不对称还原

摘要： 报道了三[(S)-α,α-二(4-甲基苯基)-2-吡咯烷甲醇]膦酰胺催化剂催化链状酮酯化合物的不对称还原反应。研究发现,该方法对碳链长为5~11的链状酮酯具有较好的催化效果,在物质的量分数为5%手性膦酰胺催化作用下,产物手性羟基酯化合物的收率最高可达89%,对映体过量(ee)值最高可达95%。此方法为手性链状羟基酯衍生物的合成提供了新选择。

摘要： 日前,南京工业大学毛建友教授课题组开发了一种光催化剂和过渡金属催化剂协同催化的方法。该方法利用廉价易得的烯烃、芳基卤代物、烷基卤代物作为反应起始原料,合成一系列手性α-芳基丙酸酯类化合物。该类化合物可以作为非甾体消炎药的前体,具有广泛的应用价值。该课题组以二氢吡啶作为还原剂,利用光催化剂和镍催化剂协同催化的策略,发展了一个条件温和、原料适用范围广、对映选择性优异的三组分不对称还原交叉偶联反应,高效地合成一系列手性α-芳基丙酸酯类化合物。对这一酯类化合物进一步水解,就可以得到一系列α-芳基丙酸类化合物。手性α-芳基丙酸类化合物是消炎药大家族中的一个重要的分支,萘普生、布洛芬、氟比洛芬等都属于这一分支。

摘要： 通过代谢调控大肠杆菌EMP途径中的NADP;依赖性甘油醛-3-磷酸脱氢酶和过表达NAD激酶,构建了羰基还原酶和NADPH再生偶联体系E.coli BL21(DE3)/pETDueT-1-gapB-bcCR&pET-28a-yfjB,以强化NADPH的内源性合成,为β-酮酯的不对称还原过程提供足够推动力。结果表明,通过EMP调控与引入NAD激酶可使胞内NADPH合成能力提高2.19倍;以4-氯乙酰乙酸乙酯为模型底物,改造后的工程菌不对称合成(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的转化效率提高了1.69倍,目标手性醇的产率高达98.18%,对映体过量值超过99%。

摘要： 手性醇是重要的医药中间体与精细化工品,立体选择性羰基还原酶催化制备手性醇具有重要的研究与应用价值,受到国内外科学家和工程师的高度关注.本文主要围绕羰基还原酶的发现与分类、催化羰基还原反应的活性与立体选择性机制、酶的筛选挖掘与分子改造技术、辅酶还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(磷酸)的再生方法、羰基还原酶催化合成手性醇医药中间体与精细化学品技术开发与应用等方面展开综述.重点阐述了羰基还原酶催化制备降血脂、抗细菌或病毒感染、抗肿瘤、抗抑郁症、抗癫痫等重要疾病治疗药物中间体及脂肪族、芳香族手性醇精细化工品的国内外技术进展与应用,为高效能立体选择性生物催化剂的创制和手性化合物的生物合成提供理论借鉴和成功范例.

摘要： 瑞来巴坦(Relebactam)是美国制药巨头默克公司研发的新型二氮杂双环辛酮化合物,是一种广谱的β-内酰胺酶抑制剂.其中关键手性哌啶中间体1的高效、廉价合成,对于瑞来巴坦的商业化生产具有至关重要的意义.本文的主要工作为发现CeCl3/NaBH4体系对肟醚的高效选择性还原,并对工艺参数进行研究和放大的工艺验证,获得了最佳合成工艺,产物收率提高至86％.本合成工艺具有还原选择性高、成本低、产率高等优点.

摘要： 本文以L-脯氨酸为起始原料,合成了α-二取代吡咯烷-2-甲醇盐酸盐,并研究了其作为手性助剂在硼氢化钠还原烯效唑的不对称反应中的应用.为进一步提高产率,考察了反应温度、手性助剂用量及溶剂和催化剂种类对ee值的影响.结果表明,硼氢化钠还原烯效唑最优条件是:50°C下,用1.5当量的手性助剂,二氯乙烷作溶剂,氯化锌为催化剂.在此条件下,能以较高的立体选择性和化学选择性得到相应的烯效唑.

摘要： 报道了布瓦西坦的关键中间体(R)-4-丙基-二氢呋喃-2-酮(1)的新合成工艺.以戊醛和乙醛酸为起始原料,在吗啉的催化下反应得到中间体5-羟基-4-正丙基-2-呋喃酮,然后用硼氢化钠脱去5位上的羟基得到中间体4-正丙基-2-呋喃酮,最后在手性膦配体S-BINAP的催化作用下,进行不对称还原得到目标化合物(R)-4-丙基-二氢呋喃-2-酮(1).与目前公开的路线相比,该工艺操作简便,原料价廉易得,各步收率高,适合工业化生产.

