Ⅳ型胶原酶

摘要： 目的 建立Ⅳ型胶原酶筛选模型,并运用此模型对中药活性成分进行评价.方法 利用Ⅳ型胶原酶特异性水解明胶释放的末端氨基与2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)发生显色,吸光度值可以衡量Ⅳ型胶原酶含量,优化Ⅳ型胶原酶浓度、琥珀酰凝胶浓度、显色剂用量及时间参数.结果 确定了Ⅳ型胶原酶筛选模型的条件:5.0×10-5 g/L酶溶液、20 g/L琥珀酰凝胶溶液、60μ1 0.05 ％TNBS、显色30 min,阳性药盐酸四环素在1.0g/L下对该酶的抑制率是19.39％,并呈现一定的量效关系,表明成功建立该筛选模型.应用该模型筛选发现,阿魏酸和川芎嗪具有明显的抑制Ⅳ型胶原酶活性,而水杨酸和小檗碱则具有促进作用.结论 Ⅳ型胶原酶的筛选模型成功建立并应用到中药活性成分筛选中,为快速评价中药活性成分及其作用机制提供了有益参考.

摘要： 目的 探讨简易、经济的Ⅳ型胶原酶消化法提取分离新生兔原代肝细胞及体外培养.方法 采用0.1%Ⅳ型胶原酶对新生兔肝脏组织小块进行消化以提取兔原代肝细胞,体外进行单层培养,并对提取的兔肝细胞的细胞数量、细胞活力和细胞增殖能力进行检测.结果 提取的肝细胞主要呈类圆形,排列整齐,细胞透亮有光泽,立体感好,细胞界限清晰.1 g肝组织可分离1.12×106个肝细胞,成活率为77%.细胞增殖能力呈先升后降趋势,细胞生长曲线较符合原代细胞生长的一般规律.结论 该实验方法简单、易操作,无需特殊设备,适合一般实验室开展原代肝细胞的提取、分离与培养.

摘要： 对小鼠原代肝细胞分离方法进行改良，通过简单且经济的方法获得小鼠原代肝细胞，采用4.5号输液针经下腔静脉逆行灌流，用长条状纸板对针进行固定，以获取质量稳定的小鼠原代肝细胞悬液．结果显示，改进后的方法灌流成功率高及重现性好并可获得实验所需肝细胞，细胞对台盼蓝拒染率＞90％．方法操作简单，成本较低且效率较高．%The paper studies how to improve the separation method for mouse primary hepatocyte in order to obtain the mouse primary hepatocyte in the most simple and economic way .Retrograde infusion is done by using infusion needles through the inferior vena cava .Then ,the needles are fixed by long strip paperboard . In this way ,stable suspension of mouse primary hepatocyte can be obtained .As a result ,the success rate of the improved retrograde infusion is extremely high and the repetition is also excellent .The hepatocyte need-ed for experirnents can be obtained .The rate of trypan blue stain-resistance is more than 90% .This method is simple in operation ,low in cost and high in efficiency .

