微囊藻毒素

摘要： 微囊藻毒素(MC)作为肝毒性最强的藻毒素之一,在受污染的水体中时常检出,严重威胁着人畜饮水安全,加强其检测十分重要。在前期研究中,已成功构建抗MC-LR噬菌体展示纳米抗体文库。本研究以MC-LR-OVA作为包被原,经4轮固相淘筛,获得纳米抗体M110。该抗体可识别MC-LR,且具有良好的稳定性。基于纳米抗体M110建立了检测MC-LR的间接竞争酶联免疫分析法(ic-ELISA),检测的半抑制浓度IC50值为3.55 ng/mL,检测限0.65 ng/mL,线性范围1.28~9.88 ng/mL。与UPLC-MS/MS方法检测结果相关系数达0.998,提示本方法可用于水体中微囊藻毒素残留的检测。

摘要： 本实验以茶籽壳为原料,Fe_(3)O_(4)为磁性添加剂和微波吸收介质,采用微波辅助法制备磁性生物质活性炭(MBAC)。实验结果表明,制备MBAC的最佳工艺条件为:50%的H_(3)PO_(4)浸渍150目茶籽壳粉末,浸渍比为5∶1(V/m),活化后茶籽壳粉末与Fe_(3)O_(4)的质量比为5∶2,微波功率为500 W。应用扫描电镜(SEM)、透射电镜(TEM)和傅立叶变换红外(FTIR)光谱等技术对该纳米材料进行表观形貌分析。采用该磁性固相吸附材料,结合超高效液相色谱-串联质谱法实现对环境水体中的微囊藻毒素(MC-LR、MC-RR)的分离分析。实验考察了MBAC用量、pH值、NaCl浓度对吸附效率的影响。实验结果表明:投加10.0 mg的MBAC,在20 min内MC-LR和MC-RR的回收率可达到80.0%以上。MC-LR和MC-RR的检出限分别为0.073μg·L^(-1)和0.016μg·L^(-1)。实际水体中MC-RR的浓度范围为51.2~56.6 ng·L^(-1),MC-LR未检测出。

摘要： 超高灵敏度和特异性的电化学生物传感器在环境风险物质监测以及生物医学检测领域具有重要意义,而构建生物亲和性高、制备工艺简单、成本低廉的检查电极是电化学生物传感器走向应用的关键。本文采用3D打印技术制备出重复性良好的三维石墨烯复合电极,然后通过电化学氧化的方法调控表面石墨烯的形貌和氧化基团。所制备的电化学生物传感器在环境污染物微囊藻毒素(MC-LR)的检测中展现出超高的灵敏度,其线性检测区在4×10^(-6)~1μg/L,检测限为1.5×10^(-7)μg/L。同时,通过改变适配体检测探针后,该电化学生物传感器对于多巴胺、重金属Hg^(2+)、四环素等均具有极高的检测灵敏度。本研究为电化学适配体生物传感器走向应用化提供了一种新的思路,为开发超高灵敏度环境监测和生物医学检测传感器提供一定的基础数据。

摘要： 微囊藻毒素主要是由水中蓝绿藻凋亡后产生的一类常见的环肽肝脏毒素,对水生生物及人体健康具有非常大的危害性。建立准确、快速检测微囊藻毒素的方法对中国民众饮水安全非常重要。对固相萃取、色谱和质谱等条件进行优化,建立了超高效液相色谱-串联质谱同时检测水中8种微囊藻毒素(LR、RR、YR、WR、LW、LA、LF、LY)的方法。该方法检出限为0.002~0.006μg/L,定量限为0.006~0.018μg/L,加标回收率为85.3%~107.5%,相对标准偏差小于11%。该方法可为地表水中微囊藻毒素的日常检测提供技术支持。

