亡率为(14.09±0.021)%,分选后细胞凋亡率低于分选前,具有统计学差异(P<0.05);分选前后的活细胞比例显示,分选后活细胞比例高于分选前,具有显著性统计学差异(P<0.001)。CCK-8法测得的分选后细胞活性高于分选前,具有显著性统计学差异(P<0.001);RTCA法测得的分选后细胞连续增殖活性明显高于分选前,具有极显著性统计学差异(P<0.0001)。结果显示,相较于CCK-8法和流式细胞法,RTCA法的细胞用量少、可回收,操作简便,无需标记,检测灵敏度高,可获得实时动态的细胞生长曲线,适合研究分选后细胞长效动态的活性变化,可为基础和临床分选后活细胞的功能研究提供检测手段。

摘要： 流式细胞分析的临床应用日益广泛.由于流式细胞分析强大的用户自定义功能、不同原理的仪器配置差异,加之缺乏标准品等诸多因素,导致结果可比性有待提高.因此,流式细胞分析面临规范化和标准化这一巨大挑战.规范操作过程包括标本染色和离心的规范化、合理选择抗体和组合、标准化仪器检测以及数据分析等将极大促进流式细胞分析的规范化和标准化工作进展.

摘要： 该文对快速一步法与乙醇固定法制备流式细胞周期样品进行系统比较, 并对快速制备方法进行优化.用碘化丙啶快速染色法制备细胞周期样品, 平行比较该方法与乙醇固定方法制备样本的测试结果, 评估快速样本制备方法的可靠性和样品放置时间对实验结果的影响.实验结果表明, 快速染色法与乙醇固定法相比, 细胞周期各时相细胞比例及CV值在统计学上均无显著差异, 样品放置6天细胞周期各时相百分含量无显著差异, 但CV值和荧光强度有明显改变, 在快速染液中添加2％～4％血清, 能够有效降低细胞粘度、提高高粘度样本的检测速度.%This paper systematically compares the rapid one-step method with the ethanol fixation method for the preparation of flow cytometry samples and optimizes the rapid preparation method.Cell cycle samples were prepared by rapid staining with propidium iodide.The test results of this method and ethanol fixation method were compared in parallel.The reliability of the rapid sample preparation method and the influence of sample placement time on the experimental results were evaluated.The experimental results showed that there was no statistically significant difference in the cell ratio and CV value of the cell cycle between the rapid staining method and the ethanol-fixed staining method.There was no significant difference in the percentage of cell cycle phase with in 6-days staining, but CV value and fluorescence intensity were significantly changed.Adding2％～4％ serum to the rapid staining solution can effectively reduce the cell viscosity and improve the detection speed of high viscosity samples.

摘要： 目的 以小鼠子宫内膜干细胞为种子细胞构建工程化子宫内膜在小鼠子宫内膜损伤修复中的应用价值.方法 选择SPF级昆明小鼠,分离子宫内膜干细胞并进行流式细胞仪分选检测;建立小鼠子宫内膜损伤模型,并在损伤后进行子宫内膜干细胞移植治疗、模型组织形态学表现与免疫组化分析.结果 子宫内膜干细胞传代培养后生长状态好,呈梭形贴壁生长,分选的干细胞细胞占总细胞数的2.17%左右.子宫内膜损伤部位可见大量有核细胞的聚集,失去了正常的上皮及腺体结构,组织间隙水肿.子宫内膜干细胞移植治疗14 d后子宫内膜能够发现生成有新的上皮细胞和基质细胞,对正常自动内膜以及侧子共内膜细胞的结构没有显著区别.病灶标本HE染色异位病灶呈囊状,囊壁由多层细胞构成,囊壁外覆盖纤维结缔组织.结论 小鼠子宫内膜组织中干细胞的比例为2.17%左右,采用100°C生理盐水处理可以构建小鼠子宫内膜损伤模型,此种移植子宫内膜干细胞的方法对于子宫内膜损伤的修复具有一定帮助.

