Ⅱ型胶原蛋白

摘要： 背景:骨关节炎临床上常见,是导致中老年人慢性残障的最常见原因.蒙药蓝刺头在骨病中有积极的治疗作用,然而其对骨关节炎的作用与机制尚待研究.目的:探究蒙药蓝刺头在膝骨关节炎中的作用以及对Ⅱ型胶原蛋白和基质金属蛋白酶13表达的影响.方法:选取健康中国大耳白兔30只,随机分组,正常对照组10只;膝骨关节炎组20只兔右膝关节用管型石膏固定8周,制备膝骨关节炎模型,造模成功后又分为蓝刺头治疗组及模型对照组(n=10).蓝刺头治疗组兔灌胃20 mL/kg的蒙药蓝刺头溶液,含药量为3.25 g/L;正常对照组与模型对照组灌胃生理盐水20 mL/kg.各组均连续灌胃90 d,之后麻醉处死取膝关节软骨制备切片.苏木精-伊红染色观察软骨组织学变化;RT-PCR测定各组中Ⅱ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶13的mRNA表达,免疫组化法观察各组中Ⅱ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶13的蛋白表达.结果 与结论:①通过苏木精-伊红染色观察发现,蒙药蓝刺头可以改善骨关节炎软骨损伤,促进软骨细胞及基质增生;②此外,蒙药蓝刺头可以促进骨关节炎中Ⅱ型胶原蛋白的mRNA及蛋白表达,抑制由骨关节炎引起的基质金属蛋白酶13 mRNA及蛋白高表达;③提示蒙药蓝刺头可以通过促进Ⅱ型胶原蛋白表达,抑制基质金属蛋白酶13表达,对骨关节炎起到积极的防治作用.

摘要： 目的研究鸡矢藤水煎液(PSE)治疗类风湿性关节炎(RA)的作用机制。方法取昆明种小鼠60只随机均分为6组,空白组(灌喂水)、模型组(灌喂水)、低浓度组(CIA模型小鼠灌胃2 g/kg/day PSE)、中浓度组(CIA模型小鼠灌胃10 g/kg/day PSE)、高浓度组(CIA模型小鼠灌胃50 g/kg/day PSE)、酮洛芬组(CIA模型小鼠灌胃5 mg/kg/day酮洛芬)。模型小鼠尾部根处皮内注射Ⅱ型胶原蛋白。造模后每4 d测定一次小鼠的踝关节肿胀度,并根据标准对小鼠关节评分,给药28 d后,用ELISA法测定血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)的含量。结果Ⅱ型胶原蛋白类风湿建模(CIA)处理后小鼠踝关节肿胀度显著增高,血浆中炎症因子TNF-α和IL-1β的水平显著增加,关节组织中有炎性细胞的浸润、血管增生。PSE处理后,类风湿小鼠踝关节肿胀度显著降低,血浆中TNF-α和IL-1β的水平明显受抑制,炎性细胞的浸润、血管增生情况明显改善。结论PSE对RA小鼠有显著的治疗作用,可能与其抑制炎症因子能力有关。

摘要： 目的:探索针刀、电针治疗对早期膝骨关节炎(KOA)兔模型关节软骨细胞结构及Ⅱ型胶原的表达情况。方法:30只新西兰兔按体质量随机分为空白组(6只)及KOA造模组(24只),KOA造模组应用改良Videman法制动4周建立早期KOA兔模型。干预结束后,对兔股骨内侧髁软骨进行免疫荧光双标染色(激光共聚焦显微镜观察),应用ELISA法检测兔血清、关节液CTX-2的含量。结果:①治疗后针刀组、电针组血清(P=0.091,P=0.657)、关节液(P=0.066,P=0.032)CTX-2含量降低。②治疗后针刀组、电针组细胞核(P=0.058,P=0.051)、F-actin骨架蛋白(P=0.184,P=0.220)和Ⅱ型胶原(P=0.168,P=0.236)IOD表达降低,但差异无统计学意义。结论:针刀、电针对早期KOA兔模型膝关节软骨细胞及Ⅱ型胶原蛋白代谢具有一定保护作用,但效果不如塞来昔布。