摘要： 对天然水体中3种痕量微囊藻毒素(MC-RR、MC-YR、MC-LR)的淋洗、洗脱、液相色谱测定等环节进行单因素不同水平考察,结果表明:以体积分数为45%的甲醇水溶液(含0.1%的TFA)为固相萃取淋洗剂、10 mL甲醇(含0.1%TFA)为固相萃取洗脱剂,体积分数为70%的甲醇水溶液(含0.1%TFA)为液相色谱流动相,可在6 min内有效分离MC-RR、MC-YR、MC-LR。将优化后的方法用于实际加标水样的测定,MC-RR、MC-YR、MC-LR的方法检出限分别为0.064μg/L、0.098μg/L、0.095μg/L,加标回收率为87.0%~116%,RSD为10.2%~18.8%。

摘要： 在水温(22±1)°C、pH 8.0~8.5、溶解氧7~8 mg/L下,对体质量(16.0±1.0)g凡纳滨对虾注射浓度为3.52×10^(-4)mmol/kg的微囊藻毒素20μL。分别于注射后0、2、4、8、16、24、48、72 h测定凡纳滨对虾死亡率,并取肝胰腺组织,检测其超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶3种抗氧化酶活性及丙二醛含量的变化,研究微囊藻毒素对凡纳滨对虾肝胰腺相关免疫酶活性的影响。试验结果显示:注射微囊藻毒素后,凡纳滨对虾72 h死亡率为13.33%;凡纳滨对虾肝胰腺中丙二醛含量逐渐升高,8 h后显著高于对照组,并于72 h达到最大值(4.02±0.02)nmol/mg(P<0.05);超氧化物歧化酶、过氧化氢酶及谷胱甘肽过氧化物酶活性在72 h内均呈先升后降的趋势,并分别在2、4、8 h达到最高,随后活性逐渐降低,16 h后逐渐低于对照组,且活性均于72 h达到最低值。试验结果表明,微囊藻毒素导致凡纳滨对虾肝胰腺脂质过氧化反应逐渐增强并抑制凡纳滨对虾抗氧化相关酶活性,造成氧化应激,72 h内便会造成肝胰腺严重氧化损伤。

摘要： 使用高效液相色谱法对饮用水中有机物及农药指标进行检测,设备的性能、流动相中的杂质、检测过程中的设备检测参数都会影响检测结果。研究通过参数优化,适量增大了囊藻毒素检测中三氟乙酸比例,峰型更加纯化,峰拖尾消失,峰后基线稳定;增加了呋喃丹检测流动相流速,出峰时间提前,洗脱更加彻底,结果更加准确;减小了草甘膦检测中进样量,流速稍降,出峰稳定,峰型良好。优化后的检测方法操作简单、灵敏度高、稳定性好,加标回收率高,适用于饮用水中微囊藻毒素、呋喃丹、草甘膦的测定。

摘要： 微囊藻毒素(microcystins,MCs)是一种蓝藻细胞内次级代谢产物,在世界范围内广泛分布,根据其肽链的修饰或所含氨基酸的类型不同,已发现并命名了200多种异构体。各种异构体之间急性毒性差异较大,因此其组成和浓度决定了自然水体中MCs的最终毒性,影响MCs异构体产生的调控因子也成为了如今研究的热点。从遗传角度看,非核糖体肽合成酶的特性、基因重组和基因突变等导致的产毒基因(mcy)编码差异直接造成不同MCs异构体的产生;从环境角度看,光照、温度和营养元素等因子可能通过改变结合位点结构、引起氧化应激和影响藻类生长代谢等方式调控MCs异构体合成。本文根据国内外已有研究成果,对MCs异构体的分布特征以及调控因子的影响机制等方面的研究现状进行了总结归纳,并对未来研究方向进行了展望,以期通过正确认识MCs的产生及转化过程,从而更好地评价其造成的环境风险,为制定相应的消除或减低风险的规避策略提供理论依据。

