染色体制备

摘要： 外周血淋巴细胞染色体G显带制备方法在临床应用广泛,作为遗传学诊断中最为基础也是最行之有效的一种检测手段。制备过程繁琐,接种、收获、制片、显带等操作可能都对其最终结果产生一定影响。但现在并没有统一的制备标准,并且进行该操作的实验室环境以及操作人员手法和相关的步骤也有很大的差异,这就导致染色体检查质量有很大区别。本文针对于国内外报道的染色体G显带制备方法进行综述,从而帮助提升染色体制备的核型质量。

摘要： 染色体制备实验技术是生命科学领域各专业学生都须掌握的一项基本实验技能。本文从实验前准备、标本的处理、制片方法、压片方法以及显微拍摄方法等各个实验课程环节进行了创新性优化和改进。在要求学生熟练掌握操作步骤的同时,强调指导学生开展自主探究性实验,帮助提高学生实验操作效率,激发学生对科学探究实验的兴趣,提高分析问题和解决问题的能力,为新形势下提升具体高校实验教学工作提供了借鉴。

摘要： 目的对外周血染色体吉姆萨显带制备条件进行优化,以提高染色体制备成功率。方法选取2021年4月~2022年4月因不孕不育就诊于梧州市工人医院生殖医学中心的116例成年患者的外周静脉血为研究对象,其中单因子梯度实验15例,正交实验设计1例,优化前组50例和优化后组50例。在现有染色体制备体系基础上,通过单因子梯度实验对影响外周血染色体制备成功率的秋水仙素作用浓度、作用时间及低渗处理时间进行优化,根据单因子梯度实验结果进行3因素3水平正交实验设计,以染色体制备成功率最高的条件组合作为最适的外周血染色体制备体系。并进一步对优化前、后两组<320带,320~400带和400~550带的分裂相所占比例进行比较分析。结果单因子梯度实验结果表明,染色体制备成功率随着秋水仙素作用浓度、作用时间及低渗处理时间的增加均呈先升高后下降趋势。在秋水仙素不同作用浓度实验中,当秋水仙素作用浓度为0.24μg/ml时染色体制备成功率最高,达67.67%;在秋水仙素不同作用时间实验中,当秋水仙素作用时间为30 min时染色体制备成功率最高,达62.33%;在不同低渗处理时间实验中,当低渗处理时间为35 min时染色体制备成功率最高,为64.17%。根据单因子梯度实验结果,秋水仙素作用浓度设置0.20,0.24,0.28μg/ml三个水平,秋水仙素作用时间设置25,30和35 min三个水平,低渗处理时间设置30,35,40min三个水平,进行正交实验设计。结果表明秋水仙素作用浓度为0.24μg/ml,秋水仙素作用时间30 min,低渗处理时间40 min是外周血染色体制备最适体系。优化前组吉姆萨显带<320带的分裂相占比(64.30%)显著高于优化后组(43.78%),差异具有统计学意义(χ^(2)=508.443,P<0.001);优化后组320~400带,400~550带分裂相占比(40.30%,15.29%)均显著高于优化前组(33.12%,2.58%),差异具有统计学意义(χ^(2)=66.629,635.346,均P<0.001)。结论经优化后确定的染色体制备体系可提高染色体制备成功率,值得临床应用与推广。

摘要： 通过体检数据分析了解制备染色体过程中的注意事项,为更好的培养、收获淋巴细胞分裂中期形态好的染色体提供有利技术保障.常规的静脉血直接培养法,无菌采集静脉血后注入肝素抗凝管中,充分混匀后,然后取0.5～1.0 mL肝素抗凝的全血注入RPMI1640细胞培养液(北京易世盛达公司生产的)中,以80次/分钟的速度摇匀后,放(37±0.5)°C恒温培养箱培养56 h后收获染色体.制备染色体的过程中的采集新鲜血液后未能及时进行培养、培养箱温度不恒定、加入的秋水仙素浓度高低的影响及培养时间长短对染色体分裂相的数量、形态及清晰度起着关键性作用.

