抗体筛选

摘要： 目的了解深圳市无偿献血者不规则抗体的阳性率、分布特点及规律,提高输血安全水平。方法对深圳市29915例无偿献血者进行不规则抗体筛查,阳性者再进行特异性不规则抗体鉴定。结果29915例无偿献血者共检出111例不规则抗体阳性,总阳性率为0.37%。女性献血者阳性率为0.91%,明显高于男性献血者阳性率(0.17%)。按ABO血型分类,其不规则抗体阳性率由高至低依次为AB型(0.67%)、B型(0.51%)、A型(0.39%)、O型(0.21%)。对111例不规则抗体阳性者进行特异性不规则抗体鉴定,共106例检出特异性不规则抗体,Rh系统、Lewis系统、MN系统、P系统分别占29.25%、29.24%、25.47%、16.04%。结论在深圳市无偿献血人群中普遍开展不规则抗体筛查十分必要。

摘要： 2020年的最后一天,中国新冠疫苗上市,国人为此振奋。然而此情此景,赵振东却再也无法看到。连续200多天进行疫苗技术攻坚,期间未有一天停歇,赵振东带领7人团队在实验室内完成了疫苗研发、中和抗体筛选、抗病毒药物筛选和复制子体系的构建,这意味着以前必须在生物安全三级实验室做的实验,现在能在生物安全二级实验室开展,为我国针对新冠病毒的抗病毒药物研发提供了重要的实验体系和技术支撑。

摘要： 目的 肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)是引起重症手足口病的主要病原体,目前缺少有效的抗病毒药物.本研究利用EV71 VP1蛋白作为抗原,筛选免疫小鼠脾脏特异性表达EV71抗体的B细胞.方法 将EV71 VP1基因进行密码子优化,构建至pET-21a(+)表达载体,并转化到大肠埃希菌BL21-DE3,优化蛋白表达和复性条件,经SDS-PAGE和Western blot鉴定表达,并检测其抗原性;以纯化蛋白为抗原,通过流式细胞术对灭活病毒免疫小鼠的B淋巴细胞进行分选,用于单克隆抗体的制备.结果 EV71 VP1基因在大肠埃希菌中以包涵体形式稳定表达,纯化复性后的蛋白具有良好的免疫原性;利用表达的VP1蛋白从免疫和未免疫的昆明小鼠脾脏筛选出能够特异性表达EV71抗体的B细胞,两者数量差异具有统计学意义.结论 成功获得免疫原性良好的EV71 VP1重组蛋白,与流式细胞术结合可用于EV71特异B细胞的检测和分选.

