显微切片术

摘要： 目的 研究改良苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色在病理诊断中的应用价值.方法 选择丽水市妇幼保健院2018年1月至2019年1月行病理检查的石蜡切片组织标本500份,分别对石蜡切片组织标本进行常规HE染色(对照组)、改良HE染色(观察组),比较两组染色优片率、染色质量评分,并比较两种染色方法病理检查对各疾病的诊断结果.结果 观察组胃肠道活检组织、骨组织、腹腔脏器组织、甲状腺活检组织的染色优片率分别为95.51％ (85/89)、94.87％ (111/117)、96.74％(208/215)、94.94％(75/79),均高于对照组的82.02％(73/89)、85.47％(100/117)、91.16％(196/215)、83.54％ (66/79)(x2=8.114、5.834、5.895、5.339,均P＜0.05).观察组各类标本的组织结构清晰度、细胞核染色效果、细胞质染色效果、细胞核质对比效果评分均高于对照组(=7.146、7.301、7.499、7.566,8.062、8.225、8.287、8.250,10.954、11.044、10.786、11.305,10.941、11.222、10.996、10.750,均P＜0.05).观察组对胃肠道病变、骨病、腹腔脏器病变、甲状腺病变的诊断准确率分别为96.63％ (86/89)、96.58％(113/117)、98.14％(211/215)、96.20％(76/79),均高于对照组的84.27％(75/89)、88.89％(104/117)、93.49％ (201/215)、86.08％ (68/79)(x2=7.869、5.138、5.798、5.016,均P＜0.05).结论 改良HE染色在病理诊断中具有良好的应用价值,可提高石蜡切片组织标本的染色质量,有利于提高病理诊断的准确性.

摘要： 目的通过对脂肪组织的4种切片处理流程进行比较,筛选出一种比较切实可行的切片处理方法。方法收集2019年中国人民解放军海军第971医院病理科诊断明确的脂肪瘤组织、乳腺脂肪组织和胃、肠、子宫或肾脏器官根治切除术标本中的脂肪组织共298例,分为传统处理法组(A组)、延长浸蜡法组(B组)、丙酮脱脂法组(C组)和改良组织脱水处理流程法组(D组)4组。4组标本分别按照4种不同的方法进行脱水、透明、浸蜡处理,切片最后进行常规苏木精-伊红染色,于光学显微镜下观察,比较各组切片优良率。结果4组切片优良率比较差异具有显著性(χ^2=462.827,P0.05)。结论采用丙酮脱脂法与改良脱水处理流程法制作的切片优良率高,有利于病理诊断;特别是后者无需额外试剂准备,更省时省力,值得在各医院病理科应用、推广。

摘要： 目的用EXAKT硬组织切磨技术制作不同类型的软硬组织切片,探索该技术在不同类型组织中的应用及其效果。方法取含有钛合金螺纹种植钉的比格犬下颌骨组织(A组织)、含有钛合金直钉和螺纹种植钉的小鼠股骨组织(B组织和C组织)、含有多孔钛材料的兔股骨踝骨组织(D组织)、含有钴铬合金支架的兔心血管组织(E组织)、含有钙黄绿素和茜素络合复合物标记的大鼠上腭组织(F组织),均经多聚甲醛固定、乙醇上行脱水、光固化树脂浸润包埋后,用EXAKT硬组织切片系统粗切为厚片,再经磨片系统打磨至50μm左右的薄片,染色封片后在光学显微镜下进行观察。结果Ladewig染色后镜下观察显示,A和B组织中骨组织与种植钉结合紧密,种植钉无脱落,新生骨明显;苏木精-伊红染色后镜下观察显示,C和D组织中新生骨明显,与种植体结合紧密,结缔软组织保留完整,原旧骨无裂痕;E组织血管壁清晰可见,分层明显,支架无脱落;荧光显微镜下观察,F组织红绿荧光明显可见,叠加图可清晰看到荧光走向。结论EXAKT硬组织切磨系统可将不同类型的软硬组织制作成切片,且植入物无脱落现象,骨组织无裂痕,各种软硬组织及植入物清晰可见。

