CHO

摘要： 目的:探讨MRS(磁共振波普)技术在非海马硬化颞叶癫痫患者诊断中的应用价值.方法:研究共选择25例非海马硬化颞叶癫痫患者作为观察组,选择25例健康体检者作为对照组,均为本院2018年1月至2019年12月期间接收,均行常规MR平扫及MRS检查,获得NAA/Cr、Cho/Cr值,比较两组检测结果,比较患侧海马与健侧海马检测结果.结果:观察组患侧NAA/Cr显著低于观察组健侧、对照组,P＜0.05 ;观察组健侧与对照组NAA/Cr比较无统计学意义,P＞0.05 ;观察组患侧Cho/Cr与观察组健侧、对照组比较均无统计学意义,P＞0.05 ;10例手术治疗患者中9例轻度神经元缺失,胶质增生不明显,1例中度神经元缺失及轻度神经胶质细胞增生,治疗有效率为90.00%.结论:在非海马硬化颞叶癫痫诊断中加强MRS技术应用可实现对致痫灶的定位,观察到神经元病理变化和代谢物功能紊乱,评估病情程度,应用价值较高.

摘要： 旨在调控单抗生物类似药的糖基化分布,使其与原研药一致.通过全因子设计试验考察不同浓度的半乳糖、尿苷、氯化锰和蛋白水解物对单抗糖基化修饰的影响.结果 表明,半乳糖、尿苷及氯化锰均能提高单抗半乳糖基化,且对细胞生长和单抗产量无明显影响.此外尿苷和氯化锰还能降低五聚高甘露糖型(Man5),但过量的尿苷会导致Man5增高.而蛋白水解物除了能降低Man5,提高单抗岩藻糖基化外,对细胞生长也有促进作用.选取模型预测的最优条件进行反应器培养验证,最终的单抗糖基化分布符合预期,成功建立CHO细胞单抗糖基化调控的生产策略.

摘要： 在被归入韩国产业银行(KDB)管理之后,韩进重工或将成为下一个并购目标。韩国造船业的格局又将面临一个大变化。2月28日,韩进重工发布公告称,为了提升其财务状况,韩进重工将收回86.3%的已发行股票,包括韩进重工业控股(HHICH)持有的全部30.98%股份以及董事长Cho Nam-ho持有的0.5%的股价。

摘要： 顶层创新的好处是:一旦创新,面会铺的很广战略方向可以做的很庞大,还能让各个业务单位互相协同平安是什么?这个问题变得越来越难回答。曾经它是一家以保险业务起步的综合金融集团,但是随着近年来,''金融+生态''、''金融+科技''等战略的陆续实施,平安的业务越来越多元,越来越跨界了。这家公司像三级发动机启动之后的火箭一样,高速增长。根据刚刚公布的2018年年报,中国平安的总资产达到7.14万亿元.

摘要： 大师档案：曹敏硕,韩国著名建筑师,亚洲建筑设计新生代的代表人物。作为韩国甚至亚洲最受瞩目的年轻建筑师,虽然曹敏硕接受了美国的建筑教育,但是在他身上和他的作品里依然能够鲜明地看出韩国的民族属性、亚洲的文化情怀。可以说,他的设计态度,呈现了新一代亚洲建筑设计师鲜明的个性。

摘要： 一、教学目标知识与技能:1.以甲醛和乙醛为典例,认识醛的组成和结构特点,知道醛类物质的官能团是醛基。2.理解两种重要的有机反应类型:氧化反应和还原反应,并学会判断反应类型。3.以乙醛为醛类的典型代表物,理解并掌握醛类的化学性质。过程与方法:通过实验探究的方法,掌握乙醛的化学性质。情感、态度、价值观:1.了解乙醛在日常生活中的重要应用。2.了解甲醛在日常生活中的应用及其对环境造成的影响。二、教学重难点教学重点:乙醛的结构和化学性质。教学难点:乙醛氧化反应的实验探究。

