明胶酶

摘要： 明胶酶是基质金属蛋白酶(MMPs)家族的重要组成之一,包括MMP-2和MMP-9,是降解细胞外基质(ECM)的重要酶类.近年研究发现,明胶酶在牙髓炎和根尖周炎发病机制中起重要作用.文章就明胶酶的基础研究及其在牙髓炎和根尖周炎致病、诊断、治疗方面的研究进展做一综述.%Gelatinases are the fundamental components of matrix metalloproteinases,including matrix metalloproteinase-2 and matrix metalloproteinase-9,and have the ability to degrade extracellular matrix.Recent studies have shown that gelatinases play an essential role in the pathogenesis of pulpitis and apical periodontitis.This paper makes a review on recent advances of the basic research of gelatinases and their effects on the pathogenicity,the diagnosis as well as the therapy for pulpitis and apical periodontitis.

摘要： 目的:探讨明胶酶(MMP-2)、表皮生长因子受体酪氨酸蛋白激酶(EGFR-TPK)和氨肽酶N(APN)抑制剂汉黄芩素对肺癌细胞的生长和转移抑制机制.方法:本文采用酶抑制学方法,研究了汉黄芩素(0 ～ 100 μmol/L)对MMP-2、APN和EGFR-TPK的抑制作用,并进一步的分析了汉黄芩素(0 ～ 100μmol/L)对肺癌A549的生长、细胞转移的抑制作用和A549细胞中TIMP-2和TGF-β1表达水平的影响,酶标仪吸光度法检测细胞凋亡蛋白Caspase 3活性.结果:汉黄芩素能够抑制MMP-2、APN和EGFR-TPK的活性(汉黄芩素半抑制浓度IC50分别为7.26±0.33、7.11±0.43和5.32±0.22 μmol/L)和诱导A549的凋亡(汉黄芩素半抑制浓度IC50为49.13±4.90μmol/L);随着汉黄芩素作用浓度(1、10、50、100μmol/L)的增加,TGF-β1表达均呈现降低趋势,TIMP-2的表达呈增加趋势,且A549细胞穿过人工基底膜的能力下降而凋亡蛋白Caspase 3活性增加.结论:汉黄芩素通过诱导TIMP-2表达增强和TGF-β1表达的降低,对MMP-2、APN和EGFR-TPK的活性产生抑制作用,对Caspase 3活性产生激活作用,最终对肺癌A549细胞的转移和凋亡起到重要作用.

摘要： 目的:通过对不同浓度的紫杉醇使用分析,对进行含有紫杉醇抗肿瘤药物对腺样囊性癌细胞侵袭力以及明胶酶水平的影响.方法:使用Bristol-Myers Squibb公司生产的紫杉醇,使用0.01 mg/L、0.06mg/L以及0.1mg/L的不同浓度紫杉醇,对人ACC-M细胞进行培养.研究紫杉醇对腺样囊性癌细胞侵袭力以及明胶酶水平的影响.结果:未受紫杉醇处理的对照组细胞,粘附率达99.5％,而在不同程度下的紫杉醇实验组细胞粘附率都有所下降,其结果分别为86.2％、72.8％和59.5％,所产生结果与紫杉醇的浓度比例成正比关系.结论:通过实验数据表明,紫杉醇的浓度对ACC-M黏附性以及明胶酶活性等都有明显的抑制作用.

摘要： 目的:观察益气补肾方对胃癌术后转移的防治效果及其对患者血清MMP-3、MMP-9水平的影响.方法:采用随机分组方法设计,胃癌术后脾肾亏虚证患者84例,分为观察组和对照组,每组42例;观察组采用益气补肾方联合FOLFOX6方案化疗,对照组仅用FOLFOX6方案化疗.在治疗前、治疗后至12个月定期监测2组的转移情况及血清MMP-3、MMP-9水平,比较分析2组的复发转移率及治疗前后血清MMP-3、MMP-9水平.结果:观察组完成40例,出现转移4例,复发转移率10％;对照组完成38例,出现复发转移11例,复发转移率28.9％;观察组复发转移率显著低于对照组(P＜0.05).治疗前2组患者血清MMP-3、MMP-9水平无明显差异(P＞0.05),治疗12个月后观察组患者血清MMP-3、MMP-9水平均低于对照组的表达水平,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:益气补肾方有抗胃癌复发转移作用,与控制血清MMP-3、MMP-9水平有关.

