木质素降解酶

摘要： 以女贞树树干上分离、纯化得到的哈茨木霉Trichoderma harzianum菌株(B7)和从杨树树干上分离、纯化得到的葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea菌株(N38)为对象。研究了2种菌株产生的3种木质素降解酶:漆酶(laccase,Lac)、木质素过氧化物酶(lignin peroxidase,LiP)和锰过氧化物酶(manganese peroxidase,MnP)的活性。结果显示,B7在培养第6 d时Lac活性最大,达到13.3 U·L^(-1),同时MnP活性也达到11.29 U·L^(-1),LiP在培养第8 d活性达到峰值为5.24 U·L^(-1);N38在培养第8 d时MnP活性最大,达到16.53 U·L^(-1),同时Lac活性也达到9.27 U·L^(-1),LiP在培养第6 d活性达到峰值为5.24 U·L^(-1)。通过染料固体培养基进行预脱色筛选,发现2个菌株对亚甲基蓝脱色效果最佳。菌株B7对亚甲基蓝的脱色优化结果为20.0 g·L^(-1)葡萄糖、1.0 g·L^(-1)硝酸钠、1.0 g·L^(-1)硫酸锌、pH3.0、装液量10.0 mL;菌株N38对亚甲基蓝的脱色优化结果为20.0 g·L^(-1)葡萄糖、1.0 g·L^(-1)氯化铵、1.0 g·L^(-1)硫酸镁、pH7、装液量30.0 mL。

摘要： 木质纤维是地球上最丰富的可再生生物质资源,其三大成分之一的纤维素是生产生物基材料、生物燃料及生物基化学品的重要原料,但是木质素复杂的化学结构阻碍了木质纤维的应用.常规木质素的物理、化学及物理-化学等降解方法常需要高温、高压条件,并且易产生抑制物、造成高能耗和环境污染等问题.微生物介导的生物催化过程通常在温和条件下进行,可以降低能源投入,为木质素的利用提供了更具体、更有效的选择.传统生物降解以白腐菌等真菌为代表,存在预处理周期长、对环境适应性差等问题,而细菌繁殖迅速、环境适应能力强、易于基因操作,成为未来木质素降解菌株的潜在候选者.本文在介绍木质素化学结构的基础上,综述了近年来微生物降解木质素的研究进展,着重分析了降解木质素的微生物(真菌和细菌)、木质素降解酶(过氧化物酶和漆酶)和降解机制,以及微生物降解木质素在脂类、生物塑料、香兰素、废水处理中的应用,并对微生物降解木质素的未来发展进行了展望.

摘要： 以前期试验获得的4株斑玉蕈(Hypsizigus marmoreus)杂交菌株为试材,利用亮蓝-PDA平板显色试验、苯胺蓝-PDA平板脱色试验、体细胞不相容试验和ISSR分子标记技术,筛选斑玉蕈木质素降解酶高活性菌株,并鉴定其生物学和遗传学特性,以期丰富斑玉蕈优良品种.结果 表明:杂交菌株JZB2124031的木质素降解酶活性最高,亮蓝-PDA平板和苯胺蓝-PDA平板可分别出现明显的变色圈和脱色圈,与其它菌株均可产生拮抗反应.15条ISSR分子标记引物具有扩增稳定性,当相似系数为0.75时,22株菌可以划分为九大类,其中杂交菌株JZB2124031独为一类.综上,杂交菌株JZB2124031具有较高的木质素降解酶活性,与其它供试菌株的亲缘关系存在较大的差异.

摘要： 对白腐菌偏肿革裥菌的命名,培养特性,木质素降解酶系统的活性检测,产酶发酵条件的优化,酶的纯化与酶学性质,对木材和木质素的分解能力,对染料和有毒物质的降解作用,木质素降解酶基因的克隆、结构与表达量分析,转录组构建与差异表达基因分析,转录因子等方面的研究进展进行系统地回顾,为进一步研究与开发偏肿革裥菌提供参考.