摘要： Objective To establish a quantitative assay of serum Golgi protein 73 ( GP73) using xMAP technology and evaluate its performance. Methods Monoclonal antibodies against GP73 were prepared and purified, and antibody pair screening was performed by double?antibody sandwich enzyme?linked immunosorbent assay. The screened antibodies were used to construct a Luminex liquid chip detection system, and the analysis performance of the detection system was evaluated. The serum levels of GP73 were detected in 90 clinical samples from healthy controls and patients with chronic hepatitis B infection ( CHB) and hepatocellular carcinoma ( HCC). Results Five anti?GP73 monoclonal antibodies were prepared and purified, and 5 antibody pairs were successfully screened.The Luminex liquid chip detection system of GP73 was successfully constructed using 8F10D1 and 10B9F11 antibody pairs. The analytical performance evaluation showed that the sensitivity of this system was 0.25 ng／ml and the dynamic range was 0.25?100 ng／ml. No cross reactivity was observed. The intra? and inter?assay variation for GP73 was ＜8% and ＜11%, respectively. The recovery was 83%?92%. The linear regression equation was y＝1.141x+6.436 ( r2 ＝0.998 4, P＜0.001). The GP73 concentrations in the serum samples of healthy control, CHB group, and HCC group were 42.8 (38.68, 55.90) ng／ml, 61.49 (43.59, 81) ng／ml, and 122.78 (49.36 liter, 264.55) ng／ml, respectively.The levels of GP73 in HCC group were significantly higher than those in CHB group and healthy controls (P＜0.05). Moreover, the levels of GP73 in CHB group were significantly higher than those in healthy controls ( P＜0.05). Conclusions A liquid chip detection system of GP73 was successfully constructed. It provides a powerful tool for the clinical application of GP73 in the future.%目的 构建高尔基体糖蛋白73(GP73)的液态芯片检测体系并评价其检测性能.方法制备并纯化5株抗GP73的单克隆抗体,采用酶联免疫吸附试验双抗夹心法进行抗体配对筛选.应用筛选到的抗体对构建Luminex液态芯片检测体系,并对该检测体系进行分析性能评估.应用该体系 检测正常对照、慢性乙型肝炎和肝细胞癌血液样本各30例,比较3组间GP73浓度的差异.结果制备并纯化了5株抗GP73 单克隆抗体,配对筛选成功5对.应用8F10D1和10B9F11抗体对成功构建了GP73的Luminex液态芯片检测体系.该检测体系的灵敏度为0.25 ng／ml,线性检测范围为0.25～100 ng／ml,特异度较好,批内精密度＜8%,批间精密度＜9%,回收率为83%～92%,线性稀释效应的线性回归方程为y＝1.141x+6.436(r2＝0.998 4,P＜0.001).正常对照组、慢性乙肝组和肝细胞癌组血液样本的GP73 浓度分别为42.8(38.68,55.90) ng／ml、61.49(43.59,81) ng／ml和122.78(49.36l,264.55) ng／ml.肝细胞癌组的GP73浓度高于慢性乙肝组和正常对照组(均P＜0.05),慢性乙肝组的GP73浓度高于正常对照组(P＜0.05).结论 成功构建了GP73的液态芯片检测体系,为GP73检测在临床上的应用奠定了基础.

摘要： 目的:探讨本院交叉配血试验不相合的原因.方法:对2012-2017年交叉配血不合样本分别采用直接抗人球蛋白试验、抗体筛选试验和不规则抗体鉴定实验等,查找原因.结果:69例配血不合样本中,13例由冷凝聚素导致,20例由于患者红细胞被致敏(直抗阳性),36例患者由不规则抗体引起.结论:出现交叉配血不合现象时,应采用抗体筛选、不规则抗体鉴定、直接抗人球蛋白试验、间接抗人球蛋白试验等方法进行原因分析,尽可能确保输血的安全、有效.

摘要： 目的 检测不规则抗体及抗体鉴定在临床输血中的意义.方法对本院输血前患者做不规则抗体筛检,抗体阳性者进一步鉴定.结果 检测3021例输血前标本进行抗体检测阳性率0.16%发现抗-D2抗体2例,抗-E抗体2例,抗Ec抗体1例.结论 对输血前患者进行不规则抗体筛选的临床意义在保证临床输血安全、减少溶血性输血反应中具有重要意义.

摘要： 目的 全自动血型分析仪在无偿献血者的不规则抗体筛选中的应用价值.方法 2016年1—6月利用全自动血型分析仪筛查献血者5792人不规则抗体,对阳性或可疑标本行抗体鉴定.结果 血型仪抗体筛选标本中抗筛阳性33例(0.6%),其中试管法抗体鉴定中含同种抗体25人(75.8%,IgM类16人,IgG类7人,IgM类+IgG类2人,抗体效价1~32),复查阴性4人(12.1%),血浆蛋白干扰或单纯的冷凝集4人(12.1%).结论 全自动血型分析仪能检出IgM和IgG类抗体,灵敏度高,结果可保存和追溯,能增强输血安全性.

