杂种鉴定

摘要： 【目的】鉴定石蒜属Lycoris种间杂交种F_(1)的真实性。【方法】利用荧光标记表达序列标签简单序列重复(ESTSSR)方法,构建亲本石蒜L.radiata、中国石蒜L.chinensis、换锦花L.sprengeri和石蒜-中国石蒜、石蒜-换锦花杂交种F_(1)共78个样品的分子身份证,并分析遗传关系。【结果】15对多态性强的荧光标记EST-SSR引物得到扩增条带92条,每对引物平均扩增6.13条;多态性信息量(PIC)为0.6292~1.0000,平均为0.9137。引物SSR203+SSR115对石蒜-换锦花、石蒜-中国石蒜杂交种F_(1)代的真实性鉴定率分别为96.30%和96.15%。非加权组平均法(UPGMA)聚类分析表明:石蒜、中国石蒜、换锦花及其种间杂交种的遗传相似系数为0.76~0.98,在相似系数为0.77处25个亲本和53个杂交种聚为Ⅰ和Ⅱ两大类,Ⅰ类包括亲本换锦花、石蒜-换锦花杂交种,Ⅱ类包括石蒜、中国石蒜以及中国石蒜-石蒜杂交种,Ⅱ类又可分为Ⅱa、Ⅱb和Ⅱc等3个亚类。利用荧光标记EST-SSR基因型编码,构建了78个石蒜属亲本及杂交种的分子身份证。【结论】荧光标记EST-SSR可用于石蒜属种间杂交种的早期鉴定。

摘要： 以花楸树〔Sorbus pohuashanensis(Hance)Hedl.〕为母本、少叶花楸〔S.hupehensis var.paucijuga(D.K.Zang et P.C.Huang)L.T.Lu〕为父本进行种间杂交,利用筛选出的9对扩增结果稳定且具多态性的EST-SSR引物,对杂交F_(1)代群体进行杂种鉴定,并对亲本和杂交F_(1)代群体的基因分离规律以及遗传多样性和遗传关系进行分析。结果显示:共获得184株杂交F_(1)代,其中175株在9个EST-SSR位点上均扩增出双亲条带,说明这些单株为真杂种,杂种率达95.1%;另9株在3~7个位点上呈现异常基因型,即缺失双亲条带或出现新条带。9对EST-SSR引物中,仅sorsd29在亲本中的扩增结果为aa×bb型(纯合互补型),其他8对引物在亲本中的扩增结果为aa×bc型(父本型)、ab×cd型(双亲互补型)或ab×ac型(杂合互补型),因而,在175株真杂种中,仅sorsd29位点未出现基因分离,另8个位点均出现了基因分离,经χ^(2)检验,F_(1)代分离比与期望分离比均无显著(P>0.05)差异。用9对EST-SSR引物从175株F_(1)代真杂种中共扩增出28个等位基因,观测等位基因数、有效等位基因数、多态性信息含量、Shannon s信息指数、观测杂合度和期望杂合度的均值分别为3.1、2.9、0.566、1.076、0.920和0.640。基于Nei s遗传距离,采用UPGMA法构建系统聚类图,结果显示:在Nei s遗传距离0.28处,少叶花楸单独成组Ⅰ,花楸树和175株F_(1)代单株聚为组Ⅱ;在Nei s遗传距离0.24处,组Ⅱ可进一步分为2个亚组,其中81株F_(1)代单株聚为亚组Ⅱ_(1),另94株F_(1)代单株与花楸树聚为亚组Ⅱ_(2)。综合分析结果表明:采用EST-SSR分子标记法可对花楸树和少叶花楸的杂交F_(1)代群体进行有效的杂种鉴定;获得的杂交F_(1)代单株的基因分离情况符合孟德尔分离定律,且与母本花楸树有较近的遗传关系;总体上看,杂交F_(1)代群体中175株真杂种的遗传多样性较为丰富。

