时间分辨荧光

摘要： 依据时间分辨荧光的基本原理,采用可编程逻辑器件(FPGA)和增益控制电路研制测铀分析仪。根据时间内插法提升系统最小时间分辨精度,依据不同物质荧光寿命长短的差异,通过FPGA输出精准测控时序,进行铀荧光信号的甄别;采用基于插值预测的自动档位调节算法进行铀荧光信号的最优参数选择,实现痕量铀的高精度测量。系统测试结果表明,基于时间分辨荧光测铀分析仪的稳定性、线性及精密度指标完全满足核行业及相关国家标准要求。

摘要： 目的:建立一种血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,ATⅡ)的定量检测方法,并检验该方法的性能。方法:通过以时间分辨荧光纳米微球作为荧光标记物,结合双抗体夹心法原理和免疫层析技术,实现ATⅡ的定量检测。结果:工艺条件优化结果显示,T线包被浓度为1.0mg/mL、结合物稀释比例为6倍、检测时间为5min时,曲线梯度和线性最好。检测方法在5~700ng/L范围内线性关系良好,方程为y=10.226x–9.1429,R^(2)=0.9989,批内精密度CV≤2.90%,批间精密度CV≤4.90%,最低检测限为1.36ng/L,准确度检测相对偏差在±1.40%范围内,检测方法具有良好的分析特异性,交叉反应因子不会影响检测结果。测定血清样本中的ATⅡ浓度,与已上市化学发光法检测试剂盒检测结果相关性较好,二者的阳性符合率与阴性符合率分别为96.67%和98.18%,假阳性率和假阴性率分别为2.22%和2.73%,诊断符合率为97.50%。结论:研究建立的ATⅡ定量检测方法具有操作简单、检测快速、结果准确的优点。

摘要： 为了满足粮食谷物中伏马毒素B1快速定量检测的需求,以伏马毒素B1为研究对象,建立了基于时间分辨荧光纳米微球的FB1荧光快速定量检测卡,检测前无需调整样品提取液pH,并借助酶联免疫试剂盒及高效液相色谱法分析比对了该荧光定量快速检测卡在粮食谷物(大米、玉米、小麦)中的检测性能。结果表明其检测不同样品的LOD在35.37~37.17μg/kg之间,LOQ在117.9~123.9μg/kg之间,灵敏度良好;线性范围均为250~6000μg/kg,相关系数R2在0.9972~0.9995之间;不同样品中6个添加水平的加标回收率为83.38%~114.66%,变异系数(CV)小于15%,准确性和重复性良好;国标液相色谱法和伏马毒素B1荧光定量快速检测卡同时检测FB1污染的不同样品,检测结果的符合度为92.53%~106.26%,CV小于10.37%;与其他常见的5种真菌毒素的交叉反应率均小于5%,且添加浓度和检出浓度的差异极显著,表明特异性良好。因此,所制备的FB1荧光定量快速检测卡能够满足粮食谷物中伏马毒素B1现场化快速定量检测的需求。

摘要： 培氟沙星(pefloxacin,PEF)广泛用于畜禽疾病的预防和治疗,常造成兽药残留,影响人体健康.因此,有必要对其构建有效快速的检测方法.实验采用溶剂热法合成具有时间分辨特性的荧光纳米材料NaYF4:Ce/Tb,并基于分子对接辅助设计PEF适配体的互补链.纳米金与发光纳米材料分别修饰在适配体、互补链上,通过碱基互补配对诱导2种纳米材料间发生时间分辨荧光共振能量转移(time-resolved fluorescence resonance ener-gy transfer,TR-FRET),基于此原理构建基于生物传感PEF的新型检测方法.在最佳条件下,测得PEF的时间分辨荧光强度在质量浓度0.2～20μg/kg呈良好的线性关系(y=1567.3x+3956.3,R2=0.9742),检测限为0.15μg/kg,测得牛奶中兽药残留加标回收率为73.81％ ～99.86％,表明该方法可用于实际食品样品中PEF的检测.