摘要： 目的探讨miR-147b-5p的表达对人髓核细胞(HNPCs)退变的影响。方法采用炎性细胞因子白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导HNPCs退变,甲苯胺蓝染色观察HNPCs形态及蛋白聚糖的表达,免疫荧光染色观察HNPCs中Ⅱ型胶原蛋白(ColⅡ)表达,实时荧光定量(qRT)-聚合酶链反应(PCR)检测退变髓核细胞中miR-147b-5p的表达。将细胞分为对照组、模型组、miR-147-5p mimic组、miR-147b-5p inhibitor组、mimic-NC组和inhibitor-NC组。噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞活力;流式细胞术检测各组细胞凋亡水平;甲苯胺蓝染色和免疫荧光染色分别观察各组细胞蛋白聚糖和ColⅡ表达;Western印迹检测各组细胞中Notch 4、Hes5、Hey1及Hey2蛋白表达水平。结果成功获得退变髓核细胞,与对照组比较,模型组细胞中蛋白聚糖及ColⅡ表达明显减少,miR-147b-5p表达水平及细胞活力显著降低,凋亡率显著升高(P<0.05)。与模型组比较,miR-147b-5p mimic组细胞活力显著增强,细胞中蛋白聚糖及ColⅡ表达明显增加,凋亡率显著降低,Notch 4、Hes5、Hey1及Hey2蛋白表达均显著降低(均P<0.05),miR-147b-5p inhibitor组各检测指标的变化趋势与各mimic组相反。结论人退变髓核细胞中miR-147b-5p表达降低,增加miR-147b-5p的表达可增强退变髓核细胞的活力,增加蛋白聚糖及ColⅡ表达,抑制细胞凋亡。

摘要： 目的探讨二甲双胍(MET)对大鼠关节软骨细胞的影响及机制。方法用白细胞介素-1β(IL-1β)和不同浓度MET(5、10、15 mmol/L)对Wistar大鼠关节软骨细胞进行处理,采用CCK-8法检测细胞增殖分化活性,并检测比较正常软骨细胞、骨关节炎(OA)软骨细胞和经10 mmol/L MET处理后的OA软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白(ColⅡ)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的mRNA表达情况,胆固醇调节元件结合蛋白-2(SREBP-2)、羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)的蛋白表达情况,以及总胆固醇(TCH)含量。结果在OA软骨细胞模型中MET浓度为10 mmol/L时细胞增殖分化活性较佳。与正常软骨细胞比较,OA软骨细胞ColⅡmRNA显著降低,而MMP-13 mRNA、TCH和SREBP-2、HMGCR蛋白显著升高(P<0.05,P<0.01)。与OA软骨细胞比较,经10 mmol/L MET处理后的OA软骨细胞ColⅡmRNA明显升高,而MMP-13 mRNA、TCH和SREBP-2、HMGCR蛋白显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论MET可能通过抑制软骨细胞胆固醇合成通路,减少软骨细胞内胆固醇蓄积,减缓软骨基质降解,保护关节软骨。

摘要： 目的 以鲟鱼软骨为原料,提取Ⅱ型胶原蛋白并优化其工艺参数.方法 选热解-酶解法提取制备Ⅱ型胶原蛋白,并对工艺中影响提取效果的各个因素进行单因素试验,最后通过正交试验获得最优参数.结果 软骨提取最佳工艺参数:热解温度120°C处理30 min,加酶量8000 U/g·Pro,酶解时间4 h,酶解pH 8,酶解温度50°C.采用上述最优参数提取鲟鱼软骨中Ⅱ型胶原蛋白的水解度为10.85％,蛋白质含量70.7％,对该提取物检测分析粘多糖-硫酸软骨素含量,可得其含量为30.6％(以干基计).结论 该提取工艺重复性好,适用于鲟鱼软骨Ⅱ型胶原蛋白的提取,为下一步其活性功能研究提供理论数据基础.

摘要： 目的 提取鲟鱼软骨中II型胶原蛋白,并鉴定其结构.方法 选取鲟鱼软骨为提取对象,采用碱洗、酸泡法去除非胶原成分、矿物质、多糖等物质,再用胃蛋白酶酶解法、氯化钠盐析法、去离子水透析法、冷冻干燥法等提取纯化Ⅱ型胶原蛋白;采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳法(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、氨基酸分析法、紫外吸收光谱法、傅里叶变换红外光谱法(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)和圆二色色谱法对提取的Ⅱ型胶原蛋白进行鉴定.结果 SDS-PAGE电泳结果显示所得提取物至少由2条链组成(α和 β);氨基酸组成分析结果显示,甘氨酸、丙氨酸和脯氨酸大量存在,而酪氨酸、半胱氨酸和组氨酸的含量较低;紫外吸收光谱显示鲟鱼软骨提取物最大吸收峰与蓝鲨软骨和鱿鱼软骨Ⅱ型胶原蛋白最大吸收峰相近,此吸收峰是胶原三螺旋结构的典型紫外吸收图谱特点;红外光谱法和圆二色谱法测定结果表明,所得提取物具有良好的三螺旋结构,具备典型Ⅱ型胶原蛋白吸收特征.结论 从鲟鱼软骨中提取的胶原蛋白为Ⅱ型胶原蛋白,且纯度较高.