摘要： (R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯是合成血管紧张素转换酶抑制剂类降压药的关键手性中间体.筛选了 1株具有不对称还原2-氧代-4-苯基丁酸乙酯合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯活性的野生菌DY99,经鉴定此菌为Kazachstania naganishii.从该菌基因组序列中挖掘并克隆了发挥催化活性的羰基还原酶基因,构建了重组大肠杆菌E.coli-pET28-kncr,对其诱导表达条件和催化反应条件进行了优化,并在最适条件下进行了催化反应.结果发现:在最优条件(当OD600达到0.8时,添加乳糖6 g/L,在28°C、150 r/min诱导12 h)下,重组菌酶活达到330.61 U/L发酵液.确定了全细胞催化不对称还原2-氧代-4-苯基丁酸乙酯制备(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的最适反应条件为30°C,pH7.5,底物、葡萄糖、细胞生物量分别为15、15和20 g/L(以干质量计),在最适反应条件下,产物累积量、时空产率分别为11.2 g/L和26.88 g/(L-h),产物的对映体过量值(e.e.)＞99％,显示了良好的应用前景.

摘要： 通过表达多种重组立体选择性氧化还原酶,分析其催化不对称还原N,N-二甲基-3-酮-3-(2-噻吩)-1-丙胺(DKTP)的性质,从而构建酶促合成(S)-N,N-二甲基-3-羟基-3-(2-噻吩)-1-丙胺(DHTP)的反应体系.基于已有立体选择性氧化还原酶重组大肠杆菌,通过Ni离子亲和层析法纯化得到重组氧化还原酶,以DKTP为底物,考察不同重组氧化还原酶对DKTP的催化活性和选择性,进一步对高选择性酶促合成(S)-DHTP的重组酶CR2进行性质分析,并考察其在最适条件下不对称还原DKTP的过程.筛选获得产物构型为(S)-型的催化活性最高的酶为CR2,该酶米氏常数Km为0.135mmol/L,Kcat/Km为3.689L/(mmol·s),最适pH8.4(0.1mol/L三乙醇胺缓冲液),最适反应温度为35°C,在10-45°C条件下和pH7.5-8.5较为稳定,Zn2+离子对酶活有促进作用.CR2催化DKTP不对称还原反应6h后,DHTP的产率达92.1％、光学纯度达99.9％.基于活性和选择性分析,获得不对称还原DKTP的目标酶CR2,其催化特性有利于高立体选择性还原DKTP生成度洛西汀中间体(S)-DHTP,从而为进一步提高酶促不对称还原DKTP的转化效率提供研究基础.

摘要： 研究了酵母菌用于4-氯-乙酰乙酸乙酯的生物不对称还原反应,筛选了助剂,考察了助剂浓度、底物纯度、酵母菌不同生长阶段对产物转化率和对映体选择性的影响.结果表明,酵母菌在不加助剂的情况下,难于还原4-氯-乙酰乙酸乙酯,而筛选的助剂M有助于酵母菌还原得到目的产物,助剂浓度、底物纯度和酵母菌不同的生长阶段对反应产物的产率和对映体选择性都有影响,这为进一步的工艺研究奠定了基础.

摘要： 本文对水/有机相两相体系中Saccharomyces cerevisiae B5催化2'-氯-苯乙酮不对称还原制备R-氯丙那林中间体R-2'-氯-1-苯乙醇进行了详细研究.结果表明,水/十二烷两相体系还原2'-氯-苯乙酮可获得较高产率,R-2'-氯-1-苯乙醇的对映体过剩值可达100﹪ee,最佳转化时间为72h,证实了在水/有机溶剂两相系统中还原反应的活力倍数与有机溶剂的LogPoct值有关.

摘要： 本文构建了两种重组菌:表达醛基还原酶的E.coliM15(pQE30-alr0307)和表达葡萄糖脱氢酶的E.coliM15(pQE30-gdh0310),二者共同用于4-氯乙酰乙酸乙酯的生物转化以获得(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯.E.coliM15(pQE30-gdh0310)作用于还原型辅酶Ⅱ的再生,有效的辅助了E.coliM15(pQE30-alr0307)催化的不对称还原反应,使得在不添加葡萄糖脱氢酶和还原型辅酶Ⅱ的情况下,得到较高得率的具有高度手性选择性的(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯.