摘要： 目的 探讨染色体分散仪在胎儿染色体制备过程中的意义.方法 使用染色体分散仪控制染色体滴片时的环境温度及湿度,制备染色体并对染色体的分散程度、染色体质量进行分析,以探索最佳的温度/湿度组合.结果 提高温度和相对湿度,均可增加脐血和羊水细胞染色体的分散程度,且分布均匀,染色体重叠交叉少,优于传统染色体滴片法.结论 Chromprep S4恒温系统可在不同的实验室之间采用完全相同的仪器参数,制备出较高质量的染色体标本,提高胎儿染色体产前诊断分析的准确度.

摘要： 目的 分析人外周血淋巴细胞染色体制备中的影响因素,做好质量控制,掌握染色体制备技术,及时准确反映辐射损伤情况,为诊断与治疗提供依据.方法 采用微量全血培养法制备标本,以RPMI1640全培养基进行体外淋巴细胞培养,对采血后细胞培养时间、秋水仙素浓度、滴片等影响因素进行分析.结果 1 089例放射工作人员外周血淋巴细胞染色体标本中,1次培养成功1 077例,出现问题后采取补救措施补救成功12例,成功率100％.结论 影响人外周血淋巴细胞染色体制备的因素很多,总结一套适合本实验室的制备方法,确保外周血染色体制备成功.

摘要： 目的：改进小鼠染色体制备过程中的关键环节,提高分裂中期染色体制备效果.方法：取材前24小时于小鼠皮下注射酵母液,2-3小时腹腔注射秋水仙素,并用剪碎小鼠股骨法比对冲洗骨髓法以期提高细胞及细胞中期相绝对值.结果：染色体形状呈均匀的圆盘状分布.与对照组比较,注射酵母液的小鼠骨髓染色体标本中的染色体数升高显著;与冲洗骨髓组标本中的染色体数值比较,剪碎骨髓组的染色体数升高显著(P＜0.05),有统计学意义.结论：采用注射酵母液和剪碎骨髓法可提高小鼠骨髓染色体的中期相细胞数.

摘要： 为确定在鱼类规格大小不同情况下制各鱼类染色体的最佳策略和方法,并对赤点石斑鱼和棕点石斑鱼(♀)×鞍带石斑鱼((♂))杂交子代(俗称:珍珠龙胆)的染色体核型进行研究.分别取赤点石斑鱼和珍珠龙胆幼鱼的头肾组织、鳍条以不同的处理方法制备染色体,观察染色体形态并对其染色体核型进行分析.结果显示:选用的染色体制备方法均能获得形态较好且图像清晰的细胞分裂相;不同的处理方法其分裂指数存在一定的差异:头肾组织细胞分裂指数比直接选取的幼鱼鳍条要高;热滴片和冷滴片所得到的染色体质量也不同,热滴片效果优于冷滴片.赤点石斑鱼染色体的核型为2n=48,10st+ 38t,NF=58;珍珠龙胆染色体的核型为2n=48,4st+ 44t,NF=52.本文对赤点石斑鱼的研究结果和前人报道略有不同,珍珠龙胆与父本鞍带石斑鱼的染色体数目、核型基本一致,而与母本棕点石斑鱼的核型存在很大差异.本文研究结果为在不同研究目的下选取适宜的鱼类染色体制备方法提供了参考资料;两种鱼的2n数相同,它们的核型特点符合典型的高位类群鱼类核型特征.结合已有报道,显示石斑鱼类染色体形态存在一定程度的多样性.对这2种石斑鱼的核型比较分析时,将已报道的25种石斑鱼核型进行比较,为石斑鱼的种质鉴定、遗传资源保护利用和育种提供基础资料和理论指导.

摘要： 为确定在鱼类规格大小不同的情况下制备鱼类染色体的最佳策略和方法,并对赤点石斑鱼和棕点石斑鱼(♀)×鞍带石斑鱼(♂)杂交子代(俗称:珍珠龙胆)的染色体核型进行研究.分别取赤点石斑鱼和珍珠龙胆幼鱼的头肾组织、鳍条以不同的处理方法制备染色体,观察染色体形态并对其染色体核型进行分析.结果显示:选用的染色体制备方法均能获得形态较好且图像清晰的细胞分裂相;不同的处理方法其分裂指数存在一定的差异:头肾组织细胞分裂指数比直接选取的幼鱼鳍条要高;热滴片和冷滴片所得到的染色体重也不同,热滴片效果优于冷滴片.赤点石斑鱼染色体的核型为2n =48,10st+38t,NF=58;珍珠龙胆染色体的核型为2n=48,4st+44t,NF=52.本文对赤点石斑鱼的研究结果和前人报道略有不同,珍珠龙胆与父本鞍带石斑鱼的染色体数目、核型基本一致,而与母本棕点石斑鱼的核型存在很大差异.本文研究结果为在不同研究目的下选取适宜的鱼类染色体制备方法提供了参考资料;两种鱼的2n数相同,它们的核型特点符合典型的高位类群鱼类核型特征.已有报道,显示石斑鱼类染色体形态存在一定程度的多样性.对这两种石斑鱼的核型比较分析时,将已报道的25种石斑鱼核型进行比较,为石斑鱼的种质鉴定、遗传资源保护利用和育种提供基础资料和理论指导.