摘要： 目的 探究蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ)对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的作用.方法 按照体重将Wistar成年雄性大鼠随机分为6组:正常组、模型组、阳性对照组(塞来昔布36μg·g-1)和高、中、低3个剂量实验组(蕲蛇CⅡ:20,10,5μg·mL-1),每组10只.用牛Ⅱ型胶原-弗氏完全佐剂乳剂注射法构建CIA模型.致炎后2周分别灌饲相应的药物,每日1次,连续给药30 d.比较组间大鼠足趾关节肿胀程度和非致炎侧关节X线表现.结果 给药后,正常组、模型组、阳性对照组和高、中、低3个剂量实验组的关节肿胀程度分别为(0.98±0.17),(1.97±0.34),(1.36±0.19),(1.13±0.13),(1.30±0.16)和(1.39±0.19)mL,模型组与正常组比较,大鼠右后足关节均表现出显著肿胀,差异均有统计学意义(均P<0.05);阳性对照组和低、中、高3个剂量实验组与模型组比较,大鼠关节肿胀程度明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05),且有一定的量效关系.大鼠非致炎侧关节X线显示,高剂量实验组骨关节模糊程度和骨质侵蚀程度明显缓解.结论 蕲蛇CⅡ能够缓解CIA大鼠关节的肿胀程度,降低关节软骨的损害,且具有一定的量效关系.

摘要： 背景:体内和体外的研究均表明,富血小板血浆对促进软骨细胞增殖和组织再生修复起重要作用,但对于不同浓度富血小板血浆修复兔膝骨关节炎软骨缺损的研究较少。目的:比较不同浓度富血小板血浆修复兔膝骨关节炎软骨缺损的效果,为临床治疗膝骨关节炎软骨损伤提供理论依据和选择方案。方法:50只健康新西兰大白兔随机被分为空白组、模型组、富血小板血浆低浓度、中浓度、高浓度组,每组10只。二次离心法制备富血小板血浆。除空白组以外,各组采用改良Hulth法制备兔膝骨关节炎模型。模型组在关节腔注射0.3 mL生理盐水,富血小板血浆低浓度、中浓度、高浓度组分别注射浓度为(1.0-1.2)×10^(12)L-1、(1.5-1.7)×10^(12)L-1、(2.0-2.2)×10^(12)L-1的富血小板血浆。采用ELISA法检测关节液中相关炎症因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6的表达;苏木精-伊红染色、甲苯胺蓝染色和Mankin’s病理评分来评估不同浓度富血小板血浆修复膝骨关节炎软骨缺损后的组织学变化;Western blot和RT-PCR检测关节软骨组织中Ⅱ型胶原蛋白和聚集蛋白聚糖的蛋白及mRNA表达水平。实验方案经中国医科大学动物实验动物福利与伦理委员会批准。结果与结论:①与模型组比较,富血小板血浆各浓度组相关炎症因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6的水平均有所下降(P<0.05),中浓度组表达水平少于低浓度组和高浓度组(P<0.05);②苏木精-伊红和甲苯胺蓝染色结果显示,富血小板血浆低浓度组和高浓度组软骨细胞形态较规则,数量有所增加,中浓度组软骨细胞排列较整齐,有软骨样细胞形成,软骨细胞修复效果明显;③Mankin’s病理评分结果,模型组最高,其次富血小板血浆低浓度和高浓度组,中浓度组评分最低;④Western blot和RT-PCR结果显示,与模型组比较,富血小板血浆各浓度组软骨组织中Ⅱ型胶原蛋白和聚集蛋白聚糖蛋白和mRNA表达水平明显增加(P<0.05),中浓度组表达明显高于低浓度组和高浓度组(P<0.05);⑤结果说明,不同浓度富血小板血浆均能有效抑制兔膝骨关节炎过程中相关炎症因子的表达,对膝骨关节炎软骨缺损有明显修复作用,以(1.5-1.7)×10^(12)L-1浓度富血小板血浆修复效果更理想。

