柱层析法

摘要： 探究柱层析法提取刺玫果肉中维生素C和花色苷的工艺条件及体外活性。以提取液中维生素C质量和花色苷吸光度为指标,通过对溶剂浓度、pH、酸度调节剂、吸涨率(MV)、浸泡平衡时间等因素的考察确定最佳提取工艺。通过测定刺玫果肉维生素C、花色苷对α-葡萄糖苷酶的抑制率及对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)的清除率,考察其体外降血糖、抗氧化活性。结果表明,在最佳提取条件下,刺玫果肉维生素C和花色苷的提取率均在95%以上,浸膏中维生素C的含量达到15%以上、花色苷的色价为8.07。刺玫果肉维生素C、花色苷提取物抑制α-葡萄糖苷酶的活性均强于阳性对照阿卡波糖;其清除DPPH·的IC;值分别为0.0031、0.0221 mg/mL。柱层析法可以同时提取刺玫果肉中的维生素C和花色苷,避免因单独地提取一种活性成分而造成原料和溶剂的浪费,研究结果为刺玫果开发提供了科学依据。

摘要： 文章基于SY/T 5119—2016《岩石中可溶有机物及原油族组分分析》中柱层析法提出一些改进与优化:在原油族组分分析中选用专用石油萃取小柱代替普通层析柱;使用超声波来保证正己烷洗涤滤液的均一性;引入提取系数β。这些优化和改进,提高了分析效率,同时能满足岩石中可溶有机物及原油族组分的质量要求。

摘要： 本实验采用核磁共振波谱仪对煎炸油中极性组分含量的测定方法进行了研究。通过对核磁共振谱图中煎炸油的特征峰相对峰面积与极性组分含量之间的数学关系进行分析,从而建立了核磁共振波谱仪测定煎炸油的极性组分含量的方法。主要结论如下:核磁共振波谱仪测定煎炸油的特征峰相对峰面积与极性组分含量之间的线性回归方程为y=-8.3276 x+90.215,相关系数R^2=0.9773;核磁共振波谱仪重复测定的煎炸油样品中极性组分含量的相对标准偏差范围为1.72%~2.53%(小于5%),表明核磁共振波谱仪检测煎炸油极性组分含量的方法具有较好的重复性。同时本研究将此法与柱层析法进行对比,所得测定结果没有显著性差异,表明核磁共振波谱法可以替代柱层析法测定煎炸油中极性组分含量。

摘要： 紫甘蓝色素,具有广泛的开发应用前景.而色素对酸、碱及化学物质的稳定性直接关系到色素的应用范畴.本综合实验采用微波萃取和柱层析法分离提纯紫甘蓝色素,再通过加入不同pH值或不同金属离子的溶液,用紫外可见光谱法测试两者对紫甘蓝色素稳定性的影响.让学生了解紫甘蓝提取工艺和提纯方法,明白微波萃取法和色谱法分离提纯有机物的原理,掌握微波萃取和柱层析操作技术,学会分析不同酸度、金属离子对紫甘蓝天然色素的影响.

摘要： 本实验采用核磁共振波谱仪对煎炸油中极性组分含量的测定方法进行了研究.通过对核磁共振谱图中煎炸油的特征峰相对峰面积与极性组分含量之间的数学关系进行分析,从而建立了核磁共振波谱仪测定煎炸油的极性组分含量的方法.主要结论如下:核磁共振波谱仪测定煎炸油的特征峰相对峰面积与极性组分含量之间的线性回归方程为y =-8.327 6x+90.215,相关系数R2=0.977 3;核磁共振波谱仪重复测定的煎炸油样品中极性组分含量的相对标准偏差范围为1.72％～2.53％(小于5％),表明核磁共振波谱仪检测煎炸油极性组分含量的方法具有较好的重复性.同时本研究将此法与柱层析法进行对比,所得测定结果没有显著性差异,表明核磁共振波谱法可以替代柱层析法测定煎炸油中极性组分含量.