摘要： 建立了直接稀释结合超高效液相色谱(Ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)同时测定闽东地区贝类中河豚毒素(Tetradotoxin,TXT)和微囊藻毒素(Microcystin-leucine arginine,MC-LR)含量的分析确证方法。贝类中的TTX和MC-LR用1%乙酸90%甲醇水溶液提取,0.5%乙酸甲醇稀释后,TTX与MC-LR分别用亲水色谱柱Acquity HILIC和Shim-pack GIST C18-AQ HP反相色谱柱分离,乙腈0.1%甲酸水溶液作为流动相梯度洗脱,UPLC-MS/MS分析,基质匹配标准曲线外标法定量。TTX和MC-LR的方法检出限分别为10μg·kg^(-1)和5μg·kg^(-1),定量限分别为30μg·kg^(-1)和15μg·kg^(-1)。两种毒素的标准添加水平为50、100、500μg·kg^(-1)(鲜重计),回收率范围分别为84.0%~97.6%和85.5%~92.2%,相对标准偏差(RSD,n=6)分别为5.3%~10.0%和6.9%~7.6%。该方法准确、可靠,适用于闽东地区贝类中河豚毒素与微囊藻毒素的同时测定。

摘要： 目的 建立三通道自动固相萃取-高效液相色谱-四极杆串联质谱法检测水中痕量的8种微囊藻毒素的分析方法.方法 采用高自动化的前处理设备,采用C18固相萃取小柱富集浓缩,应用液相色谱-四极杆串联质谱法定性定量地检测8种微囊藻毒素.结果 该方法检测水中的8种微囊藻毒素检出限为0.01～0.6μg/L,在0.25～62.5μg/L的线性范围中,线性相关系数大于0.99.结论 该方法自动化程度高、灵敏度高、定性定量准确、测定浓度范围广.

摘要： 近年来,随着全球气候变暖和湖泊富营养化程度的加剧,世界范围内湖泊生态系统中有害蓝藻水华的发生频率和分布范围不断增加,蓝藻及其释放的藻毒素对生态环境和人类健康构成严重威胁.在各种藻毒素中,以微囊藻毒素(Microcystins,MCs)毒性最强,对人类危害也最大,微囊藻毒素的化学性质相对稳定且难以通过常规水处理方法消除.本文介绍了微囊藻毒素的产生、性质与结构,并且在国内外大量研究成果的基础上综述了当前微囊藻毒素的检测方法以及降解途径,并详细介绍了物理吸附技术、光催化高级氧化技术、超声波技术以及生物降解技术等具有实际应用前景的去除方法.最后,本文总结了现有去除方法的优点及局限性,并对未来的研究方向进行了展望,以期为今后的研究提供帮助.

摘要： 微囊藻毒素是由蓝藻细胞产生的一类难降解的有毒物质,常能进入水体对人与水生生态系统健康安全构成严重威胁.伴随着全球性的有毒蓝藻水华持续暴发,其对应在水环境中微囊藻毒紊释放的问题越发严峻.微生物修复能够低毒、高效地消除水体藻毒素污染,在应急处理水华引发的饮用水安全事故中具有广阔的前景,弥补目前常规水污染控制技术存在的局限性.本文综述了我国水环境中微囊藻毒素的暴露现状、微生物降解机理、影响因子与降解功能基因等方面的研究进展,概述了该技术在我国水环境污染治理中的应用,探究其可能存在的技术优化途径并展望其研究方向,为更好地保证我国饮用水安全提供思路指导.

摘要： 本文主要对"水质甲萘威、溴氰菊酯、微囊藻毒素-LR高效液相色谱法"水利行业标准方法的研制过程进行说明.本方法从分析原理,试剂和材料、仪器、样品采集与保存的要求,分析步骤,结果计算以及质量保证与控制等方面进行了规定,方法中甲萘威、溴氰菊酯及微囊藻毒素-LR的方法检出限分别为12.0 ng/L、19.7 ng/L和24.6 ng/L.经过多种介质水体中的检测分析与高纯水加标实验,证明本方法稳定可靠,可以为我国水体中甲萘威、溴氰菊酯和微囊藻毒素-LR的检测提供方法指导。

摘要： 通过对离子源、毛细管电压等质谱条件的研究,建立了高效液相色谱-串联质谱分析水中9种微囊藻毒素的方法,并对特征母离子及子离子进行了初步解析.目标化合物以电喷雾离子源正离子多反应模式进行检测.在实验浓度范围内9种微囊藻毒素具有良好的线性关系和回收率,相对标准偏差小于10％.方法的检出限能够满足世界卫生组织及我国地表水体中关于微囊藻毒素控制标准的要求.