摘要： 【据《J Hepatol》2016年3月报道】题：中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白是一种与慢加急性肝衰竭及肝硬化患者预后有关的生物标志物（作者Ariza X等）慢加急性肝衰竭（ACLF）是肝硬化患者发生的以器官衰竭和高死亡率为特征的综合征。目前没有发现ACLF的生物标志物。在肝损伤的实验模型及由毒素或促炎细胞因子,尤其是白细胞介素6损伤的肝细胞培养中,LCN2基因及其产物,中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（NGAL）表达增多。

摘要： 慢加急性肝衰竭（ACLF）是发生在肝硬化基础上的以器官衰竭和高病死率为特征的综合征,其没有生物学标志物。在肝损伤的实验模型和体外培养的肝细胞中,由于毒素或促炎因子尤其是白细胞介素6的损伤作用,LCN2基因及其产物中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）的表达水平上调。为了研究NGAL是否为ACLF的标志物及发生ACLF时LCN2基因表达是否上调，巴塞罗那大学的Ariza等分析了因肝硬化并发症住院的716例患者的尿液和血清NGAL水平，其中148例为ACLF患者。

摘要： 为了寻找选择性高、亲和性强的新型明胶酶抑制剂类抗肿瘤药物,以(R)-(-)-扁桃酸与合成中间体5-取代-1,3,4-噻二唑-2-胺为原料,基于三甲基氯硅烷的羟基保护作用,经酰氯化、酰胺化等反应合成出12个扁桃酸-噻二唑酰胺衍生物,并对明胶酶(MMP-2,MMP-9)进行初步体外抑酶活性评价。结果显示,浓度为10μmol/L时,(2R)-N-[2-[5-(4-硝基苯基)-1,3,4-噻二唑]]-2-羟基-苯乙酰胺对MMP-2和MMP-9同时具有最强的抑制活性,抑制率分别为80.17%和70.16%,化合物(2R)-N-[2-[5-(3-硝基苯基)-1,3,4-噻二唑]]-2-羟基-苯乙酰胺、(2R)-N-[2-[5-苯甲基-1,3,4-噻二唑]]-2-羟基-苯乙酰胺和(2R)-N-[2-[5-(4-氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑]]-2-羟基-苯乙酰胺对MMP-2有较强的抑制活性,化合物(2R)-N-[2-[5-苯甲基-1,3,4-噻二唑]]-2-羟基-苯乙酰胺、(2R)-N-[2-[5-苯乙基-1,3,4-噻二唑]]-2-羟基-苯乙酰胺和(2R)-N-[2-[5-(2,4-二氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑]]-2-羟基-苯乙酰胺对MMP-9有中等强度的抑制活性。

摘要： 吴茱萸碱已被证实具有抗肿瘤活性,但其水溶性差、半衰期短、毒副作用大等等缺点限制了其在临床中的使用.为了解决以上应用障碍,采用具有明胶酶响应性的高分子纳米载体PEG-Pep-PCL负载吴茱萸碱,具有较高的包封率和载药效率,形态均一,粒径在200nm左右.

摘要： 相较于非曝光部位,经常受紫外线照射的面部皮肤在早期阶段会出现皱纹等明显的老化现象.产生上述老化现象的原因,经研究表明由于基底膜、真皮胶原蛋白、弹性纤维等皮肤组织被紫外线损伤变性造成,同时,皮肤内部所表达的各种酶也参与了这个过程.关注于对基底膜及各种细胞外基质成分具有广泛降解活性的酶——明胶酶,在明确明胶酶在健康人体皮肤中的活动方式的同时,并以研发新的抗老化化妆品为目标进行了研究.首先,进行了在人的皮肤中明胶酶表达情况的基础研究.结果显示,发现了在表皮最下层产生及活化的明胶酶的活动规律,并研究出调查角质层中明胶酶含量的评价方法.在曝光部位可检测出角质层中的明胶酶,而在腹部及上臂内侧等非曝光部位完全检测不出.上述研究结果表明明胶酶与紫外线引起的皮肤损伤有直接联系.因此独自开发了不用抗体染色,也可以大量、简便的检测出角质层中明胶酶的特殊胶片(FIZ-SN胶片),并在不同气候环境中的中国5个城市(北京、上海、成都、哈尔滨、乌鲁木齐)进行了大规模的调查.针对20岁～40岁女性,总计超过1500人次的调查结果表明:1.日照时间越长,皮肤的明胶酶含量越多;2.使用防晒产品者比不使用者的明胶酶含量少;3.在皮肤状态由于干燥而恶化的冬季,明胶酶的含量也会增多.rn 其次,为了能够开发抗老化的新化妆品,在大自然中广泛地探寻兼具优异的明胶酶抑制作用及高度安全性的物质.结果发现,山竹树皮提取物具有优异的明胶酶抑制作用.并且,针对脸部明胶酶量较多的31名志愿者进行了含山竹树皮提取液化妆品的连用试验.结果显示山竹树皮提取液具有显著的明胶酶抑制作用,并因此成功地开发了抗老化用化妆品.基于上述结果,从化妆品的角度提出有效的预防老化的新手段.