摘要： 漆酶是香菇生长发育过程中一种重要的木质素降解酶,其活性高低对于香菇木质素降解能力和香菇品质形成具有重要作用.为探讨香菇不同漆酶活性的单核菌丝体基因表达变化,对漆酶活性存在差异的单核菌丝体进行转录组测序分析,共获得15 522个注释基因.GO (gene ontology)分析表明差异基因在氧化还原酶活性节点大量富集,包括参与木质素降解的酶类及55个细胞色素P450基因;KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)分析发现淀粉和蔗糖代谢、戊糖和葡萄糖醛酸相互转化途径中糖苷水解酶、UDPG脱氢酶等基因上调表达.通过搜索转录因子数据筛选到172个差异表达的转录因子,预测了可能与漆酶结合的bZIP、C2H2、C4转录因子家族.由此推测,在漆酶高产单核菌株中木质素降解和碳水化合物代谢的相关基因的表达发生变化,及糖醛酸和磷酸戊糖途径相关基因上调表达,促进了木质素降解产物高效转化成糖、核酸等生物大分子,有助于香菇菌丝体的生长,转录因子在漆酶活性调控中起了重要作用.本研究为深入理解香菇漆酶高产菌株的生理代谢机制提供了重要的基因数据资源.

摘要： 通过对兔眼蓝莓幼果组织中分离得到的内生真菌G18进行形态特征、ITS序列和系统进化分析鉴定菌株G18为裂褶菌Schizophyllum commune.同时,对菌株G18产生的3种木质素降解酶进行监测,发现G18菌株可以分泌漆酶、木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶.为明确裂褶菌G18对染料的脱色能力,利用裂褶菌G18对固体条件下8种染料进行脱色能力的检测,筛选出较易脱色的染料后,对该染料的脱色条件进行优化.结果 表明,裂褶菌G18对8种染料均可以脱色,对孔雀石绿染料的脱色效果最好.裂褶菌G18对孔雀石绿的脱色优化结果为pH 7.0、20.0g/L淀粉、1.0g/L尿素、1.0g/L硫酸锌、接菌量9片(d =5.0mm).

摘要： 作为最丰富的可再生有机芳香族聚合物之一,木质素的生物降解和利用具有较好的环境、经济和社会效益,但繁多的木质素降解酶活测试方法为生物降解木质素的相关研究带来一定困难.本文围绕已发现的5种重要木质素降解酶(漆酶、锰过氧化物酶、木质素过氧化物酶、多功能过氧化物酶和染料脱色过氧化物酶),针对其来源、特性和酶与底物的作用机理,深入地比较和分析了多种木质素降解酶酶活测试方法.通过对ABTS法、2,6-DMP法、藜芦醇法、天青B法和其他特色方法从原理到应用的综合讨论,全面评估了上述方法的底物多样性、测试条件及适用范围.此外,本文还针对木质素降解酶酶活测试研究中所存在的主要挑战提出了解决思路,旨在为生物法降解木质素及其高值化利用的研究提供有效参考和策略.

摘要： 木质素降解酶是糙皮侧耳Pleurotus ostreatus分解木质素的关键酶.本文以糙皮侧耳栽培菌株New 831为试验材料,通过固体培养法和液体培养法测定了不同浓度锰离子Mn(Ⅱ)对其菌丝生长、偶氮染料橙黄Ⅱ降解率、木质素降解酶活性和原基形成的影响.结果表明,添加Mn(Ⅱ)可促进糙皮侧耳菌丝生长,GP-Orange液体培养时的最适Mn(Ⅱ)浓度为50μmol/L,GP-Urea-Orange固体培养时的最适Mn(Ⅱ)浓度为70μmol/L;添加Mn(Ⅱ)可加速橙黄Ⅱ的降解,Mn(Ⅱ)浓度为70μmol/L时,橙黄Ⅱ降解率最高、脱色圈最大;漆酶和锰过氧化物酶活性均随Mn(Ⅱ)浓度增加呈现“先升后降”的趋势,而木质素过氧化物酶活性则随Mn(Ⅱ)浓度的增加而降低;添加Mn(Ⅱ)可诱导原基形成,Mn(Ⅱ)浓度为70μmol/L时,原基数量最多.此外,平板培养结果揭示木质素降解酶活性与菌丝生物量之间无相关性,其主要是在营养限制条件下表达.