摘要： 提出了固相萃取-高效液相色谱-串联质谱微囊藻毒素检测方法,检出限和方法回收率研究结果表明该方法灵敏度高、结果准确可靠.利用该检测方法对海河流域几个典型水源地开展了初步检测,发现海河流域多个水源地检出微囊藻毒素,虽然目前微囊藻毒素质量浓度远低于《生活饮用水卫生标准》浓度标准限值1.0μg/L,但是微囊藻毒素已成为水源地饮水安全的重要威胁之一.

摘要： 目的:掌握太湖水体中微囊藻毒素(MC-LR)及相关因子的时空分布,为太湖周边城市安全供水提供基础数据.方法:2010年1月至2011年12月,在太湖水体中设置15个采样点,每月采集一次样品,采用高灵敏时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测各样品中MC-LR的浓度,同时监测藻类密度、水温、高锰酸盐指数、氨氮、叶绿素a等指标.结果:太湖水体中MC-LR浓度高峰出现在11月份,枯水期浓度显著高于丰水期,北部和西部的平均浓度明显高于东部、南部和中部;而藻类密度以9月份最高,丰水期浓度高于枯水期,南部和中部高于西、北和东部.结论:太湖水体中MC-LR污染存在时间和地域差异,和藻类密度的变化趋势并不一致.应加强监测以保证供水安全.

摘要： 目的：近年来,由于人类活动引发的水体富营养化频繁发生,造成了水生生物特别是藻类大量繁殖,严重破坏了水体的生态平衡.微囊藻毒素是一种单环七肽类化合物,由蓝藻的一些种属产生,在发生水华时被大量排到水体中,进而通过食物链进入人或动物的体内,威胁人类的健康.因此,微囊藻毒素的相关研究已经成为环境科学和预防医学的热点之一.在已经发现的微囊藻毒素中微囊藻毒素LR(MC-LR)是最常见和毒性最大的一种,而肝脏是其最主要的靶器官.多项研究已经证明,MC-LR不仅可以诱导肿瘤的发生,而且在肿瘤后期的发展和转移中也有促进作用.但是,其具体相关机制尚不明确.一般认为,MC-LR的致毒机理主要是其对蛋白磷酸酶2A(PP2A)和蛋白磷酸酶1(PP1)的特异性抑制,进而造成其下游信号通路的紊乱而产生一系列细胞效应.Akt/S6K1通路在细胞生长和增殖中有着重要的作用,在肿瘤中常处于高度激活状态.Thr308和Ser473是Akt激活所必需的两个磷酸化位点,S6K1的Thr389位点的磷酸化对于其激活也起着关键作用.而PP2A可以对以上位点进行脱磷酸化.本研究选取正常人肝细胞系HL7702为研究对象,通过研究短时间内MC-LR在细胞内的积累及对Akt/S6K1通路相关蛋白的影响,探讨MC-LR与肿瘤发生相关的可能原因.rn 方法：HL7702细胞暴露于10μM的MC-LR1h、2h、4h、6h和12h后,免疫印迹和免疫共沉淀检测MC-LR在细胞内的积累及其与PP2A/C亚基的结合情况,同时检测Akt/S6K1通路相关蛋白的磷酸化水平.rn 结果：一,MC-LR处理HL7702细胞1小时后,可在细胞内形成显著的累积并与PP2A/C亚基形成共价结合;延长暴露时间后,两者的结合没有增加,而是保持不变.二,MC-LR暴露一小时就能引起p-AKT(Thr308)、p-AKT(Ser473)、p-S6K1(Thr389)、p-S6(Ser235/236)、p-4E-BP1(Thr37/46)水平升高.rn 结论：进入细胞的MC-LR在一小时内就与PP2A/C的结合并达到较高水平,不随暴露时间延长而增加;与此同时,通过对关键蛋白磷酸化水平的影响使Akt/S6K1通路激活.表明MC-LR暴露可能产生促进细胞增殖的效应.

