丝裂原激活蛋白激酶类

摘要： MAPK信号通路可介导多种细胞因子参与炎症、癌症、免疫紊乱和神经退行性疾病等过程,其在肝棘球蚴病发生发展过程中也发挥重要作用。本文回顾了MAPK信号通路的结构及调节过程,重点阐述了肝棘球蚴病中MAPK信号通路的作用,即MAPK信号通路在肝棘球蚴病中存在虫体与宿主的双重激活,参与了疾病的发生、发展过程,并对其治疗产生影响,以MAPK信号通路为靶点的药物治疗有望成为肝棘球蚴病治疗新的策略。

摘要： 目的探究氧化应激对晶状体上皮细胞(HLECs)水通道蛋白(AQPs)表达的影响及其机制。方法取健康人群和白内障病人的晶状体前囊膜,应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫组织化学染色方法检测两组AQP1和AQP5表达与分布情况。应用RT-PCR方法检测不同浓度的H_(2)O_(2)作用HLECs不同时间后AQP1和AQP5 mRNA表达情况;用400μmol/L的H_(2)O_(2)刺激HLECs不同时间,Westernblot方法检测AQP1和AQP5蛋白表达,RT-PCR和Westernblot分别检测丝裂酶原激活的蛋白激酶(MAPK)抑制剂联合H_(2)O_(2)(400μmol/L)共同作用于HLECs后AQP1和AQP5的mRNA与蛋白的表达情况。结果白内障组晶状体前囊膜中AQP1和AQP5的mRNA表达与分布明显低于健康组(t=10.71、5.46,P0.05)。结论氧化应激使HLECsAQP1和AQP5表达下降;在氧化应激条件下,MAPK(p38和ERK)途径参与AQP1表达调控,但MAPK途径不参与AQP5的表达调控。

摘要： 目的 探讨人丝裂原激活蛋白激酶3(MAPK3)基因原核表达载体的构建及鉴定.方法 取对数生长期正常人肝细胞系HL-7702细胞,采用TRIzol法抽提细胞总RNA,以此为模板用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)反转录扩增MAPK3基因的蛋白编码区,脱氧核糖核苷酸(DNA)测序鉴定后插入原核表达载体pGEX-4t-1中构建重组原核表达质粒(命名为pGEX-MAPK3GST);将pGEX-MAPK3GST导入细菌Rosetta(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达MAPK3融合蛋白(GST-MAPK3),采用Sepharose 4B亲和层析法纯化MAPK3融合蛋白(GST-MAPK3),采用考马斯亮蓝染色和蛋白免疫印迹分析GST-MAPK3的蛋白纯度和验证目的蛋白.结果 RT-PCR法成功克隆了人MAPK3基因的蛋白编码区,DNA测序结果显示该片段无任何突变;用克隆获得的基因片段成功构建了pGEX-MAPK3GST,通过原核表达的方式获得了GST-MAPK3,并通过亲和层析纯化了GST-MAPK3.结论 成功克隆人MAPK3基因并获得MAPK3蛋白,可用于体外研究MAPK3对细胞角蛋白18(CK18)的磷酸化作用.

摘要： 目的探讨人丝裂原激活蛋白激酶3(MAPK3)基因原核表达载体的构建及鉴定。方法取对数生长期正常人肝细胞系HL-7702细胞,采用TRIzol法抽提细胞总RNA,以此为模板用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)反转录扩增MAPK3基因的蛋白编码区,脱氧核糖核苷酸(DNA)测序鉴定后插入原核表达载体pGEX-4t-1中构建重组原核表达质粒(命名为pGEX-MAPK3_(GST));将pGEX-MAPK3_(GST)导入细菌Rosetta(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达MAPK3融合蛋白(GST-MAPK3),采用Sepharose 4B亲和层析法纯化MAPK3融合蛋白(GST-MAPK3),采用考马斯亮蓝染色和蛋白免疫印迹分析GST-MAPK3的蛋白纯度和验证目的蛋白。结果RT-PCR法成功克隆了人MAPK3基因的蛋白编码区,DNA测序结果显示该片段无任何突变;用克隆获得的基因片段成功构建了pGEX-MAPK3_(GST),通过原核表达的方式获得了GST-MAPK3,并通过亲和层析纯化了GST-MAPK3。结论成功克隆人MAPK3基因并获得MAPK3蛋白,可用于体外研究MAPK3对细胞角蛋白18(CK18)的磷酸化作用。