摘要： 异噁唑啉是一类具有广泛生物活性的杂环化合物.采用活性亚结构拼接的思路,在前期研究基础上,设计合成了10个未见文献报道的新型3-[4-(1-哌嗪基)]苯基-5-(2-呋喃基)-4,5-二氢异噁唑啉衍生物3～12,其结构经IR,1H NMR、13C NMR和HRMS确证.采用噻唑蓝(MTT)法测试了目标化合物的体外细胞毒活性(Hela、A549和SGC7901).结果表明,该类化合物普遍具有良好的细胞毒活性,特别是化合物4、6和11对肿瘤细胞株的体外抑制活性与阳性对照药5-氟尿嘧啶相当.进一步的流式细胞分析结果表明,化合物4和11均能有效诱导肿瘤细胞株A549的死亡.%Dihydroisoxazoline is a heterocyclic compound with a variety of biological properties.In this study,ten new 3-(4-piperazinyl)phenyl-5-(2-furyl)-4,5-dihydroisoxazoline derivatives (3～12) have been prepared by the general principle of molecular hybridization based on former work.The structures were characterized by IR,1H NMR,13C NMR and HRMS.In vitro cytotoxic activity against a panel of human tumor cell lines (Hela,A549 and SGC7901) was evaluated by the 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT) assay.The result indicated that dihydroisoxazoline derivatives showed potential cytotoxic activity,and the substituents of the NH group of piperazine ring had an obvious influence on cytotoxic activities.Especially,compound 4,6 and 11 were found to be better inhibition against human tumor cell lines,which were found to be similar cytotoxic activity to positive control 5-fluorouracil.Further FACs analysis showed that compounds 4 and 11 significantly induced death in A549 cell.

摘要： 目的 观察低剂量电离辐射对C6 BTSCs增殖、分化及凋亡的影响.方法 进行C6 BTSCs的悬浮培养,应用倒置相差显微镜观察于细胞的生长特性,通过BrdU和CD133免疫荧光染色法明确C6 BTSCs的增殖情况,流式细胞分析法观察低剂量电离辐射后C6 BTSCs的凋亡情况.结果 在无血清条件培养基的作用下,悬浮培养的C6 BTSCs增殖速度快,干细胞数量较多;低剂量电离辐射后,0.3 Gy组促进C6 BTSCs增殖和分化能力,且0.3Gy组C6 BTSCs存活细胞数量较多,凋亡的细胞数量较少,与对照组或3.0Gy组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 C6胶质瘤细胞系中存在具有干细胞特性的C6 BTSCs,且低剂量电离辐射刺激对C6 BTSCs的增殖、分化具有促进作用.

摘要： 指出了流式细胞分析(Flow cytometry, FCM)是运用流式细胞仪对液相中悬浮细胞或微粒进行研究的新兴技术.目前已广泛应用于生物学、医学等领域,它具有检测速度快、灵敏度高,且操作简便等特点.介绍了流式细胞仪的发展及其原理,阐述了流式细胞分析在动物学研究中的应用,包括在水生动物、哺乳动物以及动物病理学研究等方面的应用,并对其进行了总结与展望,为流式细胞分析的进一步发展提供参考,以期流式细胞仪在动物学研究中得到更好的发展.

摘要： 目的 探讨顺铂与卡铂对骨肉瘤细胞(MG-63)作用的分子机制.方法 骨肉瘤细胞混悬液与不同浓度顺铂和卡铂分别作用24、48、72 h后,用倒置显微镜观察细胞生长情况.用噻唑蓝法测定每孔的吸光度值,制作生长曲线,并求出顺铂和卡铂的半抑制浓度(IC50).用IC50顺铂、卡铂作用于骨肉瘤细胞24、48、72 h后用流式细胞仪进行细胞周期分析.免疫印迹技术观察细胞的增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2和Bax的表达.结果 相同浓度顺铂和卡铂作用的骨肉瘤细胞死亡数量随时间增加而增加.不同浓度顺铂和卡铂对骨肉瘤细胞分别作用24、48、72 h后,对细胞的生长均起到抑制作用,相同时间内,药物浓度越高,生长抑制作用越明显(P＜0.05).骨肉瘤细胞与IC50顺铂和卡铂作用24、48、72 h后,在细胞各期均未见明显凋亡峰,但随着时间增加,G1、S、G2期所占比例逐渐下降;顺铂和卡铂作用后不同时间点凋亡细胞所占比例比较差异均有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,顺铂组和卡铂组PCNA表达下降,Bax表达增加,Bcl-2表达略减少.结论 顺铂和卡铂对肿瘤细胞生长各期均有抑制作用,对于骨肉瘤细胞来说,卡铂的浓度约需25倍于顺铂才能产生相似的生长抑制效应.顺铂、卡铂与骨肉瘤细胞作用后存在凋亡现象,但是未能形成凋亡峰,这可能与铂类化合物能够对处于任何生长周期的细胞均能产生杀伤作用有关.