摘要： 割手密具有宿根性好、抗逆性强和适应性广等特性,是甘蔗育种中利用最多,育种成效最显著的野生种。进一步发掘和利用割手密优良抗逆基因资源对现代甘蔗品种改良具有重要意义。为获得更多优良割手密的真实杂交后代,本研究以2个地方种为母本、3个野生割手密为父本进行杂交,获得3个F群体,共359份杂交后代。并从21对SSR标记中筛选出在双亲中具有多态性且扩增条带清晰的6对SSR标记,基于高通量的荧光毛细管电泳检测平台进行杂交后代真实性鉴定、亲本指纹图谱分析、遗传相似性分析和特异性条带的遗传分析。结果表明:共筛选出的6对SSR标记对5个亲本材料的分辨率较高,扩增多态性好,每个亲本都具有其特异的SSR指纹,可有效鉴定其杂交后代血缘的真实性;其中,359份F个体中共鉴定出真杂种262份,3个组合的真杂种率分别为67.77%、75.51%、75.66%,平均值为72.98%。遗传相似性分析表明2个地方种的遗传相似性系数为0.70,3个割手密两两间的遗传相似性系数分别为0.53、0.60和0.70,地方种和割手密间为0.38~0.53,种间遗传相似性系数小于种内。亲本特异性SSR位点的遗传分析结果表明,3个组合的母本特异性条带遗传率分别为68.47%、80.96%、73.39%,平均值为74.27%,而父本特异性条带遗传率分别为58.90%、76.60%、61.45%,平均值为65.65%,杂交后代具有偏母本遗传倾向,因此,在甘蔗杂交育种中应选择综合农艺性状较好的材料作为母本。本研究结果为今后割手密杂交后代的鉴定提供了高效、可靠的SSR标记选择,同时鉴定出的真实割手密后代群体可为开展割手密优异性状的遗传研究提供种质材料,为选育超亲遗传株系提供科学依据。

摘要： 甘蔗是雌雄同株高度杂合的异源多倍体植物.为去除杂交育种过程中因母本去雄不彻底导致的自交现象的干扰,有必要对杂交后代进行杂种真实性鉴定.本研究以'新台糖25号'为母本、'云蔗89-7'为父本进行有性杂交构建大规模遗传群体,获得F1代实生苗共17923株.从54个甘蔗SSR标记中筛选出一个具有父本特异性的SSR标记SMC31CUQ,通过多态性序列分析,重新设计了可特异性检测父本序列的PCR引物对SMC31CUQ-F/SMC31CUQ-1-R,并用其对整个遗传群体实生苗进行PCR鉴定,发现其中有9310株具有该父本特异性SSR标记,占群体的51.94％.大规模真杂种的获得,为进一歩构建甘蔗特定农艺性状亚群体奠定了基础.

摘要： 早期快速鉴定橡胶树F1杂交子代,获取真杂种对橡胶树优良品系的创育和遗传学研究具有重要的意义.以橡胶树优良品系'PR107'和'93-114'进行杂交,获得杂交组合子代,以亲本作为模板从104对SSR引物中筛选出3对多态性引物对35株杂交子代进行真实性鉴定,结果表明:35株杂交子代均鉴定为真杂种苗;筛选出的3对多态性引物都具有较高的杂种鉴定率,并验证了1对引物鉴定真伪杂种的可靠性,后续可作为橡胶树杂交子代真实性鉴定的理想SSR分子标记.

摘要： 本研究通过形态特征和相关序列扩增多态性(Sequence-related amplified polymorphism,SRAP)分子标记技术对结缕草属植物种间杂交获得的19个组合34个后代的形态变异和杂种真实性进行了鉴定.结果表明:同一组合不同后代在10个外部性状上均存在不同程度的差异;方差分析结果发现大部分杂交后代的外部性状与母本或双亲存在显著性差异;根据形态特征34个后代中有30个后代初步被鉴定为真杂种;SRAP分子标记鉴定结果显示,34个杂交后代均具有父本的特异性D N A片段,全部被鉴定为真杂种.本研究中的结缕草属植物杂种真实性鉴定结果为杂交后代的进一步研究及应用提供了科学依据.