摘要： 目的 评价依达拉奉抑制大鼠压力超负荷致心肌重构形成与血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1 R)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)/类固醇合成急性调节蛋白(StAR)信号通路的关系.方法 清洁级健康雄性SD大鼠36只,2月龄,体重200 ～ 220 g,采用随机数字表法分为3组(n=12):假手术组(S组)、压力超负荷组(POL组)、依达拉奉组(E组).采用结扎胸主动脉8周的方法制备心脏压力超负荷模型.结扎血管后,POL组每日腹腔注射0.9％氯化钠10 ml/kg,E组每日腹腔注射依达拉奉10 mg/kg,连续8周.于模型制备成功后,采用二维超声仪测定左室射血分数(EF)、心室缩短分数(FS);放血处死大鼠取心脏,称重后计算心重/体重(HW/BW)比值,取心肌组织,HE染色后测定心肌细胞横截面积(MSA),采用Masson染色法测定胶原容积分数(CVF),采用免疫组化法测定AT1R和StAR表达,采用Western blot法测定细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和p38 MAPK磷酸化水平(p-ERK1/2/ERK1/2比值、p-p38 MAPK/p38 MAPK比值),采用ELISA法测定醛固酮含量.结果 与S组比较,POL组HW/BW比值、MSA和CVF升高,EF和FS降低,AT1R和StAR表达上调,p-ERK1/2/ERK1/2比值、p-p38 MAPK/p38 MAPK比值和醛固酮含量升高(P＜0.05);与POL组比较,E组HW/BW比值、MSA和CVF降低,EF和FS升高,AT1R和StAR表达下调,p-ERK1/2 /ERK1/2比值、p-p38 MAPK/p38 MAPK比值和醛固酮含量降低(P＜0.05).结论 依达拉奉抑制大鼠压力超负荷致心肌重构形成的机制可能与抑制AT1 R/MAPKs/StAR信号通路激活有关.

摘要： 目的探究吉非替尼调控丝裂原激活的蛋白激酶(MEK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路对神经胶质瘤细胞移植瘤生长的影响及机制。方法通过皮下注射U87细胞的方法构建胶质瘤裸鼠模型,建模成功后将30只小鼠随机分为对照组、吉非替尼组和联合组(吉非替尼+MEK/ERK通路抑制剂PD98059),每组10只。建模28 d测量肿瘤体积和质量,通过检测Ki67、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)分析增殖水平,TUNEL染色检测凋亡。免疫组织化学染色检测CD34和血管内皮生长因子(VEGF)评估微血管密度和血管生成能力。并分析各组MEK和ERK mRNA和蛋白水平。结果吉非替尼组和联合组建模28 d肿瘤体积和质量明显低于对照组,且联合组建模28 d肿瘤体积和质量明显低于吉非替尼组(P<0.05)。吉非替尼组和联合组凋亡指数明显高于对照组[(18.54±2.75)%、(28.82±3.91)%vs(4.64±0.75)%,P<0.05],且联合组凋亡指数明显高于吉非替尼组(P<0.05)。吉非替尼组和联合组Cyclin D1、Ki67、微血管密度、VEGF表达明显低于对照组,且联合组Cyclin D1、Ki67、微血管密度、VEGF表达明显低于吉非替尼组(P<0.05)。吉非替尼组和联合组MEK、ERK mRNA和蛋白表达明显低于对照组,且联合组MEK、ERK mRNA和蛋白表达明显低于吉非替尼组(P<0.05)。结论吉非替尼可能通过MEK/ERK通路抑制胶质瘤细胞的增殖和血管生成,并诱导凋亡,从而起到抑制胶质瘤的作用。

摘要： 恶性黑色素瘤是因黑色素细胞突变产生的肿瘤,早期可通过手术或放、化疗治疗,对于发生转移或晚期的恶性黑色素瘤可采用分子靶向治疗.目前可通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂、磷酸酰肌醇3-激酶/蛋白激酶(PI3K/Akt)抑制剂、酪氨酸激酶受体(TKR)抑制剂和血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂来治疗恶性黑色素瘤.其中曲美替尼等MEK抑制剂已应用于临床中且疗效显著,但长期使用单一靶向药物会产生耐药性,可采用联合应用靶点药物治疗,进而为恶性黑色素瘤的分子靶向治疗提供更多可能.

