摘要:
建立高效液相色谱(HPLC)测定槐米中芦丁的方法,并对其不确定度进行评定.采用Agela.Innoval C18反相色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-1%冰醋酸溶液(32∶68,v/v),等度洗脱,检测波长为257nm,进样量10μL,柱温30°C,流速:1.0mL/min,建立HPLC方法.依据JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》,建立HPLC测定槐米中芦丁的数学模型,考察测量过程中影响不确定度的因素,根据其各个分量计算不确定度.结果显示,芦丁在9.79mg/L~97.92mg/L范围内线性关系良好(R2=0.9999),检出限为1.0mg/L,精密度试验RSD为0.97%,加标回收率在92.32%~98.56%之间,RSD为2.36%.该方法的不确定度主要来源于样品制备均匀度和标准曲线的拟合,合成不确定度为0.0147,扩展不确定为0.55%,槐米中芦丁的测定结果为(18.54士0.55)%.该方法精密度高,稳定性好,建立的不确定度分析与计算方法结果准确,重复性好,适用于HPLC法测定槐米中芦丁的不确定度的评定.