摘要： 紫甘蓝色素,具有广泛的开发应用前景。而色素对酸、碱及化学物质的稳定性直接关系到色素的应用范畴。本综合实验采用微波萃取和柱层析法分离提纯紫甘蓝色素,再通过加入不同pH值或不同金属离子的溶液,用紫外可见光谱法测试两者对紫甘蓝色素稳定性的影响。让学生了解紫甘蓝提取工艺和提纯方法,明白微波萃取法和色谱法分离提纯有机物的原理,掌握微波萃取和柱层析操作技术,学会分析不同酸度、金属离子对紫甘蓝天然色素的影响。

摘要： 目的:建立鸡骨草叶中N-反式对香豆酰酪氨酸的含量测定方法,并优化其纯化工艺.方法:采用高效液相色谱法测定鸡骨草叶中N-反式对香豆酰酪氨酸的含量,色谱柱为Hypersil BDS C18,流动相为0.1％甲酸水溶液(A)-甲醇(B)(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,柱温为25°C,检测波长为300 nm,进样量为10μL.以聚酰胺树脂为材料,以N-反式对香豆酰酪氨酸得率为指标,采用单因素试验优化N-反式对香豆酰酪氨酸纯化的样品溶液质量浓度、上样量、静置吸附时间等条件.结果:N-反式对香豆酰酪氨酸检测进样量线性范围为2.575～51.50μg(r=0.9999);定量限为0.000618μg,检测限为0.000129μg;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3％;加样回收率为97.04％～102.43％(RSD=2.06％,n=6).最优纯化工艺为样品溶液质量浓度为0.04 g/mL(以鸡骨草叶药材计),上样量为50 mL,上样流速为1.0 mL/min,静置吸附时间为20 min,以水(含0.1％乙酸)、20％乙醇(含0.1％乙酸)、氨水(pH 10)为洗脱溶剂依次洗脱.此纯化工艺条件下,制得的N-反式对香豆酰酪氨酸的平均得率为98.94％,平均干膏含量为61.17 mg/g,平均干膏纯度为19.73％.结论:所建含量测定方法简便、准确、稳定性较好;优化所得工艺稳定、可行.

摘要： 为建立莽草酸的纯化方法,以莽草酸的含量为指标,对雪松松针水提液的醇沉、大孔吸附树脂单用或与不同柱层析合用的纯化方法进行了探索.最终确定的莽草酸的纯化工艺流程为:提取-醇沉-柱层析-重结晶,其中醇沉法可以将莽草酸的含量由12.69％提升到20.08％,大孔吸附树脂柱层析法单用可以将莽草酸的含量由20.08％提升到35.73％,回收率均超过95％;大孔吸附树脂柱结合硅胶柱层析法可得到纯度为80.05％的莽草酸近白色固体,回收率达60.04％,再经二氯甲烷和甲醇重结晶得到纯度为96.54％的莽草酸白色粉末,表明该纯化方法简单可行,重复性好,易于实施工业化生产.

摘要： Repeated usage of deep frying oil is a general approach in food manufactures and fast food restaurants for cost saving.To use repeated frying oil properly and control the food safety,it is important to monitor the oil qualiy during deep frying.In present study,twelve categories of frying oils were selected as monitoring targes which includes seven single oils and five blending oils products such as soybean oil,palm oil,high oleic acid rapeseed oil,etc.Three products,French fries,chicken nuggets and fish filets,were selected for deep frying test.The total polar components (TPC) in frying oil samples were tested every twelve hours and the correlation between column chromatography and TESTO 270 rapid test results were compared.Our results showed that TESTO 270 method showed significant correla-tion with colunn chromatography method when TPC level was lower than 20％ (Pearson correlation coefficient was from 0.744 to 0.984,P ＜ 0.01).But the correlation coefficient was lower when the level of total polar compound (TPC) exceeded 20％ (Pearson correlation coefficient was from 0.553 to 0.928,P ＜ 0.01,and R2 =0.149 2 to 0.863 2).The false positive rate was 3.6％ when TPC level was between 20％ and 27％,and false negative rate was 10％ when TPC level was higher than 27％.The results provided the reference data for TESTO 270 rapid testing method in the quality monitoring of repeated usage of deep frying oil.%生产加工与餐饮企业为降低成本需要合理重复使用煎炸油,为保证煎炸食品的安全性,有必要建立快速有效的检测方法,以便于企业对煎炸油品质进行监控.选用目前生产加工及餐饮企业广泛使用的12种煎炸油为监控对象,包括大豆油、棕榈油、高油酸菜籽油等7种单品油和5种不同组成的调和油,煎炸处理薯条、鸡块和鱼排3种常见快餐食品,试验每12 h取样检测煎炸油中的总极性组分含量(TPC),对比研究柱层析法及TESTO 270快速检测法的结果相关性.试验结果表明,使用快速检测仪检测样品TPC,当TPC＜ 20％时,其结果与柱层析法具有显著相关性(Pearson系数为0.744～0.984,P＜0.01),但当TPC＞ 20％时,相关性减弱(Pearson系数为0.553 ～0.929,P＜0.01),R2值为0.149 2～0.863 2.当TPC介于20％至27％之间时,TES-TO 270快速检测法的结果有3.6％假阳性,TPC大于27％时,假阴性结果比率为10％.本研究为TESTO 270快速检测法在煎炸油质量监控中的应用提供了参考.