摘要： 目的:探索有利于原代髁突软骨细胞生长、促进Ⅱ型胶原蛋白(collagen type Ⅱ,Col Ⅱ)表达的有效雌激素浓度.方法:提取4周龄雌性SD大鼠髁突软骨细胞,进行髁突软骨细胞鉴定,并测定细胞生长曲线.应用不同浓度雌激素对软骨细胞进行处理后,CCK-8试剂盒对软骨细胞增殖进行测定,实时定量PCR(RT-PCR)及蛋白免疫印迹(Western Blot,WB)技术测定软骨细胞雌激素受体(ertrogen receptor,ER)α、β和Col ⅡmRNA和蛋白的表达量.结果:与对照组相比,10-9mol/L的雌激素对软骨细胞增殖和ERα表达的促进作用优于其他组(P＜0.05);10-7mol/L的雌激素对Col Ⅱ的促表达作用优于其他组(P＜0.05);而雌激素浓度的变化会对ERβ的表达产生抑制作用,10-10mol/L较其他组为显著(P＜0.05).结论:雌激素在一定浓度下可促进髁突软骨细胞增殖及ERα和Col Ⅱ表达,抑制ERβ的表达.

摘要： 目的:运用中医补肾活血治疗理论,探讨痛痹颗粒冲剂对IL-1a诱导后软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA和Ⅱ型胶原蛋白表达的影响。rn 方法:通过RT-PCR和免疫组化法分别检洲痛痹颗粒冲剂对Ⅱ-1a诱导后软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白及mRNA表达的影响。rn 结果:痛痹颗粒冲剂中大剂量组能增加IL-1a诱导后软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA和Ⅱ型胶原蛋白的表达,与模型组相比有显著差异,特别是大剂量组其Ⅱ型胶原mRNA和Ⅱ型胶原蛋白的表达接近正常组。rn 结论:中药痛痹颗粒冲剂能够促进软骨基质胶原和蛋白多糖的合成,并可能抑制软骨基质胶原和蛋白多糖的降解,这可能是其软骨保护机制之一。

摘要： 目的:运用中医补肾活血治疗理论,探讨痛痹颗粒冲剂对IL-1a诱导后软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA和Ⅱ型胶原蛋白表达的影响。rn 方法:通过RT-PCR和免疫组化法分别检洲痛痹颗粒冲剂对Ⅱ-1a诱导后软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白及mRNA表达的影响。rn 结果:痛痹颗粒冲剂中大剂量组能增加IL-1a诱导后软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA和Ⅱ型胶原蛋白的表达,与模型组相比有显著差异,特别是大剂量组其Ⅱ型胶原mRNA和Ⅱ型胶原蛋白的表达接近正常组。rn 结论:中药痛痹颗粒冲剂能够促进软骨基质胶原和蛋白多糖的合成,并可能抑制软骨基质胶原和蛋白多糖的降解,这可能是其软骨保护机制之一。

摘要： 目的:运用中医补肾活血治疗理论,探讨痛痹颗粒冲剂对IL-1a诱导后软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA和Ⅱ型胶原蛋白表达的影响。rn 方法:通过RT-PCR和免疫组化法分别检洲痛痹颗粒冲剂对Ⅱ-1a诱导后软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白及mRNA表达的影响。rn 结果:痛痹颗粒冲剂中大剂量组能增加IL-1a诱导后软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA和Ⅱ型胶原蛋白的表达,与模型组相比有显著差异,特别是大剂量组其Ⅱ型胶原mRNA和Ⅱ型胶原蛋白的表达接近正常组。rn 结论:中药痛痹颗粒冲剂能够促进软骨基质胶原和蛋白多糖的合成,并可能抑制软骨基质胶原和蛋白多糖的降解,这可能是其软骨保护机制之一。

摘要： 目的:运用中医补肾活血治疗理论,探讨痛痹颗粒冲剂对IL-1a诱导后软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA和Ⅱ型胶原蛋白表达的影响。rn 方法:通过RT-PCR和免疫组化法分别检洲痛痹颗粒冲剂对Ⅱ-1a诱导后软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白及mRNA表达的影响。rn 结果:痛痹颗粒冲剂中大剂量组能增加IL-1a诱导后软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA和Ⅱ型胶原蛋白的表达,与模型组相比有显著差异,特别是大剂量组其Ⅱ型胶原mRNA和Ⅱ型胶原蛋白的表达接近正常组。rn 结论:中药痛痹颗粒冲剂能够促进软骨基质胶原和蛋白多糖的合成,并可能抑制软骨基质胶原和蛋白多糖的降解,这可能是其软骨保护机制之一。

