毛状根

摘要： 通过查阅黄芩相关文献,对生物技术在黄芩中的应用进行综述,比较分析了黄芩的快速繁殖、愈伤组织的诱导和培养、毛状根的诱导和培养,内生真菌培养,采用生物技术方法获取黄芩活性成分黄芩苷或黄芩素,促进中药传承和创新发展,以期为利用黄芩生物技术富集黄芩苷提供一定的参考。

摘要： 以乌拉尔甘草毛状根为材料、总黄酮含量为指标,采用超声法提取,分别以提取溶剂、料液比、超声温度、超声时间为单因素,确定影响提取率的因素与水平,通过正交法优化,确定提取工艺的最佳条件。采用比色法测定比较3种甘草毛状根中总黄酮的含量,通过高效液相色谱法分析比较3种甘草毛状根中甘草苷、异甘草苷和光甘草定的含量。通过红细胞溶血和鸡胚绒毛尿囊膜试验、DPPH自由基与ABTS自由基清除试验和酪氨酸酶酶活抑制试验,分别比较3种甘草(乌拉尔甘草、光果甘草和胀果甘草)毛状根提取液的刺激性、体外抗氧化和抑制酪氨酸酶酶活的能力。结果表明,在溶剂为75%丙二醇、料液比1 g∶15 mL、超声温度50°C、超声时间40 min条件下,乌拉尔甘草毛状根总黄酮提取率最高,为1.25%。在3种甘草毛状根中,乌拉尔甘草毛状根中异甘草苷的含量最高,光果甘草毛状根中总黄酮、甘草苷和光甘草定的含量均最高;3种甘草毛状根提取液(浓度≤625 mg/L)对红细胞及鸡胚绒毛尿囊膜均无刺激性;3种甘草毛状根提取液清除DPPH自由基的半抑制浓度(IC_(50))依次为1100、570、540 mg/L,清除ABTS自由基的IC_(50)依次为740、230、590 mg/L;3种甘草毛状根提取液(浓度为625 mg/L)对酪氨酸酶活性抑制率依次为(49.5±2.3)%、(76.6±3.5)%、(17.95±4.5)%。在3种甘草毛状根中提取液光果甘草的抗氧化及美白护肤活性最好。

摘要： 通过L_(16)(4^(5))正交试验对生物碱提取工艺中的五个因素进行优化,建立一个有效的金铁锁毛状根生物碱分离提取方法;并使用大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、浑球链霉菌和铜绿假单胞菌作为指示菌对提取产物的抗菌活性进行评价。结果表明,最佳提取条件:以70%乙醇(pH 3.0)为提取剂、料液比30:1、提取时间120min、提取温度80°C,优化后生物碱得率最高为0.267%。此外,金铁锁毛状根中的生物碱对大肠杆菌和铜绿假单胞菌有一定的抗菌活性。

摘要： 为了探讨利用蒙药蒙古沙冬青毛状根生产其药用成分的可能性,本研究采用超高效液相色谱-串联四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术分别对蒙古沙冬青毛状根和自然根组织进行化学成分分析,并通过主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)等多元变量分析方法研究二者间的代谢产物差异。结果显示,蒙古沙冬青毛状根和自然根样本在正、负离子模式下分别得到3982和4209种代谢物,差异代谢物分别为1706和1639种,其中表达上调的代谢物分别有1455和1095种;注释到KEGG的差异代谢物有171和134种,主要富集在8大类65条代谢通路:氨基酸代谢、次生代谢产物生物合成、碳水化合物代谢、脂质代谢、辅助因子和维生素代谢、萜类和聚酮化合物代谢、能量代谢及核苷酸代谢等通路;蒙古沙冬青毛状根差异代谢产物主要集中在氨基酸代谢和次生代谢产物生物合成通路中,正离子模式下涉及的差异代谢物分别占37.4%和32.7%,负离子模式下占28.4%和26.1%;次生代谢产物生物合成途径中涉及黄酮/类黄酮生物合成、生物碱生物合成、β-内酰胺菌素生物合成、芥子油苷生物合成、苯丙烷代谢等11条代谢通路,其中黄酮/类黄酮生物合成途径涉及的差异代谢产物最多,占次生代谢产物生物合成途径中差异代谢物的34%,其次是有关生物碱生物合成的差异代谢物,占24%;黄酮/类黄酮生物合成途径中涉及的差异代谢物有88.2%呈现上调。本研究结果可为蒙古沙冬青毛状根代谢产物积累及途径解析提供理论依据。

