晶体上皮细胞

摘要： Objective To investigate the safety and efficacy of gemcitabine for preventing posterior capsule opacification (PCO) in rabbit eyes.Methods Thirty-six 3-month-old New Zealand rabbits were randondy and equally divided into three groups:blank control group,low dose gemcitabine(5 mg/ml) group and high dose gemcitabine(10 mg/ml) group.All rabbits underwent extracapsular cataract surgery(ECCE) and intraocular lens(IOL) implantation.At 1,3,5 and 7 d after operation,the changes of corneal edema and anterior chamber flare were observed.At 30 d after operation,the posterior capsule opacification and the change of cornea and anterior chamber's exudation were observed and compared among the three groups.Results At 1,3,5 and 7 d after operation,corneal edema and anterior chamber flare occurred in various degree in three groups.The corneal edema disappeared on postoperative day 5.The anterior chamber flare was absorbed in most cases on postoperative day 7.The postoperative corneal edema and anterior chamber flare showed no statistical significance among the three groups(P ＞ 0.05).The corneal endothelium cell density in the three groups on postoperative day 30 was lower than that before operation,and the loss of corneal endothelium cell density was of no significant difference among the three groups(P ＞ 0.05).The posterior capsule opacification appeared at 2 week after operation.On postoperative day 30,the posterior capsule opacification was grade 1 and grade 2 in low dose group and high dose group,and grade 2 and grade 3 in blank control group.The grade of posterior capsule opacification was significantly lower in low dose group and high dose group than in blank control group(P ＜ 0.01).Conclusion The results suggest that gemcitabine could effectively and safely prevent the formation and development of posterior capsule opacification in rabbits.%目的 探讨吉西他滨在预防家兔后发性白内障中的安全性和有效性. 方法 36只3月龄新西兰白兔,雌雄不限,随机分为空白对照组、低剂量组(5 mg/ml)和高剂量组(10 mg/ml)三组,每组12只(12只眼);实验动物均行白内障囊外摘除+人工晶体植入术;术后1,3,5,7d监测角膜水肿,前房闪辉变化;术后30 d对晶状体后囊膜混浊(PCO)及角膜内皮细胞数量进行分析. 结果 术后第1,3天,三组均出现不同程度角膜水肿、前房闪辉;术后第5天,三组角膜水肿吸收;第7天前房闪辉大部吸收,角膜水肿、前房闪辉组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).角膜内皮细胞计数显示各组术后30 d角膜内皮细胞数量较术前下降,角膜内皮丢失量三组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).术后第2周三组均出现后囊膜混浊,术后30d PCO分级比较,空白对照组多分布于2级和3级,低剂量组和高剂量组后囊膜混浊分布于l级和2级,空白对照组PCO较低剂量组和高剂量组明显,差异有统计学意义(P＜0.0l). 结论 吉西他滨可以有效预防后囊膜混浊的发生,眼内应用安全,未发现角膜内皮细胞数量改变.

摘要： 目的：高血糖刺激下晶状体上皮细胞异常凋亡，导致晶状体发生病理性改变，在糖尿病性白内障的形成中发挥着至关重要的作用，但其潜在的分子机制尚不清楚，本实验主要是研究在高血糖刺激下，随着大鼠晶状体逐渐混浊，晶状体上皮细胞中 MiRNA-29a-5p 表达变化，促凋亡因子 BMF 的表达变化以及两者间的关系。方法分别从正常大鼠和注射 STZ 2周、4周的糖尿病大鼠眼取出晶状体上，通过 qRT-PCR 检测 miRNA-29a-5p 及 BMF 的 mRNA 的表达值。结果实验组大鼠晶状体2周时基本透明，4周时开始出现絮状混浊。对照组大鼠晶状体一直保持透明。实验组miRNA-29a-5p 呈下调表达，BMF 呈上调表达。结论白内障的形成过程较为复杂，在不同的发展阶段会有不同的病理因素干预，其形成早期晶状体上皮细胞的异常凋亡起到了启动子的作用，而 miRNA-29a-5p 低表达很可能对诱导细胞的异常凋亡起到了重要的作用。BMF 可能在 miRNA-29a-5p 影响细胞凋亡过程中扮演了重要的角色。