摘要： 目的:通过对9例血清中存在不规则抗体患者的输血及备血,探讨提前进行抗体筛选对含有不规则抗体患者进行及时、安全、有效地治疗的重要作用.方法:采用血型血清学方法对我院2010年1月至2016年10月期间的3665例患者进行不规则抗体筛查试验.结果:3665名患者不规则抗体筛选阳性9例,阳性率0.24％ 结论:临床输血前提前进行抗体筛查试验来发现不规则抗体,便于及时对患者进行输血治疗,而且能大大降低输血反应风险.

摘要： 噬菌体抗体库技术是一种以噬菌体为载体,将外源抗体库基因插入到噬菌体衣壳蛋白基因中,并组装出具有扩增能力且在噬菌体表面无缺损表达抗体的融合噬菌体的技术.噬菌体抗体库技术已广泛运用于单克隆抗体的研发,它相对于传统的筛选技术,在时间周期,抗体类型,筛选范围,经济成本等有较为突出的优势.本文主要介绍噬菌体抗体库技术的原理、类型、运用以及最新研究进展.

摘要： 目的:使用微柱凝胶免疫检测技术进行血型鉴定、交叉配血及不规则抗体筛选等相关检查,传统方法难以开展的项目变得简单、准确,达到更安全输血.rn 方法:用微柱凝胶法进行血型鉴定(AB0及RhD)、交叉配血及抗体筛查.rn 结果：18800例血型鉴定发现A2B亚型1例,RhD阴性24例,约占比例的1.3‰,5000例交叉配血发现5例配血不合,其中1例是不规则抗体细胞Ⅲ阳性;1例是不规则抗体细胞Ⅱ、 Ⅲ混合阳性;l例受血者血清中M抗体,无法配血;1例含自身抗体(抗A);1例为A2B亚型含抗A1抗体.rn 结论:采用微柱凝胶免疫检测法进行输血相关检测,操作简便,结果准确,有利于选择更合适的血液输血,这对安全输血的意义非常重大.

摘要： 目的：研究DEL型个体是否对D抗原产生体液免疫应答。方法:对1030名经间接抗人球蛋白试验确认为Rh(D)阴性献血者进行抗体筛选，对抗体筛选阳性献血者用10个O型谱细胞和筛选特异细胞进行抗体鉴定。对产生抗-D的Rh(D)阴性献血者和临床产生抗-D孕妇用DEL特异性引物鉴定是否是真正DEL型。对117名Rh(D)阴性献血者吸收放散试验鉴定是否为DEL型，DEL阳性献血者进行抗体筛选。结果:1030名阴性献血者10人产生抗-D抗体，10名产生抗-D抗体献血者和5名产生抗-D抗体孕妇DEL基因分型为阴性，117名Rh(D)阴性献血者DEL血型血清学检测阳性24名，24名DEL阳性献血者抗体筛选阴性。结论:产生抗-D抗体的个体未检出DEL型，DEL型的个体未检出抗-D抗体。

摘要： 目的：分析2011年度上海市血液中心发放的全国血型血清学室间质控品返回的回执结果.方法：采用国际血型参比实验室(iBGRL)建立的国际血型血清学室间评分标准,对参评的74家血站及医院输血科血型实验室的回执进行评分,计算各项试验的准确率,并通过Z检验(标准统计量检验法)进行满意度统计.结果：全国血站血型室及部分医院输血科的ABO定型准确率为99.76％,RhD定型准确率为100％,抗体筛选准确率为93.52％,抗体鉴定准确率为93.41％,交叉配合试验准确率为89.85％；实验室结果评价满意率为94.24％,其中血液中心为97.56％,中心血站为97.05％,医院输血科为88.46％,地区级检测中心为100％.结论：本次室间质评在ABO/Rh血型定型中,绝大部分单位的结果统一,在抗体筛选和鉴定中,仍有一部分的单位抗筛漏检或者抗体鉴定错误.在交叉配血中,对于献血者直抗阳性的细胞交叉配血过程中,由于各个单位所用的试剂和方法不同,导致出现迥异的结果.总的满意度,血液中心的免疫血液学水平高于中心血站和医院输血科.