摘要： 本文对中国临床流式细胞分析的发展进行了阐述。流式细胞分析又称为流式细胞术((flow cytometry，FCM)，是一种大量、高速分析单个细胞的多种生理、生化、免疫、遗传等特性的细胞分析技术，在临床医学中有着广泛的应用。FCM是一种综合运用了徽光技术、电子技术、半导体技术、计算机技术、流体力学技术等多种高新技术，并结合荧光染料化学、细胞化学、细胞免疫学、细胞遗传学和细胞生物学等生物医学技术，最初主要用于生物学和基础医学研究。随着流式细胞仪逐渐从一种体积庞大、操作技术复杂、分析速度较慢、成本高发展为目前体积小、操作简便、分析速度快、成本低的仪器，FCM在临床疾病的诊断、治疗及研究等方面广泛展开。

摘要： 本文介绍了一种可同时检测细胞散射光变化和荧光强度的微型化流式细胞分析仪,该微型化流式细胞分析系统具有结构简单,体积小,集成度高和造价低廉的特点.

摘要： 血液恶性肿瘤的诊断取决于实验室方法,通常需要多个实验方法来判断,否则很容易误诊.这里报道一例与曲折的诊断过程.最初淋巴结活检被诊断T-LBL,但是在另一家医院骨髓形态被确诊为AML.最后,它被诊断为MPAL(T+My)通过综合评价包括骨髓细胞形态学、细胞化学染色和流式细胞分析.通过这个特殊病例,提出对T-LBL,ETP-ALL和MPAL(T+My)的区别和诊断经验启发读者.

摘要： 目的：分析99Tc直接标记法标记重组膜联蛋白V(99Tcm-rh-Annexin V)在小鼠体内的生理性分布特点，探讨其评价单次化疗后肿瘤细胞的凋亡状况的可行性。rn 方法：采用直接标记法标记rh-Annexin V；应用SPECT及井型闪烁探测器观察不同时间示踪剂在A组(正常小鼠)体内的生理性分布状况，并计算每克组织百分注射剂量率(％ID/g)；B组为荷瘤组，将小鼠肝癌细胞(Hca-F25)接种于小鼠右腋下部位；随机分为4个亚组(B1，n=6；B2，n=5；B3，n=3；B4，n=3)，肿瘤生长至直径约1cm时，B1、B3组一次性接受环磷酰胺(cyclophosphamide)腹膜内注射，剂量为150mg/kg；20h后，B1、B2组同时由鼠尾静脉注入99Tcm-rh-Annexin V(剂量为5.55MBq/0.5μg/0.1ml/只)，B3、B4组只注入相同放射性活度的高锝酸盐及还原剂，而不标记Annexin V；6h后分别显像、处死、取材；比较各亚组间肿瘤组织的％ID/g、靶/本底比值(T/M、T/B)以及流式细胞分析凋亡细胞(Annexin V阳性/PI阴性)百分比。rn 结果：99Tcm-rh-Annexin V在肾脏中的生理性分布最高，肝脏中分布较少，而其它组织及脏器中分布则甚少。B1组瘤体内％ID/g及T/M、T/B比值明显高于其余3个亚组，而B2、B3、B4组之间无明显差异；B1组肿瘤组织％ID/g与凋亡细胞百分比呈明显正相关，而B2、B3、B4组则不相关。rn 结论：单次化疗后，肿瘤组织内99Tcm-rh-Annexin V的摄取明显增加，且其摄取的程度与肿瘤组织内凋亡细胞的多少呈明显正相关；99Tcm-rh-Annexin V显像可以较为准确地反映化疗后早期肿瘤组织细胞凋亡的状况。

摘要： 本试验利用烟色曲霉菌降解的壳寡糖与免疫荧光微粒标记的CD34+，CD41+，CD19+，CD4+HSC/HPC细胞共培养，利用流式细胞仪检测阳性细胞的数量。发现壳寡糖对于造血干/祖细胞有促进增生的作用，其机理可能是通过促进基质细胞分泌造血生长因子而实现的。

摘要： 本试验利用烟色曲霉菌降解的壳寡糖与免疫荧光微粒标记的CD34+，CD41+，CD19+，CD4+HSC/HPC细胞共培养，利用流式细胞仪检测阳性细胞的数量。发现壳寡糖对于造血干/祖细胞有促进增生的作用，其机理可能是通过促进基质细胞分泌造血生长因子而实现的。

摘要： 本试验利用烟色曲霉菌降解的壳寡糖与免疫荧光微粒标记的CD34+，CD41+，CD19+，CD4+HSC/HPC细胞共培养，利用流式细胞仪检测阳性细胞的数量。发现壳寡糖对于造血干/祖细胞有促进增生的作用，其机理可能是通过促进基质细胞分泌造血生长因子而实现的。