摘要： 目的 研究黄酮类化合物芸香苷(Ru)对过氧化氢(H2O2)诱导的人晶体上皮细胞(HLEC)氧化损伤和凋亡的保护作用.方法 用不同浓度Ru(0、25、50、100μmol/L)预处理HLEC 1 h,再加入200 μmol/L H2O2,分别检测各组细胞增殖活性以及超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平,观察细胞凋亡形态并计算凋亡指数(AI).结果 200 μmol/L H2O2组HLEC增殖能力及SOD、GSH含量较对照组显著下降,MDA和AI较对照组明显增高(P ＜0.01)；Ru预处理组与H2O2组相比,细胞生存率、抗氧化水平明显提高,凋亡细胞数量显著减少(P＜0.01).结论 Ru通过提高细胞增殖能力保护H2O2引起HLEC的氧化损伤和凋亡.

摘要： Objective endoplasmic reticulum stress in the unfolded protein response in the pathogenesis of cataract Relations. Methods grouping results using dif erent concentrations of standard homocysteine assay. Among them, using the MTT assay for the detection of dif erent concentrations of drugs for the role of inhibition of cel proliferation rate calculation; apoptosis rate of use Hoechst33258 fluorescent staining method to detect implementation; For stimulation of reactive oxygen species in the cel s use reactive oxygen species fluorescent probe DCFH-DA detected achieved; cel s after stimulation of reduced glutathione content GSH detection kit detects implementation; using Western blot techniques for the expression of GRP78 and caspase-12, the cel s after stimulation, The experimental detection applications. Results Dif erent concentrations of cysteine likely to cause lens epithelial cel viability in a concentration dependent decrease in change. Secondly, according to the reactive oxygen species in the cel s of the experimental results showing a concentration-dependent increase of changes in the cel s of reduced glutathione content showed a decreasing variation, showing elevated expression of caspase-12's detection change for GRP78. Conclusion The high concentration of the endoplasmic reticulum stimulating factor for lens epithelial cel s has a stimulating ef ect, this stimulating ef ect, not only can lead to endoplasmic reticulum stress in lens epithelial cel s, but also can be caused by the unfolded protein response crystals epithelial apoptosis occurs, thus resulting in cataract.%目的进行内质网应激中未折叠蛋白反应在白内障发病机制中的作用关系探析。方法通过分组实验，分别使用不同浓度标准的同型半胱氨酸进行实验检测。其中，使用MTT检测法进行不同浓度药物对于细胞增殖的抑制率作用的检测计算；对于细胞的凋亡率使用Hoechst33258荧光染色方法进行检测实现；而对于刺激后细胞中的活性氧产物则使用活性氧荧光探针DCFH-DA进行检测实现；对于刺激后细胞中还原型谷胱甘肽含量使用 GSH检测试剂盒进行检测实现；对于刺激后细胞中的GRP78与caspase-12的表达，使用Western blot技术进行实验检测应用实现。结果不同浓度的半胱氨酸容易造成晶体上皮细胞活力呈现浓度依赖性下降变化。其次，根据上述实验结果细胞中的活性氧产物呈现浓度依赖性的升高变化，而细胞中的还原型谷胱甘肽含量呈现减少变化，对于 GRP78，caspase-12的表达检测显示呈现升高变化。结论高浓度内质网刺激因子对于晶体上皮细胞具有刺激作用，在这种刺激作用下，不仅能够导致晶体上皮细胞中产生内质网应激，而且还能够通过未折叠蛋白反应造成晶体中上皮细胞的凋亡发生，从而导致产生白内障。

摘要： 目的 探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对紫外线(UV)照射诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelia cell,HLEC)损伤的防护作用.方法 采用SF与HLEC共同孵育,以吡喏克辛滴眼液(PS)作为阳性对照,再用UV照射HLEC后,观察SF和PS对紫外线照射的HLEC损伤的影响.结果 UV照射后细胞活性降低,组织结构改变,流式细胞仪检查出现凋亡二倍体峰,线粒体膜电位水平下降;SF可改善UV照射后细胞损伤.结论 UV照射可引起HLEC凋亡,SF可减轻HLEC凋亡,其机制是通过提高HLEC核内DNA含量、降低细胞凋亡率、升高线粒体跨膜电位、提高HLEC活性来实现的.