摘要： 随着高通量测序技术的发展,从“组学”水平研究适应性进化分子机制成为进化生物学的研究热点。本研究以沙棘属的中国沙棘、肋果沙棘及二者的同倍化杂交物种棱果沙棘为材料,通过转录组测序,筛选出了受到正选择(w>1)的BRCA1-A&BRISC复合体亚基NBA1基因。生物信息学分析表明,NBA1基因在3种沙棘中编码区全长为771 bp,共编码256个氨基酸,为核定位的亲水性蛋白。中国沙棘与肋果沙棘中NBA1的氨基酸序列在218与236位存在差异,中国沙棘中靠近结合位点的218位突变为甲硫氨酸,不同于肋果沙棘及其他陆生植物中NBA1亚基VWA结构域中保守的亮氨酸,导致二者的蛋白质三级结构发生明显变化,且使中国沙棘与肋果沙棘中该蛋白结合位点的空间排布产生显著差异。综上,推测二者的NBA1亚基在结合其他亚基方面有所不同,主要导致了BRCA1-A复合体修复紫外辐射引起的DNA损伤修复功能方面出现差异,这可能与中国沙棘与肋果沙棘对不同海拔环境的适应有关。此外,Sanger测序验证了二代测序结果的准确性,证明该基因在亲本种中国沙棘与肋果沙棘中是纯合的单拷贝,在杂种棱果沙棘中以共显性的杂合方式存在。进一步分析发现第二代测序数据不适用于在个体水平鉴定杂种,但群体内多个个体的平行测序一定程度上可随机反映杂种的亲本来源。本研究为进一步揭示沙棘属植物对不同海拔的适应分子机制提供了参考数据,同时为利用转录组测序方法鉴定杂交物种提出了建议。

摘要： 以人工杂交获得的三倍体枇杷为试验材料,以亲本基因纽DNA分别为探针和封阻DNA,采用基因组原位杂交技术进行三倍体枇杷的杂种鉴定,并优化了GISH流程,结果表明：以亲本之一基因组DNA为探针,用另一亲本基因组DNA按探针浓度40倍的比例进行封阻,可以准确区分出三倍体枇杷杂种体细胞中不同来源的染色体,17条来自父本,34条来自母本,且没有发现明显的染色体结构变异如易位和倒位等。

摘要： 野生种质资源是进行栽培品种改良的非常重要的遗传资源。本文对通过有性杂交方法利用草莓属野生种质资源改良栽培品种及草莓属种间杂种鉴定方面的研究进展进行了综述,指出野生种与栽培种间的有性杂交是拓宽栽培种遗传背景、进行品种改良的有效途径;在种间杂种的鉴定中,应该将形态学、细胞学、生物化学及分子检测方法结合使用,以提高杂种鉴定的准确性。

摘要： 本试验通过对小黑麦(Triticale)品系P1和P2有性杂交得到的F1代群体进行田间表型鉴定及ISSR遗传多样性分析,以期为杂种鉴定和基因型多态性分析奠定基础.结果表明:(1)66个杂交F1代单株中14个单株为假杂种,52个单株为真杂种,其中5个单株无主茎、未结实,1个单株生长后期死亡;(2)46株真杂种的株高、分蘖数、有效分蘖数、穗长、小穗数、穗粒数和穗粒重均超过双亲,具有显著的杂种优势;(3)14对ISSR引物对46个真杂种扩增的多态性条带百分率平均为61.19％,其中UBC822多态性条带百分率为100％,UBC808和UBC815的多态性条带百分率均为75％.F1代群体和父母本的遗传相似系数为0.62-0.94,说明杂交后代产生了丰富的遗传变异.(4)聚类分析表明,在阈值0.748处,将杂交F1代群体和父母本分为3大类,第1类群包括1份材料(父本,P1),第2类群包括1份材料(母本,P2),第3类包括46个杂交F1代单株;杂交F1代与父母本的遗传距离较远,先与母本聚为1类,最后与父本聚为1类,说明46个杂交F1代均偏向母本.

摘要： 从20世纪80年代起,国际上就将流式细胞仪检测应用到植物的研究中,众多学者都认为流式细胞仪是一种准确、快速的检测DNA含量的方法.本实验室利用流式细胞仪对花椰菜(Brassica oleracea var.botrytis)与黑芥((Brassica nigra)原生质体融合后的自交和回交后代进行DNA含量检测，以受体花椰菜(染色体2n=18)的流式值为参照基准，三次重复测定后代植株流式值，初步确定其后代植株的染色体条数，并将这些后代分为三类:染色体条数小于18条:染色体条数为18 20条;染色体条数大于20条。然后采用常规压片制片法对植株后代进行根尖染色体观察，进一步确定后代植株的染色体条数，根据确定下来的后代染色体条数对流式细胞仪的检测结果进行验证。大量的观察后，证明利用流式细胞仪检测DNA含量确定的染色体条数与实际观察结果呈高度正相关性。