摘要： 目的 通过对脂肪组织的4种切片处理流程进行比较,筛选出一种比较切实可行的切片处理方法.方法 收集2019年中国人民解放军海军第971医院病理科诊断明确的脂肪瘤组织、乳腺脂肪组织和胃、肠、子宫或肾脏器官根治切除术标本中的脂肪组织共298例,分为传统处理法组(A组)、延长浸蜡法组(B组)、丙酮脱脂法组(C组)和改良组织脱水处理流程法组(D组)4组.4组标本分别按照4种不同的方法进行脱水、透明、浸蜡处理,切片最后进行常规苏木精-伊红染色,于光学显微镜下观察,比较各组切片优良率.结果 4组切片优良率比较差异具有显著性(χ2=462.827,P0.05).结论 采用丙酮脱脂法与改良脱水处理流程法制作的切片优良率高,有利于病理诊断;特别是后者无需额外试剂准备,更省时省力,值得在各医院病理科应用、推广.

摘要： 目的 探讨大鼠肠管组织结构最佳石蜡制片方法.方法 选择SD大鼠,对动物十二指肠、空肠中部、回肠和结肠等分别采用3种固定(直接、灌注、平铺)和2种修切(横切和纵切)相互结合的方法制作组织切片,并对结果进行比较.结果 ①采用直接固定法制作的小肠切片,其横切和纵切的黏膜层出现明显自溶;而大肠横切和纵切取材的黏膜层自溶均不明显,其横切制片的肠腺排列较好,而纵切制片的肠腺呈斜切面和横断面.灌注法固定小肠和大肠,黏膜层均未出现明显自溶.无论横切还是纵切,二者的肠腺均可见明显受挤压.②采用平铺法固定小肠,其横切和纵切制片均未发现自溶,但横切制片可在小肠的绒毛和肠腺处呈现组织的斜切面和横断面;纵切制片的肠绒毛和肠腺均垂直黏膜下层,排列更整齐;大肠的横切和纵切制片亦未发生组织自溶,而横切制片优于纵切,横切时肠腺均垂直黏膜下层,而纵切时肠腺可出现斜切面和横断面.结论 大鼠小肠的肠管制片采用平铺固定和纵切取材制片是保留全层结构的最佳方法;制作大肠切片时,可根据实验要求,直接固定或平铺固定均可采用横切取材制片更适合保留全层结构.

摘要： 目的:探讨免疫组织化学法检测子宫颈组织中p16蛋白表达时的石蜡切片厚度.方法:收集2014年1月至2018年3月中山市博爱医院病理检查结果为慢性宫颈炎(150例)、低级别鳞状上皮内病变(LSIL,126例)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL,96例)及宫颈癌(78例)患者的子宫颈组织标本进行p16免疫组织化学染色,并采用条件Logistic回归分析石蜡切片厚度为2.0、3.0、4.0、5.0、6.0μm的标本p16蛋白表达的差异.结果:随着切片厚度增加,病变部位所在细胞核p16蛋白染色逐渐加深.慢性宫颈炎和宫颈癌患者标本不同切片厚度的p16蛋白阳性率差异无统计学意义(χ2=7.817和1.332,均P>0.05);而LSIL和HSIL患者标本不同切片厚度的p16蛋白阳性率差异有统计学意义(χ2=17.688和10.182,P<0.05或P<0.01),当标本切片厚度为3.0～5.0μm时可获得较为稳定而可靠的检测结果.结论:免疫组织化学法行子宫颈组织p16蛋白检测推荐的标本切片厚度为3.0～5.0μm.