摘要： 为了研究子痫前期(PE)患者胰岛素抵抗与中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的相关性,探讨NGAL在子痫前期病理生理机制中的可能作用.本文选取产科产检并分娩的孕晚期、单胎、初诊为PE患者76例为观察组,选取同期年龄、孕周匹配的正常妊娠孕妇76例为对照组.应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定所有研究对象血清NGAL水平,同时测定所有研究对象空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平,用稳态模型法评价胰岛素敏感性(HOMA-IR=FPG×FINS/22.5).结果表明，子痫前期患者血清NGAL水平升高，NGAL水平与子痫前期患者胰岛素抵抗程度相关，提示NGAL可能通过增强胰岛素抵抗参与子痫前期的发生发展。

摘要： @@恶性肿瘤浸润和转移的过程伴有细胞外基质(extracellulannatrix，ECM)的降解，基质金属蛋白酶(ma-trixmetalloprotein-age ，MMP)是引起ECM降解的主要酶类之一，其参与机体的许多生理和病理过程，特别是与肿瘤的侵袭和转移过程密切相关，明胶酶(gelatinase)为基质金属蛋白酶MMPS的一类亚型，包括MMP-2和MMP-9，不但降解细胞外基质成分，还降解基底膜(basement member，BM)的主要成分Ⅳ型胶原，而癌细胞发生浸润和转移必须首先穿过BM。因此，明胶酶成为癌细胞侵袭转移过程中最直接和最重要的蛋白，已成为目前研究的一个热点。本文综述了MMP-2和MMP-9的分子生物学特征以及其在肿瘤侵袭和转移中的作用。

摘要： 目的:研究家兔膀胱中明胶酶的活性,比较不同年龄家兔膀胱中明胶酶活性的大小,探讨健脾止遗片的有效成分对该酶活性的影响; 方法:选用3周龄和60周龄的家兔膀胱,提取明胶酶并测定其酶活性,并研究所提有效成分对酶活性的影响. 结果:不同年龄家兔膀胱中明胶酶活性不同,老龄家兔膀胱中酶活性比幼龄的强,分离所得有效成分对该酶的活性有明显的抑制作用.

摘要： 本文对明胶酶及其抑制物与肾小管间质疾病的关系进行了探讨。文章围绕明胶酶及其抑制物、系统在小鼠肾小管不同节段的表达、明胶酶及其抑制物在肾小管间质疾病中的作用等进行了论述。

摘要： 作者选用MRL-1pr/1pr自发性狼疮小鼠为模型,观察水蛭是否可以通过影响局部明胶酶A、B的活性减轻狼疮性肾炎的病理损害.

摘要： 目的:探讨扶正化瘀方对二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化肝脏MMP-2、MMP-9、TIMP-2表达和肝星状细胞(HSC)凋亡的影响.方法:Wistar雄性大鼠60只,分为造模大鼠组及正常对照大鼠组.造模大鼠组52只,前4w每周一、二、三腹腔注射二甲基亚硝胺0.2ml·100g-1(浓度为0.5﹪)1次,共4w.4w后造模大鼠分为模型对照组18只,扶正化瘀方组17只,秋水仙碱组17只.各组分别以自来水、扶正化瘀方(生药含量为36.9g(100ml)、0.1﹪的秋水仙碱按1ml(100g-1大鼠体重灌胃,每周6次,共4W;正常对照组10只,前4w腹腔注射生理盐水,后4w用自来水灌胃,方法及剂量同上.8w结束时,2﹪戊巴比妥钠麻醉处死动物取材.观察肝脏胶原增生程度,检测肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量,检测HSC的活化、增生和凋亡,检测肝组织MMP-2,MMP-9,TIMP-2的表达和肝组织MMP-2、MMP-9的活性.结论:扶正化瘀方降低MMP-2、MMP-9、TIMP-2等表达和减轻肝纤维化程度的作用机制之一在于促进活化HSC的凋亡,减少了活化HSC的数量.