摘要： 目的 研制6种农药多残留快速检测芯片试纸条.方法 以硝酸纤维素膜为载体,农药抗原为捕获探针,时间分辨荧光微球为标记材料,通过对荧光微球粒径、硝酸纤维素膜、样品垫等反应条件进行优化,制作一种包含6种抗原抗体组合的免疫芯片.结果 该免疫芯片可同时检测甲氰菊酯、多菌灵、克百威、吡虫啉、辛硫磷、灭蝇胺6种农药.本方法对6种农药的检测限分别为1、2、0.02、1、10、0.5 mg/kg;假阴性率、假阳性率均为0,准确度较高.结论 本研究为农药多残留快速检测分析提供了技术支撑,对保障农产品质量安全具有现实意义.

摘要： 以偶联17β-雌二醇包被原(E2-BSA)的长余辉粒子(PLPs)为荧光供体,胶体金标记抗体为荧光受体,基于免疫识别和荧光共振能量转移原理,建立了E2的竞争型时间分辨荧光侧流分析方法.创新性地以余辉优良、微米级大尺寸的PLPs为荧光信号源,并利用其在硝酸纤维素膜上不迁移的特性将E2竞争物固定于检测区,巧妙解决了常规试纸对信号材料尺寸的纳米级别限制和小尺寸PLPs余辉短暂的矛盾;采用低功率紫外灯为激发光源,以智能手机实现时间分辨荧光(TRF)模式荧光采集,有效去除试纸荧光背景干扰进而提高信噪比.该时间分辨荧光侧流分析(TRF-LFA)法对E2的检出限为0.1 ng/mL,比胶体金侧流分析(CG-LFA)降低了2个数量级,且特异性良好,30 min可完成检测.将该方法应用于水中E2的检测,与HPLC-FLD法的结果一致.

摘要： 过氧化氢(H2O2)是活性氧类的主要标志物,它与多种疾病如神经退行性疾病密切相关.本文设计了一种检测细胞内过氧化氢的荧光过氧化氢酶纳米传感器.这种纳米传感器由含多聚赖氨酸、辣根过氧化物酶的生物相容性外壳和含有氧探针的多孔聚合物基质的氧传感核组成.辣根过氧化物酶(HRP)催化H2O2生成氧,进而通过荧光氧气探针进行探测.该酶纳米传感器的流体动力学尺寸约为270 nm,zeta电位为-18 mV,具有良好的生物相容性.它的荧光比率和时间分辨荧光均对H2O2高度敏感.此外,该纳米传感器可以被活细胞有效地摄取,从而可以用TRF方式灵敏地检测细胞内的H2O2浓度.结果表明,本实验制备的酶纳米传感器有望进一步用于监测H2O2相关的细胞生化反应,如氧化应激.

摘要： 用稳态荧光光谱及时间分辨荧光技术研究水溶液中甲啶铂与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.加入甲啶铂后,BSA荧光发射峰从335 nm红移到337.5 nm,并伴随着荧光强度的猝灭,表明甲啶铂与BSA发生了相互作用;单指数拟合得到的荧光寿命结果证实,甲啶铂对BSA的猝灭为静态猝灭;荧光寿命的双指数拟合结果表明,BSA的内在荧光主要是由第212位和第134位的色氨酸残基贡献的,BSA中第212位色氨酸残基和苯丙氨酸残基可能是甲啶铂的靶向目标.

摘要： 时间分辨荧光光谱因其稳定、准确的测量效果,在食品检测领域得到了广泛的应用。文章对时间分辨荧光的机理做了阐述,并介绍了实现时间分辨荧光光谱测量的技术手段,最后对光谱在食品检测领域中的应用做了归纳,以便更好的推广和运用该技术。

摘要： 目的 开发一种快速定量检测米面等食品中米酵菌酸的方法 .方法首先,制备米酵菌酸-牛血清白蛋白偶联物(bongkrekic acid-bovine serum albumin,BA-BSA),作为检测卡的包被原料包被至硝酸纤维素膜上,用本公司自制BA单克隆抗体与时间分辨微球标记放入微孔中,然后将包被后的膜和标记后的微孔组装成快速检测卡.结果 快速检测卡的线性范围为1～100 ng/mL,前处理采用碱性甲醇水溶液提取样本中米酵菌酸.结论 本方法快速、准确、灵敏度高,适合样品中米酵菌酸的检测.