摘要： 运用RAPD分子标记,对4个杂交组合(ZJ、ZU、ZP和Lj)获得的493株杂种苗进行早期杂种鉴定,对杂种的签定可以根据有无父本的特征带或新带型来鉴定其足否杂交成功,4个组合从100条RAPD引物中共计筛选出9条具有父本特征带的引物,鉴定454株杂种苗为真杂种。

摘要： 本研究采用3条各有10个核苷酸的随机引物对“甘蔗×蔗茅”亲本和子代材料进行随机扩增多态性DNA(RAPD)反应,克隆了10个与父本血缘相关的特异RAPD标记,基于其中4个特异RAPD标记的序列,设计了5对SCAR(序列特定扩增区域)引物进行PcR扩增,结果表明,在供试的73份子代材料中,共有58份能扩增出特异的SCAR条带,可以判定它们是“甘蔗×蔗茅”的真实杂种。sCAR标记是一种高效、稳定、专一的鉴定杂种韵方法,本文将RAPD标记成功转化为sCAR标记应用于甘蔗杂种鉴定尚属首次.

摘要： 通过杂交方式国内首次获得以夏蜡梅为父本、美国蜡梅为母本的杂交种,性状观测证实是真实杂种,为培育杂交夏蜡梅新品奠定基础.

摘要： 通过杂交方式国内首次获得以夏蜡梅为父本、美国蜡梅为母本的杂交种,性状观测证实是真实杂种,为培育杂交夏蜡梅新品奠定基础.

摘要： 通过杂交方式国内首次获得以夏蜡梅为父本、美国蜡梅为母本的杂交种,性状观测证实是真实杂种,为培育杂交夏蜡梅新品奠定基础.

摘要： 通过杂交方式国内首次获得以夏蜡梅为父本、美国蜡梅为母本的杂交种,性状观测证实是真实杂种,为培育杂交夏蜡梅新品奠定基础.

摘要： 本发明提供一种鉴定芸薹属蔬菜种间杂种及后代材料A06和C07染色体分离情况的SSR分子标记和方法，属于植物遗传育种领域。该分子标记能快速、准确的鉴定出芸薹属A基因组(如白菜、红菜苔等)与C基因组(如芥蓝、埃塞俄比亚芥(含C基因组的))植物的种间杂种及其后代材料。该方法能鉴定芸薹属A基因组与C基因组植物远缘杂交及其回交后代，可以拓展芸薹属蔬菜的遗传资源，转育新性状，丰富蔬菜类型，丰富人民的日常膳食营养。

摘要： 本发明涉及鉴定用于诱导杂种优势、杂种劣势和/或诊断、预后或治疗疾病中的候选基因及其编码的蛋白质的方法。特别地，涉及鉴定能够在动、植物中产生杂种优势或杂种劣势的候选基因的方法，包括(i)比较从呈现出杂种优势或杂种劣势的动、植物分离的候选基因的等位基因的mRNA序列和从该动、植物的亲本分离的相应等位基因的核苷酸序列；(ii)鉴定来自呈现出杂种优势或杂种劣势的动物或植物的等位基因中编码氨基酸序列变化的mRNA序列差异；和(iii)鉴定由位于候选基因内的两个或多个不同外显子内的mRNA序列编码的所述动、植物中候选基因的等位基因之间的氨基酸序列变化。

摘要： 本发明涉及鉴定在疾病的诊断治疗和/或杂种优势的诱导中潜在有用的候选基因的方法。具体地，本发明涉及鉴定能在动物或植物中产生杂种优势或杂种无活力的候选基因的方法，包括如下步骤：(i)比较候选基因的等位基因的核苷酸序列；(ii)鉴定来自所述动物或植物的等位基因中的核苷酸序列差异；和(iii)鉴定候选基因的等位基因之间的氨基酸序列变化位于候选基因内的两个或更多个不同外显子中。