摘要： Objective:To investigate the difference between new technology of chromatography and old low temperature ethanol method in the preparation of fibrinogen,which is used in rat model with partial rupture of the Achilles tendon.Methods:The rat model with partial rupture of the Achilles tendon was constructed and divided into the blank group (the Achilles tendon wasn't cut),the model group (the Achilles tendon was cut and wasn't administered),the experimental group (administered with 2 mg/mL self-made fibrinogen)and the control group (administered with 2 mg/mL commercially available fibrinogen).Differences of before surgery and three weeks after surgery were observed on maximum sliding distance of Achilles tendon,Achilles tendon elastic modulus and the greatest tensile strength.Results:Fibrinogen of 90.9％ purity was successfully isolated from human plasma cryoprecipitate component Ⅰ using cryoprecipitation dissolving,acid precipitation purification,S/D inactivating virus,MacroCap Q column chromatography and filtration.Biomechanical results showed that the four groups had no significant difference in the Achilles tendon maximum sliding distance (P＞0.05),but in the Achilles tendon elastic modulus and maximum resistance to pressure,the experimental group and the control group were better than the model group,and had a certain disparity with the blank group,the differences were statistically significant (P ＜0.05).Conclusions:Using column chromatography to separate human fibrinogen,not only can effectively improve the separation efficiency and reduce the loss of protein,but also enhance the effect of fibrinogen in promoting recovery of the Achilles tendon rupture.%目的:探讨层析法新工艺和原有的低温乙醇工艺制备纤维蛋白原在大鼠跟腱断裂模型中促恢复的效果差异.方法:构建大鼠跟腱部位断裂模型,将其分为空白组(未剪跟腱)、模型组(跟腱断裂未给药)、实验组(自制纤维蛋白原2 mg/mL)与对照组(市售纤维蛋白原2 mg/mL),观察各组大鼠在手术后三周跟腱部位的最大滑动距离、弹性模量和最大抗拉力差异.结果:采用冷沉淀溶解、酸沉除杂、S/D灭活病毒、MacroCapQ柱层析、过滤等流程可从人血浆冷沉淀组分Ⅰ中成功分离纯度为90.9％纤维蛋白原.试验中构建的大鼠跟腱部位断裂模型无感染、且均存活至试验终止.生物力学结果显示,四组大鼠跟腱在最大滑行距离上无明显统计学差异(P＞0.05);在跟腱部位弹性模量及最大抗压力比较上,实验组及对照组均优于模型组,但与空白组仍有一定差距,且差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论:采用柱层析法分离人纤维蛋白原,不仅能有效提高分离效率,减少蛋白损失,还可增强纤维蛋白原在断裂跟腱中的促恢复效果.

