摘要:
本文主要对酪蛋白酶解制备抗氧化肽的工艺进行优化,采用小鼠试验对酪蛋白抗氧化肽的体外、体内抗氧化活性进行了研究,并测试了其耐消化、耐酸碱、耐热及储存稳定性.通过单因素试验,优化得到酪蛋白胰蛋白酶水解的最佳工艺为:底物浓度[S]为50 mg/mL,加酶量吲/[S]为4%,温度50°C,pH为7.5,水解时间120 min.最优酶解条件下,水解度为30.1%,1,1-二苯基-2-苦基肼基自由基(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为68.1%.此酪蛋白胰蛋白酶水解物(Casein trypsin hydrolysate,CTH)对羟自由基(·OH)和一氧化氮自由基(NO·)也有着较好的清除效果,并且具有浓度相关性,当多肽浓度为10 mg/mL时,对二者的清除率分别达到45.2%和61.5%;另外,其对超氧阴离子自由基(O2-·)及亚铁离子(Fe2+)诱发的卵黄脂蛋白脂质过氧化都具有一定的清除和抑制能力.小鼠试验表明,饲养3d后,相比于模型组,CTH组小鼠的血清、肝、脑中谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的活性显著升高,而丙二醛(Malonaldehyde,MDA)含量显著降低.稳定性试验证明酪蛋白酶解产物具有良好的耐消化、耐热、耐酸碱和储藏稳定性,体现了其作为抗氧化功能原料的良好应用潜力.