摘要： 随着输血技术的发展及血型鉴定试剂敏感度的提高，由ABO血型鉴定误差引起的速发性溶血反应发生率显著减少，而患者由于输血或妊娠免疫而产生的免疫性抗体引起的迟发性溶血反应还有时发生。为了保证患者的临床输血安全，本院自2002年4月起对所有有输血史、妊娠史的患者，输血前进行抗体筛选，到2004年4月发现阳性结果12例，本文现将筛选过程进行总结报告，并讨论了筛选时的注意事项。

摘要： 机会性严重深部真菌感染患者的免疫功能低下或者缺陷,预后极差,死亡率较高.因此,考察烟曲霉感染后的机体免疫应答对于曲霉引发疾病的预防、治疗和预后具有明显的指导意义,本文着重就烟曲霉感染后体液免疫的产生机制以及保护性抗体筛选和应用方面的研究进展作一综述。

摘要： 随着输血技术的发展,输血科的实验室操作有着突飞猛进的发展,从以前的纯手工到半自动,到现在的全自动化,使得实验室的工作又快又精准的完成.本科于2013年9月使用Galileo Echo全自动血型仪来检测需要输血治疗的病人或外科手术病人的ABO和Rh(D)血型鉴定以及IgG红细胞抗体筛查,为保证该仪器能够正常发挥检测功能来达到实验室工作要求，在使用Galileo Echo全自动血型仪应注意开机后必须要进行仪器初始化，初始化结束后要进行维护每日的保养项目，加载试剂时要注意轻轻推入试剂区等问题。

摘要： 随着输血技术的发展,输血科的实验室操作有着突飞猛进的发展,从以前的纯手工到半自动,到现在的全自动化,使得实验室的工作又快又精准的完成.本科于2013年9月使用Galileo Echo全自动血型仪来检测需要输血治疗的病人或外科手术病人的ABO和Rh(D)血型鉴定以及IgG红细胞抗体筛查,为保证该仪器能够正常发挥检测功能来达到实验室工作要求，在使用Galileo Echo全自动血型仪应注意开机后必须要进行仪器初始化，初始化结束后要进行维护每日的保养项目，加载试剂时要注意轻轻推入试剂区等问题。

摘要： 随着输血技术的发展,输血科的实验室操作有着突飞猛进的发展,从以前的纯手工到半自动,到现在的全自动化,使得实验室的工作又快又精准的完成.本科于2013年9月使用Galileo Echo全自动血型仪来检测需要输血治疗的病人或外科手术病人的ABO和Rh(D)血型鉴定以及IgG红细胞抗体筛查,为保证该仪器能够正常发挥检测功能来达到实验室工作要求，在使用Galileo Echo全自动血型仪应注意开机后必须要进行仪器初始化，初始化结束后要进行维护每日的保养项目，加载试剂时要注意轻轻推入试剂区等问题。

摘要： 随着输血技术的发展,输血科的实验室操作有着突飞猛进的发展,从以前的纯手工到半自动,到现在的全自动化,使得实验室的工作又快又精准的完成.本科于2013年9月使用Galileo Echo全自动血型仪来检测需要输血治疗的病人或外科手术病人的ABO和Rh(D)血型鉴定以及IgG红细胞抗体筛查,为保证该仪器能够正常发挥检测功能来达到实验室工作要求，在使用Galileo Echo全自动血型仪应注意开机后必须要进行仪器初始化，初始化结束后要进行维护每日的保养项目，加载试剂时要注意轻轻推入试剂区等问题。

摘要： 目的：探讨自动化梅毒螺旋体抗体初筛实验的特异性并进行流程改进分析. 方法：化学发光微粒子免疫分析法(TP-CMIA)对4690份血清标本进行梅毒血清学初筛,阳性标本进行梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TP-PA)复检并同时行梅毒快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)检测.TP-CMIA初筛与TP-PA复检不符的标本进行荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)验证.结果：4690份血清标本经TP-CMIA初筛96份阳性(2.04％).在96份标本中,TP-PA复检阳性仅67份(69.79％),RPR检测41份阳性(42.71％).29份标本TP-CMIA阳性而TP-PA阴性的不符标本,FTA-ABS验证3例标本IgG抗体可疑阳性、26例IgG抗体阴性.结论：化学发光微粒子免疫分析法进行梅毒血清学筛查时存在假阳性问题,需要改进筛查流程.

