柚苷酶

摘要： 为了得到1株高产柚苷酶菌株并探究其工业应用价值,从发霉的柚子皮上筛选出1株塔宾曲霉(Asper-gillus tubingensis)MN589840,采用紫外与常压室温等离子体(atmospheric room temperature plasma,ARTP)复合诱变技术,获得突变株UA13,其柚苷酶活力可达41.524 U/mL,是原始菌株的3.06倍.对酶解条件进行探究,其酶解最适温度为40～50°C,最适pH值为5.0.利用突变株UA13发酵产酶脱苦宜昌蜜橘果汁并进行理化指标检测,当酶解约50 min时,果汁中柚皮苷含量低于柚皮苷苦阈值;当酶解时间>75 min,果汁中仅剩下少量柚皮苷.使用高效液相色谱对脱苦结果验证检测,结果显示,突变株UA13产酶可有效水解果汁中的柚皮苷,且能提高果汁风味.因此,突变株UA13具有潜在的工业应用价值,为后续实验研究奠定基础.

摘要： 采用静电纺丝技术制备聚氨酯纳米纤维膜,用壳聚糖进行亲水改性后固定柚苷酶,测定不同浓度的壳聚糖对纤维膜亲水改性下的载酶量和酶活力以及固定化柚苷酶在不同酶解温度、时间和pH条件下的酶活力.结果表明,当聚氨酯纺丝液质量分数为12％,接收距离为22 cm,纺丝电压为22 kV,注射的速率为0.5 mL/h,接收器滚轮转速为300 r/h的条件下,能够得到纤维样貌良好的纳米纤维膜;通过亲水改性,聚氨酯膜由疏水性变为亲水性,膜上接枝了作为亲水基团的羟基;壳聚糖浓度为0.5％时,聚氨酯膜上有最大的载酶量,为83.2 mg/g;同时固定化柚苷酶具有最高的相对酶活性,且固定化酶相较于游离酶在一定的温度、反应时间和pH下表现出更高的酶活性.

摘要： 采用酶法对柑橘酒进行脱苦处理,以脱苦率和感官评价为指标,考察柚苷酶在发酵前和发酵后加入对脱苦效果的影响。同时,优化脱苦条件对脱苦效果的影响,并通过正交试验优化脱苦工艺。结果表明通过酶的加入时期的考察,发现对发酵后的柑橘原酒进行加酶处理的脱苦效果要优于对鲜榨柑橘汁进行加酶处理的脱苦效果。在此基础上对柑橘原酒进行脱苦工艺条件的优化,结果表明100mL的柑橘原酒添加0.6 g/L的柚苷酶,pH值7.0、反应温度50°C、反应时间60 min时柚苷酶的脱苦效果最好,柑橘酒脱苦率可达到64.05%,感官评分81.26分。研究表明酶法对柑橘酒进行脱苦可行并有效。

摘要： 将柚柑类水果果皮充当碳源作为发酵原料,采用固态发酵黑曲霉产柚苷酶进行研究,探究了接种量、固液比、诱导剂与疏松剂比例、氮源种类及浓度等不同的固态培养基条件对黑曲霉发酵柚苷酶酶活力的影响,进一步设计了4因素3水平L 9(34)正交试验,来确定黑曲霉发酵产柚苷酶的最佳条件.通过单因素实验得出最佳固态发酵参数:接种量为10％(v/v),固液比为1:2.5,诱导剂与疏松剂的比例为3:2.5,最佳氮源为(NH 4)2 SO4.采用正交实验法测定不同因素对黑曲霉固态发酵产柚苷酶的影响,结果表明各因素影响效果为接种量>固液比>氮源浓度>诱导剂与疏松剂的比例,得到最佳发酵工艺参数为接种量为10％(v/v),固液比为1:2.5,橙皮粉加入量为3.0 g,麸皮加入量为2.5 g,(NH 4)2 SO4的加入量为0.5 g/瓶,得到最大酶活力为18697.49 U/g.