摘要： 为什么有的CEO给CHO打9分，有的CEO只给CHO打了6分？事实上，这不是一个简单的互不理解的难题，而是一个老生常谈的“屁股决定脑袋”的问题。一个组织将HR放到什么样的战略位置上，也自然会产生不同的结果。CEO眼中中的CHO 主持人：凌总，为什么你只给CH04T6分？HR该如何做好组织的战略解读？ 凌云剑：目前，人力资源部在战略解读和执行上，还存在两张皮的现象。比如，我们经过一定的民主集中之后形成的战略系统，应该在规定时间到达我们要去到的地方，但实际上这条路走得比较长，尽管最后是到达了,但时间已严重拖延。

摘要： “你们对企业内部的人力资源一把手（HRD、CHO、HRVP）满意吗？”2013年之前，95％以上的老板都回答我，满意。如今，我再把同样的问题对老板一抛，95％以上的老板告诉我：不满意。甚至有的老板说，就是HRVP（人力资源副总裁）阻碍了我的发展!老板要HR推动经营，但HR说我只有“选、用、育、留”。老板不乐意了，HR还撒娇。翻译过来，就类似小两口吵架，以前HRD只负责貌美如花，现在老板则要求负责养家。

摘要： 作者研究了壳聚糖和pH对中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary,CHO)培养液料液澄清过程的影响.初步探索了在CHO细胞收获液(pH 7.0)中添加0～0.10 g/dL壳聚糖对0.22μm膜过滤通量的影响.结果显示,添加0.06 g/dL壳聚糖时膜过滤通量最大,达到8 266.22 L/(m2·h).探索了pH值(5.0～7.0)对收获液澄清效率的影响,研究发现,不添加壳聚糖的情况下降低培养液pH值对膜过滤通量没有十分显著的提高.为更多地去除宿主细胞蛋白(Host Cell Protein,HCP)和残留DNA,作者研究了pH值与壳聚糖对膜过滤通量及残留杂质的交互影响.结果表明,pH为5.0壳聚糖质量浓度为0.06 g/dL时滤出液中残留DNA几乎完全去除,HCP含量降低50％以上,而抗体的回收率不受影响.%Chitosan is a natural,non-toxic and biodegradable flocculant.This study focused on determining and optimizing the clarification process efficiency in the presence of various concentrations (0～ 0.10 g/dL) of chitosan at different pH 5.0～7.0 for the harvested Chinese hamster ovary (CHO) cell culture fluid (HCCF) (pH 7.0).Following HCCF was treated with 0.06 g/dL chitosan,the filtration flux was achieved up to 8 266.22 L/(m2·h) using 0.22 μm filter.In addition,the result showed that similar filtration flux for HCCF at different pH without chitosan addition whereas increasing filtration flux was achieved when HCCF pre-treated with chitosan at decreasing pH.To further improve this clarification process,the combined effect of various concentrations of chitosan at different pH on the filtration flux and the removal of process impurities including host cell proteins (HCP) and residual DNA in HCCF was evaluated.The result of a full factorial experiment including two factors and three levels (chitosan at 0.02,0.04,0.06％ and pH at 5,6,7)showed that 90％ antibody product yield with nearly complete removal of residual DNA and 50％more reduction of HCP were obtained when HCCF pre-treated with the optimal 0.06 g/dL chitosan at pH 5.0.

摘要： This paper focuses on the effect of the later hydrotherm on uraniferous leucogranites and the stages of uranium mineralization. Here, we review C-H-O stable isotope, elements and fluid geochemistry of uraniferous leucogranites in Gaudeanmus, Namibia. The results show that there is significant increasing amount of rare earth element from non-mineralized to uraniferous leucogra-nites, indicating the synchronization of REE enrichment and uranium mineralization. Uranium enrichment may have close relations with Pb, Th, Co, Ni, REE in this region, so REE and U evidently exist homology. There are at least two stages of uranium mineralization by later hydrothermal alteration: firstly, due to magnatic residual high temperature and low salinity fluid, the temperature of main metallogenetic epoch ranges from 470°C to 530°C, salinity ranges from3.55% to 9.60% NaCleq, and C, H, O stable isotope is -23‰ - -13.6‰, -53.3‰ - -46.4‰, 7.71‰ - 8.81‰, respectively. Secondly, due to superim-posed hydrothermal fluid, the temperature, salinity, and C, H, O stable isotope is 150°C - 220°C, 4.65% - 19.05% NaCleq, -20.3‰ -?-3.7‰, -64.7‰ - -53.6‰, 1.49‰ - 1.99‰, respectively. The fluid for reformation is derived from postmagmatic fluid, mixed with a number of meteoric water.