摘要： Objective To study the expression of type Ⅳ collagenase in human gliomtissue, and the effectof type Ⅳ collagenase on proliferation, migration and invasion of Gliomcells, so ato provide basifoclinical treatment.MethodWestern blotting waused to compare the contenof type Ⅳ collagenase between malignanGliomtissueand normal tissues.Gliomcell C6 were divided into three groups, respectively added with cell culture medium (control group), type Ⅳ collagenase (study group),type Ⅳ collagenase and specifiinhibito(inhibitogroup).Use the methyl thiazol tetrazolium (MTT) assay, transwell migration and invasion assay to observe the effectof type Ⅳ collagenase on proliferation,migration and invasion of Gliomcells.ResultThe expression rate of type Ⅳ collagenase in malignangliomtissue(87.5％) ihighethan iin normal tissue(20.0％).There wasignificandifference in relative absorption ratio between two group(0.81 ±0.12 vs.0.04 ±0.01 ,P ＜0.01).The resulof MTassay indicate the cell proliferation ability of the three grouphave no statistical significance aevery point.The cell counin migration assary of study group (137.49 ± 14.53) wasignificantly more than control group (65.35 ±6.57, P＜0.01) and inhibitogroup (67.42 ±7.92, P＜0.01).Similarly, the cell counin invasion assary of study group (33.67 ± 7.47) wasignificantly more than control group (20.45±4.89, P＜0.01) and inhibitogroup (21.67±5.83, P＜0.01)Conclusion The contenand the expression rate of type Ⅳ collagenase in MalignanGliomtissueihighethan iin normal tissues.Type Ⅳ collagenase promotecell migration and invasion, and could be blocked by specifiinhibitor, providing new wayin the treatmenof malignanglioma.%目的 观察Ⅳ型胶原酶在人脑胶质瘤组织中的表达及其对C6胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭的作用.方法 利用Western blot法比较人脑胶质瘤组织和正常组织中Ⅳ型胶原酶的表达量及含量,将体外培养的C6胶质瘤细胞分为3组,分别加入正常培养液(对照组)、Ⅳ型胶原酶(实验组)及Ⅳ型胶原酶+抑制剂GM6001(抑制组),采用噻唑蓝(MTT)实验、细胞迁移实验和细胞侵袭实验,观察Ⅳ型胶原酶对C6胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭的作用.结果 胶质瘤组织中Ⅳ型胶原酶的含量(87.5％)显著高于正常脑组织(20.0％).吸光度比值半定量分析结果两组间差异也有统计学意义(0.81 ±0.12比0.04±0.01,P＜0.01).MTT实验显示实验组、对照组和抑制组3组细胞各个时间点吸光度差异无统计学意义(P＞0.05),3组迁移细胞数目分别为(137.49±14.53)、(65.35 ±6.57)、(67.42±7.92)个,实验组同对照组和抑制组差异均有统计学意义(P＜0.05),3组侵袭细胞数目分别为(33.67±7.47)、(20.45 ±4.89)、(21.67 ±5.83)个,实验组同对照组和抑制组差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Ⅳ型胶原酶在人脑胶质瘤组织中表达率及含量明显增高,对于体外培养的大鼠C6胶质瘤细胞,Ⅳ型胶原酶可显著促进其迁移和侵袭,并通过添加抑制剂GM6001后可有效逆转其迁移和侵袭趋势.

摘要： 优化以包涵体形式表达的抗Ⅳ型胶原酶单链抗体与力达霉素辅基蛋白融合蛋白Fv-LDP制备过程.通过单因素或正交设计优化其包涵体制备与溶解、固定化金属螯合层析和分步透析复性过程,Sephadex G-75层析精细纯化蛋白,基于流式细胞术的饱和结合实验检测其抗原结合活性.优化后,Fv-LDP包涵体纯度为63.9％,溶解度为95.7％;纯化后Fv-LDP纯度达95％以上,复性后单体含量占60％,精细纯化后提升为85％,比初始复性条件提高5.6倍,能够与人肺腺癌PAa细胞和肝癌BEL-7402细胞结合.Fv-LDP制备过程被成功优化,为其生产和研发奠定了实验基础,也为其他以包涵体形式表达的基于单链抗体的小型化抗体药物制备提供了比较实用的方法.

摘要： 背景：目前利用传统分离提取细胞的方法所获取的人脐带来源的间充质干细胞与脐带组织中所含人脐带来源的间充质干细胞的理论值相差甚远，造成脐带组织的极大浪费，阻碍了间充质干细胞的规模化制备培养。目的：建立一套高效分离人脐带间充质干细胞的方法，为间充质干细胞应用于临床提供技术方案。