摘要： 本论文分析了广州饮用水水源地有机物污染的现状与微囊藻毒素危害的潜在风险,阐述了开展饮用水水体微囊藻毒素检测技术研究及健康风险评价的重要意义及发展趋势,为今后深入开展微囊藻毒素的水生态健康风险与水质安全研究提供方向.

摘要： 谷胱甘肽(GSH)在MC-LR抗氧化防御与解毒代谢中起到重要的作用,然而,MC-LR在哺乳动物体内的解毒过程尚不清楚.本文首次定量研究了经MC暴露后,SD大鼠肝脏中MC-LR及其代谢产物MC-LR-GSH和MC-LR-Cys的变化.

摘要： 目的：探讨MC-LR对小鼠雌孕激素合成相关酶P450scc(cyp11a1)和P450arom(cyp19)的影响. 方法：48只健康昆明种小鼠,按体重随机分为4组,每日分别腹腔注射MC-LR0、3.75、7.5和15μg/kg,连续16天.染毒结束,取卵巢,RT-qPCR检测P450scc、P450arom mRNA表达水平,免疫印迹法(Western blot)检测P450scc、P450arom蛋白水平. 结果：各剂量组孕酮合成调节酶P450scc mRNA和蛋白表达水平随着染毒浓度的提高呈现下调的趋势,各剂量组雌激素合成调节酶P450arom未见明显变化. 结论：MC-LR可能通过影响P450scc mRNA和蛋白表达干扰孕激素合成.

摘要： 本发明公开了一种气单胞菌属菌株R1及制备方法及其在溶藻降解微囊藻毒素上的应用。通过从镜湖中腐烂的水华中筛选得到了一株菌株R1，该菌株具有较强的耐镉能力、溶藻以及可降解微囊藻毒素，经16S rDNA序列对比分析鉴定，R1属于气单胞菌属(Aeromonas)。该菌株对Cd

摘要： 一种去除螺旋藻中微囊藻毒素的方法，属藻类食品的加工生产技术。本发明是通过滇池筛分的鞘氨醇单胞菌(CGMCC NO:1.9113，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心：China General Microbiological Culture Collection Center,CGMCC)，巨兽芽孢杆菌(YUMCC Da147；YUMCC为云南大学菌种保藏中心),铜绿假单胞菌(YUMCC ACM4)三种菌株添加到螺旋藻藻泥中，进行短期中低温厌氧发酵，达到去除螺旋藻中的微囊藻毒素的功效。经检测，本发明方法可以除去螺旋藻原料中80％～99％的微囊藻毒素。

摘要： 本发明公开了一种有机高分子复配改性凹凸棒土对藻胆蛋白和微囊藻毒素吸附去除的方法，是将凹凸棒土与壳聚糖粉末按照50-100∶0.5-2的质量比复配，并按照0.1-2g/L的比例添加到含有微囊藻毒素及藻胆蛋白的废水中搅拌，静置，然后将絮体捞出或过滤除去。本发明具有成本低廉、去除效率高且环境友好的特点，具有较大的应用价值和市场前景。