摘要： 该研究以黑曲霉(Aspergillus niger) SL2K为研究对象,对其产柚苷酶的液态发酵条件进行优化.通过单因素试验对碳源、氮源、诱导物、接种量、初始pH值和培养时间进行考查,在单因素基础上,选取麸皮粉添加量、蛋白胨添加量、接种量、初始pH值4个因素进行4水平正交试验优化.结果表明,优化后的产酶发酵条件为麸皮粉添加量3％,蛋白胨添加量5％,接种量8％,初始pH值为5.0,鼠李糖0.08％、KH2PO41 g/L,KO 0.5 g/L,MgSO4·7H2O 0.5 g/L,FeSO40.01 g/L,装液量为100 mL/250 mL,摇床转速180 r/min,培养温度28°C,培养时间96 h.在此优化条件下,柚苷酶活力为233.89 U/mL,是优化前的2.13倍.

摘要： [目的]对黑曲霉TC-01产柚苷酶进行分离纯化及酶学性质研究,并对柚苷酶降解内毒素进行初步研究.[方法]黑曲霉TC-01发酵优化后的酶液经硫酸铵分级盐析、透析浓缩、DEAE Bio-Sep FF离子交换层析等分离纯化,考察酶学性质,初步研究柚苷酶对内毒素的降解作用.[结果]柚苷酶纯化后,比活力6429.3u/mg,纯化倍数31.1倍.酶学性质研究结果表明TC-01产柚苷酶最适pH4,最适温度60°C,考察金属离子对酶活影响,1 ～ 10mMCa2+、Mg2+对柚苷酶酶活有促进作用,Zn2+、Fe2+、Fe3+、Cu2+对柚苷酶的酶活有抑制作用,Fe2+抑制作用最为强烈.柚苷酶对内毒素具有降解作用,柚苷酶与内毒素反应1h,内毒素降解率达到79.9％.[结论]研究为柚苷酶的工业化生产提供理论依据,同时拓宽了柚苷酶的应用范围,为进一步研究柚苷酶降解内毒素提供了基础数据,具有重要的科学意义和应用价值.%[Objective] The purification and characterization of naringin produced by Aspergillus niger TC-01 were investigated,and the degradation of endotoxin by naringin was studied.[method] The fermentation broth produced from liquid fermentation by Aspergillus niger TC-01was purified by ammonium sulfate fractionation,dialysis and concentration and DEAE Bio-Sep FF ion exchange chromatography.Enzymatic properties were investigated,and the effect of naringin on the degradation of endotoxin was studied as well.[results] after purification,the specific activity of naringinase is 6429.3u/mg,purification fold is 31.1.Characterization results showed that the optimum pH is 4,the optimum temperature is 60°C.The effects of metal ions on enzyme activity was investigated,and the results were:1 ～ 10mM Ca2+ and Mg2+ can promote the enzyme activity of naringin,and Zn2+,Fe2+,Fe3+ and Cu2+ inhibited the enzyme activity of naringin,in which,the inhibitory effect of Fe2+ was the strongest.Moreover,naringin can degrade endotoxin.After 1 hour reaction between Naringin and endotoxin,the degradation rate of endotoxin reached 79.9％.[Conclusion] The study provides a theoretical basis for the industrialization of nadnginase,and at the same time,it widens the scope of application of naringinase and also provides the basic data for the further study of naringinase degradation,which has an important scientific significance and application value.

摘要： 利用常温室压等离子体技术对一株产柚苷酶菌株互隔交链孢霉(A.alternate)SK.37001进行快速诱变处理,获得一株高产柚苷酶菌株A.alternate SK.37002,与野生菌株相比,该菌株发酵酶活提高了208％.通过单因素实验确定发酵产柚苷酶的最适碳源为蔗糖,最适诱导物为柚皮苷,最适氮源为硝酸钠,利用Plackett-Burman试验筛选出影响液态摇瓶发酵酶产量的3个重要因素:硝酸钠、氯化钙、磷酸氢二钾,在此基础上运用最陡爬坡实验逼近最大响应值区域,再利用Box-Behnken设计及响应面分析法进行回归分析,获得最佳培养基配方为:1g/L柚皮苷,5g/L蔗糖,5 g/L硝酸钠,0.8 g/L磷酸氢二钾,0.7 g/L氯化钙,0.5 g/L氯化钾,0.5 g/L硫酸镁.采用优化后的培养基进行摇瓶发酵产柚苷酶酶活为624.73 U/mL,与模型预测接近,发酵产酶量比优化前提高了90％.