摘要： 背景：目前利用传统分离提取细胞的方法所获取的人脐带来源的间充质干细胞与脐带组织中所含人脐带来源的问充质干细胞的理论值相差甚远，造成脐带组织的极大浪费，阻碍了间充质干细胞的规模化制备培养。目的：建立一套高效分离人脐带间充质干细胞的方法，为间充质干细胞应用于临床提供技术方案。方法：实验分为4组，以传统酶法（胰酶与Ⅱ型胶原酶）为对照组，在此基础上，针对脐带结构分别逐一加入Ⅳ型胶原酶、透明质酸酶、DNase来对脐带组织进行消化，各实验组设不同作用时间组，比较不同分离方法、不同作用时间所获得细胞数量、细胞活性、原代细胞贴壁出现时间、融合时间及所获得人脐带来源的间充质干细胞第3代细胞在增殖能力、表面标记与多向分化能力方面的差别。结果与结论：经Ⅱ型胶原酶、Ⅳ型胶原酶、胰蛋白酶、透明质酸酶和DNAase联合作用于脐带组织，4h细胞计数达到最高（12．47±0．16）×106/cm（P〈0．01）；活力为（75．00±5．07）％（P〈0.01）：收获的混合细胞中CD105阳性率及CD29阳性率均高于对照组；细胞贴壁及细胞团融合时间均较对照组缩短（P〈0．01）；伴随细胞的传代，形态逐渐均一，第3代细胞形态基本达到统一，呈梭形漩涡状生长；实验组P3人脐带来源的间充质干细胞特异性标记CD44，CD105，CD29阳性率阳性率均高于对照组，CD34阳性率低于对照组。向脂肪细胞诱导4周后，油红O染色鉴定可见细胞内大量脂滴：向成骨细胞诱导后，茜素红染色鉴定，大体观察可见阳性钙沉积。实验证明了Ⅱ型胶原酶、Ⅳ型胶原酶、胰蛋白酶、透明质酸酶和DNAase四酶联合消化脐带组织作用4h的方法缩短了分离细胞用时并显著提高了细胞产量、细胞活力以及细胞增殖能力，同时缩短原代细胞贴壁时间、融合时间。提取得到的原代细胞中间充质干细胞比例，第3代间充质干细胞细胞纯度较传统方法均有提高。

摘要： 目的 观察乳腺癌基质降解产物(DECM)对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖和侵袭的影响,探讨DECM对肿瘤增殖和浸润的作用,及对MMP-7蛋白与SDF-1蛋白表达的影响.方法 采用胰酶消化法,分别分离来自人正常乳腺组织、乳腺癌旁组织及乳腺癌组织切取物中细胞和基质,提取基质成分,洗涤基质得到3种母液,分别为正常乳腺组织母液、癌旁组织母液、癌组织母液,再以Ⅳ型胶原酶消化基质,得到3种DECM,分别为乳腺组织DECM、癌旁组织DECM、癌组织DECM,分别用3种母液和3种DECM作用于人乳腺癌细胞株MCF-7,设置空白对照,通过MTT法、软琼脂克隆形成实验观察癌细胞增殖的变化,用Transwell实验观察细胞侵袭能力变化,通过Western Blot检测人乳腺癌细胞株MCF-7细胞中MMP-7和SDF-1蛋白的表达变化.结果 Ⅳ型胶原酶作用人乳腺不同组织来源的基质得到的DECM均可以使MCF-7细胞株增殖和侵袭能力增强,与空白组及相应母液组比较差异有显著性(P＜0.01)；DECM可以上调MCF-7中MMP-7和SDF-1蛋白的表达,与空白组及相应母液组比较差异有显著性(P＜0.01).结论 DECM具有促进肿瘤细胞增殖及侵袭能力的生物学活性；该能力可能与上调肿瘤细胞MMP-7和SDF-1蛋白表达有关.

摘要： 目的：土贝母是一种传统中药,我们以前的研究结果已证实从土贝母块茎中分离得到的土贝母皂苷(下称皂苷)有强抗肿瘤效果和诱导肿瘤细胞凋亡作用.本研究旨在探讨皂苷对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞粘附、侵袭和迁移能力的影响.方法：MTT法检测其对PGCL3细胞生长的影响;分别用粘附相关基底膜成分分析试验、重组基底膜侵袭试验、Transwell室趋化运动模型研究皂苷对PGCL3细胞的粘附、侵袭和运动能力的影响;用酶谱法检测皂苷对Ⅳ型胶原酶分泌及活性的影响.结果：皂苷明显抑制PGCL3细胞的生长,且其效果呈剂量依赖关系.皂苷作用PGCL3细胞24、48、72小时的IC50值分别为16.77、14.62、14.46 μmol·L-1.皂苷1.25、2.50、5.00 μmol·L-1处理PGCL3细胞24小时,对PGCL3细胞侵袭能力的抑制率分别为20.6％、30.6％、46.8％,对PGCL3细胞运动能力的抑制率分别为14.2％、24.7％、42.5％.皂苷降低PGCL3细胞Ⅳ型胶原酶的分泌量及Ⅳ型胶原酶活性,降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率,且其效果呈一定的剂量依赖关系.结论：皂苷抑制人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞的粘附、侵袭和迁移能力;皂苷对PGCL3细胞粘附和侵袭的影响与其降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率,降低PGCL3细胞Ⅳ型胶原酶的分泌量及活性有关.