摘要： 本发明公开了一种CHO细胞株及其制备方法和使用该CHO细胞株制备猪圆环病毒2型Cap蛋白及其应用，所述制备CHO细胞株方法包括：1)将密码子优化后的猪圆环病毒2型Cap蛋白基因克隆到真核表达载体中得到含有猪圆环病毒2型Cap蛋白编码基因的重组质粒；2)再将含有猪圆环病毒2型Cap蛋白编码基因的重组质粒转染至CHO细胞中；3)通过培养、筛选、驯化2)中所述的CHO细胞株得到高度表达的细胞株。所述使用该CHO细胞株制备猪圆环病毒2型Cap蛋白的方法为发酵培养所述的细胞株，纯化后得到重组猪圆环病毒2型Cap蛋白。使用该CHO细胞株制备猪圆环病毒2型Cap蛋白具有可工业化生产、成本低、质控容易，且制备的蛋白具有免疫效果好的优点。

摘要： 本发明公开了一种用于提高CHO细胞的表达效率的CRISPR‑Cas13d系统以及采用该系统制备得到的重组CHO细胞。本发明提供了用于抑制AMPK基因表达的物质在促进CHO细胞表达外源蛋白中的应用。本发明保护sgRNAAMPK‑1，其靶序列结合区如序列3中第1至21位核苷酸所示。本发明保护一种特异重组质粒，其表达所述sgRNAAMPK‑1和Cas13d蛋白。本发明保护表达sgRNAAMPK‑1和Cas13d蛋白的重组慢病毒。本发明的发明人通过CRISPR/Cas13d系统有效抑制了CHO细胞中的AMPK基因表达，得到了重组CHO细胞,表达外源蛋白的能力极其显著的提高,可以作为生物反应器大大提高生物制品的产量。本发明对于生物制药领域具有巨大的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种用于促进CHO细胞悬浮的CRISPR‑Cas13d系统以及重组CHO细胞。本发明提供了用于抑制IGFBP4基因表达的物质的应用，为如下：促进CHO细胞增殖；促进CHO细胞悬浮；促进CHO细胞由贴壁细胞向悬浮细胞转化。本发明还保护sgRNAIGFBP4‑1，其靶序列结合区如序列3中第1至22位核苷酸所示。本发明还保护表达sgRNAIGFBP4‑1和Cas13d蛋白的重组慢病毒。本发明的发明人筛选特定的靶点，设计了特定的sgRNA，通过CRISPR/Cas13d系统有效抑制了CHO细胞中的IGFBP4基因表达，得到了重组CHO细胞CHO细胞适应悬浮生长的时间显著缩短，增殖能力和/或悬浮能力极其显著的提高。本发明对于生物制药领域具有巨大的应用前景。

摘要： 本发明属于重组蛋白筛选系统的构建领域，具体涉及一种CHO细胞蛋白表达系统用表达载体及CHO细胞的筛选方法。本发明的表达载体含有启动子、F2A序列和Poly A序列，在所述F2A序列的上游插入有目的基因，下游插入有荧光标记和筛选标记融合基因；所述F2A序列的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明的上述表达载体，下游荧光标记基因的表达与上游目的基因的表达呈正相关，可利用荧光显微镜直观观察荧光标记基因的表达量，进而可以通过荧光强度强弱确定生长旺盛、表达量高的细胞株，利用半固体培养基更能方便该类细胞株的克隆筛选。

摘要： 本申请公开了一种松针提取物在制备CHO细胞培养液中的应用和CHO细胞培养方法。本申请创造性地采用松针提取物优化化学限定CHO培养基，发现不同松针提取物在培养后期均会延缓CHO细胞死亡，提高CHO细胞活率；在一定浓度下，松针提取物能够减少单抗的酸性物种变体，增加了单抗的碱性物种变体，有利于抗体蛋白发挥功能和有效性；对于不同糖型的单抗糖基化产生了不同的影响，有利于控制蛋白质糖基化，以更好地靶向特定的寡糖结构；低浓度松针提取物会使单抗的EC50值有所增加，在一定程度内提高了药物的安全性。