摘要： 本研究从自然界中筛选获得一系列新型高效木质素降解酶，包括锰过氧化物酶、漆酶,多功能过氧化物酶、染料脱色过氧化物酶，系统研究了木质素降解酶的性质并揭示其催化木质素降解的反应机理;在此基础上，一方面构建了木质素降解酶和纤维素酶协同转化木质纤维素的复合糖化体系，另一方面利用固定化漆酶实现抗生素污染物的高效降解。

摘要： 为了更好地挖掘利用白腐真菌这类微生物资源，本实验室近年来紧密围绕白腐真菌重要的木质素降解酶漆酶开展了较为系统的分子生物学研究，以上紧密围绕木质素降解酶漆酶所取得的研究成果为更好地将白腐真菌及其漆酶应用于生物质能源的有效获取、环境污染物的高效治理等能源和环境生物技术领域提供了有力的理论支撑和基础，对于深入揭示白腐真菌及其木质素降解酶高效降解木质素和异生物质的分子机理以及大力促进白腐真菌在生物质能源和环境保护等领域的高效利用具有较为重要的理论意义和实践价值。

摘要： 为了更好地将白腐真菌这类宝贵的微生物资源应用于环境生物技术领域，本研究从我国典型自然生境原始森林中分离获取了大量新的白腐真菌菌株资源，进一步利用其中几株产漆酶活性较高的白腐真菌菌株开展了对难降解染料化合物和多环芳烃等异生物质污染物的生物降解研究。研究结果表明，白腐真菌及其木质素降解酶漆酶在工业染料和染料废水等异生物质的脱色降解和脱毒处理中具有较大的实用价值和应用潜力，本研究为更有效地开发和利用具有高效降解生物质和异生物质能力的白腐真菌微生物资源奠定了良好的基础。

摘要： 本文研究了温度、pH、营养液与竹材质量百分比以及苯甲醇对白腐菌组合菌产木质素降解酶的影响,并找出了一个较具优势的发酵条件.并得出结果:MnP和LiP在30°C时酶活最高,而Lac酶活在33°C时最高;Lac和LiP在pH值为3.5时活性最高,MnP在pH值为4.5时活性最高.Lac、MnP和LiP都在营养液与竹材质量百分比为110％时活性最高;添加不同浓度诱导剂苯甲醇后,Lac和LiP活性在添加苯甲醇浓度为0.1％时酶活最高,从而表明苯甲醇是白腐菌产Lip及Lac的有效的诱导剂,但对Mnp的诱导作用还需进一步的判断.白腐菌组合菌固体发酵时,较具有优势的培养条件为:温度在30°C左右、pH为3.5、营养液与竹材质量百分比为110％、苯甲醇浓度为0.1％.

摘要： 白腐真菌是一类使木材呈白色腐朽的丝状真菌的总称(主要是担子菌)，是目前己知的唯一能在纯系培养中有效地将木质素彻底降解为CO2和H2O的一类微生物。从我国典型自然生境原始森林中分离获取大量新的白腐真菌菌株资源，进一步利用其中几株产漆酶活性较高的白腐真菌菌株开展对难降解染料化合物、多环芳烃等异生物质污染物的生物降解研究。结果：某些金属离子和芳香族化合物对漆酶活性和漆酶基因的转录具有显著的诱导增强作用。利用SEFA-PCR (Self-formed Adaptor PCR)等基因组步移技术克隆得到了漆酶结构基因ORF上游的启动子调控序列并对其进行了生物信息学分析，初步鉴定了可能参与转录调控的顺式作用DNA调控元件。

摘要： 以四种白腐真菌为对象，优选出最适产酶菌株黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)，并对其在不同载体的附着及产酶情况进行了相关研究。试验结果表明，白腐真菌Phanerochaete chrysosporium的锰过氧化物酶(MnP)及木质素过氧化物酶(LiP)最高分别可达225.67U/L，110.35 U/L，较其它三种菌株要高：Phanerochaetechrysosporium对尼龙纤维、厨用金刚砂尼龙、纤维海绵、玉米芯及海绵有较好的附着能力，但以厨用金刚砂尼龙、纤维海绵和玉米芯为最佳，而以载体玉米芯所产生的MnP、LiP为最高分别可达244.94U/L、263.71 U/L，较未加载体有所提高且持续时间较长。实验优选出白腐真菌Phanerochaete chrysosporium且其以玉米芯为裁体时所产MnP及LiP酶活为最高。