摘要： 目的：研制成核酸杂交的镧系元素发光时间分辨荧光分析中的关键试剂。方法：用过碘酸钠法研制成辣根过氧化物酶(HRP)标记链霉亲和素(SA),用戊二醛二步法研制成碱性磷酸酶(ALP)标记链霉亲和素和用化学合成法研制成5-氟水杨酸磷酸酯(5-FASP)等关键试剂。结果：HRP标记SA总蛋白回收率为29.8％,纯度为97％。ALP标记SA的总蛋白回收率为56％,纯度为98％,分子量为159kD,其中ALP分子量为94KD,生物活性良好。5-氟水杨酸磷酸酯,测得熔点为157～159°C、纯度为99.43％～100％、红外吸收光谱、紫外吸收光谱及核磁共振谱等特性鉴定与文献记载一致。结论：研制成的各种关键试剂均符合本实验的要求。

摘要： 吡虫啉在农作物上的长期广泛使用,使残留问题日趋严重,为保障消费者健康,必须加强吡虫啉残留的检测.传统仪器分析方法耗时长、成本高,因此亟需一种快速现场检测分析方法.本文阐述了基于两种标记材料(纳米金和氧化铕乳胶微球)的免疫层析试纸条快速检测吡虫啉的技术研究.通过比较两者的线性范围、灵敏度和操作可行性、便捷性,为不同需求的使用提供参考依据.研究结果表明:两种试纸条在检测吡虫啉时肉眼判断阴阳性的检出限都为2.5ng/mL;再将两种免疫层析试纸条(胶体金试纸条和时间分辨荧光试纸条)应用于红茶茶叶样品中吡虫啉的检测,其对茶叶样品的肉眼判断最低检测限分别为125ng/mL,75ng/mL.研究表明,基于两种标记材料建立的免疫层析试纸条各有优缺点,可根据不同需求选择适合自身的方法.

摘要： 目的:建立时间分辨荧光技术检测DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳条带的方法.方法:以正常动物骨髓细胞总RNA作为实验对象,逆转录,再PCR过程中将生物素化的dUTP渗入DNA拷贝中,以镧系稀土元素铕标记的链霉亲和素处理PCR产物,将处理后的PCR产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,利用时间分辨荧光技术对凝胶中DNA条带进行检测,并将结果与银染进行比较,分析其灵敏度和可重复性.结果:成功的建立了时间分辨荧光对聚丙烯酰胺凝胶中DNA条带的检测技术.时间分辨荧光技术能以很高的灵敏度检测出凝胶中DNA条带,检测的条带位置与染色结果具有极好的对应性.结论:时间分辨荧光用于电泳中DNA条带的检测完全可行,且具有高度的灵敏性、分辨率、可重复性以及半定量的能力.

摘要： 本发明提供了使用双受体时间分辨性荧光共振能量转移法确定样品中是否存在多种分析物的方法。

摘要： 本发明涉及一类用于溶酶体长时间超分辨荧光成像的自闪荧光染料及其合成方法与应用，此类染料的结构特征在于通过2‑氨基吡啶衍生物进行锁环，从而调控染料罗丹明的荧光态与暗态的比例。本发明涉及的荧光染料在pH>5.5的水溶液中均处于闭环结构的暗态存在，使得这类染料只有在酸性的溶酶体中以少量的荧光态存在，达到对溶酶体的精准定位。此外，该类染料在溶酶体中存在荧光态与暗态的往复变化从而达到自闪的效果，实现对溶酶体动态、长时间的超分辨荧光成像，对溶酶体的pH、分布、大小等进行监测。