摘要： Objective To investigate the value of bone marrow imprint in the diagnosis of plasma cell myeloma and the remission rate after chemotherapy.Methods Bone marrow aspiration,bone marrow imprint,and bone marrow biopsy of plasma cell myeloma with 128 patients were collected.The bone marrow biopsy was used as the standard.Bone marrow imprint was compared to bone marrow aspiration in bone marrow nucleated cells quantity,infiltration degree,and diagnostic coincidence rate.Sensitivity,specificity,positive predictive value,and Youden index were evaluated.Results The results of bone marrow imprint showed that the number of nucleated cells was better than that of bone marrow aspiration (P ＜ 0.05),and was similar to that of bone marrow biopsy (P ＞ 0.05).Bone marrow biopsy combined with CD38 (+) showed the degree of infiltration of bone marrow as the standard,and the bone marrow imprint was better than that of bone marrow aspiration (P ＜ 0.05),and was similar to that of bone marrow biopsy (P ＞0.05).To evaluate the compliance rate of bone marrow infiltration in bone marrow imprint:In phase Ⅰ,the compliance rate of bone marrow aspiration was 95.83％ (23/24) and bone marrow imprint of 91.67％ (22/24),the difference was not statistically significant (P ＞ 0.05);In phase Ⅱ,bone marrow imprint coincidence rate was 92.86％ (65/70),which was significantly higher than that of bone marrow aspiration in 65.71％ (46/70) (P ＜0.05);In phase Ⅲ,bone marrow imprint coincidence rate was 79.41％ (27/34),which was significantly higher than that of bone marrow aspiration in 44.12％ (15/34) (P ＜ 0.05).The other parameters,such as sensitivity,specificity,positive predictive value,and Youden index were better than those of bone marrow aspiration.Conclusions Bone marrow imprint has characteristics that both bone marrow aspiration and bone marrow biopsy have.It has obvious advantages in diagnosis of plasma cell myeloma and monitoring the remission after chemotherapy.%目的 研究骨髓组织印片在浆细胞骨髓瘤诊断及化疗后形态学缓解度监测中的价值.方法 收集128例次同步进行骨髓涂片、组织印片和活检切片检查的浆细胞骨髓瘤,以骨髓活检切片为标准,比较骨髓组织印片、骨髓涂片在显示有核细胞量、浸润度及诊断符合率之间的差异,以及评价其敏感度、特异度、阳性预测值、Youden指数各项性能指标.结果 骨髓组织印片显示有核细胞量评估性能优于涂片(P＜0.05),而与切片相近(P＞0.05).以骨髓切片结合CD38(+)显示骨髓瘤浸润度为标准,骨髓组织印片优于骨髓涂片(P＜0.05),而与切片相近(P＞0.05).评价骨髓组织印片显示骨髓瘤浸润度符合率方面:在Ⅰ期中,骨髓组织印片符合率[95.83％ (23/24)]与骨髓涂片[91.67％(22/24)]比较差异无统计学意义(P＞0.05);在Ⅱ期中,组织印片符合率[92.86％ (65/70)]明显高于骨髓涂片[65.71％(46/70)],差异有统计学意义(P＜0.05);Ⅲ期中,组织印片符合率[79.41％(27/34)]亦明显高于骨髓涂片[44.12％ (15/34)],差异有统计学意义(P＜0.05).其他性能指标上,骨髓组织印片的敏感度、特异度、阳性预测值、Youden指数等指标性能总体上优于骨髓涂片.结论 骨髓组织印片兼有涂片和切片的特征,在浆细胞骨髓瘤诊断及化疗后形态学缓解度监测中具有明显优势.