摘要： 目的：土贝母是一种传统中药,我们以前的研究结果已证实从土贝母块茎中分离得到的土贝母皂苷(下称皂苷)有强抗肿瘤效果和诱导肿瘤细胞凋亡作用.本研究旨在探讨皂苷对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞粘附、侵袭和迁移能力的影响.方法：MTT法检测其对PGCL3细胞生长的影响;分别用粘附相关基底膜成分分析试验、重组基底膜侵袭试验、Transwell室趋化运动模型研究皂苷对PGCL3细胞的粘附、侵袭和运动能力的影响;用酶谱法检测皂苷对Ⅳ型胶原酶分泌及活性的影响.结果：皂苷明显抑制PGCL3细胞的生长,且其效果呈剂量依赖关系.皂苷作用PGCL3细胞24、48、72小时的IC50值分别为16.77、14.62、14.46 μmol·L-1.皂苷1.25、2.50、5.00 μmol·L-1处理PGCL3细胞24小时,对PGCL3细胞侵袭能力的抑制率分别为20.6％、30.6％、46.8％,对PGCL3细胞运动能力的抑制率分别为14.2％、24.7％、42.5％.皂苷降低PGCL3细胞Ⅳ型胶原酶的分泌量及Ⅳ型胶原酶活性,降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率,且其效果呈一定的剂量依赖关系.结论：皂苷抑制人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞的粘附、侵袭和迁移能力;皂苷对PGCL3细胞粘附和侵袭的影响与其降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率,降低PGCL3细胞Ⅳ型胶原酶的分泌量及活性有关.

摘要： 目的：土贝母是一种传统中药,我们以前的研究结果已证实从土贝母块茎中分离得到的土贝母皂苷(下称皂苷)有强抗肿瘤效果和诱导肿瘤细胞凋亡作用.本研究旨在探讨皂苷对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞粘附、侵袭和迁移能力的影响.方法：MTT法检测其对PGCL3细胞生长的影响;分别用粘附相关基底膜成分分析试验、重组基底膜侵袭试验、Transwell室趋化运动模型研究皂苷对PGCL3细胞的粘附、侵袭和运动能力的影响;用酶谱法检测皂苷对Ⅳ型胶原酶分泌及活性的影响.结果：皂苷明显抑制PGCL3细胞的生长,且其效果呈剂量依赖关系.皂苷作用PGCL3细胞24、48、72小时的IC50值分别为16.77、14.62、14.46 μmol·L-1.皂苷1.25、2.50、5.00 μmol·L-1处理PGCL3细胞24小时,对PGCL3细胞侵袭能力的抑制率分别为20.6％、30.6％、46.8％,对PGCL3细胞运动能力的抑制率分别为14.2％、24.7％、42.5％.皂苷降低PGCL3细胞Ⅳ型胶原酶的分泌量及Ⅳ型胶原酶活性,降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率,且其效果呈一定的剂量依赖关系.结论：皂苷抑制人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞的粘附、侵袭和迁移能力;皂苷对PGCL3细胞粘附和侵袭的影响与其降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率,降低PGCL3细胞Ⅳ型胶原酶的分泌量及活性有关.

摘要： 目的：土贝母是一种传统中药,我们以前的研究结果已证实从土贝母块茎中分离得到的土贝母皂苷(下称皂苷)有强抗肿瘤效果和诱导肿瘤细胞凋亡作用.本研究旨在探讨皂苷对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞粘附、侵袭和迁移能力的影响.方法：MTT法检测其对PGCL3细胞生长的影响;分别用粘附相关基底膜成分分析试验、重组基底膜侵袭试验、Transwell室趋化运动模型研究皂苷对PGCL3细胞的粘附、侵袭和运动能力的影响;用酶谱法检测皂苷对Ⅳ型胶原酶分泌及活性的影响.结果：皂苷明显抑制PGCL3细胞的生长,且其效果呈剂量依赖关系.皂苷作用PGCL3细胞24、48、72小时的IC50值分别为16.77、14.62、14.46 μmol·L-1.皂苷1.25、2.50、5.00 μmol·L-1处理PGCL3细胞24小时,对PGCL3细胞侵袭能力的抑制率分别为20.6％、30.6％、46.8％,对PGCL3细胞运动能力的抑制率分别为14.2％、24.7％、42.5％.皂苷降低PGCL3细胞Ⅳ型胶原酶的分泌量及Ⅳ型胶原酶活性,降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率,且其效果呈一定的剂量依赖关系.结论：皂苷抑制人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞的粘附、侵袭和迁移能力;皂苷对PGCL3细胞粘附和侵袭的影响与其降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率,降低PGCL3细胞Ⅳ型胶原酶的分泌量及活性有关.