摘要： 本研究小组从13株微生物出发，筛选出2株对2-辛酮具有较高的转化活力和对映体选择性的面包酵母，介绍了其中一株面包酵母催化2-辛酮的不对称还原以制备高对映体纯度(S)-2-辛醇的研究结果。

摘要： 利用Co(OAc)2·4H2O、手性联吡啶双膦配体和PhSiH3形成的催化体系用于芳基烷基酮的不对称还原,取得了较好的转化率和对映选择性(ee最高为96％).本研究中首次将上述的手性Co(Ⅱ)的催化体系应用于一系列β-芳基-β-烷基丙烯酸酯的不对称1,4-还原,在空气气氛和温和反应条件下取得了好的转化率和中等到较好的对映选择性。

摘要： 在pH9.00的磷酸盐缓冲溶液中,用循环伏安法制备聚L-缬氢酸修饰石墨电极,研究樟脑在聚L-缬氨酸修饰电极上的电化学行为,建立合成龙脑的新方法.结果发现在pH6.00的磷酸盐缓冲溶液中,樟脑在聚L-缬氨酸酸修饰石墨电极上出现两对氧化还原峰,峰电位分别为:Epa=800mV,Epc=610mV,Epa=-510mV,Epc=-360mV(对饱和甘汞电极).

摘要： 本文合成了复盆子酮,通过IR,1HNMR鉴定了其结构,制得了β-环糊精与复盆子酮的包合物,IR表明它们之间通过氢键相互作用;用NaBH4对该包合物进行还原,气相色谱分析表明,对映体过量为16.546％.

摘要： 本文从实验室保藏的七株酵母出发,筛选出具有较高产物得率和对映体过量的菌株--木兰假丝酵母.研究了单相体系木兰假丝酵母还原4-氯乙酰乙酸乙酯时共底物种类及浓度、反应温度、pH值和底物添加量等因素对产物得率和立体选择性的影响.单相体系在高底物浓度时底物抑制严重,水/酸丁酯两相体系可降低底物抑制的影响.

摘要： 本文应用从酿酒酵母B5细胞中粗提出的,具有光学选择性还原氯代苯乙酮类化合物的氧化还原酶进行了初步的酶学性质的考察。该氧化还原酶在外加辅酶的情况下最适反应温度为30°C,最适pH在7-8之间,摇床转速对其反应影响不大.但随着反应时间的延长,反应速率降低,温度越高,酶的失活速度越快;在全细胞反应中,基本不存在这种失活现象.底物与产物对酶还原反应均无明显的抑制现象,而在全细胞反应中,底物与产物的浓度对反应有较大的影响.

摘要： 一种制备不对称化合物(IV)的方法，其特征在于：在不对称脲化合物(I)存在下，使亲核试剂(III)与化合物(II)进行共轭加成。还提供一种能实现不对称共轭加成反应的非金属不对称催化剂，该催化剂能获得高收率和高立体选择性。所述方法是通过采用所述催化剂的不对称共轭加成反应来制备不对称化合物的有利方法。通式中，X代表氧或硫；C

摘要： 从馈给到电解液中的固体五氧化钒中获得的含有处于期望浓度比的V+3和V+4的酸性钒电解液，是通过使电解液循环流过多个串联的电解槽电化学还原该酸性电解液中至少部分的溶解态的钒到至少部分为V+3的状态而生产的；将从所述电解槽的最后一个槽流出的电解液中含有的该被还原的钒成分与计算量的五氧化钒反应，得到含有基本上处于V+4状态的钒的电解液；添加酸和水以使该溶液保持一定的摩尔浓度；并不断地使该电解液循环流过电解槽的串级，同时在所述串级的一个槽的出口处流出一股含有处于期望浓度的V+3和V+4的电解液产品。每个槽都是高度不对称的，有一个阴极和一个阳极，其有各自的表面形貌、几何形状和相互布置以引起阳极表面上的电流密度比投影阴极表面上的电流密度大5－20倍并在阳极析出氧气。这种类型的不对称电解槽可以用在工作态电池的正极或负极电解液中的某一个的回路中，用于重新平衡其钒成分的各自的氧化状态。

摘要： 一种制备不对称化合物(IV)的方法，其特征在于：在不对称脲化合物(I)存在下，使亲核试剂(III)与化合物(II)进行共轭加成。还提供一种能实现不对称共轭加成反应的非金属不对称催化剂，该催化剂能获得高收率和高立体选择性。所述方法是通过采用所述催化剂的不对称共轭加成反应来制备不对称化合物的有利方法。通式中，X代表氧或硫；C