摘要： 改革开放以来，我国黄羽肉鸡饲养发展迅速。目前对叶黄素进行精确测定的最可靠方法是高效液相色谱法，但由于该法仪器价格昂贵，操作复杂，国内一般企业无法推广。1984年美国公职分析化学家协会(AOAC)提出柱层析法测定总叶黄素，仪器简单(分光光度计)，较适合在我国推广应用。目前我国的企业多数使用这种方法。本文总结了某公司七年来在叶黄素测定工作中的实践经验和体会，提出了柱层析法检测叶黄素原料和产品的几点注意事项，供同行参考。

摘要： 目前，农业领域己经出现众多糖类农药投入生产应用的实例，综述了多糖分离纯化方法的研究进展,包括粗多糖的制备和均一性多糖的分离纯化方法.粗多糖的制备步骤主要有多糖的提取,多糖的沉淀,多糖中蛋白质、色素和小分子的去除;柱层析法是分离纯化均一性多糖的主要方法.根据目标多糖的性质选择或寻找合适的层析柱填料,开发运用多样的分离技术是分离纯化多糖的关键.

摘要： 中国很多油田产出油为高蜡原油,在原油开采过程中,温度低于析蜡点时,蜡成分开始析出,从而附着在井壁上,容易造成堵塞,加大开采难度.从而针对蜡含量的分析对开采高蜡原油尤为重要.蜡为高碳数的正构烷烃，一般来讲，蜡含量与饱和烃含量成正比关系，目前测量饱和烃含量的方法主要是族组成分析，包括棒薄层火焰离子化检测法和柱层析法，其中棒薄层法检测周期短，方便快捷，但是针对高蜡原油检测饱和烃含量时，由于含蜡部分相对分子质量较高，在用正己烷展开时，会有一部分高碳数正构烷烃残留在沥青质部位，造成分析结果中饱和烃含量偏低，而沥青质含量偏高;柱层析法作为传统的检测原油族组成的方法，其检测精度相对可信度较强，但同样由于含蜡部分相对分子质量较大，用正己烷试剂淋洗饱和烃组分时，会有部分饱和烃组分残留在柱子内，造成分离芳烃组分时会有少量饱和烃的混入，而造成饱和烃、芳烃色谱检测结论会有偏差，而且总回收率也会偏低。针对这种问题，本文采取对溶剂进行加热处理之后再进行分析。

摘要： 采用柱层析法,将含量≥80％的鬼臼毒素粗品分离纯化,优选洗脱剂,成功制备出含量≥99.0％的鬼臼毒素精品。

摘要： 蔗糖脂肪酸酯是一种在医药，食品、化妆品等工业上广泛使用的添加剂，它由蔗糖和脂肪酸酯在碱性催化剂作用下，用溶剂或无溶刑法酯交换反应合成得到。rn 本文描述了蔗糖脂肪酸酯的不同分析方法。比较了薄层层析(TLC)扫描法、柱层析法(CC)和高效液相色谱法(HPLC)分析蔗糖脂肪酸酯的定性和定量测定结果。三种测定方法的测定结果基本一致。高效液相色谱和薄层层析扫描法、柱层析法相比，更具快速，灵敏的特点。而在无昂贵仪器的情况下，柱层析法也是一种灵敏和准确的分析方法。

摘要： 偶氮苯类化合物在特定的波长下会产生trans-cis异构化转变而具有较好的光致变色性，目前研究的热点是使偶氮苯类的吸收波长向长波方向移动，从分子设计的角度笔者合成了一种双偶氮苯类化合物，该化合物用重结晶的方法极难提纯，采用柱层析法效果较好。本文利用柱层析法分离纯化双偶氮苯类化合物,分离得到的产物经红外鉴定。

摘要： 目的：对玉竹有效部位进行化学成分研究,为玉竹质量标准的指定提供新的方法。方法：柱层析法、薄层层析法、高效液相法。结果：对有效部位进研究,经UV、IR、MS、NMR,初步定为玉竹酮,对湖南新邵产的10批玉竹样品玉竹酮的含量测定为0.17％;不同产地比较,玉竹酮含量北方地区较高,南方相对较低;不同部位玉竹酮含量比较,地上茎含量较高为0.42％;不同年限比较,3年生玉竹中玉竹酮含量>2年生药材。结论：为玉竹的质量标准控制提供新的方法。

摘要： 本文对琼脂糖凝胶电泳(电泳时须同时做质控血清以资对照)、柱层析法、超速离心法、酶活化能测定、热失活试验、免疫学方法和电泳法结合这几种常见的巨分子酶鉴定方法及临床意义进行了研究。

摘要： 本文对高纯度卵磷脂制备方法的国内外研究现状和进展进行了全面的综述.通过对不同方法的比较并结合我国的国情,提出了我国开发高纯度卵磷脂制备方法的发展方向.