摘要： 肿瘤转移是恶性肿瘤的基本生物学特征,也是导致肿瘤患者死亡,治疗失败的主要因素。尽管有很多因素影响恶性肿瘤的转移过程,但肿瘤细胞和它周围微环境相互作用对肿瘤的侵袭和转移起到了不可忽视的关键作用。其中,基质金属蛋白酶(MatrixMetalloproteinases,MMPs)就是一族位于肿瘤细胞表面与恶性肿瘤密切相关的水解蛋白酶,它参与了肿瘤细胞对基底膜和基质的降解,对血管肇的穿透,以及促使瘤细胞的转移[1-3]。MMPs还与原发瘤和继发瘤的生长、以及血管生成有关,甚至对肿瘤增殖过程亦起促进作用。随着对MMPs化学生物学认识的不断加深,瞄准以该酶为靶点的治疗策略也迅速发展起来,MMPs抑制剂(MMPs lnhibitors,MMPIs)已成为癌症治疗药物研究中的热点。已知MMPs作用的主要天然底物是胶原蛋白,羟脯氨酸是其富含的一种特异性氨基酸,以羟脯氨酸为结构母核的MMPIs预期能够提高对该酶靶的选择性。咖啡酸和没食子酸是具有多酚类结构的化合物,研究表明其钠盐可以显著抑制MMP-2和-9的分泌,对血管生成有显著的抑制作用,能降低人高转移巨细胞肺癌的侵袭力[4],将其拼合到羟脯氨酸母核上,可能会增强抑酶活性。rn 本文根据MMP与其底物结合的三维结构特征,借助计算机辅助药物设计软件SYBYL6.91进行了基于结构的合理药物设计(SBDD),设汁合成了一系列吡咯烷类新型MMP抑制剂,体外抑酶活性试验和体内抑制肿瘤血道肺转移动物试验证明有高活性,有望发展成为一类优秀的MMPI抗癌先导化合物,进行创新药物研究。

摘要： 肿瘤转移是恶性肿瘤的基本生物学特征,也是导致肿瘤患者死亡,治疗失败的主要因素。尽管有很多因素影响恶性肿瘤的转移过程,但肿瘤细胞和它周围微环境相互作用对肿瘤的侵袭和转移起到了不可忽视的关键作用。其中,基质金属蛋白酶(MatrixMetalloproteinases,MMPs)就是一族位于肿瘤细胞表面与恶性肿瘤密切相关的水解蛋白酶,它参与了肿瘤细胞对基底膜和基质的降解,对血管肇的穿透,以及促使瘤细胞的转移[1-3]。MMPs还与原发瘤和继发瘤的生长、以及血管生成有关,甚至对肿瘤增殖过程亦起促进作用。随着对MMPs化学生物学认识的不断加深,瞄准以该酶为靶点的治疗策略也迅速发展起来,MMPs抑制剂(MMPs lnhibitors,MMPIs)已成为癌症治疗药物研究中的热点。已知MMPs作用的主要天然底物是胶原蛋白,羟脯氨酸是其富含的一种特异性氨基酸,以羟脯氨酸为结构母核的MMPIs预期能够提高对该酶靶的选择性。咖啡酸和没食子酸是具有多酚类结构的化合物,研究表明其钠盐可以显著抑制MMP-2和-9的分泌,对血管生成有显著的抑制作用,能降低人高转移巨细胞肺癌的侵袭力[4],将其拼合到羟脯氨酸母核上,可能会增强抑酶活性。rn 本文根据MMP与其底物结合的三维结构特征,借助计算机辅助药物设计软件SYBYL6.91进行了基于结构的合理药物设计(SBDD),设汁合成了一系列吡咯烷类新型MMP抑制剂,体外抑酶活性试验和体内抑制肿瘤血道肺转移动物试验证明有高活性,有望发展成为一类优秀的MMPI抗癌先导化合物,进行创新药物研究。