摘要： 目的:运用中医补肾活血治疗理论,探讨痛痹颗粒冲剂对IL-1a诱导后软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA和Ⅱ型胶原蛋白表达的影响。rn 方法:通过RT-PCR和免疫组化法分别检洲痛痹颗粒冲剂对Ⅱ-1a诱导后软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白及mRNA表达的影响。rn 结果:痛痹颗粒冲剂中大剂量组能增加IL-1a诱导后软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA和Ⅱ型胶原蛋白的表达,与模型组相比有显著差异,特别是大剂量组其Ⅱ型胶原mRNA和Ⅱ型胶原蛋白的表达接近正常组。rn 结论:中药痛痹颗粒冲剂能够促进软骨基质胶原和蛋白多糖的合成,并可能抑制软骨基质胶原和蛋白多糖的降解,这可能是其软骨保护机制之一。

摘要： 作者采用酶消化法,从牛软骨中提取Ⅱ型胶原蛋白,并对其进行了纯化和鉴定,用以探讨治疗类风湿性关节炎的发病机制和病理特征.

摘要： 作者采用酶消化法,从牛软骨中提取Ⅱ型胶原蛋白,并对其进行了纯化和鉴定,用以探讨治疗类风湿性关节炎的发病机制和病理特征.

摘要： 作者采用酶消化法,从牛软骨中提取Ⅱ型胶原蛋白,并对其进行了纯化和鉴定,用以探讨治疗类风湿性关节炎的发病机制和病理特征.

摘要： 作者采用酶消化法,从牛软骨中提取Ⅱ型胶原蛋白,并对其进行了纯化和鉴定,用以探讨治疗类风湿性关节炎的发病机制和病理特征.

摘要： 本发明创造提供了一种融合蛋白酶及其制备方法、其在提取I型胶原蛋白中的应用以及该I型胶原蛋白的用途，所述融合蛋白酶包括蛋白酶7片段mmp7C和/或蛋白酶9片段mmp9C；所述蛋白酶7片段mmp7C的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述蛋白酶9片段mmp9C的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的融合蛋白酶在提取动物皮和肌腱组织的I型胶原蛋白的过程中，I型胶原蛋白空间结构不会被破坏，且能够去除终产品中的杂蛋白，提高了I型胶原蛋白的提取率。

摘要： 本发明涉及一种富含胶原蛋白三肽的胶原蛋白水分解物以及胶原蛋白水分解物的用途，具体涉及一种利用特殊的生成丰富胶原蛋白三肽的胶原蛋白水分解酶制造的胶原蛋白水分解物以及包括该有效成分的促进生发以及改善皮肤状态的组合物。本发明的胶原蛋白水分解物与现有的胶原蛋白水分解物相比较，胶原蛋白三肽的含量明显增多，人体对其吸收率较好，可有效防止脱发症，促进生发，改善皱纹以及皮肤保湿等。

摘要： 本发明公开了不同动物组织中分离胶原蛋白的方法，制备胶原蛋白溶液的方法及胶原蛋白的人造产品。为了这个目的，本发明提供了一种从动物组织制备胶原蛋白溶液的方法，包括胶原蛋白的最终处理：在中性、低温条件下处理就有预定浓度的胶原蛋白溶液，然后在30至35°C过夜处理；离心收集胶原蛋白；将收集到的胶原蛋白溶解于弱酸溶剂或者磷酸缓冲盐溶液(PBS)，从而制备浓度为1至5mg/mL的胶原蛋白溶液。本发明由上述组成，可以实现从动物骨和软骨组织、皮肤组织和腱/韧带组织有效分离胶原蛋白的方法，从上述分离组织制备胶原蛋白溶液的方法，利用上述胶原蛋白制备基质和高度浓缩胶原蛋白溶液。

摘要： 本发明涉及类人胶原蛋白及注射型类人胶原蛋白软组织填充材料。与目前临床广泛应用的同类软组织填充材料相比，所制备的注射型类人胶原蛋白软组织填充材料生产工艺简单、生物相容性好，彻底杜绝了动物胶原蛋白所不可避免的病毒隐患，安全性高。且可以通过在一定范围内调整羟基磷灰石的尺寸和溶液的配比来控制降解时间。