摘要： 本发明公开一种用于风信子属植物根尖染色体荧光原位杂交染色体制片的处理方法，包括风信子染色体制片和染色体制片处理，重点解决了风信子利用现有荧光原位杂交技术很难检测到清晰杂交信号的缺陷。风信子属植物根尖含有多糖、多酚等次生代谢物，水培风信子根系直径约1.5‑2.0 mm，分生区域被较厚的表皮细胞包裹在根尖中部，因此压片时杂质较多，获得的染色体制片直接用于FISH杂交，很难检测到清晰的杂交信号，本发明通过酶处理染色体制片后再进行FISH杂交能够捕捉到微小但清晰的信号。本方法处理的风信子属根尖染色体制片适用于45S rDNA探针、5S rDNA探针、18S rDNA探针、端粒探针等FISH杂交。

摘要： 一种外周血染色体专用真空采集管，包括管体和套于管体上部的管帽，管体底部呈圆锥状，管帽顶面设第一穿刺孔和第二穿刺孔，管帽内、管体上方设橡胶隔层，橡胶隔层与管帽内顶面之间的空腔为负压腔，管帽一侧开设通孔Ⅰ，管体上与管帽通孔Ⅰ对应处开设通孔Ⅱ，当通孔Ⅰ与通孔Ⅱ处于同一方向时，管体内腔与大气连通，所述管体容量为15毫升，管体壁上设置刻度，管帽与管体之间为螺纹连接。本发明在制备染色体时不需要转管，标本采集、接种培养、细胞收获都在同一管，节省成本，生物安全风险低，操作简单、易于自动化、不易加错样本，且连接更牢固，加样更准确。

摘要： 本发明公开一种用于风信子属植物根尖染色体荧光原位杂交染色体制片的处理方法，包括风信子染色体制片和染色体制片处理，重点解决了风信子利用现有荧光原位杂交技术很难检测到清晰杂交信号的缺陷。风信子属植物根尖含有多糖、多酚等次生代谢物，水培风信子根系直径约1.5‑2.0 mm，分生区域被较厚的表皮细胞包裹在根尖中部，因此压片时杂质较多，获得的染色体制片直接用于FISH杂交，很难检测到清晰的杂交信号，本发明通过酶处理染色体制片后再进行FISH杂交能够捕捉到微小但清晰的信号。本方法处理的风信子属根尖染色体制片适用于45S rDNA探针、5S rDNA探针、18S rDNA探针、端粒探针等FISH杂交。

摘要： 本发明公开了一种为解决染色体核型分析而提供的一种染色体制备方法及所需培养基及其制备方法，培养基是由RPMI1640、肝素钠、HEPES、L-谷氨酰胺、NaHCO3、青霉素G钾、硫酸链霉素、牛血清、植物血球凝集素(PHA)组成，其检测方法为将人体外周血0.3ml-0.4ml种入该培养基后，在终止培养前2-4h加入秋水仙酰胺使细胞停止于分裂中期，细胞培养至68-72h收获细胞，再经过低渗40mi n，三次固定，显带，染色等处理，在显微镜下进行染色体分析，以确定外周血提供者是否存在染色体异常。本发明的培养基使用方便，操作简单，成本低，患者检测费低，适合于各级医院用于遗传诊断、不孕不育及产前诊断。