摘要： 本试验利用烟色曲霉菌降解的壳寡糖与免疫荧光微粒标记的CD34+，CD41+，CD19+，CD4+HSC/HPC细胞共培养，利用流式细胞仪检测阳性细胞的数量。发现壳寡糖对于造血干/祖细胞有促进增生的作用，其机理可能是通过促进基质细胞分泌造血生长因子而实现的。

摘要： 本试验利用烟色曲霉菌降解的壳寡糖与免疫荧光微粒标记的CD34+，CD41+，CD19+，CD4+HSC/HPC细胞共培养，利用流式细胞仪检测阳性细胞的数量。发现壳寡糖对于造血干/祖细胞有促进增生的作用，其机理可能是通过促进基质细胞分泌造血生长因子而实现的。

摘要： 小鼠乳腺原基中干细胞以及其他不同细胞类群的定位,对于乳腺发生发育模式以及有关机理的揭示具有重要意义.本文利用双色免疫荧光结合confacol显微扫描技术,应用Sca-1、Cytokeratin、Muc-1、CD34和CD10抗体对小鼠乳腺原基中干细胞以及不同细胞成分进行了定位,并用细胞流式技术进行了验证和分析.结果显示,Cytokeratin可以显示原基轮廓,以此为参照,Sca-1、Muc-1和CD34阳性细胞分别定位于原基近边缘区域、中部、颈部周围,而CD10散布于乳腺原基中.流式分析显示Cytokeratin、Sca-1、Muc-1、CD10阳性细胞数量分别5.85％、17.85％、0.74％、0.76％.由此可推测干细胞可能定位于原基的近边缘区域,其子代细胞一部分向原基边缘迁移分化形成肌上皮,另一部分向原基内部分化,并通过细胞凋亡形成乳腺腔上皮.

摘要： 本发明公开一种流式细胞仪、粒子分析装置以及流式细胞术。流式细胞仪具备：流通池，流入包含被检粒子的试样；光源；照射光学系，对所述流通池的粒子流照射来自光源的光；以及检测部，检测通过光的照射而从粒子流产生的光。照射光学系具备一方的面由光轴对称非球面构成且另一方的面由圆柱面构成的聚光透镜。

摘要： 本发明涉及用于磁流式细胞仪的盒（1），其主要在x‑y‑平面中延伸，其具有用于将样本（15）注射到盒（1）中的入口（2）、用于带有磁性标记以标记样本（15）中的预先给定颗粒（16、16'）的缓冲溶液（21）的泡形罩（3）、出口、及流体通道（9），流体通道（9）包括连接入口（2）与泡形罩（3）的第一部分和连接第一部分与出口的第二部分，其中，流体通道（9）的第二部分包括富集区（5）和在富集区（5）和出口之间的测量区（6），富集区（5）带有机械引导结构，以将样本（15）中的已标记颗粒（16、16'）聚集在流体通道（9）的预定分区中，测量区（6）包括在流体通道（9）的预定分区中的磁场传感器（14），以便提供用于测量样本中的颗粒，尤其是颗粒的浓度的简化且加速的器件。

摘要： 一种光学引擎，用于台式流式细胞仪，该光学引擎具有一组激光器，每个激光器沿x轴水平聚焦到相同的水平位置，沿流动池的相同激发平面沿y轴垂直聚焦到不同的垂直位置，一组光学器件，根据激发荧光的不同激光，将相同波长范围的荧光分离到收集光学器件的焦平面中的不同位置；以及检测器，选择性地从不同的位置检测光，从而根据不同的激光器激发在相同波长范围内发射的荧光之间的区分。

摘要： 流式细胞术研究和流式细胞术结果分析，以使用流式细胞计确定目标样本流体库存的流式细胞术研究的优化稀释因数范围。可以使用流式细胞术系统的筛选化验模块确定优化稀释因数范围，以分析确定的流式细胞术结果落入流式细胞计的动态范围内，从而确定给定流式细胞计的优化稀释因数范围，以研究给定目标样本流体库存。进而，可以执行效价化验模块以基于在优化稀释因数范围内提供的优化的目标流体样本准备颗粒效价结果。筛选化验模块和/或效价化验模块可以提供具有数据通知和确认的自动化数据处理，以提供鲁棒的数据分析。