摘要： 本研究以酶活力为评价指标，通过产酶条件的优化，选择出白腐真菌的最适培养条件，并对其部分酶作用特性进行了研究。试验结果表明：白腐真菌产锰过氧化物酶的最适培养条件是：最佳碳源是麸皮，葡萄糖(碳源)对酶活力影响不大;最佳氮源是牛肉膏;最佳培养时间是96h。该菌产漆酶的最适培养条件是：最佳碳源是麸皮;最佳氮源是牛肉膏;最佳培养时间是96h。锰过氧化物酶的最适pH范围是4.4-4.8，最适底物浓度足1.2mmol/L，最适反应温度是35°C-40°C：漆酶的最适pH为4.8，最适底物浓度是1.2mmol/L，最适反应温度是40°C。金属离子Cu2+，CO2+对锰过氧化物酶和漆酶有激活作用，Fe2+对两种酶活力有一定的抑制作用，而Ag+则完全抑制漆酶的活性，Mg2+对两种酶活力影响不大。

摘要： 以一株从腐朽竹子上分离得到的侧耳菌(Pleurotus sp.)GH196为产酶菌,研究了其在静置和振荡两种液体培养方式下的木质纤维素降解酶系的产生.结果表明:在含有稻草和麦麸的液体培养基中生长,可以产生木聚糖酶、纤维素酶和依赖锰过氧化物酶-漆酶型(MnPLaccas型)木质素降解酶.振荡条件可以促进菌丝生长,有利于多糖水解酶的产生,其中以木聚糖酶的合成为主;150r/min振荡培养5 d,木聚糖酶酶活达到44.7 U/mL.

摘要： 本文探讨了生物技术即使用木质素降解微生物及木质素降解酶,处理烟梗,对提高烟梗利用价值的影响.结果表明,采用木质素降解微生物及木质素降解酶可以明显去除烟梗的木质气、刺激性,填充值增加30﹪,木质素含量明显降低,可以满足中高档烟的添加要求。

摘要： 本发明涉及一株海洋沉积物来源的木质素降解菌及其在降解木质素中的应用，其特征在于：该株海洋沉积物来源的木质素降解菌为鼠尾菌DBX666，并保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No.19599，保藏日期为2020年04月22日；与现有技术相比，本发明具有如下优点：本发明提供的菌株DBX666能够在成本较低的培养基中良好生长，且具有较强的木质素降解能力，具有较强的应用价值，实现了海洋微生物资源最大利用化。

摘要： 木质素降解液及制备方法以及用其降解木质素的方法，属于生物化学和生物炼制方法，解决现有采用漆酶等单一木质素酶难以实现木质素高效生物降解的问题。所述木质素降解液由漆酶和锰过氧化物酶，以10∶1～1∶5的酶负荷比例，溶于pH4～6的醋酸‑醋酸钠缓冲液中，使得漆酶和锰过氧化物酶酶负荷分别为1U/ml～50U/ml和1U/ml～50U/ml，然后加入1～10mM MnSO4和0.1～1mM H2O2；所述漆酶和锰过氧化物酶分别由白腐菌发酵获取胞外粗酶液，再经分离纯化后得到。本发明实现结构多样性丰富的大分子木质素协同氧化降解，与单一木质素酶降解反应体系相比，木质素高分子的降解率可达到30～50％，显著提高降解转化效率，可用于木质纤维素生物炼制、生物制浆或环境处理等领域。

摘要： 本发明提供了一种木质素的加氢降解产物及木质素的加氢降解方法。一种木质素的加氢降解产物，所述加氢降解产物的软化点为40‑150°C，每10mL乙醇对1g所述加氢降解产物在70°C下的溶解率为60％‑99.5％。本发明相比现有产品分子量低，且分布范围窄，应用价值更高。