摘要： 在柚皮产品深加工中,为了使柚皮达到更好的脱苦效果,以柚皮脱苦率为指标,采用超声波辅助碱液-酶解法对柚皮进行脱苦.经单因素和正交实验得出超声波辅助碱液法优化工艺条件为:料液比1∶30 (g/mL),超声时间20 min,超声温度55°C,超声功率120 W,所得脱苦率为75.31％.在超声波优化基础上,通过响应面优化实验对柚皮进行柚苷酶酶解处理,其优化条件为:酶添加量0.15％,酶解温度52°C,酶解pH4.1,酶解时间36 min,所得柚皮脱苦率为90.14％.此方法与传统柚苷酶酶解法相比,具有更高的脱苦效率.%The ultrasound-assisted alkaline solution-enzymolysis method,which used removal rate of naringin as the index,was studied to get better debittering effect in the further-processing product of shaddock peel.By single factor experiment and orthogonal experiment,the results showed that the optimum treatment conditions of ultrasound-assisted alkaline solution were obtained as follows:material-to-liquid ratio 1∶30 (g/mL),ultrasonic treatment time 20 min,ultrasonic temperature 55 °C,ultrasonic power 120 W.Under these optimum conditions,the removal rate of naringin was 75.31％.On this basis,by response surface design,the results showed that 90.14％ removal rate of naringin was achieved through the use of naringinase at 0.15％,dosage for 36 min,pH4.1 and 52 °C.The results of this study indicated that the ultrasound-assisted alkaline solution-enzymolysis method was more effective compared with the traditional naringinase enzymolysis method.

摘要： 本研究利用前期筛选获得的一株解淀粉芽孢杆菌11568进行液体发酵产柚苷酶,并考察不同碳源、氮源、pH值、培养温度、摇瓶转速、金属离子种类与浓度等对该菌株产柚苷酶能力的影响.通过单因素考察、响应面分析可知,解淀粉芽孢杆菌11568液体发酵产柚苷酶的最优培养基成分为(g/L):麦芽糖15.1,胰蛋白胨10,(NH4)2HPO420,NaC110,酵母提取物5;最优发酵条件为:培养温度40.9°C,摇床转速180r/min,pH7.5,发酵时间48h.在最优条件下,柚苷酶活力达到201.12U/mL,是优化前的2.4倍。

摘要： 以柚皮为原料,优化棘孢曲霉利用柑橘加工副产物固态发酵柚苷酶的条件.采用高效液相色谱法检测酶活力,通过单因素实验考察固水比、装样量、接种量、温度对柚苷酶发酵的影响,用正交实验优化发酵条件.单因素试验结果的显著性分析表明培养基的固水比、装样量和培养温度对柚苷酶产量有显著性影响,而接种量影响不显著;经正交试验确定的优化条件是:固水比1∶1(w/v),装样量5g/250mL三角瓶,温度为30°C,接种1mL孢子悬浮液,发酵8天.在此优化条件下,柚苷酶酶活力为8.19IU/gds,比初始培养基产柚苷酶活力提高7.38倍.通过对固水比、装样量和发酵稳定进行优化,大幅度提高了棘孢曲霉固态发酵柑橘加工副产物的柚苷酶产量,为柚苷酶的生产提供了一种高产发酵工艺.