摘要： 发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)的建立对植物功能基因的验证具有重要意义,为了在桉树(Eucalyptus)中建立发根农杆菌介导的遗传转化体系,本研究以不同的发根农杆菌菌株侵染尾巨桉(Eucalyptus urophylla×E.grandis)的叶片和茎段,确定合适的农杆菌菌株和外植体类型,在此基础上开展农杆菌浓度、侵染时间对毛状根诱导的影响。结果表明:采用发根农杆菌菌株MSU440,以叶片为外植体进行发根诱导,最高获得了81.0%的毛状根诱导率,毛状根平均根长达到3.23 cm。在发根农杆菌浓度为OD_(600)=0.3、侵染时间为30 min时,共培养48 h后经过20 mg·L^(-1)卡那霉素筛选培养,通过PCR分子鉴定和GUS染色证实外源基因稳定地整合在桉树毛状根基因组中,转化率达20.2%。初步建立了发根农杆菌介导的桉树遗传转化体系,为桉树基因功能鉴定和进一步的转基因育种奠定基础。

摘要： 毛状根良好的生长状况是建立毛状根-AM真菌双重培养体系的关键,为优化毛状根培养基成分,确定适宜毛状根生长的蔗糖浓度,改善烟草毛状根的生长状况,该研究以发根农杆菌菌株C58C1诱导2个烟草品种NC82和Va116叶片产生毛状根,经PCR检测证实后,用含有不同蔗糖浓度的1/2MS培养基分别进行固体和液体优化培养,通过测定毛状根的分枝数、鲜重(FW)与干重(DW),研究蔗糖对2个品种烟草毛状根生长的影响。结果表明:(1)C58C1均能诱导两种烟草叶片产生毛状根,但诱导率不同,NC82(87.3%)的诱导率更高,是Va116(38.6%)的2.26倍。(2)培养基蔗糖浓度显著影响毛状根生长,因烟草品种和起始分枝数而异。(3)固体培养基优化培养NC82和Va116的毛状根,分枝数增长的抑制蔗糖浓度分别为25 g·L^(-1)和15 g·L^(-1);液体培养基优化培养分别在25 g·L^(-1)和15 g·L^(-1)时F(D)W达到最大,分别为0.541 g(0.055 g)、0.474 g(0.050 g)。(4)综合分枝数、F(D)W、毛状根生长势考虑,C58C1诱导NC82毛状根最适培养基蔗糖浓度为25 g·L^(-1),Va116毛状根为15 g·L^(-1)。该文优化了烟草毛状根培养基组成的适宜蔗糖浓度及培养方法,为后续毛状根大量扩繁奠定基础,建立了毛状根-AM真菌双重培养体系,解决了关键的寄主生长不良的问题。

摘要： 目的:采用穿心莲水提液制备纳米银颗粒(AgNPs)处理甘西鼠尾草(Salvia przewalskii)毛状根,探讨AgNPs胁迫对毛状根生长、丹参酮含量和丹参酮生物合成途径关键酶基因表达水平的影响,探寻促进丹参酮生物合成与代谢的新方法。方法:利用不同质量浓度的AgNPs(0 mg/L、50 mg/L、75 mg/L、100 mg/L)处理甘西鼠尾草毛状根,测定毛状根生物量;利用HPLC法测定3种丹参酮类(隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA)活性成分含量;采用qRT-PCR检测不同处理时间丹参酮生物合成途径关键酶基因HMGR、DXR、CPS相对表达水平。结果:甘西鼠尾草毛状根鲜重随AgNPs处理浓度的升高逐渐降低,各处理组干重相比对照组无显著变化;丹参酮类成分含量随AgNPs浓度增加持续升高,100 mg/L AgNPs处理能使隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA大量积累;与对照组相比,100 mg/L AgNPs显著上调丹参酮合成途径HMGR、DXR、CPS基因的表达,在处理24 h时分别达到最高水平。结论:穿心莲水提液制备纳米银颗粒对甘西鼠尾草毛状根生长具有一定的抑制作用,高浓度AgNPs胁迫显著促进毛状根中丹参酮的生物合成与代谢,通过调控丹参酮合成相关酶基因的表达水平,导致丹参酮类活性成分的大量积累。