摘要： 一株降解木质素的无色杆菌及其在含木质素废水处理中的应用，涉及工业废水处理技术领域。本发明所述降解木质素的无色杆菌（Achromobacter sp.）CCZU‑WJ6保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.19017，所述菌株可应用于工业含木质素废水的降解，尤其在含木质素废水降解时适用的降解培养条件是：温度20°C~40°C，pH4~9，处理后木质素的浓度大大降低。本发明所述菌株及其应用方法与传统方法相比，处理效率高，适用范围广，操作简单，对设备要求不高，运行成本明显降低，解决真菌处理工业含木质素废水程序复杂、需要碳源的问题。

摘要： 本发明的通过亲核取代反应降解木质素和木质素模型化合物的方法属于生物质能源化工技术领域。以木质素模型化合物以及有机溶剂可溶的木质素为底物，以B的卤代化合物BX3为亲核试剂，通过亲核取代反应，在‑78°C到60°C条件下，反应0.5h～36h，同时实现木质素模型化合物、木质素降解，及X取代基的连接。本发明操作方法简单，反应条件温和，不仅高转化高选择性的(>99％的转化率，接近99％断键选择性)实现了木质素以及木质素模型化合物的降解，而且所得到的降解产物，是一种具有很高的可修饰性含溴化合物，可以作为一种重要的有机合成中间体。

摘要： 本发明提供了一种酶解木质素的制备方法，包括：将木质素原料、水和疣孢漆斑菌、粗毛革孔菌混合进行一次酶解，得到酶解产物；将所述酶解产物和黄孢原毛平革菌混合进行二次酶解，得到酶解木质素。本发明采用酶解木质素制备的木质素‑酚醛树脂降滤失剂结构与SMP相似、性能与SMP相当，其中苯酚替代率可达70％，是一种抗温、抗盐、可生物降解的高温高压降滤失剂，可作为SMP替代品使用。本发明还提供了一种精制酶解木质素的制备方法和木质素‑酚醛树脂降滤失剂的制备方法。

摘要： 本发明涉及一株海洋沉积物来源的木质素降解菌及其在降解木质素中的应用，其特征在于：该株海洋沉积物来源的木质素降解菌为太平洋鼠尾菌DBX666，并保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No.19599，保藏日期为2020年04月22日；所述的太平洋鼠尾菌DBX666的序列如SEQ ID NO.1所示，与现有技术相比，本发明具有如下优点：本发明提供的菌株DBX666能够在成本较低的培养基中良好生长，且具有较强的木质素降解能力，具有较强的应用价值，实现了海洋微生物资源最大利用化。

摘要： 本发明提供了一种木质素的加氢降解产物及木质素的加氢降解方法。一种木质素的加氢降解产物，所述加氢降解产物的软化点为40‑150°C，每10mL乙醇对1g所述加氢降解产物在70°C下的溶解率为60％‑99.5％。本发明相比现有产品分子量低，且分布范围窄，应用价值更高。

摘要： 木质素降解液及制备方法以及用其降解木质素的方法，属于生物化学和生物炼制方法，解决现有采用漆酶等单一木质素酶难以实现木质素高效生物降解的问题。所述木质素降解液由漆酶和锰过氧化物酶，以10∶1～1∶5的酶负荷比例，溶于pH4～6的醋酸-醋酸钠缓冲液中，使得漆酶和锰过氧化物酶酶负荷分别为1U/ml～50U/ml和1U/ml～50U/ml，然后加入1～10mM MnSO4和0.1～1mM H2O2；所述漆酶和锰过氧化物酶分别由白腐菌发酵获取胞外粗酶液，再经分离纯化后得到。本发明实现结构多样性丰富的大分子木质素协同氧化降解，与单一木质素酶降解反应体系相比，木质素高分子的降解率可达到30～50％，显著提高降解转化效率，可用于木质纤维素生物炼制、生物制浆或环境处理等领域。

摘要： 本发明提供了粘质沙雷氏菌菌株及其生产木质素降解酶和降解木质素的应用，属于木质素降解技术领域。一种粘质沙雷氏菌菌株SM01，Serratia marcescens，保藏编号为CGMCC NO.15175。所述粘质沙雷氏菌菌株在生产木质素降解酶中的应用。所述粘质沙雷氏菌菌株在降解木质素中的应用。粘质沙雷氏菌菌株具有高效降解木质素的能力，木质素的累积降解率达到92％以上。