摘要： 目的：探索新辅助化疗后乳腺原发肿瘤的退缩模式。方法将86例ⅡA～ⅢC期乳腺浸润性导管癌患者分别行半疗程（25例）和全疗程（61例）新辅助化疗。新辅助化疗后手术标本制作次连续病理大切片，显微镜下勾画残余肿瘤范围，Photoshop软件配准，3D⁃Doctor软件三维重建残余肿瘤，评价新辅助化疗后原发肿瘤病理退缩模式。结合病理退缩模式，将临床⁃病理退缩模式分为向心性退缩（相比新辅助化疗前原发肿瘤最长径，新辅助化疗后残余肿瘤最长径≤2 cm且退缩比率≥50％）和非向心性退缩。结果半疗程组患者中，外科病理完全缓解（ pCR）1例，孤立状退缩1例，弥散状退缩23例；全疗程组患者中，外科pCR 18例，孤立状退缩3例，结节状退缩12例，团块伴散在状退缩21例，弥散状退缩7例，差异有统计学意义（ P＜0．001）。 Logistic多因素分析显示，新辅助化疗前原发肿瘤分期、新辅助化疗后淋巴结降期、新辅助化疗前钼靶恶性钙化灶和孕激素受体（ PR）表达为预测临床⁃病理退缩模式的独立影响因素（均P＜0．05）。结论病理组织学三维重建能够全面、立体、直观地展示新辅助化疗后乳腺原发肿瘤的退缩模式。全疗程新辅助化疗前原发肿瘤分期、新辅助化疗后淋巴结降期、PR表达和新辅助化疗前钼靶恶性钙化灶为新辅助化疗后乳腺原发肿瘤临床⁃病理退缩模式的独立影响因素。%Objective The aim of this study is to evaluate the shrinkage mode of the primary tumor in women with breast cancer after neoadjuvant chemotherapy ( NAC ) determined by part⁃mount sub⁃serial section ( PMSS) and three⁃dimensional ( 3D) reconstruction technique. Methods Eighty⁃six women with pathologically proven solitary invasive ductal carcinoma (ⅡA⁃ⅢC) were recruited. They were divided into two groups. Group A ( n=25) received half cycles of NAC and Group B ( n=61) received whole cycles of NAC. Breast specimen was prepared with PMSS, and residual tumors were microscopically outlined, scanned and registered by Photoshop software. The 3D model of residual tumors was reconstructed with 3D⁃Doctor software to evaluate the shrinkage mode. Further, the clinicpathologic shrinkage modes were divided into 2 categories:concentric shrinkage mode ( CSM, the longest diameter of the pathological residual tumors was less than 50% and ≤2 cm in comparison with the primary tumor before NAC ) , and non⁃concentric shrinkage mode ( NCSM, the longest diameter of the pathological residual tumors was more than 50% and/or>2 cm in comparison with the primary tumor before NAC) . Results Pathological shrinkage modes:Group A: modes Ⅰ,Ⅱ, andⅤwere observed in 1, 1, and 23 cases, respectively;Group B:modesⅠ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ, and Ⅴwere observed in 18, 3, 12, 21, and 7 cases, respectively ( P<0.001) . The multivariate analysis showed that patients with lower primary tumor stage, PR(-) or mammographic malignant calcification before NAC(-) and lymph nodes down⁃staging after NAC were more likely to present with CSM after NAC ( P<0.05 for all). Conclusions The pathologic reconstruction of breast residual tumors can fully and three⁃dimensionally reveal the shrinkage mode of the primary breast tumor in women with breast cancer after NAC. PMSS and 3D reconstruction of pathology provide a new platform in this area. Primary tumor stage, PR expression and mammographic malignant calcification before NAC and lymph node down⁃staging after NAC are independent predictors of the clinicopathologic shrinkage mode.

摘要： 目的 探讨C3d、C4d免疫组化染色在石蜡包埋组织切片中辅助诊断大疱性类天疱疮的价值.方法 通过免疫组织化学SP法检测20例大疱性类天疱疮患者石蜡包埋组织切片中C3d、C4d的表达,并与家族性良性天疱疮、大疱性表皮松解症患者及正常皮肤进行对照.结果 20例大疱性类天疱疮患者石蜡包埋切片C3d、C4d真表皮交界基底膜处沉积率为95％(19/20),9例大疱性表皮松解症患者中真表皮交界基底膜处C3d、C4d阳性率0％(0/9),4例家族性慢性良性天疱疮患者基底膜带均为阴性.结论 石蜡包埋组织切片中,C3d、C4d免疫组化染色可以作为辅助诊断大疱性类天疱疮的方法之一.%Objective To estimate the value of immunohistochemical staining for C3d and C4d in paraffin-embedded tissue sections for the auxiliary diagnosis of bullous pemphigoid (BP).Methods Paraffinembedded tissue sections from 20 patients with BP served as the experiment group, and those from lesions of 9 patients with familial benign pemphigus and 4 patients with epidermolysis bullosa as well as from normal skin served as the controls.Immunohistochemical SP method was used to measure the expressions of C3d and C4d in these paraffin sections.Results The deposition of C3d and C4d was observed in the basement membrane at the dermo-epidermal junction in 95％ (19/20) of BP tissue sections, but undetected in any of the familial benign pemphigus or epidermolysis bullosa tissue sections.Conclusion Immunohistochemical staining for C3d and C4d in paraffin-embedded tissue sections may serve as an auxiliary method for the diagnosis of BP.