摘要： 本研究应用离体培养的人主动脉血管平滑肌细胞、研究内源性NO对IL-1β诱导血管壁平滑肌细胞合成和分泌的多种基质金属蛋白酶的表达及激活的影响.

摘要： 目的：探讨复方黄芪颗粒对肝纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)蛋白表达的影响。 方法：应用Chevallier半定量计分系统,病理组织学观察,结合细胞外基质(ECM)特殊染色动态观察高、低剂量FFHQKL治疗猪血清诱导肝纤维化模型后各时间段肝组织学及ECM量的变化,评估复方黄芪颗粒的抗肝纤维化疗效；应用免疫组织化学染色观察造模结束时以及药物治疗各时间段肝组织内MMP-2、TIMP-2表达量的变化。 结果：与模型组比较,高、低剂量FFHQKL治疗2个月、3个月结束时,肝组织Chevallier纤维化评分均明显减少(P＜0.01)。FFHQKL高、低剂量治疗组在治疗第2个月结束时,TIMP-2蛋白表达明显减弱,MMP-2蛋白表达明显增强,与M组比较有显著性差异(P＜0.05)。 结论：复方黄芪颗粒可以在蛋白水平增强MMP-2酶蛋白的表达,同时抑制TIMP-2酶蛋白的表达,促进ECM的降解,从而达到逆转肝纤维化之疗效。

摘要： 本发明公开了一种胃蛋白酶解鉴定大分子胶原蛋白或明胶的方法。采用SDS‑PAGE的方法，将不同的肽段显示出来，得到酶解片段的图谱，不同来源的胶原蛋白经过酶解后得到不同的肽段图谱，根据肽段图谱即可以区别胶原蛋白或明胶的来源。本发明方法简单、结果精确。

摘要： 本发明公开了一种胃蛋白酶酶解鉴定大分子胶原蛋白或明胶的方法。采用SDS-PAGE的方法，将不同的肽段显示出来，得到酶解片段的图谱，不同来源的胶原蛋白经过酶解后得到不同的肽段图谱，根据肽段图谱即可以区别胶原蛋白或明胶的来源。本发明方法简单、结果精确。

摘要： 本发明公开了一种猪皮酶法制备胶囊用明胶的生产方法，包括以下步骤：步骤1，对猪皮做预处理准备，使用碱性蛋白酶和氢键断裂剂对猪皮中的胶原纤维氢键进行断裂，进行膨化处理，然后加入PH值为4.0‑6.0的水溶液浸泡10‑14小时，对猪皮中的胶原纤维进行膨化；步骤2，使用盐酸或液碱溶液对猪皮进行杀酶处理，终止酶解反应的进行，步骤3，将猪皮进行水洗熬胶，过滤，浓缩；步骤4，进入后续的加工处理工序，对得到的产品进行包装；加工处理包括以下步骤，冷冻成型，胶液冷冻成型冷却温度：‑2‑＋9°C，时间：15‑20分钟，挤胶成长条状；本发明具有提高产量、提高自动化程度、提高产品优质率、降低成本、减轻环境污染的优点。

摘要： 本发明公开了一种牛皮酶法制备食品添加剂明胶的生产方法，包括以下步骤：牛皮验收：对待加工牛皮皮料进行验收筛选，进行切碎处理，对牛皮的验收：铬含量≤0.2mg/kg，牛皮无异味、无杂物；酶解：将切碎处理的牛皮进行水洗和酶解，用生物组合酶和酶激活剂对牛皮中的胶原纤维进行酶解，使用生物组合酶和酶激活剂0.2‑1%，酶解时间：20‑24小时；终止酶解：将酶解后的牛皮进行水洗终止酶解反应，终止酶解时牛皮水洗环境PH值为7.0‑8.0，水洗时间20‑24小时，使用PH值为1.0‑2.0的溶液对牛皮胶原纤维进行杀酶处理使得酶解彻底终止；本发明具有提高产胶率、提高产品优质率、大量减少酸、碱用量、减轻环境污染的优点。