摘要： 以杜梨(Pyrus betulaefolia)为研究材料,利用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)开发了一种简单、快速、高效的杜梨毛状根遗传转化方法.将含有mCherry基因的表达载体pROK2导入发根农杆菌K599,侵染杜梨幼苗,通过注射烟草叶片、常规PCR及体视显微镜观察,检测转化效率.结果表明,利用侵染烟草叶片瞬时表达的方法,证明mCherry可以正常表达;发根农杆菌侵染40株杜梨后,再生毛状根植株为34株,再生率达85％,通过PCR鉴定,转基因毛状根长势良好且鉴定为阳性的植株有6株,阳性率达到17.6％;经体视显微镜观察,可以在转基因根中直接观察到mCherry的红色荧光.通过发根农杆菌直接侵染杜梨苗的方法,成功实现了外源基因在杜梨新生不定根中的表达,操作简便,转化率高,周期较短,为梨树基因功能研究和遗传改良提供了新型工具,为提高梨树遗传转化成功率奠定了基础.

摘要： 温郁金为浙江省道地药材“浙八味”之一,含有抗癌药用成分β-榄香烯等.从温郁金块根上端0.1-0.2cm处剪取长1-1.5 cm的芽尖作为外植体,利用0.1％升汞消毒10 min,在丛生芽培养基MS+6-BA2 mg/L+IAA 1 mg/L+ZT 1 mg/L+Cef 500 mg/L上能高效获得丛生芽,芽的再生率可达100％.丛生芽经切割后置于生根培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+ IAA 0.5 mg/L上形成带根的完整植株.此外,利用发根农杆菌K599侵染温郁金组培苗的茎段、块根和根茎段,均成功诱导出毛状根;其中,根茎段毛状根的诱导率可达75％.研究结果为快速大量繁殖和培育脱毒的温郁金以及利用毛状根工厂化生长温郁金药用成分提供了基础.

摘要： 为建立虎杖高效遗传转化体系,用携带有植物表达载体pCAMBIA1301的发根农杆菌ATCC15834侵染虎杖无菌苗获得毛状根.对影响虎杖毛状根诱导的因素(如外植体种类、农杆菌活力、培养基种类、超声波辅助时间)进行优化,以获得最佳培养条件;通过潮霉素筛选阳性毛状根,以确定最佳潮霉素浓度.结果表明:以叶片为外植体、1/2MS为培养基、菌液OD600=0.8、超声波辅助5 s时,虎杖遗传转化毛状根效果最佳;筛选出的毛状根经GUS染色和PCR分子鉴定,该方法的阳性转化率为92％.该研究优化了虎杖毛状根的培养条件,为后期试验探究建立了更加高效的虎杖转基因体系.

摘要： 本研究以药用植物丹参的内生真菌为研究对象，以发根农杆菌诱导丹参无菌苗产生的丹参毛状根为研究材料，通过研究内生真菌对丹参毛状根有效成分积累的影响（以六种丹参标准品作为对照），筛选目标菌株。

摘要： 目的：对柴胡毛状根进行转录组学分析,从转录组水平阐释柴胡次生代谢产物含量与相关酶活性关系. 方法：采用IlluminaHiseq4000对柴胡毛状根及利用茉莉酸甲酯诱导3天后的柴胡毛状根进行转录组测序分析,通过与基因数据库比对分析注释和发现差异表达基因. 结果：柴胡毛状根及利用茉莉酸甲酯诱导后的柴胡毛状根分别获得了19754820、20865859条Clean Reads,Trinity组装后得到66062条Unigene,通过与NR、GO、COG、KOG、KEGG数据库比对,最终获得43905个有注释信息的Unigene.柴胡毛状根诱导3天后有5497个基因转录表达量上升,6278个基因转录表达量下降,合计11775个差异表达基因.13075条差异表达基因被COG注释到24个功能类别中,11878条差异性表达基因被KEGG注释归属于32条代谢通路.与对照毛状根相比,利用茉莉酸甲酯诱导后的毛状根IPPI、β-AS等基因表达量上升. 结论：本研究注释了大量相关基因序列,通过本研究为后续深入的基因功能研究及柴胡皂苷合成的分子机理研究等奠定了基础.