摘要： 肿瘤转移是恶性肿瘤的基本生物学特征,也是导致肿瘤患者死亡,治疗失败的主要因素。尽管有很多因素影响恶性肿瘤的转移过程,但肿瘤细胞和它周围微环境相互作用对肿瘤的侵袭和转移起到了不可忽视的关键作用。其中,基质金属蛋白酶(MatrixMetalloproteinases,MMPs)就是一族位于肿瘤细胞表面与恶性肿瘤密切相关的水解蛋白酶,它参与了肿瘤细胞对基底膜和基质的降解,对血管肇的穿透,以及促使瘤细胞的转移[1-3]。MMPs还与原发瘤和继发瘤的生长、以及血管生成有关,甚至对肿瘤增殖过程亦起促进作用。随着对MMPs化学生物学认识的不断加深,瞄准以该酶为靶点的治疗策略也迅速发展起来,MMPs抑制剂(MMPs lnhibitors,MMPIs)已成为癌症治疗药物研究中的热点。已知MMPs作用的主要天然底物是胶原蛋白,羟脯氨酸是其富含的一种特异性氨基酸,以羟脯氨酸为结构母核的MMPIs预期能够提高对该酶靶的选择性。咖啡酸和没食子酸是具有多酚类结构的化合物,研究表明其钠盐可以显著抑制MMP-2和-9的分泌,对血管生成有显著的抑制作用,能降低人高转移巨细胞肺癌的侵袭力[4],将其拼合到羟脯氨酸母核上,可能会增强抑酶活性。rn 本文根据MMP与其底物结合的三维结构特征,借助计算机辅助药物设计软件SYBYL6.91进行了基于结构的合理药物设计(SBDD),设汁合成了一系列吡咯烷类新型MMP抑制剂,体外抑酶活性试验和体内抑制肿瘤血道肺转移动物试验证明有高活性,有望发展成为一类优秀的MMPI抗癌先导化合物,进行创新药物研究。

摘要： 肿瘤转移是恶性肿瘤的基本生物学特征,也是导致肿瘤患者死亡,治疗失败的主要因素。尽管有很多因素影响恶性肿瘤的转移过程,但肿瘤细胞和它周围微环境相互作用对肿瘤的侵袭和转移起到了不可忽视的关键作用。其中,基质金属蛋白酶(MatrixMetalloproteinases,MMPs)就是一族位于肿瘤细胞表面与恶性肿瘤密切相关的水解蛋白酶,它参与了肿瘤细胞对基底膜和基质的降解,对血管肇的穿透,以及促使瘤细胞的转移[1-3]。MMPs还与原发瘤和继发瘤的生长、以及血管生成有关,甚至对肿瘤增殖过程亦起促进作用。随着对MMPs化学生物学认识的不断加深,瞄准以该酶为靶点的治疗策略也迅速发展起来,MMPs抑制剂(MMPs lnhibitors,MMPIs)已成为癌症治疗药物研究中的热点。已知MMPs作用的主要天然底物是胶原蛋白,羟脯氨酸是其富含的一种特异性氨基酸,以羟脯氨酸为结构母核的MMPIs预期能够提高对该酶靶的选择性。咖啡酸和没食子酸是具有多酚类结构的化合物,研究表明其钠盐可以显著抑制MMP-2和-9的分泌,对血管生成有显著的抑制作用,能降低人高转移巨细胞肺癌的侵袭力[4],将其拼合到羟脯氨酸母核上,可能会增强抑酶活性。rn 本文根据MMP与其底物结合的三维结构特征,借助计算机辅助药物设计软件SYBYL6.91进行了基于结构的合理药物设计(SBDD),设汁合成了一系列吡咯烷类新型MMP抑制剂,体外抑酶活性试验和体内抑制肿瘤血道肺转移动物试验证明有高活性,有望发展成为一类优秀的MMPI抗癌先导化合物,进行创新药物研究。