摘要： 本发明涉及一种显微镜，具体涉及一种可容纳多盒切片的显微镜自动切片进给装置；包括有机台以及水平放置在机台上的推板组、竖向设置在推板组前方的片盒组、设置在片盒组下方的托板组以及设置在载物台上的片夹组，推板组包括进片推板，以及带动进片推板前后运动的推板装置，进片推板的前部形状为阶梯形，阶梯的下部向前凸出，片夹组包括片夹推板以及与其滑动配合的带导轨的片夹板、拨杆，片夹推板成阶梯形，其下部有一向下的凸台，该凸台与进片推板的前凸对应抵接，片夹推板与进片推板连接后组成的容纳切片的凹槽宽度大于切片的宽度；采用本发明技术方案的可容纳多盒切片的显微镜自动切片进给装置，可防止切片翻翘、粘附或滑出片盒。

摘要： 本发明公开一种基于计算显微视觉切片扫描技术的显微视觉系统的显微视场数字化扩展方法，其首先通过精密定位系统控制显微视觉系统在垂直光轴的平面沿定义坐标系的X、Y轴方向移动对焦平面位置的清晰成像的空间进行切片扫描，获取焦平面位置清晰成像的空间的多个局部视场切片扫描图图像，并记录精密定位系统的位移；然后利用二维切片扫描图像结合显微视觉系统的景深构建三维切片视场空间，并利用栅格化、栅格数值化技术对三维切片空间进行数字化获取三维切片视场空间数字化信息；最后，利用三维切片视场空间的数字化信息重构显微视觉系统扩展后的显微视场数字化信息。该方法能同时得到高分辨率、大视场、数字化的微装配系统的显微视场空间信息。

摘要： 本发明披露了一种可现场安装在扫描式电子显微镜（SEM）成像室内的切片机。其包括一高压下产生减速场的试样夹具以及一活动刀片。该SEM包括一置于临近试样夹具的反向散射电子检测器。设置的刀片将与试样夹具上的试样接触以切除一小部分试样并暴露出试样的新表面，而不会干扰施加在试样上的高压，所述刀片的安装方式应保证完成上述过程之后可退回至不干扰减速场的位置。

摘要： 本发明涉及一种显微镜，具体涉及一种可容纳多盒切片的显微镜自动切片进给装置；包括有机台以及水平放置在机台上的推板组、竖向设置在推板组前方的片盒组、设置在片盒组下方的托板组以及设置在载物台上的片夹组，推板组包括进片推板，以及带动进片推板前后运动的推板装置，进片推板的前部形状为阶梯形，阶梯的下部向前凸出，片夹组包括片夹推板以及与其滑动配合的带导轨的片夹板、拨杆，片夹推板成阶梯形，其下部有一向下的凸台，该凸台与进片推板的前凸对应抵接，片夹推板与进片推板连接后组成的容纳切片的凹槽宽度大于切片的宽度；采用本发明技术方案的可容纳多盒切片的显微镜自动切片进给装置，可防止切片翻翘、粘附或滑出片盒。

摘要： 冰冻切片机以及生产可用于显微镜的薄切片的方法。用于生产可用于显微镜的组织样本(60)的薄切片的冰冻切片机，包括冷冻装置(24，34，36，38，40，42，46，48，50，52)，用于冰冻组织样本(60)；切割装置(26)，用于切割冰冻的组织样本(60)；以及工作腔室(20)；切割装置(26)和至少部分冷冻装置(24，34，36，38，40，42，46，48，50，52)设置在工作腔室中。设置在工作腔室中冷冻装置(24，34，36，38，40，42，46，48，50，52)部分容纳液体冷冻剂(70)，组织样本(60)能被插入液体冷冻剂中以冰冻。