摘要： 一种全自动染色体制备设备，包括：培养机构，包括用于放置培养皿的培养箱；存取机构，包括夹台和第一转运组件，所述第一转运组件用于驱动所述夹台对培养箱内的培养皿进行存取；离心机构，包括用于放置培养皿的离心架和用于驱动所述离心架沿水平旋转的离心动力源；处理机构，包括安装座和第二转运组件，所述第二转运组件用于带动所述安装座在所述夹台和离心架之间移动，所述安装座上设有用于抓取培养皿的抓取组件、用于对培养皿进行开盖的旋盖组件和用于对培养皿添加试剂的加样组件。上述方案实现了对培养皿的培养、转运、加样、离心等一系列流程的全自动操作，在提升了制备效率的同时降低了污染可能性，有效避免了人工干预。

摘要： 本发明提供了一种适用于多种动物的染色体制备方法，涉及生物技术领域。本发明的染色体制备方法包括如下步骤：经秋水仙素处理后的细胞，用0.2％～0.3％胰酶消化细胞2～5min后终止消化，收集细胞；将收集的细胞经低渗、预固定、固定后制成细胞悬液；将细胞悬液滴在玻片上制得染色体标本；将染色体标本用0.1％～0.2％胰蛋白酶溶液消化1～3min，再用Giemsa染液染色后用水冲洗，自然晾干即可。本发明的制备方法能够获得更多分散良好、长短适中、轮廓清晰、完整的标准分裂相，可以制出各类细胞的染色体标本。

摘要： 本实用新型涉及教学设备技术领域。公开了一种用于植物染色体制备预处理的压力反应容器，包括：压力罐，所述压力罐下部固定镶嵌有对称布置的单向阀，右侧所述单向阀为进气阀，左侧的所述单向阀为出气阀，所述压力罐的内部固定安装有支撑板，所述支撑板上固定安装有反应容器，所述反应容器上插接有盖板，所述压力罐上卡接有盖子。本实用新型提供一种用于植物染色体制备预处理的压力反应容器，通过导气室与盖板相配合可实现使反应容器内的气压均匀的升高，避免因冲入压力罐的气流变化而引起的反应材料受压不均，通过压力表可及时观测到压力罐内的气压，使日常使用更加便捷。

摘要： 本实用新型公开了外周血染色体制备固定处理试剂盒，设置第一容纳室和第二容纳室，第一容纳室的开口端和第二容纳室分别用于容纳配置固定液的原料，第一容纳室的开口端和第二容纳室的开口端可拆卸连接，第二容纳室的内侧壁上粘接有隔离膜，第一容纳室的上壁贯穿设置有按压杆，按压杆且位于第一容纳室外部的一端固定连接有按柄，按柄与第一容纳室的上壁之间设置有弹簧，按压杆且位于第一容纳室内部的一端固定连接有刺破组件，通过下压按柄，带动按压杆及刺破组件下移刺破隔离膜，使得两个容纳室的原料混合，反复压动按柄，刺破组件随之反复移动对原料起到混合作用，本试剂盒可携带固定液，并且可进行及时配制。

摘要： 一种全自动染色体制备设备，包括：培养机构，包括用于放置培养皿的培养箱；存取机构，包括夹台和第一转运组件，所述第一转运组件用于驱动所述夹台对培养箱内的培养皿进行存取；离心机构，包括用于放置培养皿的离心架和用于驱动所述离心架沿水平旋转的离心动力源；处理机构，包括安装座和第二转运组件，所述第二转运组件用于带动所述安装座在所述夹台和离心架之间移动，所述安装座上设有用于抓取培养皿的抓取组件、用于对培养皿进行开盖的旋盖组件和用于对培养皿添加试剂的加样组件。上述方案实现了对培养皿的培养、转运、加样、离心等一系列流程的全自动操作，在提升了制备效率的同时降低了污染可能性，有效避免了人工干预。

摘要： 本实用新型公开了一种外周血淋巴细胞染色体制备N显带试剂盒，包括试剂管和盒体，所述盒体包括呈矩形的底板，所述底板的一侧表面固定连接有侧板，所述侧板的一端呈开口状，所述侧板对应设置开口的一端铰接有盒盖，所述盒体内部通过连杆连接有活动块，本实用新型通过设置试剂管与盒体，盒体由底板以及侧板构成，其内部通过连杆连接有活动块，连杆在驱动机构作用下转动时，即可将活动块移出盒体，试剂管插在活动块上的圆形槽内，从而取用过程中，活动块移出盒体，只需要将试剂管抽出即可，便于取用。