摘要： 毛状根具有生长速度快、激素自主性和遗传稳定性等特点，已成为获得植物次生代谢产物的重要途径。本实验利用发根农杆菌ATCC15834和C58C1诱导广藿香外植体产生毛状根，结果表明：在预配养时间为2d，乙酰丁香酮浓度为15mg·L-1，侵染时间为25min，共培养时间为2d的条件下，发根农杆菌ATCC15834和C58C1诱导率均达到最高，分别为83.3％和80.5％。PCR扩增结果证实，发根农杆菌Ri质粒的T-DNA部分已在广藿香毛状根的基因组中整合及表达，说明广藿香毛状根已经被成功诱导。

摘要： 利用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)转化药用植物得到的毛状根(hairy roots)具有遗传性稳定、生长迅速,合成能力强等优点,近些年来,它已被广泛应用于植物次生代谢产物生产、品种改良和特种植物栽培等领域,解决了天然药用植物资源短缺,有效成分含量低等问题.本文介绍了毛状根诱导方法及机理,并综述了农杆菌类型、外植体的部位、外植体的放置方式以及外植体的处理方式对毛状根诱导率的影响以及毛状根在转基因植物以及差异表达功能基因克隆方面的应用情况.随着毛状根培养技术的不断优化和成熟,它将在中草药现代化发展中起到更加重要的作用.

摘要： 目的：研究紫锥菊毛状根的诱导及活性成分的产生。方法：用发根农杆菌Agrobacterium rhizogenes A4，R1601，1025感染紫锥菊外植体。结果：紫锥菊外植体被3种发根农杆菌感染后，外植体伤口处均能陆续分化生长出白色的毛状根。A4菌株的诱导效果明显好于其他两种菌株，A4对紫锥菊叶片的毛状根诱导率高达66.7％。紫锥菊毛状根的最佳诱导条件为：发根农杆菌A4，感染时间12min，菌液OD600值0.8，共培养温度24°C，共培养时间2d，预培养时间2d，培养基pH值6.0，此条件下紫锥菊毛状根的平均诱导率达到54％；对诱导出的毛状根进行PCR检测，证明其确为已转化的毛状根。检测得到紫锥菊毛状根中的多糖含量为15.54％，总酚的含量为2.491％。结论：本实验所建立的紫锥菊毛状根培养系统，为研究紫锥菊毛状根大量培养生产活性成分奠定了基础。

摘要： 目的：利用四种发根农杆菌R1，1601，1025，1000诱导药用植物罗勒产生毛状根，建立毛状根培养体系。方法：利用共培养法研究不同外植体、不同菌株、不同预培养时间、不同感染时间以及不同外源激素等条件对转化频率的影响。结果：利用发根农杆菌1025，预培养2d的叶片为转化材料，感染6～8min，加入O.1mg/L NAA转化率最高。经过基本培养基的筛选和毛状根生长动力学的考察，确立了罗勒毛状根在1/2MS培养基中的最佳继代时间为20d左右。结论：罗勒毛状根离体培养的建立为进一步进行药用活性成分的工业化生产奠定了基础。

摘要： 药用植物长春花(Catharanthus roseus)中含有微量的长春碱(Vinblastine)、长春新碱(Vin cristine)等抗癌萜类吲哚生物碱(Terpenoid indole alkaloids，TIAs)，为了提高长春花中生物碱含量，用经过“disarmed”改造的根癌农杆菌C58C1(携带pRiA4质粒)感染产生的毛状根为研究试材，通过研究外源植物生长调节剂对长春花毛状根愈伤组织诱导、不定芽分化、丛生芽诱导、不定根分化和再生植株移栽的影响研究，建立了长春花毛状根再生植株快速繁育体系。结果表明，转基因长春花毛状根愈伤组织诱导和不定芽诱导的最佳培养基均是MS+6-BA2.0ｍｇ·Ｌ-1＋ NNA0.3mg·L-1，丛生芽诱导的最适培养基是MS＋6-BA2.0mg·Ｌ-1＋NAA0.5mg·L-1，不定根发生的最适培养基是1／2MS＋NAA0.3mg·L-1。将再生植株放入蒸馏水中炼苗，可使长春花再生植株的移栽成活率达90％。

摘要： 利用发根农杆菌15834菌株感染怀地黄组培苗子叶、叶柄和茎切段，建立了自效的毛状根培养及其植株再生体系。毛状根可直接从受伤的外植体产生，能在无外源激素的1/2MS固体和液体培养基上自主生长，表现出典型的发根特征。用100 μ ml/L 乙酰丁香酮处理对数生长期的农杆菌菌液感染子叶获得了46.7％的最高转化频率;在附加0.2mg/L KT和3.0mg/L 6-BA的1/2MS培养基上，毛状根能100％形成愈伤组织，51.49％分化出芽;分化芽在1/2MS培养基上100％生根,形成具有矮化、节间短和根系发达等特征的转化再生植株且移栽后生长旺盛;1个转化毛状根克隆的梓醇含量为0.557mg/g，是鲜地黄梓醇含量的48.5％，是生地鲜重梓醇含量的18％。ro1B基因PCR、Southern blot分析、冠瘿碱纸电泳和RT-PCR扩增检测证明农杆菌Ri质粒上的T-DNA整合到怀地黄基因组中并表达。