摘要： 本发明属于医学生物材料领域，具体公开了一种改性I型胶原蛋白及改性方法和利用该改性I型胶原蛋白制备的胶原凝胶，该改性方法包括：在2～10°C的温度下(1)将弱酸与I型胶原蛋白混合均匀，制得酸性胶原溶液；(2)利用磷酸盐缓冲液对酸性胶原溶液进行透析，直到获得中性胶原溶液；(3)去除中性胶原溶液中的气泡；(4)在液封条件下，利用旋转流变仪对脱除了气泡的中性胶原溶液进行剪切，剪切完成后静置，即可制得改性I型胶原蛋白。本发明通过利用机械剪切的方式对胶原蛋白进行改性，该方法简便高效，可以在不需要引入其他物质的基础上，减少胶原分子的三螺旋结构，增多无规卷曲结构，使得组装得到的胶原纤维直径、孔隙和粘弹性可控。

摘要： 本发明创造提供了一种融合蛋白酶及其制备方法、其在提取I型胶原蛋白中的应用以及该I型胶原蛋白的用途，所述融合蛋白酶包括蛋白酶7片段mmp7C和/或蛋白酶9片段mmp9C；所述蛋白酶7片段mmp7C的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述蛋白酶9片段mmp9C的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的融合蛋白酶在提取动物皮和肌腱组织的I型胶原蛋白的过程中，I型胶原蛋白空间结构不会被破坏，且能够去除终产品中的杂蛋白，提高了I型胶原蛋白的提取率。

摘要： 本发明属于生物医用材料领域，具体涉及一种医用级Ⅲ型胶原蛋白的制备方法，包含如下步骤：动物胎盘组织预处理、脱细胞、脱脂、除杂、酶切、盐析纯化、脱盐浓缩；所述的盐析方法为：在碱性条件下对含有Ⅲ型胶原蛋白的动物源胶原蛋白混合物进行盐析，一步盐析即可得到高纯度的Ⅲ型胶原蛋白，纯度达到95％以上；制备得到的动物胎盘Ⅲ型胶原蛋白具有良好的三螺旋结构以及特征性的纤维网状结构；内毒素含量低于0.5Eu/mL，达到医用标准；可应用于活性护肤品、皮肤修复敷料、植入剂、人工皮肤、医疗器械、保健食品等领域。

摘要： 本发明涉及一种富含胶原蛋白三肽的胶原蛋白水分解物以及胶原蛋白水分解物的用途，具体涉及一种利用特殊的生成丰富胶原蛋白三肽的胶原蛋白水分解酶制造的胶原蛋白水分解物以及包括该有效成分的促进生发以及改善皮肤状态的组合物。本发明的胶原蛋白水分解物与现有的胶原蛋白水分解物相比较，胶原蛋白三肽的含量明显增多，人体对其吸收率较好，可有效防止脱发症，促进生发，改善皱纹以及皮肤保湿等。

摘要： 本发明公开了不同动物组织中分离胶原蛋白的方法，制备胶原蛋白溶液的方法及胶原蛋白的人造产品。为了这个目的，本发明提供了一种从动物组织制备胶原蛋白溶液的方法，包括胶原蛋白的最终处理：在中性、低温条件下处理就有预定浓度的胶原蛋白溶液，然后在30至35°C过夜处理；离心收集胶原蛋白；将收集到的胶原蛋白溶解于弱酸溶剂或者磷酸缓冲盐溶液(PBS)，从而制备浓度为1至5mg/mL的胶原蛋白溶液。本发明由上述组成，可以实现从动物骨和软骨组织、皮肤组织和腱/韧带组织有效分离胶原蛋白的方法，从上述分离组织制备胶原蛋白溶液的方法，利用上述胶原蛋白制备基质和高度浓缩胶原蛋白溶液。

摘要： 本发明涉及制备天然胶原蛋白的方法,包括在具有双层横向切刀的混合器中预处理所述胶原蛋白,并且随后将液体介质中的所述胶原蛋白除菌,其中所述混合器配有控制搅拌和剪切速度的系统和恒温器。本发明也涉及天然状态、特别是药用组合物和/或parapharmaceutical组合物和/或内科－外科组合物和/或眼科组合物和/或化妆品组合物中的无菌胶原蛋白,特别是主要为Ⅰ型的胶原蛋白及其应用。