摘要： 本发明涉及用于磁流式细胞仪的盒（1），其主要在x‑y‑平面中延伸，其具有用于将样本（15）注射到盒（1）中的入口（2）、用于带有磁性标记以标记样本（15）中的预先给定颗粒（16、16'）的缓冲溶液（21）的泡形罩（3）、出口、及流体通道（9），流体通道（9）包括连接入口（2）与泡形罩（3）的第一部分和连接第一部分与出口的第二部分，其中，流体通道（9）的第二部分包括富集区（5）和在富集区（5）和出口之间的测量区（6），富集区（5）带有机械引导结构，以将样本（15）中的已标记颗粒（16、16'）聚集在流体通道（9）的预定分区中，测量区（6）包括在流体通道（9）的预定分区中的磁场传感器（14），以便提供用于测量样本中的颗粒，尤其是颗粒的浓度的简化且加速的器件。

摘要： 本发明公开一种流式细胞仪、粒子分析装置以及流式细胞术。流式细胞仪具备：流通池，流入包含被检粒子的试样；光源；照射光学系，对所述流通池的粒子流照射来自光源的光；以及检测部，检测通过光的照射而从粒子流产生的光。照射光学系具备一方的面由光轴对称非球面构成且另一方的面由圆柱面构成的聚光透镜。

摘要： 本发明提供一种流式细胞仪液路系统，包括：流动室；样本液供给模块，其包括进样针、第一柱塞泵、第一三通阀、样本液供给管路；第一三通阀进口端与进样针通过样本液供给管路相连，其两个出口端通过样本液供给管路分别与流动室、第一柱塞泵相连；鞘液供给模块，其包括鞘液桶、第二三通阀、定量泵、滤芯、加热装置、鞘液供给管路；定量泵分别与鞘液桶、滤芯顶部相连；加热装置分别与滤芯底部、流动室相连；第二三通阀设置于定量泵与鞘液桶相连的鞘液供给管路上，用以在鞘液供给过程中在滤芯顶部存储空气；取样模块；清洗模块。本发明还提供一种流式细胞仪。通过改进样本液供给模块及鞘液供给模块的液路结构设计，以提高样本液及鞘液流动的稳定性。

摘要： 本发明公开一种流式细胞检测液路系统，涉及细胞检测领域。该流式细胞检测液路系统包括流动室外壳体、细胞悬液输送管和鞘液输送管。该流式细胞检测液路系统在进行使用时，设置的流式细胞检测液路系统中设有鞘液质量检测盒体，鞘液质量检测盒体能够对鞘液输送管内部的鞘液进行检测，减少检测数据的不准确性，该液路系统整体结构较为成熟，设置的混合管能够保证鞘液与细胞悬液的混合效果好，在鞘液受到压力进入混合管后，鞘液输送管与混合管呈倾斜角度，因此鞘液产生涡旋，并最终向下运动，与细胞悬液输送管底部输送的细胞悬液混合形成鞘流，细胞悬液位于中心位置，使得鞘液对细胞悬液的周围进行包裹。

摘要： 本发明公开了一种流式细胞分选仪的照明系统和流式细胞分选仪，其中，所述流式细胞分选仪的照明系统包括光源单元和光束整形单元，所述光束整形单元位于所述光源单元的出射光线的传播路径上；所述光束整形单元包括柱面非球面透镜组，所述柱面非球面透镜组包括第一圆锥面和第二圆锥面；所述第一圆锥面具备第一光焦度所述第二圆锥面具备第二光焦度其中采用上述技术方案，通过设置柱面非球面透镜组包括两个圆锥面，且通过合理设置两个圆锥面的光焦度可以保证光源单元发出的光束经光束整形单元后得到平顶椭圆光束，且平顶椭圆光束的光斑面积较大，保证细胞或微粒检测精确度高；同时可以保证出射激光的能量利用率较高。

摘要： 本发明公开了一种流式细胞分选仪的照明系统和流式细胞分选仪，流式细胞分选仪的照明系统包括光源模块和光束能量分布调整模块；所述光源模块用于产生出射光束；所述光束能量分布调整模块包括变倍扩束单元和光束整形单元，所述变倍扩束单元用于对所述出射光束进行扩束处理得到扩束光束，且所述变倍扩束单元的扩束倍率可调；所述光束整形单元用于根据所述扩束光束的光束口径调整所述扩束光束的能量分布。通过变倍扩束单元得到光束口径不同的扩束光束，再经过光束整形单元得到能量分布不同的照明光斑，例如高斯光斑、类高斯光斑和平顶光斑，针对不同的探测样品采用不同的照明光斑进行探测，可以降低照明系统的功耗，增加照明系统的普适性。