摘要： 本发明公开了一种平欧杂种榛授粉品种亲和性快速鉴定的方法，属农林作物栽培技术领域。本发明可以近距离、一次性水培、收集多个品种的花粉，一次性进行多个组合授粉，样品间不受污染；在授粉前后均设计了可选择的样品保存方式，解决了不能一次性完成实验的时间安排问题；用镊子和解剖针配合，挤出雌蕊的操作方式，降低了对实验人员的技术要求，提高了取样的成功率；明确了榛树雌蕊无须软化即可进行荧光显微实验。本发明进一步简化了鉴定实验的工作流程，可在授粉后16‑24h完成大批量样本的鉴定工作，从而实现了平欧杂种榛授粉品种亲和性鉴定的高效、快速、准确的目的。

摘要： 本发明提供了一种基于ITS序列和matK序列鉴定睡莲杂种的两个亲本的方法，属于植物分子鉴定技术领域，本发明的方法是基于一代测序得到睡莲杂种的双亲遗传的核基因组片段ITS序列和母系遗传的叶绿体基因组片段matK序列，将GenBank下载的ITS和matK序列，经过严格的筛选后分别建立睡莲属的ITS和matK序列数据库，通过将待测定亲本睡莲的ITS和matK序列分别与对应的数据库比对，基于遗传距离构建邻接树，并通过检查特异位点，从而得到待测定睡莲的父本和母本的信息。结果表明，基于GenBank下载并构建的睡莲属ITS和matK核苷酸序列数据库，通过测序待鉴定亲本的睡莲杂种的ITS序列和matK序列，能够通过遗传距离法鉴定得到睡莲杂种的母本和父本信息。

摘要： 本发明涉及一种基于单核苷酸多态性的花生真假杂种鉴定的引物组以及利用上述引物组进行花生真假杂种鉴定的方法。本发明可在一天时间内对最多可对多达384个样品进行68个位点的检测，相对于微卫星检测方法，效率提高50‑100倍。本方法是利用测序技术直接读取单核苷酸多态，结果直观，可靠，不存在样本间干扰问题。

摘要： 本发明公开金花茶SSR标记引物及其在杂种鉴定中的应用，开发了5对引物，利用SSR标记技术结合形态性状分析对金花茶杂种的真实性进行有效鉴定，从而为金花茶杂交育种提供科学依据。

摘要： 本发明涉及一种基于单核苷酸多态性的花生真假杂种鉴定的引物组以及利用上述引物组进行花生真假杂种鉴定的方法。本发明可在一天时间内对最多可对多达384个样品进行68个位点的检测，相对于微卫星检测方法，效率提高50‑100倍。本方法是利用测序技术直接读取单核苷酸多态，结果直观，可靠，不存在样本间干扰问题。

摘要： 一种用于黑色茶花杂种鉴定的SSR标记引物，所述引物为引物编号：SSR31，上游引物：5′‑CAAGGCAGAGTAGGCTGAGG‑3′，下游引物：5′‑AAAAGGGAAGGGGAAAGTCA‑3′，重复单元：(AGC)7，片段大小：212～273；引物编号：SSR48，上游引物：5′‑GTTGGAGGTTTTTCAGCCAC‑3′，下游引物：5′‑ATTGAAAGTCGCTGCTTCGT‑3′，重复单元：(CCG)7，片段大小：249～300；引物编号：SSR250，上游引物：5′‑ACCTCCAGCTTCCATCAGAA‑3′，下游引物：5′‑ATCTTGACGGGCGTAACATC‑3′，重复单元：(CCG)5，片段大小：261～315。本发明SSR标记重复性好、特异性强；利用SSR分子标记技术对黑色茶花杂种进行了有效鉴定，明确了黑色茶花杂种与亲本遗传变异的关系，实现对黑色茶花杂种后代进行快速鉴定和早期选择。

摘要： 本发明公开了一种利用SSR标记鉴定红姜花与白姜花种间杂交F1杂种真实性的方法。本发明通过分别提取亲本红姜花、白姜花和其杂交F1代的基因组DNA，进行SSR毛细管电泳扩增分析，采用SSR标记引物HcgSSR115和/或HcgSSR1951进行扩增，将种间杂交F1代与亲本的特征峰进行比对，鉴定杂种的真实性。本发明采用的SSR标记特异性强、重复性好，在早期就能筛选出真实杂种，具有鉴定时间短、准确率高、可靠性强的特点，能够替代传统使用形态学的杂种鉴定方法，有效提升了姜花种间杂种鉴定效率。本发明提供的方法能快速鉴定红姜花与白姜花种间杂种真实性，为姜花杂种研究提供有效依据，有利于姜花品种遗传改良。