摘要： 柚皮苷作为黄酮类化合物的主要代表物质之一,主要存在于未成熟的柑橘类果皮中.柑橘类果汁中往往含有大量的柚皮苷物质,使得果汁产生较重的苦味.柚苷酶主要用于除去柑橘类果汁中的柚皮苷.利用微生物产生的柚苷酶进行脱苦是一种理想、经济的方法,且已成为此行业的关注焦点.本文采用紫外和微波联合诱变方法对从自然界筛选得到的柚苷酶产生菌进行诱变育种;研究诱变后菌株的产酶特性以及粗酶酶学性质,并对柚苷酶进行分离纯化;最后探究其对柑橘类果汁脱苦的应用效果.rn 从自然界中筛选获得15株产柚苷酶的菌株，选择其中一株酶活力最高的菌株进行形态学以及18S rDNA鉴定，确定为黑曲霉并命名为Asperillus niger N-01。以此为出发菌株，采用紫外-微波联合诱变技术处理，突变菌株A.niger N-132产酶能力达到81.50U/mL，酶活力较原始菌株提高4.7倍，且具有较好的遗传稳定性。rn 对突变菌株A.niger N-132的产酶条件进行优化。确定A.niger N-132的液体产酶培养基配方为:桔皮粉(30目-120目)2.7%，豆渣0.5%，酵母膏2.0%, KH2PO4 1.0%, Na2HPO4 0.1%，MgSO4`7H2O1.0mmol/L,FeC13 1.0mmol/L，CaCl2 1.0mmol/L，培养基初始pH5.0-6.0;培养温度30°C，接种量5.0%，装液量30mL/250mL，在上述条件下产酶水平可达到114.68U/mL。固态发酵基质中，确定桔皮粉与豆渣的最适比例为2:1;接种量20%，培养基初始pH为6.5，培养温度30°C。在上述条件下发酵，菌株在108h-168h处于产酶高峰期，最高酶活力可达到2163.74U/g干曲;同时确定从湿曲提取柚苷酶的最佳固液比与浸提时间分别为1:6和5.5h.

摘要： 优化黑曲霉变异株Aspergillus niger wz001的液态培养条件,选择麸皮为碳源,加量为1％,豆饼粉为氮源,加量为1～3 ％,磷酸盐选择(NH4)H2PO4.经优化,橙皮苷酶和柚苷酶的酶活分别达到988.4U/ml和992.6U/ml,分别提高41％和46％。

摘要： 柚皮苷是柑橘汁及其加工制品中的主要苦味物质.通过筛选、诱变得到一株能分泌胞外柚苷酶的黑曲霉菌株HZG-7-11-11.实验结果表明培养108 h柚苷酶活力可达到1026 U.当向培养基中添加1％橘子渣和0.5％鼠李糖时,柚苷酶酶活力有所提高,分别达1268 U及1249 U,但更高浓度的橘子渣或鼠李糖并不能诱导更高的酶活.45％硫酸铵浓度对于黑曲霉突变株HZG-7-11柚苷酶有较好的沉淀效果.

摘要： 本发明涉及柚苷和柚苷配基在哺乳动物中抑制酰基CoA-胆固醇-O-酰基转移酶(ACAT)的活性、抑制巨噬细胞-脂质复合物在动脉壁上的累积、以及预防或治疗肝病的应用。

摘要： 本发明涉及柚苷和柚苷配基在哺乳动物中抑制酰基CoA－胆固醇－O－酰基转移酶(ACAT)的活性、抑制巨噬细胞—脂质复合物在动脉壁上的累积、以及预防或治疗肝病的应用。

摘要： 本发明提供了一种可同时高产柚苷酶和橙皮苷酶、并能实现工业化生产的黑曲霉菌WZ001(Aspergillus niger WZ001)及其应用。所述黑曲霉菌WZ001保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCCNo.206047，保藏日期2006年5月15日，提议的分类命名为黑曲霉菌WZ001。本发明所述的黑曲霉菌WZ001产酶量高，采用液态发酵培养时，柚苷酶与橙皮苷酶产酶量均可达到14000U/g发酵原料以上；采用固态发酵培养时，柚苷酶与橙皮苷酶产酶量均可达到6000U/g发酵原料以上。