摘要： 肿瘤转移是恶性肿瘤的基本生物学特征,也是导致肿瘤患者死亡,治疗失败的主要因素。尽管有很多因素影响恶性肿瘤的转移过程,但肿瘤细胞和它周围微环境相互作用对肿瘤的侵袭和转移起到了不可忽视的关键作用。其中,基质金属蛋白酶(MatrixMetalloproteinases,MMPs)就是一族位于肿瘤细胞表面与恶性肿瘤密切相关的水解蛋白酶,它参与了肿瘤细胞对基底膜和基质的降解,对血管肇的穿透,以及促使瘤细胞的转移[1-3]。MMPs还与原发瘤和继发瘤的生长、以及血管生成有关,甚至对肿瘤增殖过程亦起促进作用。随着对MMPs化学生物学认识的不断加深,瞄准以该酶为靶点的治疗策略也迅速发展起来,MMPs抑制剂(MMPs lnhibitors,MMPIs)已成为癌症治疗药物研究中的热点。已知MMPs作用的主要天然底物是胶原蛋白,羟脯氨酸是其富含的一种特异性氨基酸,以羟脯氨酸为结构母核的MMPIs预期能够提高对该酶靶的选择性。咖啡酸和没食子酸是具有多酚类结构的化合物,研究表明其钠盐可以显著抑制MMP-2和-9的分泌,对血管生成有显著的抑制作用,能降低人高转移巨细胞肺癌的侵袭力[4],将其拼合到羟脯氨酸母核上,可能会增强抑酶活性。rn 本文根据MMP与其底物结合的三维结构特征,借助计算机辅助药物设计软件SYBYL6.91进行了基于结构的合理药物设计(SBDD),设汁合成了一系列吡咯烷类新型MMP抑制剂,体外抑酶活性试验和体内抑制肿瘤血道肺转移动物试验证明有高活性,有望发展成为一类优秀的MMPI抗癌先导化合物,进行创新药物研究。

摘要： 肿瘤转移是恶性肿瘤的基本生物学特征,也是导致肿瘤患者死亡,治疗失败的主要因素。尽管有很多因素影响恶性肿瘤的转移过程,但肿瘤细胞和它周围微环境相互作用对肿瘤的侵袭和转移起到了不可忽视的关键作用。其中,基质金属蛋白酶(MatrixMetalloproteinases,MMPs)就是一族位于肿瘤细胞表面与恶性肿瘤密切相关的水解蛋白酶,它参与了肿瘤细胞对基底膜和基质的降解,对血管肇的穿透,以及促使瘤细胞的转移[1-3]。MMPs还与原发瘤和继发瘤的生长、以及血管生成有关,甚至对肿瘤增殖过程亦起促进作用。随着对MMPs化学生物学认识的不断加深,瞄准以该酶为靶点的治疗策略也迅速发展起来,MMPs抑制剂(MMPs lnhibitors,MMPIs)已成为癌症治疗药物研究中的热点。已知MMPs作用的主要天然底物是胶原蛋白,羟脯氨酸是其富含的一种特异性氨基酸,以羟脯氨酸为结构母核的MMPIs预期能够提高对该酶靶的选择性。咖啡酸和没食子酸是具有多酚类结构的化合物,研究表明其钠盐可以显著抑制MMP-2和-9的分泌,对血管生成有显著的抑制作用,能降低人高转移巨细胞肺癌的侵袭力[4],将其拼合到羟脯氨酸母核上,可能会增强抑酶活性。rn 本文根据MMP与其底物结合的三维结构特征,借助计算机辅助药物设计软件SYBYL6.91进行了基于结构的合理药物设计(SBDD),设汁合成了一系列吡咯烷类新型MMP抑制剂,体外抑酶活性试验和体内抑制肿瘤血道肺转移动物试验证明有高活性,有望发展成为一类优秀的MMPI抗癌先导化合物,进行创新药物研究。

摘要： 本发明涉及一种将选自I型胶原酶、II型胶原酶、中性蛋白酶和梭菌蛋白酶构成的组的至少一种酶从物质的混合物中纯化出来的方法，作为方法步骤，所述方法包括至少一个疏水作用色谱过程，其特征在于，疏水作用色谱过程中的固定相包括从聚丙二醇和丁基琼脂糖构成的组中选出的材料。本发明还涉及以这种方法纯化的酶用于制药、化妆品和/或生化目的的用途。