摘要： 本发明公开一种基于计算显微视觉切片扫描技术的显微视觉系统的显微视场数字化扩展方法，其首先通过精密定位系统控制显微视觉系统在垂直光轴的平面沿定义坐标系的X、Y轴方向移动对焦平面位置的清晰成像的空间进行切片扫描，获取焦平面位置清晰成像的空间的多个局部视场切片扫描图图像，并记录精密定位系统的位移；然后利用二维切片扫描图像结合显微视觉系统的景深构建三维切片视场空间，并利用栅格化、栅格数值化技术对三维切片空间进行数字化获取三维切片视场空间数字化信息；最后，利用三维切片视场空间的数字化信息重构显微视觉系统扩展后的显微视场数字化信息。该方法能同时得到高分辨率、大视场、数字化的微装配系统的显微视场空间信息。

摘要： 本实用新型公开了一种病理切片扫描仪显微光路结构及其病理切片扫描仪，所述病理切片扫描仪显微光路结构包括壳体以及安装在所述壳体内的第一反光镜、第二反光镜、第三反光镜、第四反光镜和管透镜；所述病理切片扫描仪包括物镜、相机和所述的病理切片扫描仪显微光路结构。本实用新型通过设置第一反光镜、第二反光镜、第三反光镜和第四反光镜，利用多次反射实现在较小的空间内满足管透镜所需的焦距要求，从而降低了整个扫描仪显微光路结构在高度方向和水平方向的尺寸，以达到结构紧凑、高度模块化的目的，简单实用。

摘要： 本实用新型公开了一种制备中药材显微鉴别切片的手动切片装置，它包括设有竖直侧板的基座，刀杆的顶端交接在固定在侧板上的连接板中，刀杆的中部安装有刀具；刀杆中部上下两侧分别设有上导轨和卡具固定机构，卡具固定机构上设有卡具套筒，卡具套筒中安装有卡具，卡具中装卡有待切片药材的模具块，模具块的上部延伸至上导轨与下导轨之间；卡具套筒的下部与旋钮螺纹连接。本实用新型通过卡具、旋钮和卡具套筒的螺纹连接，实现了模具块的位移的精确控制，可以调节切片厚度在20‑100μm之间，切片的组织完整可辨，使得药材切片的厚度能够满足显微鉴别的要求；作业人员通过手柄控制刀杆的转动，对药材进行快速切边，省时省力，切片精确度高。

摘要： 本实用新型提供了一种电子显微镜超薄切片染色装置及超薄切片染色机，涉及超薄切片染色技术领域，其中电子显微镜超薄切片染色装置包括载网装置，载网装置包括支撑板，支撑板上均布设有网槽；容纳装置包括透明染色袋；注水组件包括注水管，注水管连接注水装置；注液组件包括第一注液管和第二注液管，第一注液管连接有用于注射醋酸双氧铀染液的第一注液装置；第二注液管连接有用于注射柠檬酸铅染液的第二注液装置；排气装置包括排气管，排气管连接有排气过滤装置；废液输出装置包括排液管，排液管连接有储液袋。本实用新型提供的电子显微镜超薄切片染色装置不仅实现了染色作用，还有效避免了染液造成的污染。

摘要： 本实用新型涉及一种显微镜，具体涉及一种可容纳多盒切片的显微镜自动切片进给装置；包括有机台以及水平放置在机台上的推板组、竖向设置在推板组前方的片盒组、设置在片盒组下方的托板组以及设置在载物台上的片夹组，推板组包括进片推板，以及带动进片推板前后运动的推板装置，进片推板的前部形状为阶梯形，阶梯的下部向前凸出，片夹组包括片夹推板以及与其滑动配合的带导轨的片夹板、拨杆，片夹推板成阶梯形，其下部有一向下的凸台，该凸台与进片推板的前凸对应抵接，片夹推板与进片推板连接后组成的容纳切片的凹槽宽度大于切片的宽度；采用本实用新型技术方案的可容纳多盒切片的显微镜自动切片进给装置，可防止切片翻翘、粘附或滑出片盒。