摘要： 本发明公开了一种来源于唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(Burkholderia gladioli)ZJB‑12126的重组羰基还原酶及其编码基因、含有该基因的重组载体、该重组载体转化得到的重组基因工程菌，以及其在不对称还原前手性羰基化合物中的应用；分别以2‑苯甲酰氨甲基‑3‑酮丁酸酯、4‑氯乙酰乙酸乙酯(COBE)、(R)‑6‑氰基‑5‑羟基‑3‑羰基己酸叔丁酯和(4S)‑3‑[5‑(4‑氟苯基)‑1,5‑二氧代戊基]‑4‑苯基‑2‑恶唑烷酮为底物，进行生物催化反应制备高光学纯度的(2S,3R)‑2‑苯甲酰氨甲基‑3‑羟基丁酸酯、(S)‑4‑氯‑3‑羟基丁酸乙酯、6‑氰基‑(3R,5R)‑二羟基己酸叔丁酯以及(4S)‑3‑[(5S)‑5‑(4‑氟苯基)‑5‑羟基戊酰基]‑4‑苯基‑1,3‑氧氮杂环戊烷‑2‑酮，可以利用重组大肠杆菌作为生物催化剂进行生物催化反应，为药物手性中间体的生物催化合成提供了可供选择的新酶源。

摘要： 本发明属于生物技术领域，涉及一种利用羰基还原酶不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯的方法及应用。该方法以氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的羰酰还原酶为催化剂，以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物，以NADPH为辅因子，不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯。该方法采用的酶活性高达6.2U/mg，其对底物的得率高达95%、产物的对映体过量值为100％，且产量高，大大降低了生产成本。

摘要： 本发明公开了一种新的羰基还原酶、基因及其突变体，含有该基因及突变体的重组表达载体和重组表达转化体，该重组酶制备方法，以及该羰基还原酶和重组酶在不对称还原前手性羰基化合物制备活性手性醇中的应用。本发明的羰基还原酶来源于光滑假丝酵母，应用于(R)-邻氯扁桃酸甲酯、(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯、(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯等多种光学活性手性醇的制备。与其他制备方法相比，本方法催化制备的产物浓度高，不需要额外添加或少量添加昂贵的辅酶，产物光学纯度高，具有反应条件温和，操作简便，易于放大等优势，因此在氯吡格雷、L-肉碱以及普利类降压药物中间体的生产中具有很好的工业应用前景。

摘要： 本发明公开了一种羰基还原酶LsCR突变体、工程菌及在不对称还原羰基化合物制备手性醇中的应用，所述羰基还原酶LsCR突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第101、117、147、145位进行单突变或多突变获得的。本发明LsCR

摘要： 本发明公开了一种羰基还原酶不对称还原制备(‑)‑5‑氮杂螺[2,4]庚烷‑7‑醇的方法，包括羰基还原酶冻干粉的制备、(‑)‑5‑氮杂螺[2,4]庚烷‑7‑醇的制备两步，反应路线短，操作步骤简单，具有原料便宜易得、利用率高、反应时间快、反应条件温和、产物手性纯度高、环境污染少等优点；本发明方法制备的(‑)‑5‑氮杂螺[2,4]庚烷‑7‑醇的收率在85％以上(以5‑氮杂螺[2,4]庚烷‑7‑酮计)、目标产物ee值为100％。

摘要： 本发明公开了一种醛酮还原酶及不对称还原制备手性度洛西汀中间体的方法，属于生物法不对称合成手性化合物技术领域。本发明筛选得到醛酮还原酶来源于巨大芽孢杆菌BM1‑1(Bacillus megaterium BM1‑1)，经过菌株培养，基因克隆，构建工程菌，醛酮还原酶表达与纯化，在加入NADPH和辅助底物情况下，醛酮还原酶催化催化底物3‑(二甲氨基)‑1‑(2‑噻吩基)‑1‑丙酮(DKTP)生产(S)‑3‑(二甲氨基)‑1‑(2‑噻吩基)‑1‑丙醇(S‑DHTP)。本发明确定了基于该酶催化DKTP不对称还原的反应体系和反应条件。本发明操作方便，设备简单，在生物催化制备手性度洛西汀中间体领域具有较好的工业应用前景，对于今后生物催化专用酶源的开发和手性化合物合成方法的研究具有较为重要的意义。

摘要： 本发明公开了一种来源于唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(Burkholderia gladioli)ZJB-12126的重组羰基还原酶及其编码基因、含有该基因的重组载体、该重组载体转化得到的重组基因工程菌，以及其在不对称还原前手性羰基化合物中的应用；分别以2-苯甲酰氨甲基-3-酮丁酸酯、4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)、(R)-6-氰基-5-羟基-3-羰基己酸叔丁酯和(4S)-3-[5-(4-氟苯基)-1,5-二氧代戊基]-4-苯基-2-恶唑烷酮为底物，进行生物催化反应制备高光学纯度的(2S,3R)-2-苯甲酰氨甲基-3-羟基丁酸酯、(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯、6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯以及(4S)-3-[(5S)-5-(4-氟苯基)-5-羟基戊酰基]-4-苯基-1,3-氧氮杂环戊烷-2-酮，可以利用重组大肠杆菌作为生物催化剂进行生物催化反应，为药物手性中间体的生物催化合成提供了可供选择的新酶源。