摘要： 本发明公开了一种近红外活体荧光强度与荧光时间分辨一体成像系统，涉及生物成像技术领域。包括操作平台、光学单元、切换模块、采集单元和控制单元。操作平台用于承载待检测的标本；光学单元包括近红外荧光强度成像模块和荧光时间分辨成像模块；切换模块用于近红外荧光强度成像模块和荧光时间分辨成像模块之间的切换；采集单元用于采集成像信息并形成图片以及在成像过程中自动调焦；控制单元分别与操作平台、光学单元、切换模块和采集单元连接，用于控制操作平台、光学单元、切换模块和采集单元启停，以及控制操作平台的运动。本发明实现了宽场活体以及局部细节放大的定性成像分析要求的同时实现了活体深组织下多种待分析物的定量检测分析要求。

摘要： 本发明提供了一种时间分辨荧光标记物的荧光检测方法及其装置，将待检测样本溶液分成等量的若干份，分批次进行荧光标记物的检测得到多次检测的统计结果，从而完成对整个样本溶液中荧光标记物的含量检测，所述待检测样本溶液中含包被了时间分辨荧光标记物的磁微球。提高了反应池的检测准确性，减少系统检测波动。

摘要： 本发明提供了一种基于荧光共振能量转移的均相时间分辨荧光多组分同时检测方法。本发明属于荧光免疫分析技术领域，本发明的目的在于利用作为能量受体的荧光物质的多色性，提供一种快速、灵敏、多组分同时检测的均相免疫分析新方法。建立了一种基于荧光共振能量转移(FRET)的均相荧光免疫分析(FIA)的新方法，可实现多组分抗原的同时检测。将作为能量供体的稀土元素以及作为能量受体的宽激发荧光物质分别标记需要检测的几种抗原和相应的抗体，抗原抗体的特异性结合使得能量供体和受体之间距离缩短，从而发生从能量供体到受体的FRET，根据受体的时间分辨荧光强度变化得出样品中抗原浓度。

摘要： 本发明提供了使用双受体时间分辨荧光共振能量转移法确定样品中是否存在多种分析物的方法。

摘要： 一种新型荧光稀土络合标记物及其制备和用其进行时间分辨荧光分析的方法与试剂盒，该类络合标记物可通过采用化学修饰的功能性基团与蛋白质、多肽、激素等生物分子进行共价结合，进而对各种微量生物活性物质进行时间分辨荧光测定；与常规荧光标记物相比，具有高荧光强度、稳定性、容易标记且成本低、制备简单的特点；与现有技术中的络合标记物相比，具有灵敏度高，成本较低，标记率高，使用范围广泛等优点。

摘要： 本发明提供了一种时间分辨荧光微球偶联新型工艺，包括活化步骤、标记步骤、封闭步骤和离心重悬步骤，活化反应后不需要离心，直接将标记混合溶液加入到活化后的溶液中，将最终产物在2‑8°C保存备用；产物可用于胃蛋白酶原I检测、胃蛋白酶原II检测和铁蛋白检测。本发明提供的抗体标记的时间分辨荧光微球偶联的新型工艺，克服了现有技术中的缺点，简化了繁琐流程，节省了操作时间，提高了生产效率，重复性好，成本低，便于大规模生产应用。

摘要： 本发明提供了一种时间分辨荧光标记物的荧光检测方法及其装置，将待检测样本溶液分成等量的若干份，分批次进行荧光标记物的检测得到多次检测的统计结果，从而完成对整个样本溶液中荧光标记物的含量检测，所述待检测样本溶液中含包被了时间分辨荧光标记物的磁微球。提高了反应池的检测准确性，减少系统检测波动。

摘要： 本实用新型公开了一种时间分辨荧光免疫层析检测装置及荧光免疫分析仪。该时间分辨荧光免疫层析检测装置及荧光免疫分析仪较之传统的反射型检测装置，通过将激发光源和荧光检测器设于检测区的两侧，从而可以对从检测区的免疫层析检测传感器发出的荧光进行接收和检测，相对于传统的反射型检测方法，不仅可以检测免疫层析检测传感器表面的荧光信号，还可以检测到免疫层析检测传感器内部的荧光信号，进而可以提高检测的信号强度，有利于提高检测灵敏度。通过测试，使用上述时间分辨荧光免疫层析检测装置及荧光免疫分析仪来检测免疫层析试纸条的荧光信号，较之传统的反射法接收到的荧光信号的信噪比有效提高10％～20％。