摘要： 目的 观察芪归解毒汤对硫酸镍诱导正常人晶状体上皮细胞(Lens epithelium cell,LEC)凋亡的影响.方法 体外培养正常人晶状体上皮细胞,用血清药理学方法制备含芪归解毒汤药物血清,用药物血清和硫酸镍处理培养的LEC,采用流式细胞术检测LEC凋亡率;透射电子显微镜观察LEC超微结构改变和凋亡小体形成.结果 硫酸镍组LEC凋亡率(26.99±2.58)高于中药组LEC(12.21±2.42),硫酸镍组和中药组LEC凋亡率均高于对照组(0.8±0.16),三组间差异有统计学意义(χ2=-20.489,P<0.01),两两比较均有统计学意义(P<0.01).透射电镜观察到硫酸镍组LEC各阶段均有细胞凋亡,可见到LEC凋亡后的继发性坏死.中药组LEC呈凋亡早期改变,只有少数LEC呈凋亡改变,未见有凋亡后继发性坏死的LEC.结论 芪归解毒汤药物血清可有效地抑制硫酸镍诱导的LEC凋亡.

摘要： 目的 研究TNF-α诱导的人晶体上皮细胞(HLE-B3)炎症损伤模型中细胞形态及性状的改变,探讨核因子-κB(NF-κB)信号通路在炎症损伤中的作用.方法 将HLE-B3细胞分为两组,对照组加入普通培养液,观察组加入含TNF-α的培养液.观察两组细胞形态变化;划痕试验检测细胞迁移率变化;免疫组织化学、Western blot和荧光定量PCR法分别检测NF-κB蛋白及mRNA表达变化;ELISA法检测培养液中NF-κB下游因子IL-1和IL-6水平.结果 观察组HLE-B3细胞伸长变细,迁移率明显增快,逐渐向成纤维细胞转化.刺激后NF-κB蛋白表达增多,并从胞质向胞核内转移.与对照组比较,TNF-α刺激后6 h NF-κB蛋白及mRNA表达量均明显增高,12 h时达到高峰;培养液中IL-1和IL-6水平刺激后亦明显增加.结论 应用TNF-α进行诱导是建立HLE-B3细胞炎症损伤模型的有效方法;NF-κB信号通路被激活可能是开启炎症损伤的关键.

摘要： 目的 探讨晶体上皮细胞体外培养的方法及其转化的生物特性.方法 取家兔晶体前囊膜经胰酶消化后,行过滤离心,获取分散的晶体上皮细胞,进行体外培养并传代,观察其生长转化.结果 晶体上皮细胞经体外培养,能够生长、繁殖并传代,第三代后出现转化.结论 晶体上皮细胞体外生长良好,并二代后以作为晶体上皮细胞进行其生物特性的研究.

摘要： 目的 探讨抗氧化剂维生素(Vit E)、维生素(Vit C)对H2O2氧化损伤所诱发的晶体上皮细胞(LECS)凋亡的抑制作用.方法 在MEM培养基中离体培养兔晶体,分别在不同培养时限时观察对照组和各试验组晶体混浊情况,计算细胞凋亡率.结果 H2O2+Vit E组、H2O2+Vit C组和H2O2+Vit E+Vit C组晶体混浊度都明显低于H2O2组晶体混浊度(P＜0.01),说明它们能够抑制H2O2的氧化损伤作用,其中H2O2+Vit E+Vit C组的细胞凋亡率最高时才(11.22±0.25)%明显低于其他2组(P＜0.01),抑制效果最好.结论 抗氧化剂Vit E和Vit C可抑制H2O2氧化损伤所诱导的兔晶体上皮细胞凋亡及白内障的形成.