摘要： 本发明涉及一种明胶类酶活保护剂的制备方法及其在降纤酶制剂中的应用，所述制备方法包括如下步骤：对明胶溶液进行物理剪切，然后过滤、灭菌、冻干，得到所述明胶类酶活保护剂。本发明提供的明胶类酶活保护剂不仅能够对降纤酶的酶活力提供有效的包裹性保护，在生产和长期储存过程中，提供紧密的保护骨架，阻止降纤酶分子之间的聚合；同时不具有酶活放大效应，能够实现对于中间体的有效监控；并且可以使冻干过程的吹干效应可以大大减少，进一步地保护了酶活的稳定性。

摘要： 本发明涉及一种碱法/酸法和酶法复合制备皮料明胶的方法，包括以下步骤：步骤一，皮料分切；步骤二，皮料预处理；步骤三，循环压榨酶解；步骤四，灭酶钝化；步骤五，后处理：灭酶钝化后的皮料经煮胶、净化、浓缩、干燥工艺得到明胶成品。本发明显著的提升了胶原分解成明胶的效率，与传统碱法制胶相比，极大地缩短了生产周期，整个工艺过程仅在3～5天内即可完成。同时，胶原分解成明胶的效率提高，减少了薄皮及皮料表层的溶胶现象，因此明胶得率比传统碱法提高8％以上；明胶质量也显著提高，该法制备的明胶特性可以使冻力提高10％以上，透明度提高6％以上。

摘要： 本发明涉及一种明胶类酶活保护剂的制备方法及其在降纤酶制剂中的应用，所述制备方法包括如下步骤：对明胶溶液进行物理剪切，然后过滤、灭菌、冻干，得到所述明胶类酶活保护剂。本发明提供的明胶类酶活保护剂不仅能够对降纤酶的酶活力提供有效的包裹性保护，在生产和长期储存过程中，提供紧密的保护骨架，阻止降纤酶分子之间的聚合；同时不具有酶活放大效应，能够实现对于中间体的有效监控；并且可以使冻干过程的吹干效应可以大大减少，进一步地保护了酶活的稳定性。

摘要： 本发明提供一种尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（neutrophil gelatinase‑associated lipocalin，NGAL）及其多肽片段的应用，具体为尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白及其多肽片段在制备用于过敏性疾病诊断、鉴别诊断、病情程度判断、治疗效果评价、监测、预后评估及机理研究等制剂的应用。本发明通过研究证实，与健康人（正常对照组）相比，尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白及其多肽片段在过敏性疾病患者中表达升高。可用于过敏性疾病患者的各种目的应用检测。本发明发挥尿液标本获取无创、可大规模重复取样、保存方便的优势，利用尿液标本检测尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白及其多肽片段。

摘要： 本发明属于微生物发酵培养技术领域，公开了一种批发酵提升鸭疫里默氏菌RA1明胶液化酶产量的方法，对血清1型鸭疫里默氏菌进行批发酵法发酵培养，得到发酵液；对发酵液进行离心、沉淀、透析，将回收目标产物采用PBS缓冲液反复冲洗作为明胶酶纯品，明胶酶纯品经明胶液化酶液化实验证明呈阳性，即得明胶液化酶终产物；采用SDS‑PAGE方法对明胶液化酶终产物进行分子量测定。发酵液培养具体包括：菌种复苏：将冰箱保存的血清1型鸭疫里默氏菌RA1融化后，无菌操作法用接种环取菌泥涂布新鲜制备的血平板，并划线培养出单菌落；RA1扩大培养：取RA1单菌落涂布血平板，在平板上长出大量菌丛后，过夜培养；批发酵法培养RA1。

摘要： 本实用新型提供中性粒细胞明胶酶相关载酯蛋白诊断用抗体透析浓缩装置，涉及透析装置技术领域，包括支撑伸缩件，支撑伸缩件上安装有转动组件，转动组件与上夹体连接，上夹体通过调整伸缩件连接有下夹体，下夹体上安装有温度控制机构，温度控制机构包括温度调节组件和温度传感组件，通过转动组件设置在容器上侧的方式，进行搅拌时，转动组件驱动上夹体和下夹体以及透析袋进行转动，实现搅拌提高透析浓缩效率的效果，转动组件不与透析液接触，从而无需设置防水结构，解决了传统中在容器中设置搅拌机构导致的容器成本、复杂度较高的问题，并且将温度传感组件设置在夹体上，进一步降低了容器的复杂度。