摘要： 本发明涉及一种化合物以及一种用于抑制或治疗受试者HIV感染的方法。所述化合物为AMP-激活蛋白激酶(AMPK)的激活剂或这些激活剂的药学上可接受的盐或其衍生物。所述AMPK的激活剂包括二甲双胍、盐酸二甲双胍和AICAR。二甲双胍和AICAR的分子式如下。

摘要： 本发明涉及一种用作人源腺苷单核苷酸激活蛋白激酶(AMPK)激活剂的小分子有机化合物。该类化合物可用于预防、延缓或治疗由AMPK介导的病症，特别是II型糖尿病、肥胖症和肿瘤。本发明还涉及该化合物的制备方法。另外本发明还涉及了该化合物在激活人源腺苷单核苷酸激活蛋白激酶中以及促进胞内葡萄糖吸收的应用和在制备治疗代谢性疾病的药物中的应用。

摘要： 本发明公开了一个与有丝分裂原激活蛋白激酶p38相互作用的蛋白及其编码基因与应用。其目的是提供一个与有丝分裂原激活蛋白激酶p38相互作用的蛋白及其编码基因与其在制备与有丝分裂原激活蛋白激酶p38信号通路相关疾病的治疗性药物中的应用。该蛋白的氨基酸残基序列如序列表中的SEQ ID №：1所示。本发明在医学和生物制药领域具有较大的实际意义和广阔的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种三七丝裂原活化蛋白激酶激酶基因

摘要： 本发明公开了一个与有丝分裂原激活蛋白激酶p38相互作用的蛋白及其编码基因与应用。其目的是提供一个与有丝分裂原激活蛋白激酶p38相互作用的蛋白及其编码基因与其在制备与有丝分裂原激活蛋白激酶p38信号通路相关疾病的治疗性药物中的应用。该蛋白是具有下述氨基酸残基序列之一的蛋白质：1)序列表中的SEQ ID №：1；2)将序列表中SEQ ID №：1的氨基酸残基序列经过一至十个氨基酸残基的取代、缺失或添加且与有丝分裂原激活蛋白激酶p38相互作用，并对其具有调控作用的蛋白质。本发明在医学和生物制药领域具有较大的实际意义和广阔的应用前景。

摘要： 本发明属于分子诊断技术领域。为解决现有技术中存在的肿瘤细胞的恶化转移过程尚不清楚，不能为肿瘤转移及预后诊断提供诊断依据的技术问题，本发明提供一种腺苷酸激活蛋白激酶AMPK作为肿瘤转移及预后诊断的生物标志物的用途，AMPKα1作为肿瘤转移及预后诊断的生物标志物的用途。本发明通过实验证明癌信号(包括PI3K,Ras及Her2)抑制AMPKα1在恶性肿瘤中的蛋白表达与临床数据十分吻合，从而证实AMPKα1在恶性肿瘤中显著低表达是恶性肿瘤转移的关键因素，从而将AMPKα1的基因表达水平作为肿瘤转移的诊断和预后的重要指标，可以将AMPKα1作为肿瘤转移及预后诊断的生物标志物来应用。

摘要： 本发明揭示用于鉴别治疗生发中心激酶(GCK)类激酶(GLK)介导的疾病的治疗剂的方法。揭示用于侦测以化合物调节GLK信号传导的方法。也揭示用于侦测自体免疫疾病及/或癌症的存在及/或严重程度的方法。

摘要： 本发明公开了一种三七丝裂原活化蛋白激酶激酶基因PnMAPKK1，PnMAPKK1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，编码丝裂原活化蛋白激酶激酶，本发明通过功能基因组学相关技术研究证实PnMAPKK1基因具有提高植物对病原真菌抗性的功能，将本发明抗真菌基因PnMAPKK1构建到植物表达载体上并转入烟草中过量表达，转基因烟草植株具有很强的体外抗真菌活性；PnMAPKK1超表达的转基因烟草对茄腐镰刀菌、胶孢炭疽菌、轮枝镰刀菌和葡萄座腔菌的生长均具有明显的抑制作用。

摘要： 发现了丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的新的磷酸化位点。在所述磷酸化位点磷酸化的MAPKs能够被用作由MAPKs介导的病理状态的诊断标记。

摘要： 本发明涉及获得单体形式的重组凝血酶原激活蛋白酶(rLopap)的方法；重组凝血酶原激活蛋白酶(rLOPAP)及其氨基酸序列。此外，本发明还涉及这种蛋白酶用于消除血液纤维蛋白原以及用作凝血酶原血异常诊断试剂盒的用途。本发明描述了21kDa的重组形式的凝血酶原激活蛋白酶的获得和表征，该蛋白酶被命名为rLopap(Lonomiaobliqua凝血酶原激活蛋白酶)，具有丝氨酸蛋白酶特征，不过它显示出如同lipocalin家族的保守氨基酸序列。该蛋白表现出促凝血活性，消除血液中的血纤维蛋白原并延长人血液/血浆的凝固时间。本发明介绍了重组形式的rLopap的获得，该rLopap显示出足够的活性以便进行临床药理学测定。