摘要： 白内障术后形成的后发性白内障是术后常见并发症,发病率高,儿童更是达到100%.虽然采用各种先进的手术方法,但仍有相当比例的晶体上皮细胞残留在前囊膜下,并向后囊增殖,移行及分化为成纤维细胞,从而引起晶状体后囊的混浊甚至机化。本文着重研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对体外培养的兔晶体上皮细胞(RBEL)增殖的影响,从而为药物治疗后发障开辟道路。

摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一种用于体外细胞分化的混合胶，所述混合胶由基质胶和I型鼠尾胶原按照45%：55%的体积百分比混合得到，所述I型鼠尾胶原的浓度为1.1mg/mL。将制得的混合胶与胚胎肝内胆管上皮细胞混合，可用于定向分化为成熟的肝内胆管上皮细胞和胆管结构，该方法操作简单，耗时短，成本低，且构建获得的细胞模型稳定，可用于慢性、炎性及自身免疫性等胆管疾病的治疗及机制研究。

摘要： 本发明涉及一种诱导人羊膜上皮细胞向视网膜色素上皮细胞分化的方法及其在治疗视网膜退行性疾病中的应用，该方法为向人羊膜上皮细胞中添加含有10‑100mM烟酰胺和1‑10μM曲古抑菌素A的诱导组合物，诱导产生的细胞高表达MITF、PMEL17、RPE65、Bestrophin等视网膜色素上皮细胞的典型基因。将利用该方法诱导产生的细胞注射到RCS大鼠视网膜下腔，通过ERG以及眼底检测发现大鼠眼睛电生理信号明显增强，眼底结构明显改善，眼球切片HE染色显示其视网膜厚度明显增加，经过上述方案诱导分化后的细胞经注射后对大鼠的视力有一定程度的恢复。本发明中的诱导复合物能够用于人羊膜上皮细胞向视网膜色素上皮细胞的分化以及治疗视网膜损伤相关的眼部疾病。

摘要： 本公开提供了促进多能干细胞分化成胸腺上皮细胞或胸腺上皮细胞祖细胞的方法，以及从所述方法获得的细胞，以及包含此类细胞的溶液、组合物和药物组合物。本公开还提供了将胸腺上皮细胞或胸腺上皮细胞祖细胞用于治疗和预防疾病、产生器官以及用于其他用途的方法，以及试剂盒。

摘要： 本发明的问题在于提供一种针对干眼症等与复层扁平上皮细胞相关的疾病有效的新的治疗剂。本发明是一种包含间充质干细胞的分泌物的复层扁平上皮细胞的正常分化‑成熟促进剂。优选地，上述分泌物不含动物血清，上述间充质干细胞为来源于脂肪的间充质干细胞、来源于脐带的间充质干细胞或来源于骨髓的间充质干细胞，上述复层扁平上皮细胞为选自由角膜上皮细胞、结膜上皮细胞、表皮角化细胞、口腔上皮细胞、会厌上皮细胞、食道上皮细胞、阴道上皮细胞、声带皱襞上皮细胞、鼻腔上皮细胞以及鼻前庭上皮细胞组成的群组中的至少一种。

摘要： 本发明公开了一种纯化子宫腔上皮细胞、腺上皮细胞和基质细胞的制备方法及其应用，该制备方法通过两种不同的细胞消化液对样品依次进行消化处理得到高纯度的子宫腔上皮细胞、腺上皮细胞和基质细胞。本发明中的制备方法克服了现有的技术问题，能高效制备高纯度的完全分离的子宫腔上皮细胞、腺上皮细胞以及基质细胞，而且所需的试剂仅包括消化酶，而且制备得到的细胞均为活细胞，可进一步应用于下游多种分子生物学和细胞生物学的研究。

摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一种用于体外细胞分化的混合胶，所述混合胶由基质胶和I型鼠尾胶原按照45%：55%的体积百分比混合得到，所述I型鼠尾胶原的浓度为1.1mg/mL。将制得的混合胶与胚胎肝内胆管上皮细胞混合，可用于定向分化为成熟的肝内胆管上皮细胞和胆管结构，该方法操作简单，耗时短，成本低，且构建获得的细胞模型稳定，可用于慢性、炎性及自身免疫性等胆管疾病的治疗及机制研究。

摘要： 本发明的目的在于提供一种尿路上皮细胞的制备方法，其能够应用于治疗泌尿系统疾病，尤其是尿路上皮细胞损伤引起的疾病或尿路上皮细胞缺失或功能障碍引起的疾病，以及提供通过方法所制备的尿路上皮细胞和用于诱导(制备)尿路上皮细胞的培养基。由诱导尿路上皮细胞的方法制备的尿路上皮细胞能够应用于治疗泌尿系统疾病，该方法包括通过向哺乳动物的体细胞导入以下外源因子中至少一种的步骤，FOXA1(叉头盒蛋白A1，Forkhead box A1)基因或其表达产物、TP63(肿瘤蛋白P63，tumor protein P63)基因或其表达产物、MYCL(L‑Myc)基因或其表达产物、以及KLF4(Kruppel样因子4，Kruppel‑like factor 4)基因或其表达产物。

摘要： 本发明提供了一种胆囊上皮细胞的建系方法，包括以下步骤：获得胆囊上皮细胞；对所述胆囊上皮细胞进行贴壁培养以得到原代细胞；使用永生化慢病毒和病毒感染试剂对所述原代细胞进行感染；对感染后的原代细胞继续培养直至至少部分细胞出现扩增成克隆后，使用细胞消化液进行贴壁细胞的消化以得到传代细胞；使用有限稀释法对所述传代细胞继续进行单克隆培养以得到上皮属性的阳性克隆产物；将所述上皮属性的阳性克隆产物继续扩增培养以得到永生化的胆囊上皮细胞系。本发明解决了现有技术中尚未有关于制备非胆囊癌永生化的胆囊上皮细胞系的问题。同时本发明提供了一种胆囊上皮细胞系及其应用。

摘要： 本发明的课题在于，提供一种抑制从多能干细胞向肝细胞的分化的同时，维持屏障功能的肠上皮细胞的制造方法、以及抑制向肝细胞分化的同时，维持屏障功能的肠上皮细胞。根据本发明，提供一种肠上皮细胞的制造方法，其包括：工序1，使多能干细胞分化为肠道干细胞；及工序2，在选自包含MEK1抑制剂、DNA甲基化抑制剂及TGFβ受体抑制剂的组中的1种以上和EGF的存在下，使在工序1中所获得的肠道干细胞分化为肠上皮细胞，上述方法中，在工序2中途，在本说明书中所定义的规定的时点重新接种1次以上分化中的细胞。

摘要： 本发明涉及一种诱导人羊膜上皮细胞向视网膜色素上皮细胞分化的方法及其在治疗视网膜退行性疾病中的应用，该方法为向人羊膜上皮细胞中添加含有10‑100mM烟酰胺和1‑10μM曲古抑菌素A的诱导组合物，诱导产生的细胞高表达MITF、PMEL17、RPE65、Bestrophin等视网膜色素上皮细胞的典型基因。将利用该方法诱导产生的细胞注射到RCS大鼠视网膜下腔，通过ERG以及眼底检测发现大鼠眼睛电生理信号明显增强，眼底结构明显改善，眼球切片HE染色显示其视网膜厚度明显增加，经过上述方案诱导分化后的细胞经注射后对大鼠的视力有一定程度的恢复。本发明中的诱导复合物能够用于人羊膜上皮细胞向视网膜色素上皮细胞的分化以及治疗视网膜损伤相关的眼部疾病。