摘要： 本文对高纯度卵磷脂制备方法的国内外研究现状和进展进行了全面的综述.通过对不同方法的比较并结合我国的国情,提出了我国开发高纯度卵磷脂制备方法的发展方向.

摘要： 本发明公开了一种柱层析分离法提取羊胆汁中牛磺胆酸的方法，包括过滤、蛋白沉淀处理、除色素处理、盐析、萃取、脱水浓缩和柱层析分离等步骤。本发明以羊胆汁作为提取原料，不仅降低了牛磺胆酸的提取成本，而且提取工艺更为简单，收益更高。本发明以柱层析分离法提取牛磺胆酸，柱层析分离纯化效果好，提取的牛磺胆酸精品无腥味、纯度高，且产品收率高，提取工艺简单，利于工业化大生产。

摘要： 本发明公开了一种用硅胶层析柱法分离纯化甘油磷酸胆碱(L-α-GPC)的方法，属于脂质开发应用技术领域。包括如下步骤：酶解反应液为原料，先用离子交换树脂除去Ca2+和Cl-，然后将水相转化成醇相，通过硅胶层析柱将L-α-GPC和GPE、LPC及其它副产物分开，活性炭脱色，真空浓缩除水，得到无色、透明的产品；醇解反应液为原料，直接过硅胶柱分离，阳离子交换树脂除Na+，活性炭脱色，真空浓缩除水，得到产品。产品的指标检测：化学纯度99.6％，光学纯度ee：99％，mp142-143°C，(C＝2.6，H2O含量16％，pH＝5.8)。本发明为分离纯化L-α-GPC提供了一种新的思路和方法，也增加了硅胶柱层析分离纯化方法在脂质科学中的应用。

摘要： 本发明公开了一种采用配位柱层析法分离纯化东莨菪碱的方法，通过东莨菪碱粗提物的制备、配位层析柱的制备、层析柱平衡、层析分离、流出液合并与干燥等步骤制得纯化后的东莨菪碱。本发明对现有的东莨菪碱色谱分离法进行改进，在层析分离介质中引入配位剂，使得东莨菪碱提取物只需一步层析分离即可达到较高纯度(纯度为90％‑99％，回收率为70％‑85％)，大大缩短了生产流程，减少了有机溶剂的使用量，降低了生产成本。

摘要： 离子交换和硅胶柱层析法分离制备汉防己甲、乙素的方法。汉防己是防己科千金藤属植物粉防己的干燥块根，其有效成分为汉防己碱，其中主要有效成分为汉防己甲素和乙素，汉防己碱具有抗心肌缺血、抗心率失常、降压、抗炎、抗矽肺、抗癌及镇痛等作用。药用时，对其纯度要求达到99%以上，提取纯化为限制二者药用的重要原因。当前，提取纯化汉防己甲素和乙素工艺，大量运用到剧毒且昂贵的氯仿，以及强碱等，氯仿对人和环境均有很大的毒害作用，另外对放大生产的设备腐蚀性强。此外，样品纯度不高，工艺过程复杂。在此现状上，本发明开发了，运用离子交换树脂和C18键合硅胶柱层析法，快速分离纯化制得高纯度的汉防己甲素和乙素，同时公开了一种利用乙醇进行重结晶纯化汉防己甲素和乙素的方法。本制备工艺没有运用任何有毒试剂，柱层析填料可重复利用，所用乙醇可回收利用。

摘要： 本发明属于天然产物分离提取技术领域。具体涉及一种硅胶柱层析法分离纯化鱼卵中卵磷脂的方法。所述方法包括用丙酮、乙醇提取卵磷脂，柱层析法进行纯化，以异丙醇‑甲醇作为洗脱剂，得到高纯度的卵磷脂。本发明从海洋加工副产物鱼卵中提取高纯度的卵磷脂。得到的产品纯度高，且无毒；本发明方法可为医药品，保健品和化妆品等产品提供含不饱和脂肪酸比例高达39.15%的高纯度卵磷脂。