摘要： 本发明提供一种柚苷酶水解蜂胶黄酮苷的方法，采用柚苷酶对蜂胶黄酮苷进行恒温酶解，通过酶解，蜂胶黄酮苷类物质水解为黄酮苷元，与原料相比，产物的抗氧化性能增强。所获酶解产物经高效液相色谱测定其黄酮类物质含量，结果显示黄酮苷类物质含量下降，而黄酮苷元类物质含量明显提高。本发明是对蜂胶产品的深度开发利用，有利于提高蜂产品的附加值，开拓其应用范围。制得的蜂胶酶解产物抗氧化性能显著提高，较之原料蜂胶，可更好地应用于医药、食品和化妆品等领域。

摘要： 本发明公开了一株粘质沙雷氏菌及其在生产柚苷酶中的应用，属于微生物技术领域。该菌株命名为粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）C10，其于2022年1月19日保藏于广东省广州市越秀区先烈中路100号大院59号楼的广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:62223。该菌株为一株新型可以产柚苷酶的菌株，能高效催化水解柚皮苷，所产柚苷酶对柚皮苷水解效率为90%左右，所产柚苷酶活性及稳定性较好。因此，粘质沙雷氏菌C10对不同柑橘类果汁脱苦加工及风味改良上具有重要应用潜力。

摘要： 本发明提供了一种可同时高产柚苷酶和橙皮苷酶、并能实现工业化生产的黑曲霉菌WZ001(Aspergillus niger WZ001)及其应用。所述黑曲霉菌WZ001保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCCNo.206047，保藏日期2006年5月15日，提议的分类命名为黑曲霉菌WZ001。本发明所述的黑曲霉菌WZ001产酶量高，采用液态发酵培养时，柚苷酶与橙皮苷酶产酶量均可达到14000U/g发酵原料以上；采用固态发酵培养时，柚苷酶与橙皮苷酶产酶量均可达到6000U/g发酵原料以上。

摘要： 一种利用生物酶反应将淫羊藿苷转变为淫羊藿苷元以提高其生物活性的方法。在柚苷酶的作用下，浓度为30％-70％的乙醇水溶液中进行反应。所述反应温度为40-70°C，反应时间为1-30小时。淫羊藿苷羟基上的糖基被切下来，转为具更高药理活性的淫羊藿苷元。本发明还提高了淫羊藿苷的可加工性，同时可扩大其实际应用范围。

摘要： 一种利用生物酶反应将淫羊藿苷转变为淫羊藿苷元以提高其生物活性的方法。在柚苷酶的作用下，浓度为30％-70％的乙醇水溶液中进行反应。所述反应温度为40-70°C，反应时间为1-30小时。淫羊藿苷羟基上的糖基被切下来，转为具更高药理活性的淫羊藿苷元。本发明还提高了淫羊藿苷的可加工性，同时可扩大其实际应用范围。

摘要： 本本发明提供一种柚苷酶水解蜂胶黄酮苷的方法，采用柚苷酶对蜂胶黄酮苷进行恒温酶解，通过酶解，蜂胶黄酮苷类物质水解为黄酮苷元，与原料相比，产物的抗氧化性能增强。所获酶解产物经高效液相色谱测定其黄酮类物质含量，结果显示黄酮苷类物质含量下降，而黄酮苷元类物质含量明显提高。本发明是对蜂胶产品的深度开发利用，有利于提高蜂产品的附加值，开拓其应用范围。制得的蜂胶酶解产物抗氧化性能显著提高，较之原料蜂胶，可更好地应用于医药、食品和化妆品等领域。

摘要： 本发明公开了一株粘质沙雷氏菌及其在生产柚苷酶中的应用，属于微生物技术领域。该菌株命名为粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）C10，其于2022年1月19日保藏于广东省广州市越秀区先烈中路100号大院59号楼的广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:62223。该菌株为一株新型可以产柚苷酶的菌株，能高效催化水解柚皮苷，所产柚苷酶对柚皮苷水解效率为90%左右，所产柚苷酶活性及稳定性较好。因此，粘质沙雷氏菌C10对不同柑橘类果汁脱苦加工及风味改良上具有重要应用潜力。