摘要： 本发明提供一种胶原酶抑制剂以及含有胶原酶抑制剂的保湿晶露及其制备方法。所述胶原酶抑制剂包括：铁皮石斛提取物和洋甘菊提取物，以所述胶原酶抑制剂的总质量计，所述铁皮石斛提取物的加入量为17‑65％，所述洋甘菊提取物的加入量为35‑83％。本发明的胶原酶抑制剂对胶原酶活性的抑制作用优异，且对人体无副作用。

摘要： 本发明涉及一种胶原酶抑制剂及其制备方法和包含该胶原酶抑制剂的透肌水。所述胶原酶抑制剂包括：野菊花提取物和金盏花提取物，以所述胶原酶抑制剂的总质量计，所述野菊花提取物的加入量为26.2‑73.8％，所述金盏花提取物的加入量为26.2‑73.8％。本发明的胶原酶抑制剂对胶原酶活性的抑制作用优异，且对人体无副作用。

摘要： 本发明提供一种胶原酶抑制剂，含该胶原酶抑制剂的睡眠面膜及其制备方法。所述胶原酶抑制剂包括：茯苓提取物和苦参根提取物，以所述胶原酶抑制剂的总质量计，所述茯苓提取物的加入量为51‑83％，所述苦参根提取物的加入量为17‑49％。本发明的胶原酶抑制剂对胶原酶活性的抑制作用优异，且对人体无副作用。

摘要： 本发明提供一种胶原酶抑制剂，含该胶原酶抑制剂的修护霜及其制备方法。所述胶原酶抑制剂包括：人参提取物和苦参根提取物，以所述胶原酶抑制剂的总质量计，所述人参提取物的加入量为51‑97％，所述苦参根提取物的加入量为3‑49％。本发明的胶原酶抑制剂对胶原酶活性的抑制作用优异，且对人体无副作用。

摘要： 本发明提供一种胶原酶抑制剂，含该胶原酶抑制剂的补水面膜和制备方法。所述胶原酶抑制剂包括茯苓提取物和辣木籽提取物，以所述胶原酶抑制剂的总质量计，所述茯苓提取物的加入量为12‑49％，所述辣木籽提取物的加入量为51‑88％。本发明的胶原酶抑制剂对胶原酶活性的抑制作用优异，且对人体无副作用。

摘要： 本发明提供一种胶原酶抑制剂，包含该胶原酶抑制剂的眼部精华及其制备方法。所述胶原酶抑制剂包括大花红景天提取物和洋甘菊提取物，以所述胶原酶抑制剂的总质量计，所述大花红景天提取物的加入量为3‑30％，所述洋甘菊提取物的加入量为70‑97％。本发明的胶原酶抑制剂对胶原酶活性的抑制作用优异，且对人体无副作用。

摘要： 本发明提供一种胶原酶抑制剂，包含该胶原酶抑制剂的抗衰亮肤水和制备方法。该胶原酶抑制剂包括：红石榴皮提取物和马齿苋提取物，以所述胶原酶抑制剂的总质量计，所述红石榴皮提取物的加入量为26‑74％，所述马齿苋提取物的加入量为26‑74％。本发明的胶原酶抑制剂对胶原酶活性的抑制作用优异，且对人体无副作用。

摘要： 本发明涉及一株产胶原酶蜡样芽胞杆菌

摘要： 本发明公开了一种表达胶原酶的大肠杆菌及其构建方法与应用。本发明一种蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus R75E分泌的一种胶原酶的氨基酸序列(如SEQ ID NO:1所示)与核苷酸序列(如SEQ ID NO:2所示)。本发明提供含有上述胶原酶基因在大肠杆菌中的表达菌。本发明提供一种含有表达所述DNA分子的重组大肠杆菌，所述重组大肠杆菌是在宿主菌中导入所述的大肠杆菌重组表达载体得到的大肠杆菌菌株。本发明提供一种纯化所述重组胶原酶的方法及在降解鱼鳞中Ⅰ型胶原蛋白方面的应用。本发明的重组胶原酶，能够高效降解天然的Ⅰ型胶原蛋白纤维，效果显著，可应用于农副产品中胶原蛋白的开发利用、水产品胶原蛋白的加工与利用、医疗以及食品工业生产中胶原酶的应用。