摘要： 本发明提供了一种二级柱层析法提取植物油脱臭馏出物中角鲨烯的方法，包括以下工艺步骤:皂化预处理分离不皂化物，一级柱层析分离生育酚和甾醇，二级柱层析提纯角鲨烯。整个工艺可得含量为50%左右的角鲨烯，并兼得含量70%以上的生育酚和98%以上的甾醇。克服了传统角鲨烯提取工艺针对性不强的问题，发挥了柱层析的优良选择性，大大提高了提取效率。该工艺具有操作简单、分离效率高、角鲨烯回收率高、投资小等优点。

摘要： 本发明公开了富集EPA/DHA型磷脂酰胆碱的柱层析法，包括以下步骤：S1、准备硅胶作为吸附剂，二氯甲烷/甲醇作为洗脱剂，湿法装柱，得到层析柱；S2、将南极磷虾粉经95％乙醇重复提取3～5次后，合并提取液并真空脱溶，再采用无水乙醇复提2～3次，取上清液真空脱溶后制得富含PC的南极磷虾油，南极磷虾油经冷丙酮离心取沉淀，反复清洗沉淀至上清液澄清无色，沉淀物采用乙醇复溶后真空脱溶，获得南极磷虾PC；S3、将南极磷虾PC加入二氯甲烷溶解，并加入层析柱中，利用二氯甲烷/甲醇洗脱液进行洗脱，将仅含有PC组分的流出液进行旋蒸脱溶，得PC

摘要： 本发明公开了一种基于柱层析法分离目标双特异性抗体与副产物的方法，将PLLA常温条件下溶于三氯甲烷内，置于模具内并加入冰晶片，搅拌混合处理，之后进行真空冷冻干燥处理、加热干燥，制得聚乳酸多孔凝胶；将纳米羟基磷灰石分散于去离子水中制得分散液；制备琼脂糖溶液，滴加上述分散液，并加入上述制得的聚乳酸多孔凝胶，搅拌混合处理，最后降温凝胶化处理，干燥后制得柱层析填料；将上柱层析填料装进层析柱内，采用PBS缓冲液对层析柱进行预平衡处理，然后将待纯化的双特异性抗体样品上样至层析柱内；采用PBS缓冲液进行清洗；最后采用洗脱液对层析柱进行洗脱，并收集洗脱液，制得纯化的双特异性抗体。该方法操作简单，制得的双特异性抗体纯度高。

摘要： 本发明公开了一种采用配位柱层析法分离纯化东莨菪碱的方法，通过东莨菪碱粗提物的制备、配位层析柱的制备、层析柱平衡、层析分离、流出液合并与干燥等步骤制得纯化后的东莨菪碱。本发明对现有的东莨菪碱色谱分离法进行改进，在层析分离介质中引入配位剂，使得东莨菪碱提取物只需一步层析分离即可达到较高纯度(纯度为90％‑99％，回收率为70％‑85％)，大大缩短了生产流程，减少了有机溶剂的使用量，降低了生产成本。

摘要： 离子交换和硅胶柱层析法分离制备汉防己甲、乙素的方法。汉防己是防己科千金藤属植物粉防己的干燥块根，其有效成分为汉防己碱，其中主要有效成分为汉防己甲素和乙素，汉防己碱具有抗心肌缺血、抗心率失常、降压、抗炎、抗矽肺、抗癌及镇痛等作用。药用时，对其纯度要求达到99%以上，提取纯化为限制二者药用的重要原因。当前，提取纯化汉防己甲素和乙素工艺，大量运用到剧毒且昂贵的氯仿，以及强碱等，氯仿对人和环境均有很大的毒害作用，另外对放大生产的设备腐蚀性强。此外，样品纯度不高，工艺过程复杂。在此现状上，本发明开发了，运用离子交换树脂和C18键合硅胶柱层析法，快速分离纯化制得高纯度的汉防己甲素和乙素，同时公开了一种利用乙醇进行重结晶纯化汉防己甲素和乙素的方法。本制备工艺没有运用任何有毒试剂，柱层析填料可重复利用，所用乙醇可回收利用。