摘要： 利用发根农杆菌ATCC15834和A4,采用针刺幼茎法和外植体共培养法侵染乌拉尔甘草活体幼苗、下胚轴和子叶,成功获得了乌拉尔甘草毛状根,建立了乌拉尔甘草毛状根诱导培养体系.发根农杆菌ATCC15834最适宜甘草毛状根的诱导,株龄14d的乌拉尔甘草幼苗为最适外植体,工程菌液OD600为0.5～0.6时,添加乙酰丁香酮100mg/L时毛状根诱导率为未添加乙酰丁香酮2.43倍;针刺幼茎法毛状根诱导率达79.2％,共培养法诱导率达34.7％,不添加激素的1/2Ms培养基为最适合毛状根增殖培养的液体培养基,最适蔗糖浓度为40.0g/L,25d毛状根增殖率达到19.3倍.

摘要： 利用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)诱导药用植物产生的毛状根具有生长迅速,合成能力强和遗传性稳定等优点,已成为一种新的培养系统。本文就影响发根农杆菌介导的药用植物遗传转化的因素作一概述。

摘要： 本发明提供了一种利用基因工程技术遗传转化西藏八角莲，获得生产鬼臼毒素的西藏八角莲的毛状根的方法。涉及包含发根农杆菌遗传转化西藏八角莲的方法，遗传转化获得可生产鬼臼毒素的西藏八角莲毛状根。其过程是用发根农杆菌遗传转化西藏八角莲，获得了西藏八角莲毛状根，经分子检测确为遗传转化的毛状根，HPLC检测表明遗传转化获得的西藏八角莲毛状根能够生产鬼臼毒素。本方法可以为鬼臼毒素的生产提供一种新型可持续的新型药源。

摘要： 本发明提供了一种利用基因工程技术遗传转化西藏八角莲，获得生产鬼臼毒素的西藏八角莲的毛状根的方法。涉及包含发根农杆菌遗传转化西藏八角莲的方法，遗传转化获得可生产鬼臼毒素的西藏八角莲毛状根。其过程是用发根农杆菌遗传转化西藏八角莲，获得了西藏八角莲毛状根，经分子检测确为遗传转化的毛状根，HPLC检测表明遗传转化获得的西藏八角莲毛状根能够生产鬼臼毒素。本方法可以为鬼臼毒素的生产提供一种新型可持续的新型药源。

摘要： 本发明公开了一种利用胡萝卜毛状根高效扩繁根内球囊菌孢子的方法，将发根农杆菌进行活化培养；胡萝卜毛状根的诱导和继代；在得到的继代培养的毛状根中截取幼嫩粗壮且生长迅速的毛状根置于菌根室中，并将10‑15个无菌AM真菌孢子放置于靠近胡萝卜根尖处，将培养皿放于培养架上，且菌根室所在一侧朝上方倾斜，进行避光共培养：将得到共培养完成后的菌根室中的菌根连带培养基切成2‑4份，分别置于新鲜的含蔗糖M培养基一侧，扩大培养，得到含大量真菌孢子的固体培养物；最后进行孢子抽提。本发明不仅操作简单、高效，可持续利用已建立共生的菌根扩繁根内球囊菌孢子，而且培养出的孢子活力强、侵染率高，同时扩繁时间短。

摘要： 本发明提供了一种高效利用发根农杆菌诱导朱砂根产生毛状根的方法，属于植物组织培养技术领域。本发明所述方法包括如下步骤：(1)发根农杆菌的活化：(2)朱砂根组培无菌叶片毛状根诱导；(3)毛状根继代培养。本发明提供的方法具备操作简单、省时高效，朱砂根毛状根的诱导率高，能够获得朱砂根皂苷含量高的朱砂根毛状根，并能显著缩短其培养时间，为工业生产提供技术支持和科学依据，同时利于保护生态环境。