摘要： 本发明提供了一种高效表达外源蛋白的CHO细胞构建方法，其中，该方法包括：克隆、重组一系列外源蛋白基因的表达质粒，该表达质粒分别逐一包含前置的13种信号肽及该外源蛋白基因；转染CHO细胞，根据表达量筛选出该外源蛋白表达量最高的前置信号肽序列，构建该信号肽序列和外源蛋白基因的表达质粒，然后转染CHO细胞，逐步筛选稳定表达外源蛋白的单克隆细胞。本发明还涉及该方法构建的高效表达外源蛋白的CHO细胞和使用该细胞表达外源蛋白的方法。本发明的方法能较常规表达显著提高蛋白表达含量，且可应用于多种外源蛋白的表达，无需对外源蛋白的基因进行优化，具有广泛的适用范围。

摘要： 本发明公开了一种CHO细胞株及其制备方法和使用该CHO细胞株制备猪圆环病毒2型Cap蛋白及其应用，所述制备CHO细胞株方法包括：1)将密码子优化后的猪圆环病毒2型Cap蛋白基因克隆到真核表达载体中得到含有猪圆环病毒2型Cap蛋白编码基因的重组质粒；2)再将含有猪圆环病毒2型Cap蛋白编码基因的重组质粒转染至CHO细胞中；3)通过培养、筛选、驯化2)中所述的CHO细胞株得到高度表达的细胞株。所述使用该CHO细胞株制备猪圆环病毒2型Cap蛋白的方法为发酵培养所述的细胞株，纯化后得到重组猪圆环病毒2型Cap蛋白。使用该CHO细胞株制备猪圆环病毒2型Cap蛋白具有可工业化生产、成本低、质控容易，且制备的蛋白具有免疫效果好的优点。

摘要： 本发明涉及一种CHO细胞的瞬时转染方法及重组CHO细胞。该瞬时转染方法包括如下步骤：以细胞密度、转染试剂的添加量、含目的基因的质粒的添加量为因素，以目的基因的表达量和转染效率为响应变量，进行三因子九水平的均匀设计，获得瞬时转染工艺参数；根据瞬时转染工艺参数，以质粒的添加量和转染试剂的添加量为因素，以目的基因的表达量和转染效率为响应变量，进行二因子的正交设计，获得包含CHO细胞悬液的细胞密度、转染试剂的添加量以及质粒的添加量的瞬时转染条件；及根据瞬时转染条件，向CHO细胞悬液中加入转染试剂和质粒进行瞬时转染，培养，得到重组CHO细胞。上述瞬时转染方法兼具较高转染效率和较高目的基因表达量。

摘要： 本发明涉及通过在CHO细胞株中稳定过表达Creb3L1基因提高CHO细胞分泌能力。主要利用谷氨酰胺合成酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞(CHO‑GS‑/‑)为宿主细胞，转染外源包含Creb3L1序列的真核表达载体，经压力筛选后得到定点插入的稳定高效表达Creb3L1蛋白的CHO细胞株。通过本方法获得的CHO‑Creb3L1细胞提高了CHO细胞的分泌能力，可用于生产，提高蛋白产量。

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种提高CHO细胞重组蛋白表达水平的方法。包括以下步骤：（1）将目的基因重组载体与含细胞周期调控相关基因p18和/或调控细胞生长的基因aFGF的共转基因重组载体共转染CHO细胞；所述基因p18的序列如SEQ ID NO:1所示；所述基因aFGF的序列如SEQ ID NO:2所示；（2）将共转基因重组载体和目的基因重组载体共转染到CHO细胞中后，培养并筛选，得到CHO细胞表达系统；（3）将瞬时和稳定转染CHO细胞株进行悬浮无血清培养，得到目的蛋白。本发明方法可以显著提高目的基因在CHO细胞中的表达水平，实现目的蛋白在CHO细胞的瞬时和稳定高水平表达。