摘要： 本发明涉及生物医药工程技术领域，公开了一种从噬菌体抗体库中筛选和验证抗狂犬病病毒中和抗体的方法，包括A、单克隆噬菌体抗体培养，并取培养上清液；B、定性分析：将步骤A中的培养上清液置于96孔板中，依次经DMEM培养基以及中和用病毒中和、BSR细胞悬液培养、预冷丙酮固定后，与稀释后的FITC标记的抗狂犬病病毒核蛋白抗体共孵育，选择可明显抑制病毒感染的克隆测序，排除重复的序列，初步获得中和活性各不相同的抗狂犬病病毒抗体序列；C、定量分析：挑选不同序列有中和活性的各个克隆，重新制备噬菌体抗体颗粒，纯化并稀释一定倍数后采用RFFIT法测定体外中和活性；以及D、全分子抗体瞬时表达和活性分析。

摘要： 本发明公开了一种从ScFv噬菌体抗体库中以THY‑1/CD90为靶点筛选出的全人源拮抗抗体，该全人源拮抗抗体为单链抗体，全人源拮抗抗体重链DNA序列如SEQ ID NO:1所示，轻链DNA序列如SEQ ID NO:2所示，重链氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，轻链氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。上述技术方案，从人ScFv噬菌体抗体库中筛选以THY‑1/CD90为靶点的全人源拮抗抗体，并分别测定其DNA序列和氨基酸序列，通过该方法获得的全人源拮抗抗体具有靶向THY‑1/CD90的特异性。这样产生的抗体能够克服杂交瘤技术生产抗体的缺点，还能实现高通量、快速筛选抗体的目的，且价格低廉。

摘要： 基于鼠源天然单链抗体库筛选识别CIM‑ScFv抗体的多肽序列及其应用，多肽序列的重链可变区的氨基酸序列为如SEQ ID NO.1所示序列：ARWTVITYAMDY，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示序列：QNGHSFPYT，多肽序列在西马特罗抗原鉴定中的应用。本发明对获得的单链抗体进行质量评价，四轮筛选中噬菌体回收率一直呈增加的趋势，说明随着淘选次数的增加，特异性的噬菌体抗体得到了有效富，与西马特罗抗原进行亲和力鉴定，亲和力较好，可应用于西马特罗抗原的快速检测试剂的生产中，丰富西马特罗等β2型受体激动剂的残留检测方法，为进一步制备西马特罗的抗体和抗体进化奠定物质基础，为西马特罗等非法添加物的控制使用提供参考，以满足公众对无残留动物肉制品的要求。

摘要： 本发明涉及生物医药工程技术领域，公开了一种从噬菌体抗体库中筛选和验证抗狂犬病病毒中和抗体的方法，包括A、单克隆噬菌体抗体培养，并取培养上清液；B、定性分析：将步骤A中的培养上清液置于96孔板中，依次经DMEM培养基以及中和用病毒中和、BSR细胞悬液培养、预冷丙酮固定后，与稀释后的FITC标记的抗狂犬病病毒核蛋白抗体共孵育，选择可明显抑制病毒感染的克隆测序，排除重复的序列，初步获得中和活性各不相同的抗狂犬病病毒抗体序列；C、定量分析：挑选不同序列有中和活性的各个克隆，重新制备噬菌体抗体颗粒，纯化并稀释一定倍数后采用RFFIT法测定体外中和活性；以及D、全分子抗体瞬时表达和活性分析。