摘要： 本发明公开了一株可摄食铜绿微囊藻和降解微囊藻毒素的鞭毛藻及应用，具体为Poteriospumella属鞭毛藻Poteriospumella lacustris NY1，是从福建省漳州市南靖县爆发水华的南一水库中分离、筛选得到。鞭毛藻NY1既能快速地摄食铜绿微囊藻，又能高效地降解微囊藻毒素，避免藻毒素释放到水体造成二次污染，并且在一定温度、光照和pH范围内作用效果稳定。鞭毛藻NY1治理有害蓝藻水华既避免了藻毒素释放到水体造成二次污染，又减少了对水生生态环境的干扰，因此，具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明涉及一种铜绿微囊藻生长周期内微囊藻毒素MC‑LR快速定量方法，采用高效液相色谱仪测定刚接种后的铜绿微囊藻生长周期96h内MC‑LR浓度，同时分别在显微镜下利用血球计数板计算藻细胞数量，用紫外分光光度计对铜绿微囊藻进行680nm吸光度测定，分别建立藻毒素，吸光度及藻细胞数的正比例线性关系；在随后的藻毒素毒理实验中，通过测定生长周期96h内铜绿微囊藻的吸光度或藻细胞数量，便可定量得出同时期藻毒素MC‑LR浓度；本发明同现有技术相比，具有快速、低成本、样品损耗小和无毒害等优点，能够解决传统的铜绿微囊藻藻毒素MC‑LR定量方法中存在的效率低、成本高、样品损耗多和操作人员安全性等技术问题。

摘要： 本发明涉及一种使不产毒微藻产生微囊藻毒素的方法；还涉及通过该方法得到的可产生微囊藻毒素的微藻。本发明首次提供了使不产毒微藻产生微囊藻毒素的方法以及得到的产毒藻株，这是本领域首次利用不产毒微藻改造成产微囊藻毒素微藻的报道。我们首次实现了使用生物合成的方法，从无机物开始合成微囊藻毒素。尽管得到的藻株产生的微囊藻毒素含量很低，但是，从无到有已经是飞跃，并且我们可以以该藻株为基础，进行后续研究，以提高微囊藻毒素产量。

摘要： 本发明通过了一种利用藻毒素产毒基因研究氯离子和硫酸根对微囊藻毒素生成影响的方法，该方法通过往培养液中加入不同浓度的氯离子和硫酸根，检测微囊藻毒素的含量和微囊藻毒素产毒基因mcyD的拷贝数，建立不同浓度的氯离子或硫酸根、微囊藻毒素含量以及藻毒素合成酶基因mcyD拷贝数之间的相关性，最终通过检测藻毒素合成酶基因mcyD拷贝数来研究藻毒素的含量。该方法特异性强、灵敏度较高，所需时间比较短、操作比较简单，所需仪器设备和试剂相对简单。

摘要： 本发明公开了一种气单胞菌属菌株R1及制备方法及其在溶藻降解微囊藻毒素上的应用。通过从镜湖中腐烂的水华中筛选得到了一株菌株R1，该菌株具有较强的耐镉能力、溶藻以及可降解微囊藻毒素，经16S rDNA序列对比分析鉴定，R1属于气单胞菌属(Aeromonas)。该菌株对Cd

摘要： 一种藻细胞内微囊藻毒素MC‑LR提取方法，首先通过冷冻离心得到藻细胞，并用超纯水清洗；之后加提取液震荡后转入刻度试管中并用提取液清洗离心管3次；然后沸水浴25min提取MC‑LR，若时间水浴时间达到25min后提取液未挥发完全可适当延长时间，但总提取时间不能超过30min；提取完成后冷却至室温，加入50％甲醇振荡溶解，经0.22μm有机相滤头过滤后经高效液相色谱装置测定；本发明能够以较少简单的设备通过较少的实验步骤得到较高的细胞内微囊藻毒MC‑LR提取效率，是一种简单易行的细胞内微囊藻毒素MC‑LR的提取方法。

摘要： 一种去除螺旋藻中微囊藻毒素的方法，属藻类食品的加工生产技术。本发明是通过滇池筛分的鞘氨醇单胞菌(CGMCC NO:1.9113，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心：China General Microbiological Culture Collection Center,CGMCC)，巨兽芽孢杆菌(YUMCC Da147；YUMCC为云南大学菌种保藏中心),铜绿假单胞菌(YUMCC ACM4)三种菌株添加到螺旋藻藻泥中，进行短期中低温厌氧发酵，达到去除螺旋藻中的微囊藻毒素的功效。经检测，本发明方法可以除去螺旋藻原料中80％～99％的微囊藻毒素。