摘要： 本发明公开了一种硝酸根转运蛋白及其编码基因在提高作物毛状根根瘤数量上的应用，在植物体内过表达序列表中SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列或者与SEQ ID NO：1具有同种功能的核苷酸序列，获得与野生植物相比毛状根上的根瘤数目增多的转基因植物。本发明对于提高大豆的结瘤固氮能力和提高大豆产量具有重要的科研及实用意义。

摘要： 本发明公开了一种烟草毛状根遗传转化体系的建立方法，包括烟草种子消毒获得无菌烟草种子、烟草种子萌发获得烟草无菌苗、农杆菌制备、农杆菌侵染液的制备、侵染、共培养、除菌培养、筛选培养获得可用于基因功能检测的烟草毛状根和毛状根鉴定等步骤。本发明简单易行、周期短，8周即可获得足量毛状根，获得的毛状根可应用于烟草基因的功能鉴定(包括被转化基因表达量的检测；其他目标基因表达量的检测以及烟碱、去甲烟碱、新烟碱等烟草物质含量的检测等)；解决了传统烟草稳定植株转化从遗传转化至可用于基因功能鉴定的T1代植株需时较长，大约1年左右的时间的技术问题；比较而言，本烟草毛状根遗传转化体系显著缩短了研究周期。

摘要： 本发明公开了一种发根农杆菌介导的获得转基因除虫菊毛状根的方法，属于植物组织培养技术领域，其技术方案要点是，步骤如下：S1、切下除虫菊组培苗叶片，用菌液侵染叶片；S2、滤出叶片，接种于MS基本培养基中，暗培养2天；S3、将叶片移至固体培养基Ⅰ中培养20天，形成叶片根；S4、将叶片根的根尖切下，放置在固体培养基Ⅱ上，根尖朝上，培养7天，获毛状根；S5、选取不具向地性的毛状根，将毛状根的根尖切下放置在固体培养基Ⅲ上，培养20天，获抗性根；S6、选取抗性根，切成多段水平放置在固体培养基Ⅳ上，然后进行继代培养。本发明主要用于获得转基因除虫菊毛状根，建立了高效迅速的除虫菊毛状根转化体系，能够为除虫菊的科研及育种工作提供有效技术支撑。

摘要： 本发明涉及植物培养技术领域，具体涉及一种草莓匍匐茎生长转基因毛状根的诱导方法及其应用，包含了植物培养，侵染液制备，匍匐茎离体注射和毛状根诱导，以草莓小苗作为试验材料，对草莓小苗进行草莓匍匐茎离体注射、离体抽真空和活体注射方法的比较，筛选出活体注射法后，用携带有pCAMBIA1302和pCAMBIA1302‑FaNRT1.1载体的K599发根农杆菌进行匍匐茎注射，获得转基因毛状根，并通过PCR和荧光显微观察确定为转基因毛状根，本发明成功建立了草莓匍匐茎生长转基因毛状根诱导体系，研究了草莓毛状根最佳诱导方法，红颜草莓毛状根诱导率达到50％，对草莓根系矿质营养和次生代谢研究提供了可行方法。

摘要： 一种巴戟天毛状根遗传转化体系的建立方法，以巴戟天无菌组培苗的幼嫩茎段作为外植体，经预培养后转移到侵染液中，侵染结束后将外植体表面的菌液吸干，然后进行共培养，将在共培养过程中形成菌斑的外植体用含有头孢噻肟钠和特美汀的无菌水清洗，清洗完的外植体转接到含有头孢噻肟钠、特美汀和乙酰丁香酮的1/2 MS固体培养基上诱导毛状根；当毛状根长到2～3 cm左右时，将毛状根剪下并转移到含有筛选抗生素的1/2 MS固体培养基上，筛选出具有卡那霉素抗性且生长速度快、分支较多的毛状根发根系。本发明具有较高转化效率，为后续的基因功能研究及利用基因工程手段提高巴戟天药效活性成分的含量提供良好的技术支撑。

摘要： 本实用新型提出的植物毛状根或不定根培养装置，可实现对毛状根或不定根的营养供给和氧气充分供给，保障了植物毛状根或不定根的正常生长，且方便维修。其中，罐体内设有网板，罐盖通过支架安装有喷头，喷头向罐盖外侧延伸并形成有进液口，配液罐上还安装有驱动装置，驱动装置驱动连接有搅拌桨，配液罐上还设有回液口和导液口，回液口通过第一管道与所述出液口连通，导液口通过第二管道与所述进液口连通，所述第二管道上设有离心泵和蝶阀，配液罐外周套接有保温套，保温套和配液罐之间形成有水流通道。