摘要： 本申请公开了一种抗冠状病毒抗体、其筛选方法、含有该抗体的药物组合物及应用。本申请中，经所述抗冠状病毒抗体处理的冠状病毒的刺突蛋白S1/S2解离的力大于未经所述抗冠状病毒抗体处理的冠状病毒的刺突蛋白S1/S2解离的力。本申请提供的靶向非RBD表位的抑制S1/S2解离和或S2变构重排的抗冠状病毒抗体，以尝试替代现有的RBD靶向抗体，克服单一阻断RBD/ACE2互作无法抵抗冠状病毒利用其它受体入侵的缺陷，或与现有的RBD靶向抗体配合使用，降低长期使用单一的RBD靶向抗体诱发冠状病毒产生抵抗性突变的几率。

摘要： 本发明公开了一种含高效价抗HCMV中和抗体原料血浆的筛选方法和抗HCMV中和抗体效价的检测方法，属于血液制品技术领域。本发明提供的筛选方法和检测方法均基于荧光免疫斑点试验，包括利用能与含有已知抗HCMV中和抗体量的抗HCMV免疫球蛋白国家标准品恰好中和的HCMV病毒稀释液与按照确定的倍数稀释的待检血浆样品或系列梯度稀释的待检样品进行荧光免疫斑点试验。本发明提供的方法仅需要48h左右就可以获得结果，并且结果数据由免疫斑点分析仪采集分析，无需肉眼观察，对结果的判定更加客观准确。

摘要： 一种表位特异的抗体筛选方法，以解决抗体库筛选技术中具有治疗作用的功能性抗体筛选效率低的问题，包括用功能表位肽筛选和活细胞筛选的步骤；还提供了用该方法筛选噬菌体展示抗体库所获得的一种全人源抗PD‑1单克隆抗体，针对特定的功能性表位，能有效阻断PD‑1与其配体的结合，并具有亲和力高、EC50低的特点，能在低剂量下对动物模型产生治疗作用。本发明大大提高了功能性抗体的筛选效率，并为恶性肿瘤、免疫疾病患者提供了一种潜在的更安全经济的免疫治疗药物。

摘要： 本发明涉及一种新型抗体文库和一种使用所述新型抗体文库的抗体筛选方法。具有源自人类序列的特异性VH或VL支架的根据本发明的抗体文库展现出高热力学稳定性，并且具有允许高可溶性表达以及可逆折叠的优点。另外，根据本发明的抗体包含多种经合理控制的CDR，以对所有抗原展现出高特异性和高亲和力，并且因此可以有利地用于选择针对靶抗原的适当的候选抗体。

摘要： 本发明涉及一种基于时间分辨免疫荧光分析仪检测抗体配对的抗体筛选方法，具体包括以下步骤：S1：制备荧光标记物，使用制备的荧光标记物标记抗体；S2：将抗体包被至固相载体中，并进行封闭；S3：将待检抗原加入所述步骤S2的固相载体中，使抗原与抗体相结合，形成抗原抗体复合物；S4：向所述步骤S3的固相载体中加入所述步骤S1中已荧光标记的抗体，进行孵育后，放入时间分辨免疫荧光分析仪进行检测，筛选抗体。该基于时间分辨免疫荧光分析仪检测抗体配对的抗体筛选方法提高了抗体筛选配对成功率，减轻了工作量，具有高通量筛选抗体配对的优点，同时提高了与POCT免疫层析技术平台抗体配对符合率。

摘要： 本发明提供了一种基于羽扇豆过敏原Lup an1纳米抗体筛选双抗夹心纳米抗体对的方法，包括如下步骤：(1)胶体金的制备；(2)金标纳米抗体的制备；(3)采用免疫层析试纸条方法进行双抗夹心抗体对的筛选。本发明所述的基于羽扇豆过敏原Lup an1纳米抗体的使用胶体金免疫层析试纸条方法筛选双抗夹心纳米抗体对，能开发一种操作简便、耗时较短的双抗夹心检测体系中捕获抗体与检测抗体的筛选方法，用于后续食物中过敏原检测方法的构建。